抗生素在植物组织培养中控制污染的应用

综述了近年来抗生素在植物组织培养污染防止中应用的研究进展。主要对植物组织培养中对外植体的处理、培养基中添加抗生素后对植物的影响等方面进行探讨,开发出既可作为污染菌抑制剂又可对植物生长进行调控的抗生素将是一个很有潜力的研究方向。     

植物组培产业化生产中污染防控技术研究

对浙江省植物组培产业生产中心的主要污染微生物的防控技术进行了研究,从11个杀菌剂和消毒剂中筛选出了对污染细菌德氏假单胞菌（Pseudomonas delafieldii）、丁香假单胞菌（Pseudomonas syringae）、蜡状芽胞菌（Bacillus cereus）和污染真菌指状青霉（Penicillum digitatum）、黑曲霉（Aspergillus niger）预防效果好,且对组培植物安全的药剂为乙蒜素和链·土霉素。乙蒜素可以在培养基分装前加入,与培养基同时灭菌使用;而链·土霉素在培养基使用前加入可有效预防污染物生长,该药剂对组培器皿和环境也有较好的消毒效果。     

土霉素对白网纹草组织培养中污染菌的抑制作用

在白网纹草组织培养中,为了降低污染,提高成活率,在初代培养基中加入不同浓度的土霉素来抑制污染菌的生长。结果表明,在白网纹草初代培养基中加入20～30 mg/L的土霉素,污染率降低25个百分点以上,成活率则提高10个百分点以上。对杂菌分离培养共发现细菌9种,真菌19种,其中肠杆菌、毛霉和交链孢霉是主要的污染菌。     

植物组织培养中污染的控制

控制污染是植物组培苗工厂化生产中重要的技术环节。笔者从外植体消毒、操作污染和环境污染、继代培养中污染的防治、减少培养基中的有机成分等方面，讨论了减少污染的措施和方法。     

头孢霉素对红菜薹小孢子再生植株培养污染菌的抑制作用

红菜薹小孢子再生植株培养体系连续继代过程中,插入培养基的试管苗切口处有云雾状污染菌出现,在培养基中加入头孢霉素(300⁵00mg/L)可抑制污染菌的生长。结果表明:3个浓度(300、400、500mg/L)都能有效地抑制污染菌的污染,以300mg/L的浓度为佳,其对植株生长无明显影响。     

头孢霉素对红菜薹小孢子再生植株培养污染菌的抑制作用

红菜薹小孢子再生植株培养体系连续继代过程中,插入培养基的试管苗切口处有云雾状污染菌出现,在培养基中加入头孢霉素(300~500mg/L)可抑制污染菌的生长。结果表明:3个浓度(300、400、500mg/L)都能有效地抑制污染菌的污染,以300mg/L的浓度为佳,其对植株生长无明显影响。     

不同pH值PDA培养基对平菇、香菇母种培养的影响

在食用菌菌种制作、培养过程中,培养基是关键性因素。其中,培养基的p H值对食用菌菌种的生长尤为重要,关系到菌种制作的成败。为此,以平菇和香菇为试验材料,以PDA培养基作为基础培养基,将培养基的pH值分别调至5.0、6.0、8.0、9.0,对照(CK)为自然p H值,接种培养平菇和香菇母种。接种后观察菌丝生长、污染状况,同时测定菌落直径。结果表明:香菇在偏酸环境下长势优于碱性环境,其中在pH值=6处理下长势最好,污染最低,成活率达70%;平菇对pH值的适应范围较宽,在所设处理下均能正常生长,其中在自然pH值下长势最好,污染最低,成活率达80%。     

欧洲甜樱桃茎段离体培养污染率控制方法的研究

以欧洲甜樱桃红灯5年生健壮植株为试材,研究了培养基中蔗糖及不同抗生素配比对外植体茎段培养污染率的影响。结果表明：无蔗糖培养基能显著降低染菌率,外植体在无糖培养基中最佳培养时间为7天,利福平和氯霉素能很好地抑制菌类物质活性,降低茎段培养的污染率,二者浓度均为100mg／L时获得无菌成活苗的几率最高,氯霉素、利福平最佳浓度组合为100mg／L利福平＋50mg／L氯霉素。100mg／L利福平＋50mg／L氯霉素的无糖培养基处理外植体时,污染率为0,成活率为90％。     

大熊猫源石膏样小孢子菌培养条件的筛选

为探明大熊猫源石膏样小孢子菌的最佳培养条件,在不同培养基、碳源、氮源、温度、pH等条件下培养石膏样小孢子菌,用十字交叉法测量菌落每天的生长情况。结果显示,石膏样小孢子菌在沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂培养基上生长最好,在改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基、高盐培养基上均生长良好,但在皮肤癣菌鉴定培养基和子囊孢子培养基上生长缓慢;5种碳源对菌株生长的影响不大,其中葡萄糖使该菌生长较好;在5种氮源培养基中,除了在以尿素为氮源的培养基中该菌株不能生长外,在以蛋白胨、硝酸钠、草酸铵、硫酸铵为碳源的培养基中该菌均能生长,且在以蛋白胨为氮源的培养基中生长最好;该菌株生长的最适培养温度为25℃,在15~35℃均可生长,在35℃时生长最差;在pH值为10时生长最好,在pH值为5、6、8、9时均能够良好生长,比在pH值为7时的生长更好,在pH值为4、11时的生长较差。     

植物组织培养中褐变和玻璃化及污染的治理研究

褐变、玻璃化和污染是植物离体微繁中常常出现的现象,严重影响了外植体的生长与分化,导致生产中损失,是生产中亟待解决的问题。本文通过分析植物茎段培养中存在的原因,并对植物组织培养中褐变、玻璃化和污染治理措施展开探讨,旨在为今后研究植物组织培养工作提供参考。     

粗毛纤孔菌的菌丝培养特性

对粗毛纤孔菌生物学特性的研究表明:粗毛纤孔菌菌丝生长可利用多种碳源和氮源,在以蔗糖为碳源、谷氨酸为氮源的培养基中生长最佳;适宜pH值为8～8.5;适宜生长温度为20～25℃;在黑暗条件下生长更好;最适宜培养基为PDA培养基。在25℃、PDA培养基上,粗毛纤孔菌10d便可在直径为9cm的培养皿上长满。     

DEB-2菌株抗真菌活性物质对半夏组培生长的影响

为了开发DEB-2菌株抗真菌活性物质成为组培抗真菌添加剂,采用生长速率法研究了DEB-2菌株抗真菌活性物质对12株组培常见污染菌的抑制作用,并将该抗真菌活性物质添加到组培培养基中,观察其对半夏组培苗生长的影响。结果表明,DEB-2菌株抗真菌物质对组培常见污染菌有较强的抑制作用,在20mL/L浓度下能明显抑制大多数常见组培污染真菌的生长,但对半夏的生长无显著影响;在30mL/L浓度下能显著抑制半夏不定芽的再生率;在40mL/L浓度下对不定芽生长高度的抑制作用极显著,对半夏的生长势有明显的抑制作用。     

荆条种子无菌萌发过程中污染菌的分离鉴定及抑菌剂筛选

荆条具有生态、观赏、药用及实用等方面的价值，但在荆条快速繁殖体系的建立中发现，种子在无菌萌发过程中污染率极高，达50%～75%。为降低荆条种子无菌萌发过程中的污染率，试验通过鉴定其主要污染菌株，筛选出有效抑菌剂，并利用组织分离法对污染菌进行分离和纯化；同时，通过光学显微镜和扫描电镜对污染菌的分生孢子进行细胞学观察，然后采用真菌rDNA基因的ITS序列通用引物进行分子生物学鉴定，最后选择百菌清、代森锰锌、多菌灵、氟吗锰锌4种杀菌剂添加到PDA培养基中进行抑菌效果分析。结果表明，主要污染菌为种子表面附着的真菌，菌落呈绒状黄绿色同心圆形，菌丝为有隔褐色分支状菌，分生孢子为橄榄棕色、有隔、梭型；细胞学和分子生物学鉴定表明，该污染菌为链格孢菌。抑菌研究结果发现，60%氟吗锰锌对链铬孢菌的抑制效果最佳，菌落直径最小。将60%氟吗锰锌稀释1 400倍添加到荆条种子无菌萌发培养基（水琼脂培养基）中，污染率明显下降到5.5%。荆条种子无菌萌发中主要污染菌为链格孢菌，60%氟吗锰锌对其抑制效果最佳。     

植物源杀菌剂对马铃薯组织培养中青霉菌的抑菌效果

在马铃薯脱毒试管苗工厂化快繁过程中,为了抑制试管苗中的真菌污染,减少损失,采用平板生长抑制法用3种植物源杀菌剂苦参、中草药和黑农一号,对植物组织培养中青霉菌抑菌效果进行研究。结果表明:在培养基中加入黑农一号抑菌剂抑制青霉菌的效果最好,浓度在2.0%时,抑菌率达100.0%。     

一株撑绿杂交竹内生菌的分离鉴定及主要培养特性研究

从天全撑绿杂交竹秆中分离到一株对植物病原真菌具有拮抗作用的内生真菌。形态特征表明,该菌株为毛壳菌属中的一员,但与目前查阅范围内的记载种均存在差异,且国内该菌在竹类植物内生菌分离上尚未曾见有报道,故暂定名为竹毛壳菌（Chaetomium sp.）。竹秆组织分离表明内生真菌的生态分布存在季节、组织部位与年龄差异。此外,对其培养特性进行了初步摸索,结果表明：（1）竹秆煎汁对该毛壳菌生长、产孢速度及产孢量均有促进作用,且同等条件下含蔗糖的培养基对菌的生长和繁殖都优于含葡萄糖的培养基;（2）该毛壳菌生长对低温和高温敏感;（3）该毛壳菌生长对pH值的适宜范围较宽;（4）该毛壳菌对光照敏感,对通气状况要求不严格。     

白粉寄生菌的研究

寄生在凤仙花白粉菌上的白粉寄生菌经鉴定为 Cicinnobolus cesatii deBary.,培养在 BPA,PDA,V_8培养基和灭菌的米饭、麦粒、燕麦片等上面,于20～25℃生长良好并产生大量分生孢子。孢子悬液接种在患白粉病的10种植物病叶上,该菌能寄生在单丝壳、蔷薇单丝壳、鞑靼内丝白粉菌、禾白粉菌和二孢白粉菌上。     

黄瓜疫病菌毒素的产生和生物测定初报

黄瓜疫病菌菌系Ｐｍ７在铵氮培养液、黄瓜籽培养基、修改的Ｃｓ培养液和Ｐｌｉｃｈ＆Ｒｕｄｎｉｋｉ培养液中均能良好生长,其中以铵氮培养液和黄瓜籽培养基产毒能力较强。该菌系在适于生长的４种培养基中生长２０天所产生的培养滤液对１０个黄瓜种质有程度不同的毒性,该菌系培养滤液对辣椒、南瓜、茄子、番茄等蔬菜幼苗也有明显毒性     

多菌灵对食用菌生产中常见污染菌影响

在木屑和PDA两种平板培养基中以木霉、青霉1、青霉2、黑曲霉、链孢霉为试验材料,研究了不同浓度的多菌灵(蓝丰)对以上食用菌生产中常见污染菌的影响。结果表明:木屑培养基上多菌灵抑制木霉、链孢霉的有效浓度为0.05%,抑制黑曲霉的有效浓度为0.2%,对青霉无抑制作用;PDA培养基上多菌灵对木霉、黑曲霉、链孢霉抑制作用较强,对青霉1、青霉2均有一定抑制作用。表明不同浓度的多菌灵对食用菌污染菌的抑制作用不同,多菌灵对木霉、黑曲霉、链孢霉有较好的防治效果,对青霉防治无效,对于同种污染菌在不同培养基上抑制效果有差异性。     

采用非织物材料作为香蕉类原胚体离体培养的支撑剂

本研究探讨在植物组培中用合成的非织物材料作为支撑剂,来代替琼脂培养基。把香蕉类原胚体放在吸有液体培养基的非织物材料中培养要比放在琼脂胶剂中培养生长较快。这种培养技术对离体繁殖和诱变选种可能有用。在植物组织培养的众多培养基中,琼脂被广泛地用来作为胶化剂。但人们知道琼脂含有少量会抑制组培植物生长的生长抑制素(Romberger and Tabor1971,     

不同抗生素对马铃薯组培苗细菌污染抑制效果比较

<正>在马铃薯组培苗生产过程中,组培苗污染率是一项很重要的指标。污染率低,则生产效率高、成本低;污染率高,则影响正常组培苗扩繁节奏,效率低、生产成本高。马铃薯组培苗污染有2类,一类是真菌污染,一类是细菌污染。真菌污染主要是孢子生长,污染苗瓶口打开后孢子会随风大量扩散,严重影响环境,应及时淘汰。细菌污染则是吸附在培养基表面,可以通过抗生素抑制。一、试验材料试验对象为马铃薯大西洋细菌污染苗,试验试