J亚群禽白血病病毒感染鸡的抗原和血清抗体变化规律

为了解鸡感染J亚群禽白血病病毒(ALV-J)后抗原和血清中抗体的变化规律,本研究经卵黄囊途径对6日胚龄SPF鸡胚,肌肉途径对31日龄和56日龄的SPF鸡感染ALV-J后,于不同时间采集胎粪或泄殖腔棉拭子,同时采集血液、分离血清,以检测p27抗原、J型抗体和p27抗体。结果显示,胚胎组在各检测点均可检测到p27抗原(仅1只鸡在1日龄时为阴性),而31日龄组和56日龄组检测不到p27抗原;胚胎组没有检测到p27抗体,31日龄组中80%的鸡在3次重复感染后可检测到p27抗体,56日龄组在首次感染后p27抗体的检出率较高(60%);各组J型抗体在各检测点基本为阴性(仅个别鸡在个别检测点为阳性)。结果提示,p27抗原和抗体的检测在ALV-J感染的早期诊断及禽白血病净化工作中具有重要意义。     

SPF鸡感染J亚群禽白血病病毒血清抗体与卵黄抗体的变化动态及其相关性

为研究以卵黄抗体替代血清抗体判定SPF鸡群J亚群禽白血病病毒(ALV-J)感染状态的可行性,人工接种ALV-J的SPF鸡23周龄时,分别从25只抗体阳性鸡及22只抗体阴性鸡采集血清和卵黄,比较不同稀释度的卵黄与血清中ALV-J抗体的阴阳性吻合率及ELISA检测S/P值相关系数。结果表明,相对于血清抗体,将卵黄1∶400稀释,假阳性和假阴性最少,确定1∶400为卵黄最适稀释度。对40只攻毒SPF鸡和36只同批次单独饲养的空白SPF鸡在25~34周龄,每隔3周采集一次血清,每周采集一次种蛋,共采集304份血清样品和760份卵黄样品。血清按1∶500稀释,卵黄按1∶400稀释,所有血清和卵黄抗体用美国IDEXX公司ALV-J抗体ELISA检测试剂盒检测,同一只鸡同一时段采集的血清和卵黄样品严格在同一次ELISA中检测。结果显示,在25~34周龄,卵黄抗体检测判定结果与血清整体吻合率为82.5%~95%。上述结果表明用卵黄抗体替代血清样品检测来监控SPF鸡群对ALV-J的感染状态是可行的,疫苗生产企业可通过抽检SPF鸡场提供SPF种蛋的卵黄抗体水平来判断SPF鸡场的洁净度。     

贵州省鸡群中禽白血病病毒J亚群感染的调查

采用禽白血病J亚群抗体检测试剂盒对4个不同肉种鸡场的血清样本进行检测,发现ALV-J抗体阳性率平均达到16.52%(3.33%～0.0%).对出现肿瘤病变的显性型病鸡进行病理组织学检查,在肝、肾、脾组织中观察到大量增生的、含嗜酸性颗粒的髓细胞样瘤细胞.针对J亚群gp85基因部分序列进行PCK扩增,从ALV-J抗体阳性鸡的肝病料扩增出一条545bpDNA带,而ALV-j抗体阴性鸡的样本显现阴性反应.将扩增的gp85基因序列与国内外J亚群毒株相应序列进行比较,结果核苷酸序列的同源性分别达到94.8%～96.5%和95.50%～96.8%.综合血清学、病理组织学变化和病原分子生物学鉴定结果,证实贵州省肉种鸡群中存在ALV-J 亚群病毒感染.     

J亚群禽白血病研究进展

J亚群禽白血病病毒是上世纪90年代初从商品代肉鸡中分离鉴定出来的新的ALV亚群,主要引起肉鸡的骨髓瘤白血病(myloid leucosis,ML)。2009年,J亚群禽白血病在我国呈高发态势。我国于1999年首先在肉用型鸡群分离鉴定出ALV-J的中国株,随后相关研究依次展开。论文就ALV-J的流行病学、检测方法、病毒变异、免疫抑制及与其他免疫抑制疾病共感染等几个方面进行了简要介绍。     

J亚群禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

本研究利用J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis virus,ALV-J)gp85单因子血清纯化后的抗体成功建立了检测ALV-J抗原的双抗体夹心ELISA方法(DAS-ELISA)。结果表明,该方法具有良好的特异性、重复性和稳定性,对ALV-J抗原的最小检出量为0.165 μg/mL。用该法对48份临床血浆样品进行检测,结果与PCR方法的符合率达到85.2%。     

J亚群禽白血病病毒的免疫荧光检测效果

应用特异性抗J亚群禽白血病病毒（ALV－J）的单克隆抗体JE9建立了免疫荧光检测ALV－J抗原和抗体的方法。结果表明，在ALV－JADOL－Hcl感染鸡胚成纤维细胞（CFF）24小时后，可以用1FA检测出阳性细胞，感染72小时后，可以检测出最小病毒感染量≥1．25TCID50／孔。对人工感染ALV－J鸡肾脏冰冻切片检测结果证明，免疫荧光法可以检测出组织中的ALV－J抗原，表现强阳性反应。用重组病毒rBac4817－env感染的Sf9细胞作抗原，可以检测出鸡血清中抗ALV－J的特异性抗体。该方法在ALV－J的控制中必将产生重要作用。     

鸡感染J亚群禽白血病病毒的免疫抑制机理

通过人工接种建立了雏鸡感染J亚群禽白血病病毒（ALV-J）后发生免疫抑制的病理模型。对免疫抑制的机理进行了初步研究。结果表明：ALV-J感染早期可诱导胸腺、法氏囊的淋巴细胞凋亡，这种早期的淋巴细胞凋亡是胸腺和法氏囊萎缩的重要原因之一。病理组织学动态观察表明。ALV-J主要引起骨髓的髓系细胞灶状或弥漫性增生，病变导致骨髓机能受损，使机体免疫机能下降。是引起免疫抑制的根本原因。病毒感染组免疫器官均发生了严重的实质萎缩性病变．这种病变的发生除与骨髓的病变及淋巴细胞凋亡有关外。还与中后期淋巴细胞的坏死有关．从而导致严重的免疫抑制。ALV-J感染可引起免疫器官及部分内脏器官中嗜酸性粒细胞样的瘤细胞浸润增生，这可以作为病毒感染早期的病理诊断指标。     

J亚群禽白血病的研究进展

禽白血病(Avian Leucosis，AL)是由各种禽白血病亚群病毒引起的多种肿瘤性疾病的总称．主要是以造血细胞恶性增生为主的一类传染病。目前主要将其分为淋巴细胞性白血病、禽骨髓细胞性白血病、成髓细胞性白血病和成红细胞性白血病。其中淋巴细胞性白血病是对禽类危害最大的疾病．相关文献报道亦最多。而骨髓细胞陛白血病(又称禽骨髓细胞瘤Myeloid Leucosis，ML)是由禽白血病病毒J亚群(Avian Leucosis Virus-J subgroup，ALV-J)引起的禽多种肿瘤性传染病。     

山东省莱州市部分猪场猪瘟和蓝耳病血清抗体检测

猪瘟和蓝耳病是影响我国养猪业的重大疫病,对其进行定期检测极为重要。为了解规模猪场的猪瘟和蓝耳病的免疫合格情况,2017年4—8月,采用两阶段随机抽样结合便利抽样方法,采集莱州市6个规模猪场的629份血清样品,通过ELISA方法进行猪瘟和蓝耳病免疫抗体水平检测。结果显示:6个猪场的猪瘟和蓝耳病抗体平均阳性率分别为82.19%和92.85%,均高于国家规定的70%的基本要求,但有1家猪场的猪瘟抗体合格率未达到国家规定的最低标准,保育猪群的猪瘟和蓝耳病抗体合格率整体偏低。检测结果表明:莱州市猪场猪瘟和蓝耳病的免疫效果较好,猪群基本能够得到有效保护,但对于抗体合格率偏低的猪场以及保育猪群应注意加强猪瘟和猪蓝耳病的免疫和抗体监测。     

2011—2019年山东省部分规模猪场猪瘟免疫效果监测

为了解山东省规模猪场的猪瘟免疫效果及变化趋势,2011—2019年在16个地市717个规模猪场,采集血清样品22 465份,采用猪瘟抗体ELISA方法进行抗体检测,并比对不同年份和不同场点的免疫水平。结果显示:2011—2019年,全省16个地市种猪场的场群免疫合格率为73.84%,个体合格率为77.54%;商品代猪场的场群免疫合格率为63.96%,个体免疫合格率为71.79%。从不同年份看,规模猪场的猪瘟免疫抗体水平呈波浪状变化,2011—2012年免疫水平较高,2013—2014年较低,2015—2016年再次升高,2017—2019年免疫水平又出现下降;从不同场点看,无论是个体免疫效果,还是群体免疫效果,种猪场均优于商品代猪场。结果表明,山东省规模猪场的总体猪瘟免疫抗体水平不高且不稳定,因而规模猪场应持续加强猪瘟的免疫和监测,尤其是商品代猪群,以降低猪瘟的发生风险。     

2015—2018年安徽省定点猪场主要疫病病原和血清抗体监测

为全面掌握安徽省口蹄疫、猪瘟、高致病性猪繁殖与呼吸综合征和猪伪狂犬病等主要猪群疫病的感染及免疫状况,2015—2018年,从安徽省东部、中部和南部选取12个生猪养殖场,应用荧光定量RT-PCR和ELISA检测方法,连续4年对上述疫病病原和血清抗体进行检测。结果显示：每年均检测出口蹄疫3ABC阳性抗体,O型和A型口蹄疫免疫抗体合格率呈逐年下降趋势。猪瘟和高致病性猪繁殖与呼吸综合征免疫情况较好,抗体合格率均超过农业农村部规定的70%标准,高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸阳性率呈逐年下降趋势。猪伪狂犬病在猪场中存在一定的流行,gE（野毒）抗体阳性率在0.74%~19.90%之间;gB免疫抗体合格率在35.64%~71.16%之间,合格率较低且呈逐年下降趋势。小型猪场的主要疫病免疫抗体合格率普遍低于中型猪场,保育猪群和育肥猪群抗体合格率低于其他生产阶段猪群。结果提示,该地定点猪场的口蹄疫和猪伪狂犬病防控效果不理想,不仅存在一定的病毒感染,免疫抗体合格率也偏低,病毒流行风险较高,需要加强监测和免疫;猪瘟、高致病性猪繁殖与呼吸综合征总体防控效果较好,但需要加强种公猪免疫。     

2017—2020年广西部分猪场送检血清猪伪狂犬病抗体检测

为了解广西猪场伪狂犬病毒（PRV）感染和免疫状况,2017年1月—2020年12月,对部分猪场随机采样送检的血清样品,应用ELISA方法开展PRV血清抗体检测,并对检测结果进行不同年份、不同季节、不同地区、不同生长阶段猪群的统计分析。结果显示：从时间分布上看,2018年PRV gE抗体场阳性率（57.71%）和个体阳性率（24.75%）均最高,此后呈逐年下降趋势,其中个体阳性率下降明显（P＜0.05）,2020年下降至6.14%;各年间的PRV gB抗体场合格率差异不显著（P＞0.05）,均在90%以上,而2019年的个体阳性率（88.71%）最低,与其他年份差异显著（P＜0.05）。冬季PRV gE和gB抗体个体阳性率最低,分别为14.96%和89.35%,与其他季节差异明显（P＜0.05）;冬季gE抗体场阳性率（42.97%）最低,与春季、秋季差异不显著（P＞0.05）,但显著低于夏季（P＜0.05）,而gB抗体场合格率一年四季差异不显著（P＞0.05）,均在95%以上。从空间分布上看,广西14个地市猪场均存在不同程度的PRV野毒感染,其中玉林市最严重,场阳性率和个体阳性率分别为69.51%和35.86%,而钦州市最轻,分别为16.67%和4.07%;PRV gB抗体个体合格率普遍较高,均在84%以上。从不同生长阶段猪群上看,后备母猪、育肥猪PRV gE和gB抗体个体阳性率均显著低于其他生长阶段猪群（P＜0.05）,其中gE抗体个体阳性率在13%以下,而gB抗体个体阳性率不足80%。结果表明,近年广西规模猪场PRV野毒感染率较高,而疫苗免疫并不能完全阻止野毒株感染。建议通过PRV净化和提高规模猪场生物安全水平等措施来控制其流行。本研究为制定合理的猪伪狂犬病防控与净化策略提供了依据。     

2018—2021年上海市嘉定区规模猪场主要疫病抗体监测

为了解上海市嘉定区规模猪场口蹄疫(FMD)、猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪伪狂犬病(PR)和猪流行性腹泻(PED)等疫病的免疫及流行状况,对嘉定区现有的2个规模猪场2018—2021年的检测数据进行汇总分析.结果显示:嘉定区规模猪场FMD、CSF、PRRS、PR免疫抗体平均合格率分别为91.8％、8...     

2020年山东省淄博市高致病性禽流感监测

为掌握山东省淄博市高致病性禽流感(H5N1 Re-11/Re-12株)免疫效果、病原分布及防控情况,根据2020年淄博市动物疫病监测与流行病学调查计划要求,按照两阶段抽样法从全市规模养殖场和散养户中随机抽取血清和棉拭子样品,采用血凝(HA)和血凝抑制(HI)、荧光RT-PCR方法进行抗体和抗原检测,并对检测结果进行统计...     

河南省部分猪场猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟血清抗体检测

为了解河南省部分猪场猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟的抗体保护水平,2018年采用ELISA方法,对河南省部分一级监测网点猪场开展了猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟血清抗体检测。检测结果显示:猪繁殖与呼吸综合征抗体总阳性率为91.28%,猪瘟抗体总阳性率为95.87%。其中:后备猪、种公猪、经产母猪、保育猪、育肥猪血清样品的猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为93.68%、93.87%、92.16%、88.93%、88.65%,猪瘟抗体阳性率分别为98.51%、98.77%、98.45%、85.71%、91.82%;祖代场、父母代场、商品场血清样品的猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为94.63%、88.02%、89.46%,猪瘟抗体阳性率分别为98.40%、96.16%、91.03%。检测结果表明:河南省一级监测网点猪场的猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟抗体水平较高,但保育猪群和育肥猪群偏低,需要对其加强抗体监测,以确定最佳免疫方案;商品代猪场抗体水平略低于祖代和父母代猪场,这要求畜牧兽医部门需同时加强对所有猪场的日常监督与监管。     

2017—2019年安徽省部分禽场禽白血病定点监测

为了解安徽省部分禽场禽白血病病毒（avian leucosis virus，ALV）感染情况，2017—2019年，采用ELISA检测试剂盒，对安徽省59个禽场的3 275份血清和2 100份蛋清进行ALV-J抗体、ALV-A/B抗体和p27抗原检测，并对相关结果进行三间分布数据分析。结果显示：2017—2019年ALV-J抗体、ALV-A/B抗体和p27抗原平均抗体阳性率分别为19.36%、7.66%和5.90%；从不同养殖规模看，大型场的ALV-J抗体、ALV-A/B抗体和p27抗原的场阳性率分别为73.91%、73.91%和62.52%，均高于中型场和小型场；从不同场点类型来看，祖代场的ALV-J抗体和p27抗原的个体阳性率最高，分别为21.52%和6.01%，商品代场的ALV-A/B抗体的个体阳性率最高；从不同养殖品种看，黄羽肉鸡ALV-J抗体个体阳性率（26.24%）、鸭ALV-A/B抗体个体阳性率（12.31%）均高于其他禽种。结果表明，安徽省禽白血病流行较为严重，尤其是大型场、祖代场以及肉鸡和鸭的ALV感染风险较高。建议进一步加强对高风险禽场和禽群的禽白血病监测，持续推进禽白血病净化工作。     

2020年山东省春季口蹄疫和高致病性禽流感免疫抗体检测

为了解山东省口蹄疫、高致病性禽流感两种重大动物疫病的免疫效果,按照山东省动物疫病监测计划,采集全省98个场(户)2909份血清样品,应用液相阻断ELISA和血凝抑制试验(HI)检测方法进行血清抗体检测.结果显示:O型口蹄疫抗体样品合格率为83.73％,A型口蹄疫为77.5％,高致病性禽流感H5亚型Re-11、H5亚型R...     

2020年云南省部分猪场3种猪源病毒抗体检测

为了解云南省猪场猪瘟（CSF）、猪繁殖与呼吸障碍综合征（PRRS）、猪伪狂犬病（PR）的免疫水平,2020年1—8月,采用ELISA方法对不同猪场随机采集的934份血清进行了这3种疫病病原抗体检测。结果显示：猪瘟病毒（CSFV）平均抗体阳性率为86.51%,不同州市抗体阳性率为57.14%~100%,有2个州市不足70%,不同生长阶段抗体阳性率为80.56%~92.05%;猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）平均抗体阳性率为48.61%,不同州市抗体阳性率为24.00%~100%,仅红河州为100%,其余均不足70%,不同生长阶段PRRSV抗体阳性率为38.33%~56.19%;猪伪狂犬病毒（PRV）gB平均抗体阳性率为79.11%,不同州市gB抗体阳性率为43.33%~100%,除红河州外其余均超过70%;仅玉溪市和曲靖市检出PRV gI抗体阳性,阳性率分别为11.11%和10.70%,阳性样品来源于除公猪外的其他各生长阶段猪群。结果表明,云南省猪场CSF和PR的免疫抗体水平较高,而PRRS免疫抗体水平较低,部分地区还存在PR野毒感染风险。结果提示,云南省应整体加强PRRS的免疫防控,部分地区还需加强CSF和PR免疫及综合防控。本研究为云南省猪场CSF、PRRS和PR的免疫及其防控措施制定提供了参考数据。