β-葡聚糖酶活力测定条件研究

<正>β-葡聚糖是由葡萄糖单体通过β-1,3和β-1,4糖苷键连接而成的D型葡萄糖聚合物,它主要存在于单子叶禾本科谷实中的糊粉层和胚乳细胞壁中。β-葡聚糖酶属于水解酶类,能有效地降解β-葡聚糖分子中的β-1,3和β-1,4糖苷键,使之降解为小分子。由于在     

DNS法测定饲用β-葡聚糖酶活力

１材料与方法１．１酶制剂　由浙江农科院微生物研究所提供。１．２主要化学试剂β－葡聚糖（山毛榉）：ＢｉｏｃｏｎＢｉｏｃｈｅｍ．ＬＴＤ产品;葡萄糖（ＡＲ）;乙酸钠（ＡＲ）;３,５－二硝基水杨酸（ＡＲ）;酒石酸钾钠（ＡＲ）;氢氧化钠（ＡＲ）：冰乙酸（ＡＲ）;无水乙醇（ＡＲ）。１．３主要仪器７２１分光光度计、恒浴箱、控温磁力搅拌器、ＫＳ－２型多管快速混匀器、ｐＨｓ－２型数字ｐＨ计、秒表。１．４试剂配制１．４．１１．０％β－葡聚糖溶液;称１．０ｇβ－葡聚糖,用１０ｍＬ无水乙醇湿润,加８０ｍＬ蒸馏水,置于磁…     

β-葡聚糖及β-葡聚糖酶在畜禽饲料中的研究与应用

对饲料中β-葡聚糖的化学结构特性及其在饲料中的分布、含量和抗营养作用及其测定方法，β-葡聚糖酶的作用机理及其在饲料中的应用效果和质量衡量等问题进行了简单的论述。     

β-葡聚糖酶的酶学性质研究

本试验采用DNS法对某种微生物产β-葡聚糖酶的酶学性质进行研究。结果表明:酶作用的最适温度和pH值分别为37℃和6.5。该酶是一种耐热酶,在有底物保护条件下,酶的热稳定性可有一定幅度的提高,酶的pH稳定性范围为3.5～6.0。金属离子Cu~(2+)、K~+对酶有激活作用,Ca~(2+)、Ba~(2+)、Fe~(3+)、Zn~(2+)、Mg~(2+)、Fe~(2+)对酶起抑制作用。该酶对纤维素类底物有较强的分解作用,但对滤纸的分解能力相对较弱。     

β-葡聚糖酶的酶学性质研究

采用DNS法对β-葡聚糖酶的酶学性质进行了研究,研究结果表明:该酶的最适反应温度为40~50℃;最适反应pH为7.5,在pH4.5～9有较大的活性区间;有较强的耐碱性,在pH5.5～11处理1h仍有超过90%的活性;Mn2+对β-葡聚糖酶有一定的抑制作用,其他金属离子和螯合剂对酶活没有明显的激活或抑制作用;该酶抵抗胃蛋白酶的能力较强,胰蛋白酶对该酶有一定的促进作用;该酶的米氏常数Km=0.795mg/mL,最大反应速度Vmax=8.547μmol/(mg/min)。     

β-葡聚糖酶和木聚糖酶应用研究

1 麦类饲料中p-葡聚糖和木聚糖的含量及其影响因素 p-葡聚糖、木聚糖均属植物细胞壁中的可溶性非淀粉多糖。p-葡聚糖是以混合的p(1—3)、(1—4)糖苷键连接形成的D型葡萄糖聚合物。在大麦、燕麦的淀粉质胚乳细胞壁中约占75％。含蛋白质丰富的糊粉层,p-葡聚糖的含量也较高。它是大麦的主要抗营养因子。木聚糖在黑麦中有两种类型,木聚糖Ⅰ是由单个阿拉伯糖单位以p(1～3)糖苷键连接的聚合物,木聚糖Ⅱ是由系列的木聚糖残基,在位点2,3相互连接成的许多分支结构。     

饲用木聚糖酶、β-葡聚糖酶活力测定方法的调研

对国内外有代表性的十几家饲用制剂科研单位和生产企业的半纤维素酶酶活测定方法进行了调研。结果为绝大多数单位都使用还原糖法，测定条件的pH值在定，国内大多数单位选用国产底物。β-葡聚糖及木聚糖底物的浓度一般在0.5-1.0%(W/V)。缓冲液选用醋酸钠缓冲液、磷酸氢二钠缓冲液或柠檬酸缓冲液，而且浓度差别较大。由结果可知：国外和国内对半纤维素酶酶活测定方法的条件都未统一，酶活测定方法的统一存在一定的难度。     

抽提条件对酶制剂中β-葡聚糖酶活力的影响

β-葡聚糖酶可以将大麦β-葡聚糖分解成较小聚合物，将β-葡聚糖酶添加到饲料中可以减少大麦β-葡聚糖的抗营养作用，增加单胃动物对养分的吸收率，提高以大麦为主的饲料的利用率。影响酶发挥作用的因素有很多，如温度、pH值、激活剂、抑制剂等。另外，酶制剂生产厂家为提高酶制剂的稳定性常使用载体将酶进行吸附固定，这个过程对稳定性也有影响。在酶制剂检测过程中，如何合理准确地将酶制剂中的酶释放出来是一个关键步骤，因此针对此问题进行了一些研究，现报道如下。     

体外模拟动物胃肠条件下β-葡聚糖酶稳定性的研究

本文研究了胃肠条件下里氏木霉GXC的 β -葡聚糖酶稳定性。模拟胃条件表明 ,酶活的降低主要由低pH值引起 ,温度和胃蛋白酶对酶活性无显著影响 ,,而金属离子混合液 (Cu2 + 、Mn2 + 、Zn2 + 和Fe3 + )具有促进作用 ;模拟小肠条件发现 ,温度和胰蛋白酶对β -葡聚糖酶活性无显著影响 ,酶活的降低主要由中性pH值引起 ,微量元素混合液 (Cu2 + 、Mn2 + 、Zn2 + 和Fe3 + )对酶活性具有一定的抑制作用 ,而Ca2 + 能显著激活β -葡聚糖酶。研究结果表明 ,虽然 β -葡聚糖酶在胃内的活性较低 ,但能在小肠中恢复 ,同时也进一步说明了胃蛋白酶和胰蛋白酶对 β -葡聚糖酶无降解作用     

饲用β-葡聚糖酶的研究及应用进展

<正>β-葡聚糖酶(β-glucanase)是一种水解酶类,包括内β-1,3葡聚糖酶、内β-1,4葡聚糖酶和外β-1,3葡聚糖酶、外β—1,4葡聚糖酶,能够水解如大麦、小麦和黑麦等谷物中的β-葡聚糖,催化裂解β-葡聚糖分子中β-1,3和β-1,4糖苷键,降解生成小分子寡糖和葡萄糖。β-葡聚糖酶广泛应用于饲料、现代白酒、啤酒的酿造、制糖、食品、日化工业等。饲用β-葡聚糖酶应     

β-葡聚糖酶的特性、功能及应用研究

<正>β-葡聚糖是一类非淀粉性多糖(NSP),作为谷物类植物细胞壁成分之一,在大麦、燕麦、小麦等胚乳细胞壁中含量尤为丰富。因畜禽体内缺乏分解β-葡聚糖的酶,β-葡聚糖在消化道中吸水膨胀变得黏连等性质,使其成为限制麦类饲料营养成分有效利用的主要抗营养因子。研究表明,饲料中添     

内环1,4—β—葡聚糖酶的活力测定

在饲料工业中,卜葡聚糖酶不仅用于家禽,而且也用于猪饲料。卜葡聚糖酶可中和谷物饲料,如大麦、小麦、黑麦、燕麦以及次粉。鼓皮、米糠中非淀粉多糖（p一葡聚糖、木聚糖）的不利影响。这些非淀粉多糖能够降低日粮中所有营养物的消化与吸收,尤其是脂肪和蛋白质。p一葡聚糖是自然合成的多聚糖含量最多的糖类,它大量以1,4－p一葡聚糖存在。已经证实,卜葡聚糖酶,尤其是内环形式酶的部分水解,不仅可以降低p一葡聚糖的粘稠度,而且能改善禾本科谷物的营养价值。因此,建立内环1,4－p一葡聚精酶的定量分析方法,对研究卜葡聚糖的抗营养作…     

饲用β-葡聚糖酶的发酵工艺研究

通过对本实验室保藏的12株黑曲霉菌株采用培养、选择性培养基分离,筛选出一株相对酶活较高的菌株作为出发菌株,然后通过紫外线、硫酸二乙酯等复合诱变筛选出一株β-葡聚糖酶高产菌株An08-752。以复合碳源(麸皮+花生壳粉+大麦粉)为碳源;有机氮源为豆粕粉,无机氮源为硫酸铵、硝酸钠;添加无机盐磷酸氢二钾(K+)、硫酸镁(Mg2+);料水比为1:1。固态发酵优化条件为:初始pH值6.8;装料量50 g/500 ml;发酵温度30℃;发酵时间37 h。酶活力达到了1.23×105 U/g。     

β-葡聚糖酶在麦类饲料中的应用研究

玉米一直是主要的能量饲料 ,但玉米的供应日趋紧张。应用丰富的麦类饲料作能量饲料越来越受到重视。β -葡聚糖是限制麦类饲料有效利用的主要因素 ,国内外许多研究表明 ,在麦类日粮中添加 β-葡聚糖酶可消除 β -葡聚糖的抗营养作用 ,提高麦类饲粮的营养价值。1　麦类饲料中β -葡聚糖的含量及其影响因素β-葡聚糖与阿拉伯木聚糖、戊聚糖、纤维素、果胶等均属植物细胞壁中的可溶性非淀粉多糖(ＳＮＳＰ)。小麦、小黑麦中每千克干物质分别含 5和 7ｇ/ｋｇβ -葡聚糖 ,而燕麦、大麦、黑麦中含量较高分别达到 37 5、33、1 2ｇ(Ｃｈｏｃｔ等 ,1 9…     

β-葡聚糖酶处理大麦的喂鸡效果

与其他谷类相比,大麦对鸡的代谢能较低。大麦(15％粗蛋白)的表观代谢能是2750大卡/千克,而玉米和小麦分别为3370大卡/千克和3250大卡/千克。大麦代谢能低的主要原因是含有较多β-葡聚糖。β-葡聚糖是一种复杂的碳水化合物,属可溶性纤维,大麦胚乳细胞壁的75％由它组成。胚乳是谷物含淀粉的部分,谷物的大部分能量储存在这里。β-葡聚糖由β-1,3和β-1,4键与葡萄糖结合而成,它不能被动物的酶所消化。而且家禽的肠道微生物极少,很难提供足够的酶来降解     

黑曲霉β-葡萄糖苷酶稳定性的研究

β-葡萄糖苷酶是纤维素酶的重要组成部分，它可水解结合于末端、非还原性的β-D一糖苷键，释放葡萄糖和相应的配基，其活力高低及稳定性直接影响纤维素酶的作用效果。本文对该酶的稳定性进行研究，为饲料酶制剂的生产和应用提供理论依据。     

耐高温β-葡聚糖酶产生菌株的酶学性质的研究

从云南安宁温泉周围土壤中筛选到一株热稳定性能较好的β-葡聚糖酶产生菌W-9,并对其发酵条件及酶学特性进行初步研究。该菌株发酵72h在pH6.0,70℃条件下酶活性为82.64U/mL。对W-9所产β-葡聚糖酶的酶学性质进行研究,结果显示,β-葡聚糖酶的最适反应pH为6.0,最适反应温度为70℃,70℃条件下保温时,酶活基本稳定。     

复合诱变选育高产β-葡聚糖酶菌株

以黑曲霉SD16为出发菌株,经紫外线和N 注入诱变处理,选育高产β-萄聚糖酶菌株.结果表明:紫外线的最佳照射时间为10min,N 最佳注入剂量为70×2.6×1012 N /cm2;突变高产菌株AN1的β-葡聚糖酶酶活由出发菌株SD16的493.2 U/mL提高到902.5 U/mL.且突变菌株AN1经传5代培养,产酶性能稳定.     

氮离子注入选育β-葡聚糖酶高产菌株的研究

为获得工业化生产的高产β-葡聚糖酶菌株,试验采用低能氮离子（N^＋）注入诱变筛选的方法,对出发黑曲霉（Aspergillus niger）菌株Y2449进行改良,获得高产菌株SD16。突变株黑曲霉SD16产β-葡聚糖酶酶活由出发菌Y2449的73．00U／mL提高到493．24U／mL,产量提高到亲株的7倍,高产菌株SD16经连续5代培养传代,产酶性能稳定。     

产β-葡聚糖酶黑曲霉固态孢子增殖工艺研究

试验旨在提高固态培养黑曲霉孢子增殖。以平板单菌落计数的方法计算单个孢子增殖孢子数目,通过单因素筛选及正交试验对黑曲霉产孢培养基以及培养条件进行优化研究。确定最优产孢培养基配方为:葡萄糖40 g/l、(NH_4)_2SO_4 3.0 g/l、KH_2PO_4 1.5 g/l、Mg SO_4 1.0 g/l、Mn Cl_2 3.0 mg/l、Zn SO_4 15.0 mg/l;最佳培养条件为:培养基体积150 ml/500 ml,接种量10~3个孢子/瓶。在此优化条件下,黑曲霉单孢子产孢量达7.38×10~6个,是未优化条件下的1.8倍。