杨树皮储藏蛋白基因启动子的克隆和功能研究

杨树树皮储藏蛋白BSP是类似种子储藏蛋白的氮素储藏物 ,冬季在韧皮部薄壁细胞中大量积累 ,是落叶树氮代谢中的重要成分。为了研究BSP基因启动子在转基因植物中的表达特性 ,探索其在植物基因工程研究中潜在的应用价值 ,我们用PCR方法从美洲黑杨基因组中DNA扩增得到了BSA启动子片段。与GUS基因融合构建中间载体后 ,转化烟草 ,获得了一批PCR检测为阳性的转化再生植株。经GUS组织化学检测 ,发现若干转基因烟草的茎和叶柄韧皮部以及叶脉都呈GUS染色阳性 ,初步证明杨树BSP基因启动子确有韧皮部表达特性 ,可介导GUS基因在转基因烟草韧皮部特异表达。     

暴马桑黄ras基因启动子的克隆及序列分析

以暴马桑黄(Sanghuangporus baumii)菌丝体提取的DNA为模板,采用PCR扩增技术,克隆得到ras基因启动子片段,并采取在线软件对其功能元件进行分析,结果显示:克隆得到的ras基因启动子片段含有典型启动子所具备的作用元件TATA-box和CAAT-box,还有许多其他重要作用元件G-box、CAG-m...     

杨树因伤诱导型启动子的克隆及功能分析

机械损伤或病虫害侵扰引起植物一系列防御相关基因的激活,其中一些是因伤诱导表达的．Ｂｒａｄｓｈａｗ等１９８９年报道了杨树Ｗｉｎ３基因家族中的一员,其编码产物类似于白薯和豆类胰蛋白酶抑制剂,并且是因伤诱导表达的。为了更全面的了解这一基因启动子在因伤介导表达中的作用,探讨其在基因工程用于控制外源基因表达的可能性,本文分别从欧洲黑杨（Ｐ．ｎｉｇｒａ）和美洲黑杨（Ｐ．ｄｅｌｔｏｉｄｅｓ）中扩增出ｗｉｎ３基因启动子ＷＩＮＰ（７０５ｂｐ）和ＷＩＤＰ（７９１ｂｐ）．这两个启动子与来自大肠杆菌的ＧＵＳ基因融合,通过根癌农杆菌Ｔｉ质粒转化系统引入烟草中．证实了ＷＩＮＰ和ＷＩＤＰ控制的ＧＵＳ基因的表达不仅在损伤部位,而且具有系统的因伤诱导效应．对８株转基因烟草的组织化学分析表明,其表达模式与以前的报道一致。无论是在受损伤组织还是完整组织中,ＷＩＮＰ的伤诱导活性总比ＷＩＤＰ高。这两个启动子需要进一步改造以增强其活性。     

杨树R2R3 MYB基因PeMYBLI的克隆及表达

An R2R3 MYB gene,PeMYBL1,was isolated from male inflorescence of Populus×euramericana by homologous cloning combined with in silico cloning techniques.The full length of PeMYBL1 cDNA was 1 094 bp encoding 276 amino acids.The deduced amino acid sequence contained two conserved MYB domains near the N-terminus,a conserved E1 motif and an acidic Ser/Thr rich region toward its C terminus.Phylogenetic analysis revealed that PeMYBL1 was clustered with AtMYB85 from Arabidopsis thaliana,ZmMYBL1 from Zea mays,OsMYB15...     

真核启动子研究进展

启动子是基因表达的重要顺式元件,也是基因工程表达载体的一个重要元件,决定着特定基因的定时、定位、定量表达,对其进行研究分析有重要的理论意义和广泛的应用前景。从启动子的基本构成、分类、生物信息学的预测与分析、克隆以及活性功能验证几个方面进行综述,介绍了多种启动子顺式作用元件的生物预测方法、启动子克隆和功能验证的各项技术,以期为克隆启动子和研究基因的表达调控提供参考。     

热激启动子控制的FT基因诱导杨树早期开花体系的优化

为实现杨树早期开花,缩短育种周期,利用农杆菌介导的转化方法,探讨影响热激启动子控制的FT1基因转化白杨派杂种无性系的因素,优化其转化条件,并实现FT1基因的转化,采用热激诱导方法诱导2～3个月大的转基因植株早期开花。结果表明:叶盘转化前的预培养、菌液浓度、侵染时间及共培养时间对卡那霉素抗性植株再生率的影响均达到极显著水平;叶盘在愈伤组织诱导培养基上暗培养6天,然后用活化至OD600=0.5的菌液侵染60min,再在愈伤组织诱导培养基上共培养2天,该条件下FT1基因转化白杨派杂种的卡那霉素抗性植株再生率可达29.84%;37℃每天1h持续热激3周可使FT1基因顺利表达,促进转基因植株开花;热激植株大小是影响转基因植株热激诱导开花的限制因素,低于20cm的植株不能诱导开花;热激诱导可产生相对较多的正常花器,但花器变异仍然十分广泛。     

杨树ARGONAUTE基因的克隆及序列分析

作为RNA诱导沉默复合体的核心元件,Argonaute(AGO)蛋白在植物生长发育过程中发挥着重要作用。以欧美杨和美洲黑杨不定根cDNA为模板,采用RT-PCR技术分离得到PeAGO5和PdAGO5基因的cDNA克隆,测序和序列分析结果表明2个目的cDNA片段均为2809bp,基因内部含有完整的开放阅读框,可编码907个氨基酸,预测蛋白质分子量分别为102.31ku和102.34ku,理论等电点(pI)分别为9.34和9.7。所推导的2个氨基酸序列之间仅有7个差异位点,含有3个保守的结构域,DUF1785、PAZ和Piwi结构域。它们与拟南芥AtAGO5蛋白的相似性分别为64.8%和64.3%,故将其命名为PeAGO5和PdAGO5。系统进化分析发现,PeAGO5和PdAGO5,与拟南芥AtAGO1,AtAGO5和AtAGO10蛋白同属一个进化分支。此外,采用实时定量PCR技术检测PeAGO5基因在杨树硬枝插穗不定根发育过程中的表达模式,推测该基因参与不定根发育调控。     

杨树抗虫基因工程研究进展

杨树栽培历史悠久 ,用途广泛 ,在国民经济中发挥着巨大作用。但由于杨树虫害严重 ,每年要给农林业生产造成巨大的损失。据国家林业局统计 ,我国森林病虫害年均发生面积在80 0万ｈｍ2 ,经济损失高达 5 0亿元。杨树害虫防治工作已迫在眉睫。以往人们大多采用化学防治的办法杀虫 ,     

猕猴桃Ac-miR160d启动子区的克隆及表达分析

[目的]为深入研究猕猴桃miR160d转录调控机制提供线索,也为猕猴桃分子育种及品种改良提供参考.[方法]根据'红阳'猕猴桃基因组信息,设计引物克隆miR160d(Ac-miR160d)前体基因及其启动子序列,并对其前体序列进行二级结构验证,对启动子序列进行保守结构域和顺式作用元件分析.同时,对猕猴桃果实进行非生物(N...     

暴马桑黄gpd启动子的克隆与序列分析

暴马桑黄药用价值很高,但是其含有的一些药用成分含量很低,运用基因工程技术对暴马桑黄进行改造,是培育优质暴马桑黄的有效手段.本试验对暴马桑黄三磷酸甘油醛脱氢酶(gpd)启动子进行基因克隆,从暴马桑黄中克隆得到一段1380 bp的gpd启动子序列.核心启动子区是转录因子和RNA聚合酶的结合区域,对启动子活性有较大影响,序列...     

杨树基因工程的研究进展

围绕转基因研究着重论述了杨树在抗病虫害育种、抗除草剂、抗非生物逆境胁迫、木质素结构调整以及转基因树木安全性等方面的研究进展,并对转基因杨树的应用前景作了展望。     

杨树花叶病毒研究进展

笔者对国内外杨树花叶病毒的生物学、血清学、分子生物学及其与杨树的互作等进行了简述。     

豫南地区杨树无性系引种及区域试验

对初选出的7个杨树无性系在豫南3个区试点的形态特征、生长特性和速生性进行了试验对比.结果表明:不同无性系在抗逆性、形态特征、生长特性和速生性方面存在显著差异.表现最好的无性系是TZ-8、其次是TZ-5和TZ-6,7a生平均材积分别为0.609 3、0.532 9 m3和0.514 9 m3,与对照相比,增益分别为264%、231%和223%.     

杨树育种研究进展

从杨树种质资源、引种、杂交育种、多倍体育种、分子育种等方面概述了我国及湖北省杨树育种的发展历程,并对目前中国及湖北省杨树育种存在的主要问题及解决对策进行了讨论。     

杨木和稻草微米纤维素表面官能团研究

利用傅立叶变换红外光谱仪对不同形态的杨木和稻草原料进行了表面官能团分析。研究表明杨木纤维素在经研磨成微米级别后,同一个纤维素分子链上相邻的葡萄糖单元-OH基之间形成的分子内氢键联结加强,从而赋予杨木微米纤维素一定的刚度;而稻草纤维素分子间的氢键联结增强且Si—H峰变弱,表明在高速研磨过程中部分硅物质剥落,使微米稻草纤维素表面性能有所改善。     

杨木单板干燥试验研究

利用喷气式单板干燥实验装置,采用生产中常用的干燥条件对美洲黑杨Ｉ－６９,欧美杨Ｉ－７２,青杨组的青杨、小叶杨及甘肃杨、白杨组的新疆杨和河北杨等７种杨木,旋切厚度为１．０１ｍｍ和２．０２ｍｍ的单板进行了干燥试验,测试了单板的干燥时间和干缩率,利用辊筒式单板干燥机按相似条件对上述７种杨木单板进行干燥,观察并测试其干燥变形。结果表明：７种杨木单板的整个干燥过程为减速干燥,干燥速度曲线为近似抛物线;杨木板     

细菌肥料对杨树生长效应的研究

细菌肥料对杨树生长效应的研究＊王守宗杨承栋谢应先倪本洲代忠哲关键词杨树、细菌肥料、生长效应细菌肥料应用于农业生产中，能够使农作物获得特定的肥料效应［１］。由于生产成本低、用量少、无毒无害、不污染环境等优点，国内外都在积极研究和应用微生物肥料［２～４］...     

关于杨树的特性及造林技术的探讨

杨树作为一种常见树种,其生长快、用途广,具有经济价值、社会价值和环保价值等,目前在我国很多地区都有大量栽植.在认识杨树特性的基础上,深入探讨杨树造林技术,期望有利于提升各地区的杨树栽植水平,促进我国林业事业的可持续发展.     

杨树木质素合成酶hct基因的克隆及核苷酸序列分析

根据毛果杨全序列（AC185363.2）中唯一具有转移酶功能的保守区设计引物,以正在分化的2年生欧美杨107次生木质部总RNA为模板经RT-PCR扩增出hct基因片段,与pMD20-T载体连接,重组质粒经特异引物扩增、限制性内切酶酶切和测序鉴定。结果表明,扩增片段长度为709bp,包含一个708bp的开放阅读框,与毛果杨全序列及HCT2（EU603314）的同源性均为98%,编码的氨基酸序列与毛果杨HCT2氨基酸（ACC63883.1）的同源性为98%,断定我们克隆的cDNA为hct,属于转移酶超家族,GenBank登录号为FM202091,该重组质粒命名为pMD20-T-hct。     

寒旱区杨树种、品种（无性系）对杨二尾舟蛾抗性研究

对寒旱区克拉玛依市的51个杨树种、品种（无性系）的杨二尾舟蛾危害指数和相对抗性指数进行了调查和分析,结果表明：除准噶尔3号属低抗水平外,其余50个种、品种（无性系）均属于中感和高感水平;不同杂交组合的相对抗性指数差异显著;同一杂交组合的不同种（或品种）间抗性也存在显著差异。