猕猴桃OSCA基因家族鉴定及其在非生物胁迫下的表达分析

【目的】揭示OSCA家族基因在猕猴桃响应非生物胁迫中的表达特征,为猕猴桃OSCA基因功能分析与猕猴桃抗逆性遗传改良提供参考。【方法】利用生物信息学方法对全基因组范围内猕猴桃OSCA基因家族成员进行鉴定和综合分析,通过q RT-PCR法分析它们在不同非生物胁迫下的表达特征。【结果】在中华猕猴桃基因组中共鉴定出16个OSCA基因,它们不均等地分布于13条染色体上,其启动子区域存在大量响应逆境胁迫的顺式作用元件。OSCA3在干旱、盐、高温和低温胁迫下表达量均较显著上调,OSCA8在干旱、盐和低温胁迫下表达量显著上调,OSCA1和OSCA14在低温胁迫处理下表达量显著上调,OSCA7和OSCA15均显著响应干旱胁迫。【结论】鉴定出6个受非生物胁迫显著诱导表达的猕猴桃OSCA基因,为进一步研究OSCA基因在响应猕猴桃非生物胁迫中的分子功能提供了重要依据。     

毛花猕猴桃AeAPX基因家族鉴定与表达分析

【目的】鉴定并分析毛花猕猴桃（Actinidia eriantha）抗坏血酸过氧化物酶（ascorbate peroxidase, APX）)基因家族,为毛花猕猴桃抗坏血酸（ascorbate acid, AsA）代谢调控分子机制的探究提供参考。【方法】利用生物信息学方法对毛花猕猴桃APX基因家族进行鉴定和分析,并通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)验证分析AeAPXs在不同果实发育期中以及套袋处理后的表达情况。【结果】毛花猕猴桃全基因组中鉴定出29个AeAPX基因家族成员,随机分布在18条染色体上,并出现了基因片段复制现象。大多数基因被预测定位在叶绿体中。蛋白质二级结构以α-螺旋和不规则卷曲为主,且有13个家族成员属于跨膜蛋白。AeAPXs家族具有相似的基因结构,大多数含有4个外显子且在上游启动子区域,分析发现,大量与光（Box4、G-Box）、激素（ABRE、TCA-element）逆境胁迫（MBS、ARE）响应相关的顺式作用元件。系统进化分析表明,AeAPXs基因家族可分为3个亚类,共存在6对共线性基因对。qRT-PCR...     

对萼猕猴桃CDPK基因家族鉴定及非生物胁迫应答分析

【目的】鉴定对萼猕猴桃(Actinidia valvata)CDPK家族基因,并分析其在不同组织的表达模式以及对盐胁迫和淹水胁迫的响应。【方法】基于3代全长转录组测序数据,通过多种生物信息学手段,分析和鉴定对萼猕猴桃CDPK家族基因,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术分析这些基因在不同组织中的表达,及在不同非生物胁迫条件下的表达情况。【结果】在对萼猕猴桃基因型KR5的全长转录组测序数据中共鉴定出63个CDPK基因,命名为AvCDPK1～AvCDPK63。系统发育分析将AvCDPK基因蛋白分为4个亚家族,同一亚家族具有相似的结构和基序(motif)。AvCDPK基因存在明显的组织表达特异性。AvCDPK49在盐胁迫和淹水胁迫条件下,均显著诱导表达,Av CDPK30和31在2种胁迫下均显著抑制表达。【结论】在对萼猕猴桃中共鉴定出63个CDPK基因,系统发育树显示Av CDPK基因家族与拟南芥CDPK基因家族在进化上高度保守。不同组织中AvCDPK的表达量存在明显差异,其中Av CDPK49受盐害、淹水诱导显著高表达,表明其可能在猕猴桃的耐盐和耐涝响应过程中发挥着重要作用。     

盐胁迫下欧李叶片叶绿素代谢与超微弱发光的关系

【目的】解析盐胁迫下欧李叶片叶绿素代谢与超微弱发光(ultraweak luminescence, UWL)的变化规律及二者之间的关系。【方法】以蒙原金秋欧李[Cerasus humilis (Bge.) Sok.]盆栽苗为试材，采用浓度为400 mmol·L^-1、800 mmol·L^-1的NaCl分别进行轻度和重度盐胁迫处理，测定UWL强度和叶绿素代谢相关指标的变化规律并进行相关性分析。【结果】(1)不同程度盐胁迫下，与对照相比，轻度和重度盐胁迫下欧李叶片7种叶绿素合成前体物质(ALA、PBG、UroⅢ、CopⅢ、ProtoⅨ、Mg-protoⅨ、Pchl)含量均下降，主要合成过程酶(ALAD、MgCH)及叶绿素酶(Chlase)含量均表现为上升，叶绿素(Chla、Chlb、Chla+b)含量均下降；同时叶片UWL强度也持续下降。(2)2种盐胁迫下，重度胁迫导致叶绿素代谢各指标及UWL强度的下降或上升幅度均较轻度胁迫更大。(3)相关分析显示，2种盐胁迫下，叶片UWL强度均与叶绿素合成前体物质含量及叶绿素含量呈显著正相关，与叶绿素酶含量呈显著...     

不同光质对‘秋红宝’葡萄试管苗生长的影响

【目的】探索不同光质对‘秋红宝’葡萄试管苗生长及生理特性的影响。【方法】以‘秋红宝’葡萄试管苗为试材,设置7种不同光质处理,观测试管苗的株高、茎粗、叶片叶绿素含量及抗氧化酶活性等生理生化指标,并结合主成分分析和灰色关联分析筛选出最优光质。【结果】单白光与单红光处理的株高显著高于其他处理;单蓝光处理的植株根数和最长根长均达到各处理最大值,且叶片叶绿素含量均显著高于其他处理;红蓝光质4∶1处理的叶片SOD活性显著高于其他处理;POD与CAT活性在红蓝光质5∶1中最高。综合灰色关联分析得出最适光质排序为:红蓝光质5∶1单蓝光单白光单红光红蓝白光质3∶1∶1红蓝光质4∶1红蓝光质3∶1。【结论】红蓝5∶1光质可作为促进‘秋红宝’葡萄试管苗生长的最理想光质;影响不同光质下试管苗生长的主要指标有总叶绿素、最长根长、株高、叶长、SOD。     

野生毛花猕猴桃种质资源主要数量性状变异分析及评价指标探讨

【目的】更好地对江西省境内野生毛花猕猴桃(Actinidia eriantha Benth.)资源进行评价。【方法】对野生毛花猕猴桃118份资源果实的主要数量性状进行统计分析和分级。果实的主要数量性状包括单果质量、果形指数、干物质含量、维生素C、可溶性固形物(SSC)、可溶性糖及可滴定酸7项指标,根据K-S正态性检验及频率分布对数量性状进行分级。【结果】单果质量变异系数最大,为33.65%;可溶性固形物最小,为11.91%。经K-S正态性检验,大部分性状呈偏正态分布;根据分析结果,提出5级数量性状分级标准,每个等级提出2份不同区域种质作为参照。【结论】该研究可为我国毛花猕猴桃资源描述的规范化、标准化提供参考。     

基于转录组研究补光对设施‘红地球’葡萄萌芽的影响

【目的】探究不同光质补光对设施‘红地球’葡萄冬芽萌发的影响。【方法】以8年生‘红地球’葡萄为试验材料,采用4种不同光质补光(红蓝光2∶1、蓝光、红光、白光)处理‘红地球’冬芽,以不补光为对照,进行生理指标测定和转录组学分析。【结果】红蓝光2∶1处理下芽萌发最快,其展叶率及可溶性糖、总蛋白和H_2O_2含量均高于其他处理。利用FPKM计算基因表达量,以差异表达倍数|log_2fold changes|≥1、P-adjust 0.05为筛选条件,共获得1423个差异表达基因,包括上调基因309个,下调基因1114个,其中红蓝光2∶1、蓝光、红光、白光处理与对照之间的差异基因数目分别为1051、880、836和325个;GO分析发现差异基因涉及代谢过程、细胞过程、结合和催化活性等。KEGG分析显示,差异基因主要富集在植物与真菌互作、植物激素信号转导、内质网蛋白加工、植物MAPK信号通路等途径;其中植物信号转导途径中生长素、细胞分裂素、赤霉素、脱落酸、乙烯、油菜素内酯和茉莉酸信号转导相关基因在红蓝光2∶1处理下表达显著。根据富集结果随机选取9个差异表达基因进行qRT-PCR验证,基因的表达趋势与转录测序结果基本一致。【结论】不同光质补光均加快了葡萄芽的萌发,红蓝光2∶1可作为葡萄芽萌发的理想光质;植物激素信号转导通路中SAUR、A-ARR、GID1、PYR/PYL、PP2C基因的差异表达,是各处理葡萄芽萌发差异的重要原因。     

枣树2-半胱氨酸氧化还原酶基因Zj2-CP在干旱和盐胁迫下的功能分析

【目的】研究枣树2-半胱氨酸氧化还原酶基因(2-Cys peroxiredoxins, Zj2-CP)的功能,为其在枣树抗逆基因工程改良中的利用奠定基础。【方法】以‘辣椒枣’(Ziziphus jujuba‘Lajiaozao’)组培苗为研究对象,通过实时荧光定量PCR技术分析目的基因在盐胁迫及PEG胁迫条件下的表达模式,利用农杆菌介导法将本实验室已构建的植物表达载体PEZR(K)-Zj2-CP-LNY转入拟南芥,激光共聚焦显微镜进行目的基因的亚细胞定位,同时对转基因植株进行高盐和干旱胁迫处理,验证其抗逆功能。【结果】实时荧光定量PCR分析表明‘,辣椒枣’组培苗中,Zj2-CP能够被不同浓度的PEG和盐胁迫诱导表达,暗示该基因可能对枣树抗旱性和耐盐性具有重要的作用。转Zj2-CP基因的拟南芥转化株系的茎和叶表皮细胞的细胞膜和细胞质以及根的细胞膜中均检测到Zj2-CP存在。在盐胁迫处理下,转Zj2-CP基因的拟南芥的幼苗存活率显著低于野生型;在干旱胁迫处理下,转Zj2-CP基因植株主根的长度显著低于野生型。【结论】与野生型拟南芥相比,过表达Zj2-CP基因的拟南芥增加了对干旱和盐胁迫的敏感性,我们推测Zj2-CP参与植物干旱和盐胁迫响应。     

葡萄类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因VvCBL4的克隆与表达分析

【目的】在京秀(Vitis vinifera‘Jingxiu’)葡萄中克隆类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因Vv CBL4及其启动子,分析Vv CBL4的表达特性与逆境胁迫的关系。【方法】用RACE技术克隆Vv CBL4的全长,实时荧光定量PCR检测Vv CBL4在不同逆境下的表达;用同源克隆技术获得Vv CBL4的启动子,在烟草叶片中瞬时表达分析Vv CBL4启动子的活性。【结果】Vv CBL4全长为959 bp,ORF为642 bp,编码213个氨基酸,具有3个EF手钙结合结构域。Vv CBL4在根部表达量最高,其次是果实。Vv CBL4的转录本能对干旱、低温和盐胁迫处理快速做出响应。Vv CBL4启动子富含与逆境响应相关的顺式作用元件。干旱、低温和盐胁迫处理能够增强启动子活性。【结论】获得Vv CBL4及其启动子序列,Vv CBL4的表达能对逆境胁迫做出响应,Vv CBL4启动子的活性受逆境胁迫诱导,说明Vv CBL4在葡萄逆境胁迫反应中具有重要的作用。     

不同储存方式对猕猴桃维生素C含量的影响

以探讨不同储存方式对猕猴桃维生素C（Vc）含量的影响为目的,采用2,6-二氯靛酚滴定法测定不同储存方式下猕猴桃维生素C含量的变化。结果显示,3种储存方式下,猕猴桃Vc含量及保存率随储藏时间的增加均呈下降趋势,低温储存对猕猴桃Vc含量和保存率的影响最小,干制对猕猴桃Vc含量及保存率的影响最大,猕猴桃应尽量选择鲜食。     

洞庭1号无籽西瓜套种棉花高产高效模式的研究与应用

根据西瓜、棉花两者生长发育特点进行套种试验,研究其高产高效栽培模式。试验示范结果表明,以西瓜行株距4.5m×0.65m,棉花行株距1.5m×0.45m的种植密度,西瓜与棉花之间互颉作用最小,西瓜和棉花的产量和产值在3个套种模式中位居第1,在5个处理中经济效益最高。     

Primary culture and identification of mouse PASMCs and effects of hypoxia on proliferation and apoptosis of PASMCs

AIM：To establish a fast, accurate and economical technique for culturing mouse pulmonary arteriolar smooth muscle cells (PASMCs), and to explore the effects of hypoxia on the proliferation and apoptosis of the PASMCs. METHODS：In sterile condition, the pulmonary artery was isolated from the male BALB/c mice by digesting with collagenase I, and the cells were cultured in fetal bovine serum-coated flask. Centrifugal procedure was not used during the cell passage. The cell morphology was observed under an inverted phase-contrast microscope. α-Smooth muscle actin was identified by immunocytochemistry and immunofluorescence. The effects of hypoxia on the proliferation and apoptosis of the PASMCs were detected by CCK-8 assay and TUNEL assay. RESULTS：PASMCs were identified by the methods of immunocytochemistry, immunofluorescence staining and observation of morphology. Unlike the rat PASMCs with typical subcultured peak-vally pattern, the mouse PASMCs showed a lot different without a peak-vally pattern. The cells could be subcultured after 5 d to 7 d and there was 3 to 5 generations depending on the activity of the cells. CCK-8 assay demonstrated that the A values of PASMCs exposed to hypoxia increased after 24 h (P＜0.05) as compared with normoxia. TUNEL result showed that the apoptotic index of the PASMCs in hypoxia decreased after 24 h (P<0.05). CONCLUSION：This technique for obtaining cultured mouse PASMCs is simple, fast, accurate and economical. The digestion time is easy to control. Hypoxia promotes the proliferation and inhibits the apoptosis of PASMCs.     

小檗碱和壳聚糖抗蔬菜病原真菌活性测定及复合膜制备

研究了小檗碱和壳聚糖对几种常见蔬菜病原真菌的抑制活性,以及以小檗碱和壳聚糖为主料制备复合膜的方法,并测定了该膜的药物释放效果。试验表明:低浓度(0.234 mg/mL)小檗碱即可抑制辣椒炭疽病菌(Vermicularia capsici)等5种蔬菜病原真菌的生长。20 mg/mL浓度壳聚糖对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)的抑制率高达65%,而对其余4种果蔬病原真菌也有一定的抑制作用。为了集成这2种天然化合物的优点,制备了小檗碱-壳聚糖复合膜,该膜具有缓释功能,在模拟外部环境(磷酸缓冲液,pH 6.8)条件下,20 d小檗碱累计释放率接近25%,提示其在果蔬贮藏抗菌中的应用价值。     

钾肥在小白菜和萝卜上的施用效果

采用盆栽试验方法研究了施用钾肥对小白菜、萝卜生长发育、产量、品质及钾素含量的影响。结果表明 ,施用钾肥对小白菜和水萝卜的株高、叶片数无显著的影响 ,但可提高水萝卜块根的产量 ,提高幅度为 31.0 4 %～ 97.93%。施用钾肥可提高小白菜和萝卜的蛋白质和VC含量 ,降低硝酸盐含量 ,增加植株的钾素含量     

Storability of onion seeds and effects of packaging and storage conditions on viability and vigour

Fresh onion seeds desiccated to 6.0% seed moisture content (SMC) were stored in various packaging materials under different storage conditions. Seeds packed in aluminum-laminated pouches beside those stored with silica gel at 25 °C maintained satisfactory germinability and vigour after 12 months. Desiccated seeds stored in moisture impervious containers produced more vigourous seedlings. Germination potential of onion seeds increased with reduced SMC besides storage in moisture impervious packets along with desiccants as physiological and biochemical attributes are regulated. Seed viability and vigour decreased with accelerated ageing due to increased lipid peroxidation, decreased activities of several free radical and peroxide scavenging enzymes. Electrical conductance of seed leachates also increased with ageing. Thus, adoption of appropriate storage temperature and moisture control techniques would significantly affect onion seed quality, which was due to minimum accumulation of free peroxide radicals and enhanced activity of free radical scavenging enzymes.     

遮阴及地膜覆盖对黄皮果实表面温湿度变化及果实品质的影响

以金鸡心黄皮为试材,研究了遮阴及地膜覆盖处理对黄皮果实品质与果实表面温湿度变化的影响。结果表明：阴雨天气下,遮阴及遮阴＋地膜覆盖处理的果实表面日平均湿度低;晴天天气下,地膜覆盖处理及对照果实表面的日平均温度高,昼夜温差大,阴雨及晴天天气下温度变化、湿度变化趋势基本一致;地膜覆盖提高了果实品质,遮阴及遮阴＋地膜覆盖降低了果实好果率。     

热处理对果蔬采后品质及病虫害的影响

采后热处理是近年来快速发展的果蔬采后处理技术,广泛应用于改善果蔬贮藏期间的品质、增强抗逆性等 方面。从果蔬贮藏期间的生理生化、采后品质及防治病虫害等方面阐述了热处理的机理,讨论了热处理对果蔬衰老 方面的生理特征如色泽、风味、硬度(软化)、失重、呼吸、乙烯释放、酶活性等变化及与抗逆性有关的诱导蛋白质合成 及基因表达的影响,较全面阐述了热处理防治果蔬贮藏期间病虫害的机理如直接作用于病菌、害虫与提高果蔬的抗 病虫性等。     

大棚葡萄的病虫害防治

大棚葡萄种植过程中,容易产生多种病虫害,如黑痘病、炭疽病等。针对当前山西省大棚葡萄的种植情况,本文分析了大棚葡萄常见的病虫害,重点阐述了病虫害防治技术,如物理防治、化学防治、农业防治、生物防治等,为大棚葡萄病虫害的科学防治提供参考。     

云南泸西苹果病虫害调查与病原及害虫鉴定

云南红河州泸西县为云南重要的苹果新产区,调查鉴定泸西县苹果病虫害的发生情况,对泸西县的苹果病虫害防控,苹果产业发展具有重要意义。本研究系统调查和鉴定了云南红河州泸西县向阳乡习峨村、三塘乡、向阳乡沙马村等3个苹果产区的病虫害。通过室内病原显微观察,对真菌病原进行形态鉴定,应用RT-PCR检测技术与测序鉴定病毒,害虫形态鉴定。最终结果表明:云南泸西苹果病虫害共8种,其中真菌病害3种,有斑点落叶病、枝干轮纹病、褐斑病;病毒病害2种,有苹果茎沟病毒病、苹果花叶病毒病;虫害3种,蚜虫、蓟马和金纹细蛾3种虫害。其中斑点落叶病和褐斑病为主要病害,病毒病害其次,虫害发生率较小。其次通过调查与鉴定,否定了危险性病害苹果炭疽叶枯病在云南泸西的存在。     

果蔬加工研究现状及发展前景

综述了国内外果蔬加工的新趋势,对果蔬的营养价值和保健功能加以分析,阐述了果蔬加工的发展前景.