桑树叶片愈伤组织的诱导及不定芽分化影响因素的研究

通过正交试验,探讨了植物生长调节剂噻二唑苯基脲(Th id iazuron,TDZ)、α-萘乙酸(NAA)、桑品种、叶龄、叶位等5种因素对桑树叶片愈伤组织诱导的影响。筛选出了桑树叶片愈伤组织诱导的最佳条件为:21 d苗龄的陕305组培苗叶片,培养基MS+1.0 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA。在此条件下,陕305愈伤组织诱导率可达93.9%。对得到的陕305叶片愈伤组织进行了不定芽分化诱导,结果表明,最佳分化培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA+2%果糖,愈伤组织不定芽分化率高达100%。     

桑技条存放时间等因素对扦插发根的影响

经试验表明桑树品种抗青10号插条繁殖在12—25℃的温度条件下以20/11—5/12剪伐枝条自然放存5至10天(防晒防风),然后剪取插穗经50ppm吲哚丁酸浸渍24小时置于含水量3.5％的河沙中预措,其发根最佳。其中12℃低温区发根缓慢根量少,仅在根源体处发根,25℃高温区则发根快、根量多,除根源体外愈伤组织处亦可发根。经以上处理的插穗直接插于苗圃在加强管理的情况下,插条成活率平均亦达70％(放存30天技条除外)。     

不同插穗对桑树绿枝扦插生根效果的影响

利用绿枝扦插立体育苗的方法,研究了桑树不同品种、不同部位、不同长度、不同类型及不同时期的插穗对绿枝扦插生根效果的影响,结果表明：5个供试品种中,育71-1的生根效果最好,生根率为91.1％,株平均生根数为49.1条,其次为湖桑32号、选792、大10,而湘7920的生根效果最差;育71-1和湖桑32号不同部位插穗的生根率和生根数量均为中部枝条＞下部枝条＞上部枝条,不同长度插穗的生根率和生根数量均为15 cm插稳＞18 cm插穗＞12 cm插穗;主枝做插穗的生根效果明显优于侧枝;育71-1于7月20日和8月10日2次扦插的效果最好,生根率均超过90％,9月1日扦插的生根率也有74.5％,所以使用该方法可在7月至9月连续进行2～3次扦插育苗,扦插时尽量选用主枝的中部枝条剪成15 cm插穗进行扦插.     

2,4-D和BA对黑麦草不同外植体愈伤组织诱导与分化的影响

以多年生黑麦草的芽尖、根尖、下胚轴、成熟种子为外植体进行了愈伤组织诱导和分化的研究,结果表明:不同划割处理的成熟种子的愈伤组织诱导率不同,不同外植体的愈伤组织诱导率也不同,芽尖、根尖愈伤组织的诱导效果较差.纵向划割的成熟种子的愈伤组织诱导率及分化能力均优于下胚轴.2,4-D浓度在7 mg/L、BA浓度为0.1 mg/L时有利于成熟种子诱导产生愈伤组织,2,4-D浓度在5mg/L、BA浓度在0.05mg/L时有利于下胚轴诱导产生愈伤组织.继代培养时间对愈伤组织的分化率有很大影响,成熟种子和下胚轴在继代培养基上继代培养60d和80d时分化率最高,分别达到76%和35%,继代天数过长不利于愈伤组织的生长.     

噻二唑苯基脲对桑树愈伤组织诱导的影响

以2个主栽桑树品种为材料,探讨了噻二唑苯基脲(TDZ)等植物生长调节剂对桑树愈伤组织诱导的影响。结果表明,TDZ能够显著促进桑树愈伤组织的产生和生长。叶柄、幼茎愈伤组织诱导最佳培养基为MS+0.5mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA;子叶愈伤组织诱导最佳培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA。     

不同外植体对马蹄金愈伤组织诱导及分化的影响

从不同外植体的生长时间、切取方式和光照条件诸因素探讨了对草坪地被植物马蹄金Dichondra repens愈伤组织诱导及分化的影响作用。结果表明：下胚轴和子叶的生长时间只对愈伤组织诱导的始愈时间和生长势有影响,生长期越短,则始愈时间缩短,愈伤组织生长势强,而对出愈率、愈伤组织状态和愈伤组织分化率无明显作用;光照和黑暗培养只对下胚轴诱导愈伤组织的生长状态有影响而对子叶诱导愈伤组织无作用;外植体的不同切取方式对愈伤组织诱导的始愈时间有影响,经切取后可缩短始愈时间;仅从完整子叶离体培养诱导愈伤组织获得了再生植株,其分化频率为13．9％～18．6％。     

桑树不同剪稍程度对翌年春叶质量的影响

通过桑树不同剪稍程度对翌年春叶质量的影响试验表明:在其它桑园管理措施一致的前提下,采用剪去条长3/5的普通剪稍法,能适当提高4龄起蚕结茧率、虫蛹统一生命率和茧质,显著提高后代的卵质及孵化率。综合考虑桑叶的产量和质量,在实际生产中采用剪去条长3/5的普通剪稍法,既能保证桑叶产量,又能提高桑叶质量。     

桑树夏秋期不同采收程度对种茧育的影响

试验表明,在其他桑园管理措施一致的前提下,夏秋期留叶5～12片,能显著提高卵质及下代孵化率,适当提高4龄结茧率、虫蛹统一生命率及茧质。综合考虑桑叶的产量和质量,实际生产中,夏秋期留叶5-6片,既能保证桑叶产量,又能提高蚕种质量。     

60Co-γ射线辐照对结缕草愈伤组织分化的影响

本试验以3个结缕草（Zoysia spp.）（品）种（兰引3号,马尼拉,青岛）的茎基作为外植体材料,诱导愈伤组织,观察出愈率,然后用不同剂量（5~40 Gy）的60Co γ射线辐照处理愈伤组织,观察其胚性愈伤组织诱导情况。结果表明,较低剂量（15～20 Gy）的辐照处理可以促进结缕草愈伤组织向胚性愈伤组织转化,在这一剂量范围内,3个结缕草（品）种不但可以获得很高的出愈率,同时也可获得较高的胚性愈伤组织形成率。胚性愈伤组织诱导的临界剂量是20 Gy, 此时,兰引3号、马尼拉和青岛愈伤组织的胚性转化率均达到了峰值,分别为76.47%、63.64%和37.5%。3个结缕草品种愈伤组织辐照的半致死剂量为30 Gy。     

不同生根剂对无核紫葡萄的扦插效应

研究了不同生根剂对电热温床培养无核紫葡萄的扦插效应。结果表明,萘乙酸（NAA,300 mg/L）、国光生根粉（100 mg/L）、阳光生根胶囊（300 mg/L）均可促进葡萄插穗地下部分形成愈伤组织和生根。插穗生长20 d时,3个处理的愈伤组织诱导率分别为87.5%、77.5%、82.5%,比清水对照（60%）提高了27.5、17.5、22.5个百分点;生根率分别为75%、65%、55%,比对照（15%）提高60、50、40个百分点。插穗生长20 d时,3个处理的萌芽率分别为45%、50%、57.5%,比对照（75%）降低了30、20、17.5个百分点;插穗生长40 d时,各处理均可提高葡萄插穗成活率,3个处理的成活率分别为82.5%、92.5%、87.5%,分别比对照（77.5%）提高了5.0、15.0、10.0个百分点。NAA有利于促进插穗生根,而国光生根粉更利于插穗成活。插穗生长40 d时,与对照相比,3种生根剂均对新梢长度和叶片数有明显抑制作用,而阳光生根胶囊和萘乙酸对新梢长度有极显著的抑制作用。由于生根粉的作用使苗木根系生长迅速,成苗时苗木质量较高,建议在无核紫葡萄苗木生产中采用国光生根粉以提高苗木成活率及苗木长势。     

不同苜蓿品种对叶片愈伤组织诱导及植株再生的影响

以7个苜蓿品种叶片为外植体，采用3种诱导培养基、5种分化培养基，共15个组合，研究了不同品种间愈伤组织诱导及植株再生的差异。结果表明，不同苜蓿品种间植株再生率差异显著，超级13R在7个苜蓿品种中表现最佳。     

不同苜蓿品种对叶片愈伤组织诱导及植株再生的影响

以7个苜蓿品种叶片为外植体,采用3种诱导培养基、5种分化培养基,共15个组合,研究了不同品种间愈伤组织诱导及植株再生的差异。结果表明,不同苜蓿品种间植株再生率差异显著,超级13R在7个苜蓿品种中表现最佳。     

不同浓度激素对狗牙根愈伤组织的诱导与分化的影响

以狗牙根成熟种子为外植体,以N6为基本培养基,研究不同浓度2,4 D和6 BA组合对狗牙根愈伤组织诱导与分化的影响。结果表明:(1)1mg/L的2,4 D对愈伤组织诱导有很大的促进作用;(2)种胚愈伤组织的诱导宜采用N6+1mg/L2,4 D+0.7mg/L6 BA的培养基;(3)愈伤组织的分化缓慢,1mg/L2,4 D+0.7mg/L6 BA培养基所产生的愈伤组织分化情况较好。     

电晕电场作用对花棒愈伤组织诱导与分化的影响

以花棒的芽尖和下胚轴为外植体,对经高压电晕电场处理后的幼胚进行了愈伤组织诱导和分化的研究。结果表明:电场处理可以明显提高愈伤组织诱导率和分化率,不同的电场处理强度和处理时间愈伤诱导率不同。下胚轴在电场强度为5kV/m、处理60min时出愈率可达90.5%,分化率可达88.7%;芽尖在电场强度为7kV/m、处理60min时出愈率可达23.6%,分化率可达20.9%。     

外源激素对紫穗狼尾草愈伤组织诱导及分化的影响

以紫穗狼尾草(Pennisetum alopecuroides)幼芽基部为外植体,研究了外源激素对其愈伤组织诱导及分化的影响,筛选适宜的激素种类及浓度配比,为狼尾草无性系抗性育种奠定基础。结果表明,2,4 D对愈伤组织诱导的作用最显著,生长素NAA和KT的作用相近,均以0.5~1.0 mg·L-1为宜;NAA对愈伤组织分化的作用较明显,以0.5~1.0 mg·L-1与3.0 mg·L-16 BA配合效果最佳,KT的作用不明显。最佳诱导培养基为MS+2,4 D 3.0 mg·L-1+NAA 1.0 mg·L-1 +KT 1.0 mg·L-1;最佳分化培养基为MS+NAA 0.5 mg·L-1 +6 BA 3.0 mg·L-1。     

激素对调养是茅愈伤组织诱导及其分化的影响

用不同种类培养基及不同浓度2，4-D、BA对高羊茅种子进行愈伤诱导，结果表明：培养基种种类对愈伤诱导无明显效果；MS培养基下不同浓度2,4-D对高羊茅愈伤诱导时间及出愈率差别很大，以9mg/l效果最佳，愈伤诱导率达66.7%左右；过高浓度的2,4-D、BA对萌芽和愈伤的形成均有负作用；愈伤组织分化以MS BA2.0mg/l NAA0.5mg/l为佳。     

4种不同处理对百脉根农艺性状的影响

通过试验探讨了在不同处理方式(PEG浓度为12%、低营养、高重碳酸盐、低磷和对照)情况下对百脉根农艺性状株高、根长、根直径、茎粗、根体积、分枝数的影响。研究结果表明：在低营养处理下,百脉根株高、根长、茎粗、根体积、分枝数受到抑制生长作用最大;在PEG浓度为12%时,百脉根根直径受到的抑制生长作用最大。在不同处理方式下,对百脉根农艺性状总体影响由大到小排列为低营养>低磷>高重碳酸盐>PEG浓度为12%。通过利用不同处理方式对百脉根进行试验,了解到百脉根在PEG浓度为12%时为最佳生长环境,旨在为研究百脉根在不同环境下表现出的变化规律和抗旱性的深入研究提供理论依据。     

添加铁、锰及镉对桑愈伤组织生长的影响

镉、锰和铁添加浓度为５×１０－５Ｍ和１０－－４Ｍ时，对桑愈伤组织生长有明显抑制作用，而镉和铁或镉和锰复合添加条件下，桑愈伤组织的生长受阻更为严重。镉或锰的添加促进桑愈伤组织对铁的吸收，但愈伤组织中镉的含量却因铁的添加浓度增大而下降。锰和镉两元素的吸收具相互促进作用，因而对桑愈伤组织的毒性更大。     

2,4-D和6-BA组合配比对金达苜蓿愈伤组织诱导与分化的影响

为了建立一个高效的金达苜蓿(Medicago sativa L. cv. Jinda)组织培养再生体系,我们以金达苜蓿无菌苗的胚轴上段、下段、子叶为外植体,进行了2,4-D和6-BA不同组合配比对愈伤组织诱导和胚性愈伤组织及胚状体分化的影响,这对其以后建立遗传转化体系具有重要的意义。结果表明:胚轴上、下段和子叶是很好的诱导愈伤组织的外植体;在MSO胚状体诱导培养基上,分化出胚性愈伤组织的最佳2,4-D、6-BA剂量配比为8:0.2,成苗培养基为MSO+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂。     

抗生素对农杆菌的抑菌效果及对黄花苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响

研究了不同浓度抗生素对农杆菌抑菌效果及对野生黄花苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明:氨苄青霉素(Amp)的抑菌效果优于头孢霉素(Cef);各个浓度下的Amp和Cef对愈伤组织的诱导与对照相比基本无显著差异;Amp浓度为100～300mg/L,Cef浓度为200～500mg/L时对不定芽的形成具有较好的促进作用。因此,在进行农杆菌介导黄花苜蓿遗传转化研究时,可选择Amp作为抑菌剂,最佳浓度为300mg/L;Kan和Hyg作为抗性愈伤选择剂,适宜的浓度分别为40～50mg/L和15～20mg/L。