冈尼桉引种繁殖试验

在我国中亚热带地区的湖南长沙开展了耐寒桉树冈尼桉的引种繁殖试验,初步研究结果表明：冈尼桉播种前应先用0.1%高锰酸钾浸种30 min,再播种于黄心土和沙土为3：1的基质中,萌发率为34.1%;冈尼桉实生苗不适应湖南长沙的夏季高温,引种第二年的夏季陆续死亡;冈尼桉种子经0.25%HgCl2消毒后,接种于MS＋BA0.2mg·L-1＋IBA 1 mg·L-1培养基中萌发率为28.8%,之后在MS＋BA 0.2 mg·L-1＋IBA 0.8 mg·L-1培养基中继代培养,生长良好。     

邓恩桉组织培养体系的建立与优化

对邓恩桉组织培养体系的建立以及继代和生根过程中培养基的正交试验优化筛选等方面进行了研究,结果表明：初接种时,不同无性系邓恩桉芽的诱导以及愈伤组织的诱导情况均有较大差异,MS＋BA 0.2mg·L-1＋IBA 1.0mg·L-1为最适于接种诱导的培养基;继代培养过程中BA为芽增殖系数最主要的影响因子,IBA为苗高生长最主要的影响因子,MS＋BA 0.5mg·L-1＋IBA 1.0-1.5mg·L-1＋蔗糖30g·L-1为理论最佳继代培养基配方;生根培养过程中,探讨了使用不同的生长激素和营养素配比构成的混合物①、混合物②和混合物③对生根的影响,其中混合物①为生根率及发根根数最主要的影响因子,混合物①2mg·L-1＋混合物②125ml·L-1或250ml·L-1＋混合物③1.5mg·L-1为理论最佳生根培养基配方。以相应的理论最佳培养基配方为基础,根据实际生长情况对培养基配方作进一步的优化调整,邓恩桉试管苗继代增殖系数可达4.5以上,生根率可达80%以上。     

I-69杨与小叶杨杂交种胚培养研究

本研究利用组织培养技术对进行培养挽救,以为了提高育种成功率.试验结果表明:外植体的最佳消毒方法为75％酒精消毒30 s后在0.1％升汞处理8min,幼胚的成活率为90％.随着外植体消毒时间增加,幼胚成活率先上升后下降.幼胚最佳萌发培养基为1/2MS+ BA0.1 mg·L-1+ NAA0.01 mg·L-1.最佳继代增殖培养基为MS+ BA0.1 mg· L-1+ NAA0.01 mg·L-1,增殖系数达到6.33.对不定芽增殖最有利条件为:pH值6.0、琼脂浓度6g·L-1和蔗糖浓度30 g·L-1.最佳生根培养基为1/2MS+ IBA0.2 mg·L-1,生根率为93.2％.     

莨山唇柱苣苔组织培养与植株再生

为了能快速繁殖莨山唇柱苣苔,以其嫩叶为试验材料,进行了在不同培养条件下的组织培养研究。研究结果表明：MS＋BA 1.0 mg.L-1＋NAA 0.5 mg.L-1为愈伤组织诱导的最佳培养基;MS＋BA 0.5mg.L-1＋NAA 0.3 mg.L-1为丛生芽分化的最佳培养基;MS＋NAA 0.3 mg.L-1＋石英砂为最佳生根培养基。在80%遮阳网下进行炼苗,移栽25 d后成活率可达80%。     

大花蕙兰高频再生培养体系的建立

以大花蕙兰茎尖为外殖体,以MS为基本培养基,探讨了外源激素对原球茎分化、增殖与不定根形成的影响。试验结果表明：采用MS＋6-BA 0.5 mg·L-1～1.0 mg.L-1＋NAA0.1 mg·L-1～0.3 mg·L-1＋AC（活性炭）2.0 g.L-1的培养基,对原球茎的分化及增殖效果好;采用1/2MS＋6-BA0.1 mg.L-1＋NAA0.5 mg·L-1＋AC2.0 g·L-1的培养基,50 d内生根率可达93.3%。在水苔或水苔：椰糠=1：1的基质中驯苗,成活率可达92%以上。     

四倍体刺槐组织培养快速繁殖试验

以健壮母株当年生萌发枝条带腋芽茎段为外植体,采用正交试验研究了不同浓度的激素对外植体诱导分化的影响,筛选出愈伤组织最适诱导培养基为:MS 6 BA0 25mg·L-1 NAA0.1mg·L-1;增殖培养基为:MS 6 BA0.5mg·L-1 NAA0.05mg·L-1;生根培养基为:1/2MS IBA0.2mg·L-1 NAA0.2mg·L-1。     

刺槐未成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生

以刺槐不同胚龄的未成熟合子胚为外植体,采用混合正交试验设计,研究幼胚胚龄和不同外源激素种类及质量浓度对刺槐胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚分化、萌发的影响.结果表明:开花后8周(55天左右)是胚性愈伤组织和体胚诱导的最佳外植体取材时期;MS+2,4-D 5.0 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1是诱导胚性愈伤组织的最佳培养基,出愈率最高为95.42％±0.02％;MS +NAA0.5 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1+谷氨酰胺250 mg·L-1+水解酪蛋白500 mg·L-1是体细胞胚诱导和分化的最佳培养基,直接体细胞胚发生率最高为92.40％±0.12％,通过愈伤组织诱导体细胞胚发生的频率最高为90.73％ ±0.49％.一旦形成球形胚,将培养物转接到不含任何生长调节剂的MS培养基上,体细胞胚经成熟萌发可进一步形成完整小植株.     

日本落叶松体细胞胚胎发生的研究

日本落叶松日永 10、日永 6 9和日草 34三个优株 ,将其未成熟种子和成熟种子的胚及成熟种子萌发的胚根、胚轴和绿色愈伤组织 5种外植体进行体细胞胚胎发生的试验 ,其中只有未成熟胚诱导出胚性愈伤组织 ,筛选出1)胚性愈伤组织诱导培养基 :S培养基 6_BA 0 5mg·L- 1 KT 0 5mg·L- 1 2 ,4_D 1 0mg·L- 1 ;2 )胚性愈伤组织保持与增殖培养基 :S培养基 6_BA 0 2 5mg·L- 1 KT 0 2 5mg·L- 1 2 ,4_D 0 1mg·L- 1 ;3)成熟体细胞胚诱导培养基 :S培养基 ABA 15mg·L- 1 PEG4 0 0 0 10 0g·L- 1 。以上 3种培养基均需附加蔗糖 30g·L- 1 ,谷氨酰胺 4 5 0mg·L- 1 ,水解酪蛋白 5 0 0mg·L- 1 ,凝胶 (Sigma#) 3g·L- 1 ,pH5 8。 4 )体细胞胚萌发培养基 :S培养基 ,不加任何激素 ,附加蔗糖 2 5g·L- 1 ,凝胶 (Sigma#) 3g·L- 1 ,pH5 8。     

东京樱花组培快繁技术研究

以春季萌发的东京樱花嫩枝为外植体,研究植物激素、GA3等因素对东京樱花的组织培养的影响。实验结果表明:在MS+BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1的培养基上,不定芽诱导率达95.83%;不定芽的最佳增殖培养基为MS+BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+GA30.5mg·L-1;当芽伸长至2cm时,将其切下置于生根培养基1/2MS+NAA0.1mg·L-1+IBA0.5mg·L-1中,生根率达95%以上,移栽成活率达90%。     

京2杨组培条件的优化及再生体系建立

以京2杨为研究对象,确定了影响其组培苗生长的关键因子及组培苗生长的最佳条件,并为其建立了稳定高效的再生体系.试验结果表明:京2杨组织培养的最适基本培养基为MS培养基,继代培养基和不定芽最佳生根培养基均为1/2MS NAA 0.08 mg·L-1 IBA 0.08 mg·L-1;培养基中加入活性碳不利于京2杨生长;光周期对京2杨的生长影响较小,但光照强度和继代培养基pH值对其生长影响显著,最适光照强度为2500 lx,最适pH值为6.5;无菌苗叶片最佳不定芽诱导培养基为MS BA 1.0 mg·L-1 NAA 0.1 mg·L-1,叶柄最佳不定芽诱导培养基为MS BA 1.0 mg·L-1 NAAO.2 mg·L-1.     

齿瓣石斛组织培养技术研究

以齿瓣石斛蒴果为外植体进行胚培养的试验表明,初始萌发培养基为1/2MS;原球茎萌发培养基为3/4MS+10%马铃薯汁+5%香蕉汁+6-BA0.2mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+0.05%AC;继代增殖培养基为MS+10%马铃薯汁+10%香蕉汁+6-BA0.5mg.L-1+NAA0.2mg.L-1+0.1%AC;壮苗生根培养基为1/2MS+10%香蕉汁+5%马铃薯汁+6-BA0.2mg·L-1+NAA1.0mg·L-1+0.1%AC,生根诱导率达100%,成活率达90%以上。     

耐冬山茶花粉储藏条件及其活力的动态变化

以山东青岛耐冬山茶花粉为试验材料,采用离体培养基法研究了花粉的萌发特性,并探讨了不同贮藏温度与贮藏时间对花粉萌发率和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响.结果表明:耐冬山茶花粉萌发的最适宜培养基为:150 g·L-1蔗糖+0.05 g·L-1硼酸+100 mg·L-1GA3+ 900 g·L-1Ca(NO3)2;花粉最佳贮藏温度为-80℃;-80℃贮藏360 d后,花粉萌发率仍达到原来的58.19％,3种保护酶活性较高,花粉抗氧化、衰老能力较强;贮藏过程中,3种保护酶活性出现最高峰值前后花粉萌发率出现大幅度下降;不同贮藏温度下,3种保护酶的作用不同,室温下POD、CAT为敏感性保护酶,4℃下SOD为敏感性保护酶,-20℃、-80℃下CAT为敏感性保护酶;3种保护酶活性对花粉萌发率的影响依次为:SOD＞ POD＞ CAT.     

细叶美女樱花粉培养液筛选的研究

以细叶关女樱的新鲜花粉为试材，利用单因子实验，比较了液体培养基中蔗糖、硼、钙对细叶美女樱花粉萌发的影响，在此基础上进行了L23（5^6）的正交试验，筛选出蔗糖、硼和钙3因子共同作用促进花粉萌发的最佳培养液配方。试验结果表明：促进花粉萌发的最佳培养液配方为蔗糖250g／L＋硼20mg／L＋钙10mg／L，花粉的萌发率为51．3％。     

培养基成分对仁用杏花粉离体萌发的影响

为了研究培养基成分对仁用杏花粉离体萌发的影响,以仁用杏‘优一’为试材,以蔗糖、硼酸、二水合氯化钙、赤霉素为培养基的主要成分,通过单因素和正交试验,筛选出适宜‘优一’花粉萌发的培养基成分及浓度。结果表明,4种成分在一定浓度范围内对‘优一’花粉萌发起促进作用,高质量浓度则抑制,促进‘优一’花粉萌发较适宜的浓度分别为蔗糖15%,硼酸0.003 g·L-1,二水合氯化钙0.000 2 g·L-1,赤霉素0.000 8 g·L-1;赤霉素对‘优一’花粉管伸长作用明显,其花粉管生长量、长度、节间生长显著高于其它3个处理。4种成分L25(56)的正交试验结果表明,琼脂0.1 g·L-1+蔗糖1 g·L-1+硼酸0.003 g·L-1+二水合氯化钙0.000 0 g·L-1+赤霉素0.000 6 g·L-1组合是‘优一’花粉萌发的最佳组合;‘优一’花粉在适宜萌发条件下,2~4 h是‘优一’花粉萌发的高峰期,蔗糖和硼酸是影响花粉萌发的最关键因素。     

栓皮栎体胚的增殖、成熟和萌发

以栓皮栎实生苗叶片为外植体诱导体细胞胚胎发生,调查碳水化合物、渗透剂和植物生长调节剂对体胚增殖、成熟和萌发的影响,建立体胚增殖、成熟和萌发的培养基方案.叶片外植体在附加1.0 mg·L-1NAA和0.5mg·L-1BA的起始培养基上诱导形成前胚性团块.这些胚性团块在增殖培养基上培养6周,在附加1 mg·L-1BA、0.25 mg·L-1NAA和3%蔗糖的MS培养基上增殖效果最好.将单个体胚转接到成熟培养基上进行培养,蔗糖浓度对栓皮栎体胚成熟以及后续的萌发有显著影响.成熟培养基中附加5%的蔗糖,体胚成熟率和萌发率分别达到63.5%和33.8%.虽然在成熟培养基中附加ABA有利于体胚成熟,但对体胚的进一步萌发没有促进作用.为了提高萌发率,成熟体胚在附加植物生长调节剂的萌发培养基上进行培养,以及进行预冷处理.成熟体胚4℃冷处理没有促进胚根和上胚轴的发育萌发.在附加0.5 mg·L-1BA和0.25 mg·L-1 IBA的1/2 MS萌发培养基上,体胚萌发率达到65.9%,再生植株转化率达到9.4%.     

青钱柳茎段腋芽萌发和丛生芽增殖

为建立高效的青钱柳组培快繁体系,以青钱柳茎段腋芽作为外植体,WPM为基本培养基,研究不同植物生长调节剂种类及其浓度组合对腋芽萌发和丛生芽增殖的影响.结果表明:9个处理的激素组合对青钱柳腋芽萌发均有不同程度的促进作用.其中,6-BA 3 mg·L-1+2ip 1 mg·L-1 +NAA 0.1 mg·L-1处理效果最佳,萌芽率最高(83.33%),芽生长状态最好,但各处理诱导的均以单芽为主.将单芽置于添加TDZ的培养基中则诱导的均为丛芽,最佳组合为TDZ 0.1 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,萌芽率、增殖系数均达最高,分别为100%和7.33.培养基中添加2.0 mg·L-1 GA,能有效地促进丛生芽的伸长生长,芽苗生长健壮,为后续生根奠定良好基础.     

柠檬桉的组培快繁技术研究

以柠檬桉优株带芽茎段为外植体进行组培快繁技术体系研究。结果表明：晴天＋流水冲洗1h＋0．1％HgCl2（3＋4）min为柠檬桉的最佳外植体采集处理方案。培养基添加VC20．0mg.L-1或PVP2．0g.L-1是褐变控制的有效措施,不同防褐化剂的效果为：PVP=VC〉AC〉DTT〉CA。改良MS＋6-BA1．0mg·L-1＋KT0．2mg·L-1＋NAA0．05mg.L-1是柠檬桉扩繁增殖的最适培养基;改良MS＋6-BA0．5mg.L-1＋NAA0．1mg.L-1是柠檬桉壮苗增殖的最适培养基。自然光培养,光照强度3000～3500Lux是柠檬桉增殖培养的最适光照条件。     

金叶复叶槭组培技术研究

以腋芽为外植体,筛选金叶复叶槭组织培养的最佳培养基。结果表明:最佳诱导培养基为MS+6-BA 0.4 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1+蔗糖35 g·L-1+琼脂8 g·L-1,诱导率高达86%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.6 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1+蔗糖35 g·L-1+琼脂8 g·L-1,增殖系数7.26;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.10 mg·L-1+IBA 1.0 mg·L-1+蔗糖35 g·L-1+琼脂8 g·L-1,生根率96%。     

酒葡萄“龙紫宝”的组织培养技术研究

以"龙紫宝"葡萄当年生枝条腋芽为外植体,尝试对其进行诱导及增殖试验,得到最佳诱导培养基为GS+KT 0.8 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+蔗糖35 g·L-1+琼脂8 g·L-1,诱导萌芽率最高达到88%;最佳增殖培养基为GS+KT1.2 mg·L-1+NAA0.05 mg·L-1+蔗糖35 g·L-1+琼脂8 g·L-1,增殖倍数最高达到8.7倍。     

优良赤桉无性系茎段组织培养研究

以三明市生长优良的赤桉无性系为材料,进行茎段组织培养试验,结果表明,其茎段组织在诱导培养基Ms＋NAA0．05mg·L^-1中萌动率最高,增殖培养时以3／4MS＋6-BA1．0mg·L-1＋NAA0．2mg·L^-1这个组合月增殖系数最大,生根诱导时以1／3MS＋IBA1．0mg·L-1＋NAA0．2mg·L-1中加入ABTI#O．2mg·L-1的平均生根率最好。