腐烂茎线虫单异活体繁殖方法研究

腐烂茎线虫（Ditylenchus destructor）系世界上一重要的植物病原线虫。试验通过用玉米培养基培养的灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）对腐烂茎线虫进行的单异活体培养，系统地比较了20℃和25℃个不同的温度对培养的影响，建立了在室内快速和大量繁殖腐烂茎线虫的方法。该方法繁殖的线虫可用于线虫的生物学和遗传学等方面的研究。     

腐烂茎线虫耐寒力测定

对5个不同地理来源的腐烂茎线虫群体分别放置在使甘薯发病的病薯、甘油和细沙3种介质中,在-20℃和-70℃温度下经过不同的处理时间测定其存活率来研究腐烂茎线虫耐寒力,探索腐烂茎线虫在低温冷冻下的保存方法。试验结果,腐烂茎线虫在-20℃和-70℃低温下,随着处理时间的延长,不同群体线虫的存活率都有所下降,其中DeWY和DeLJ群体在不同处理时间下的存活率均高于其他3个群体,差异达到极显著水平,初步证实这2个群体有很强的耐寒力。试验发现在细沙和不同甘油浓度条件下,所有线虫群体在低温处理下均未查到活虫。腐烂茎线虫在低温下的生存状态依赖于原寄主材料,甘薯薯块是腐烂茎线虫在低温下抵御逆境最好的屏障,腐烂茎线虫侵染的薯块放在低温下保存,在遗传学研究等方面保存原始线虫种源有一定的应用价值。     

腐烂茎线虫对花生的致病性

盆栽接种试验表明,侵染甘薯的腐烂茎线虫对花生具有显著的致病性.该线虫可以侵染花生的根系、果针和荚果,果针受害最重,影响饱果率和荚果重量.不同花生品种对腐烂茎线虫的抗性和症状表现出一定的差异.     

A、B型腐烂茎线虫的培养

为了筛选A、B型腐烂茎线虫最优培养材料,利用轮枝镰刀菌、尖孢镰刀菌、秦薯5号、烟薯25号做为培养材料,分别接种500条、1000条、2000条A、B型茎线虫,28℃黑暗培养35d。结果表明:随着接种量增大,繁殖量呈增加趋势,即接种2000条时,繁殖量最大。 A型茎线虫在烟薯25号上繁殖能力最强,平均线虫数为95164 ,繁殖倍数为55,雌雄比为1.52, B型茎线虫在烟薯25号及轮枝镰刀菌上繁殖能力较强,平均线虫数为77157,65717条,繁殖倍数为39,33,雌雄比为1.49,1.36。不同生物型线虫在不同培养材料上繁殖力有差异,且雌雄比与繁殖量呈正相关关系。     

腐烂茎线虫综合防治研究进展

腐烂茎线虫是一类分布范围广泛、取食部位多样的全球检疫性有害生物,是一类重要的植物病原线虫,对我国马铃薯、甘薯的种植推广具有很大影响。本文结合了腐烂茎线虫综合防治研究成果,介绍了腐烂茎线虫的症状、病原流行、侵染规律以及防治措施,并在此基础上分析了腐烂茎线虫的主要研究重点和方向,以期为腐烂茎线虫的防治提供参考。     

A型和B型腐烂茎线虫的培养

为了筛选A型、B型腐烂茎线虫最优培养材料,将轮枝镰刀菌、尖孢镰刀菌、甘薯秦薯5号、甘薯烟薯25号作为培养材料,分别接种500条、1 000条、2 000条A型、B型腐烂茎线虫,于28℃黑暗培养35 d。结果表明：随着接种量增大,繁殖量呈增加趋势,即接种2 000条时,繁殖量最大;A型腐烂茎线虫在烟薯25号上繁殖能力最强,B型腐烂茎线虫在烟薯25号及轮枝镰刀菌上繁殖能力较强;不同基因型腐烂茎线虫在不同培养材料上繁殖力有差异,且雌雄比与繁殖量成正相关关系。     

马铃薯腐烂线虫与甘薯茎线虫病

概述了马铃薯腐烂线虫的形态特征,分类地位,生物学特性以及由该线虫引起的甘薯茎线虫病的发病规律和防治要点;列举了世界上关于甘薯种质资源抗线虫机制和线虫致病机理研究的新进展。马铃薯线虫的口针分泌物具有致病作用,可诱导抗病品种的组织产生抗病过敏反应;甘薯品种“鲁薯７８０６６”和“胜利百号”的周皮木栓层和一些特殊形态结构是阻止该线虫侵入和扩展的屏障。     

腐烂茎线虫在山西省的适生区预测

根据腐烂茎线虫已知分布区域及相关环境变量数据,采用MaxEnt和ArcGIS物种适生性分析软件,对当前和未来环境条件下腐烂茎线虫在山西省的适生区域进行预测.结果表明:当前气候条件下,腐烂茎线虫的适生区面积占山西总面积的89.2%,其中,高度、中度和低度适生区的面积分别占全省总面积的34.3%、32.1%和22.8%,高度适生区包括9个市82个县(市、区);在两种代表性浓度路径(RCP)2.6和8.5预测下,未来2050和2070年腐烂茎线虫总适生区的面积占比均有所增加,其中,在RCP2.6气候情景下,2050和2070年高度适生区面积占比分别增加11.4%和15.7%,而在RCP8.5气候情景下,分别增加46.6%和59.2%.MaxEnt模型的预测曲线下面积的均值为0.909,说明预测结果准确度较高.年均温、最冷季平均温、最暖季降雨量、温度季节性变化方差和最冷季降雨量是腐烂茎线虫在山西扩散的主要影响因子,相关部门应加强对其潜在适生区的监测.     

我国腐烂茎线虫基因型及效应基因研究进展

腐烂茎线虫是一种检疫性有害生物,我国关于腐烂茎线虫的研究起步较晚,过去很长一段时间认为不会在我国发生,因此也缺少系统的调查和鉴定。现如今因腐烂茎线虫所引起的甘薯茎线虫病以及马铃薯腐烂茎线虫病已成为我国甘薯和马铃薯产区的重要病害。文章主要介绍腐烂茎线虫在我国基因型以及特殊效应基因的研究进展,为腐烂茎线虫与植物互作机理提供理论依据,以促进腐烂茎线虫研究的发展。     

腐烂茎线虫种内群体特异性检测研究

对腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor Thorne)7个不同地理群体rDNA 中的ITS区进行PCR-RFLP和序列测定, 发现种内群体间无论在序列长度还是酶切图谱均存在一定的变异.根据其序列特征设计出种特异性引物, 对所供试的腐烂茎线虫群体及属间不同种群体样品的rDNA ITS区相应区段扩增以验证其特异性, 同时对分别由1～5条腐烂茎线虫成虫和幼虫提取的DNA进行特异性扩增以验证其灵敏度. 结果表明: 所有供试的腐烂茎线虫群体均可以特异性扩增一个346 bp的片段, 而所有供试的属外种均没有扩增片段;由1～5条腐烂茎线虫成虫和4～5条幼虫进行的特异性扩增也获得稳定的目的片段. 显示该特异性引物具有较高的稳定性、特异性和灵敏度, 能快速、准确地检测出腐烂茎线虫.     

甘薯茎线虫的扫描电镜制样方法

以甘薯茎线虫为材料,对取样、固定、干燥等制样方法进行比较研究.结果表明,以活线虫为研究试样,采用戊二醛 -锇酸双固定及临界点干燥法(或叔丁醇干燥法 )制样效果好,能获得良好的微形态结构,侧线数目清晰,虫体不皱缩,不变形.     

马铃薯腐烂线虫不同群体同工酶表型与致病力研究

    对国内不同地理来源的10个马铃薯腐烂线虫群体进行同工酶表型研究,同时在2个中抗甘薯茎线虫病品种(苏薯9号、宁薯9-9)上测定马铃薯腐烂线虫群体致病力、繁殖力、雌雄比(性比)、甘薯薯块鲜重损失量.结果表明:①10个群体苹果酸脱氢酶(MDH)酶谱分为2个酶型, 酶型Ⅰ的相对迁移率(Rf值)约为0.21、0.26;酶型Ⅱ的Rf值约为0.21、0.26、0.31,而酯酶染色不成形;②在P=0.05水平上,各群体间的致病力、繁殖力、性比差异显著,其中致病力最高的群体来自河北廊坊DeHB,对苏薯9号的致病力为75%;③在苏薯9号和宁薯9-9上,各线虫群体致病力与线虫繁殖力呈正相关;④偏相关分析显示,在苏薯9号上不同线虫群体繁殖力与性比呈负相关,相关系数为-0.213,而在宁薯9-9上不同群体繁殖力与性比呈显著正相关,相关系数为0.901,说明寄主品种的改变对线虫群体性别分化影响显著;⑤在抗甘薯茎线虫病和保鲜力方面,宁薯9-9分别比苏薯9号高33.48%和19.86%.     

Snf907真菌代谢物对甘薯茎线虫活性的影响

研究了Snf907真菌代谢物原液及不同稀释液对甘薯茎线虫活性及运动行为的影响。结果表明,在1,5,10,20,50倍稀释液浓度下二龄幼虫的校正死亡率分别是87.06%,78.73%,41.21%,24.37%,14.00%,均与无菌水对照差异显著;其不同浓度的代谢物对甘薯茎线虫的行为影响不同,随着浓度的增大和时间的延长,对甘薯茎线虫活动频率的抑制也增强。     

甘薯茎线虫与镰孢菌对甘薯的复合侵染

从甘薯茎线虫病的薯块中分离到茄病镰孢(Fusarium solani)和尖孢镰孢(F.oxysporum)2种真菌.通过苗期和薯块接种证实,尖孢镰孢与腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor)能共同侵染甘薯引起复合侵染病害.     

腐烂茎线虫热激蛋白新基因的克隆与序列分析

热激蛋白90基因(heat shock protein 90 genes,hsp90s)是与生物发育、生物防御反应以及生物抗环境胁迫等相关的多功能基因.本试验以RT-PCR结合RACE方法从腐烂茎线虫Dhtylenchus destructor中克隆出1个hsp90,命名为Dd-hsp90-1,基因登录号为HQ9015...     

甘薯形态结构对茎线虫病的抗性机制

 甘薯抗茎线虫病品种鲁薯-78066和胜利百号块根周皮的木栓层细胞有4 ～ 5层，并在细胞壁上沉积有较多的木栓质。表皮接种线虫结果表明，这种形态结构可有效阻止马铃薯腐烂线虫侵入。感病品种粟子香和徐薯18的周皮不发达，只有1 ～ 2层木栓层细胞，而且木栓质极少，线虫能在24h内从表皮直接侵入。甘薯抗病和感病品种的地上茎和地下茎髓部均可受到该线虫危害。抗病品种鲁薯-78066和胜利百号在地下茎和块根顶端连接部位与感病品种粟子香和徐薯18相比较，抗病品种木质部薄壁细胞的壁厚，木质化程度高，导管数量多，线虫不能够穿过这种结构进一步扩展。抗、感品种薯块表皮的伤口有利于线虫侵入，表皮和皮层变成黑褐色，呈糠皮状，但线虫不能进入木栓形成层危害块根皮层以内的组织。