CpG-ODN 2006对斑马鱼抗创伤弧菌感染的作用

为创建环境友好的免疫预防技术,分析CpG-ODN对斑马鱼抗创伤弧菌感染的作用,采用PBS(对照)和人工合成的CpG-ODN 2006(试验组)序列分别注射斑马鱼,48h后创伤弧菌FJ03-X2进行攻毒,收集斑马鱼的肠道和肾脏组织提取RNA,逆转录成cDNA,通过Real-time RT-PCR检测相关基因的表达。结果表明,24h后CpG-ODN2006组的免疫保护率高达70.0%;相关免疫基因表达检测结果发现CpG-ODN 2006组肠道中lysozyme、Myd88、tlrs和tnf的mRNA水平显著下调,而il1b和il10则显著上调;肾脏中的基因表达差异更为明显:lysozyme显著上调,il1b、myd88、tnf、ifng1-2、il10、il22均显著下调。结果表明CpG-ODN 2006通过调节斑马鱼肾脏及肠道中非特异性免疫相关基因的表达,维持免疫系统的平衡,增强抗创伤弧菌FJ03-X2感染的能力。     

免加铁源饲料添加剂饲粮对育肥猪的饲用效果

【目的】探讨免加铁源饲料添加剂饲粮在育肥猪中的应用效果。【方法】2012-09-28-11-12,选取健康、体质量约为69kg的杜×长×大育肥猪32头,将其分为对照组和试验组,每组16头猪,用加有铁源饲料添加剂的常规饲粮饲喂对照组,用免加铁源饲料添加剂的基础饲粮饲喂试验组,分析2组猪生产性能、饲料利用和血浆生化指标的变化。【结果】与对照组相比,试验组猪平均日增质量和对饲料转化率有提高的趋势;对粗蛋白、无氮浸出物、粗纤维的消化率显著提高(P0.05);血浆铁质量浓度显著减少(P0.05),但血红蛋白质量浓度却极显著提高(P0.01);血浆谷丙转氨酶活性显著(P0.05)提高;血浆总蛋白、甘油三酯和胆固醇含量显著增加(P0.05);其他血浆生化指标差异不显著。【结论】育肥猪基础饲粮无需加铁源饲料添加剂。     

外源肉碱对鲤鱼背肌脂肪酸组成及其CPT I基因表达的影响

【目的】研究外源肉碱对鲤鱼背肌脂肪酸组成及其CPT I基因表达的影响,为阐明肉碱调控脂肪酸代谢的机理提供理论依据。【方法】在基础饲料中分别添加0,50,100,150,200和400mg/kg L-肉碱,进行饲养试验,60d后取鲤鱼(Cyprinus carpio)背肌样品,测定其脂肪酸组成;提取鲤鱼背肌总RNA,采用同源克隆方法扩增CPT I基因的部分序列,Real-time PCR方法测定CPT I基因mRNA表达水平的变化。【结果】外源肉碱对鲤鱼背肌脂肪酸组成有显著影响(P0.05),随饲料中L-肉碱添加量的增加,鲤鱼背肌∑SFA和∑MUFA脂肪酸含量显著升高(P0.05),∑PUFA、EPA、DHA、∑n-3和∑n-6脂肪酸含量显著降低(P0.05);同源克隆扩增获得了鲤鱼CPT I基因的部分cDNA序列(GenBank注册号为JQ361077),长度为857bp,同源性分析表明其与斑马鱼(Danio rerio)的同源性为89%。鲤鱼饲料中L-肉碱添加量为150mg/kg时,CPT I基因mRNA的表达丰度最高,为对照组的4倍。【结论】本试验条件下,外源肉碱添加量为150mg/kg时,显著影响鲤鱼幼鱼背肌脂肪酸组成和提高CPTI基因mRNA表达水平。     

基于ITS高通量测序技术研究果寡糖对奶牛瘤胃真菌菌群的影响

【目的】利用ITS高通量测序分析技术研究果寡糖对奶牛瘤胃真菌菌群的影响。【方法】采用两阶段交叉设计,选择泌乳阶段相近、胎次相同、健康状况良好的泌乳期奶牛4头。随机分为2组,对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加果寡糖,添加量为60 g/(cow·d)。【结果】本试验条件下,在日粮中添加果寡糖并未显著影响奶牛瘤胃真菌的多样性(P0.05),但优势菌属的相对丰度在两组之间存在差异,其中接合菌门(Zygomycota)仅存在于对照组,新丽鞭毛菌门(Neocallimastigomycota)相对丰度试验组比对照组增加了628.28%,但差异不显著(P=0.21)。试验组假丝酵母属(Candida)和平革菌属(Phanerochaete)相对丰度极显著高于对照组(P=0.001、P=0.003),试验组毛壳属(Chaetomidium)相对丰度显著增加(P=0.037),试验组瘤胃壶菌属(Piromyces)相对丰度较对照组增加1 205.71%,但差异不显著(P=0.135)。试验组柄孢壳属(Zopfiella)和德巴利氏酵母属(Debaryomyces)相对丰度比对照组分别降低99.08%和64.14%,但差异不显著(P=0.523、P=0.671)。【结论】日粮中果寡糖的添加对奶牛瘤胃真菌菌群的多样性并未产生明显的影响,但优势菌比例发生变化,瘤胃中瘤胃壶菌属、平革菌属等纤维降解菌的相对丰度提高,增强了瘤胃真菌菌群对纤维的降解能力。     

蛭弧菌Bdh5221对银鲫肠道菌群和非特异性免疫指标的影响

将360尾体重为50 g左右的银鲫Carassius auratus gibelio随机分为3个组,每个组设立3个平行,每个平行40尾鱼.将蛭弧菌Bdh5221菌液以0、104 、107 CFU/g(饲料)的浓度喷洒于基础饲料上投喂银鲫,于第7、14、21、28天时检测银鲫肠道蛭弧菌Bdellovibrio sp.数量的变化.在两个试验组蛭弧菌数量基本达到稳定(即第28天)时,测定蛭弧菌Bdh5221对银鲫肠道菌群和血清中非特异性免疫指标的影响.结果表明:两个试验组的大肠杆菌、气单胞菌数量显著少于对照组(P<0.05),而乳酸杆菌数量极显著大于对照组(P<0.01),双歧杆菌数量有上升的趋势,拟杆菌变化不明显;溶菌酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、酚氧化酶及107CFU/g组的超氧化物歧化酶活性显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01).由此表明,在饲料中添加蛭弧菌具有改善银鲫肠道菌群和提高免疫相关酶活性的作用.     

葡萄糖氧化酶和复合预混合饲料对育成生长期蓝狐血清生化指标的影响研究

探讨葡萄糖氧化酶和复合预混合饲料对育成生长期蓝狐血清生化指标的影响。试验选取40只健康雄性蓝狐,随机分成4组;对照组饲喂基础日粮,在基础日粮(未额外添加维生素和微量元素)中添加1%复合预混合饲料作为试验I组,在基础日粮中添加0.1%葡萄糖氧化酶作为试验II组,在基础日粮中(未额外添加维生素和微量元素)添加1%复合预混合饲料+0.1%葡萄糖氧化酶作为试验III组;每组10只蓝狐,每个重复1只,预饲期7 d,试验期54 d。结果表明,试验III组血清总蛋白和球蛋白含量极显著高于对照组和试验I组(P 0.01),与试验II组差异不显著(P 0.05),不同添加剂对育成生长期蓝狐血清白蛋白含量无显著影响(P0.05);试验II组和III组血清IgA含量极显著高于对照组和试验I组(P 0.01),试验II组和III组血清IgA含量差异不显著,对照组和试验I组血清IgA含量差异不显著(P 0.05);不同添加剂对育成生长期蓝狐血清IgM和IgG含量均无显著影响(P 0.05);试验III组血清总抗氧化能力极显著高于对照组(P 0.01),显著高于试验I和II组(P 0.05);各试验组血清谷胱甘肽过氧化物酶含量极显著高于对照组(P 0.01),各试验组间差异不显著(P 0.05);不同添加剂对育成生长期蓝狐血清超氧化物歧化酶和丙二醛含量无显著影响(P 0.05)。由此可见,基础饲粮(未额外添加维生素和微量元素)中添加0.1%葡萄糖氧化酶+1%复合预混合饲料更有利于育成生长期蓝狐机体对蛋白质的吸收与代谢,能够提高机体的抗氧化性能,增强机体的抵抗力。     

屎肠球菌8296对断奶仔猪生长性能、营养物质表观消化率和血清生化指标的影响

【目的】研究饲粮中添加屎肠球菌8296对断奶仔猪生长性能、营养物质表观消化率和血清生化指标的影响,为断奶仔猪应激能力提升提供依据。【方法】选取60头21日龄外三元(杜长大)断奶仔猪,随机分为3组(每组5个重复,每重复4头):对照组饲喂基础饲粮,2个屎肠球菌组(EF1组和EF2组)分别饲喂添加0.1%和0.3%屎肠球菌8296的基础饲粮,试验周期30 d。测定并比较3组仔猪的生长性能、营养物质表观消化率和血清生化指标。【结果】①与对照组相比,EF1组仔猪的平均日增重(ADG)显著提高(P0.05),料重比(F/G)显著降低(P0.05);EF2组ADG和平均日采食量(ADFI)分别极显著(P0.01)和显著(P0.05)提高,F/G极显著降低(P0.01)。②EF2组仔猪的粗脂肪(EE)和钙(Ca)的表观消化率显著高于对照组(P0.05),磷(P)的表观消化率极显著高于对照组(P0.01)。③与对照组相比,EF1组仔猪血清中谷草转氨酶(AST)活性极显著降低(P0.01),免疫球蛋白M(IgM)含量显著升高(P0.05);EF2组球蛋白(GLO)、磷(P)、免疫球蛋白G(IgG)的含量显著降低(P0.05), AST活性极显著降低(P0.01),甘油三酯(TG)和IgM的含量显著上升(P0.05),免疫球蛋白A(IgA)含量极显著上升(P0.01)。【结论】在饲粮中添加屎肠球菌8296可改善断奶仔猪生长性能、提高仔猪对营养物质的消化吸收能力,增强免疫力;添加剂量为0.3%时效果更显著。     

大蒜素对鲫非特异免疫指标影响的研究

为评价大蒜素对鲫Carassius auratus非特异性免疫功能的影响,在鲫基础饲料中分别添加250、500mg/kg的大蒜素,并对鲫进行42 d的养殖试验,其中试验的第1~28天饲喂含大蒜素的试验饲料,第29~42天饲喂不含大蒜素的基础饲料。结果表明:与投喂基础饲料的对照组相比,添加250 mg/kg剂量的大蒜素能显著提高鲫血清补体C3活力(P0.05),而添加500 mg/kg剂量的大蒜素则能显著抑制鲫血清补体C3、C4活力(P0.05),改投不含大蒜素的基础饲料后,该剂量组C4活性仍显著低于对照组(P0.05);添加250、500 mg/kg剂量的大蒜素能显著提高鲫血清、肝胰脏、肾脏和脾脏中溶菌酶(LZM)活力(P0.05),改投不含大蒜素的基础饲料的14 d内,250、500 mg/kg剂量组血清LZM活性及500 mg/kg剂量组肾脏和脾脏LZM活性仍有显著升高(P0.05);添加250 mg/kg剂量的大蒜素能显著提高肝胰脏和脾脏中一氧化氮(NO)含量(P0.05),添加500 mg/kg大蒜素能显著提高血清和脾脏中NO含量(P0.05),但该剂量显著抑制肝胰脏NO含量(P0.05),250、500 mg/kg剂量组肾脏中NO含量在第42天时均显著高于对照水平(P0.05)。研究表明,鲫基础饲料中大蒜素的适宜添加剂量为250 mg/kg。     

几种饲料添加剂对虹鳟（Oncrhynchus mykiss Walbaum）免疫活性和抗氧化能力的影响

研究在基础饲料中分别添加不同剂量的那西肽(Nosiheptide)、黄霉素(Flavomycin)、大蒜素(Allitri-dum)对虹鳟(Oncrhynchus mykiss Walbaum)组织中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、溶菌酶(LSZ)、碱性磷酸酶(AKP)及酸性磷酸酶(ACP)活力的影响。在室内饲养虹鳟8周,结果显示,15 mg.kg-1大蒜素组与对照组相比极显著提高了肝脏与肾脏中CAT活性(P<0.01),显著提高了肝脏与肾脏中SOD活性(P<0.05),同时也显著提高了鳃中LSZ活性(P<0.05);2 mg.kg-1那西肽组在肝脏和肾脏中SOD活性显著高于对照组(P<0.05);2 mg.kg-1那西肽组与对照组相比分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)提高肾脏和肝脏中AKP活性,4 mg.kg-1那西肽组肾脏和肝脏中AKP活性显著高于对照组(P<0.05);8 mg.kg-1黄霉素组和2 mg.kg-1那西肽组与4 mg.kg-1那西肽组和15 mg.kg-1大蒜素组肝脏中ACP活性分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)高于对照组,2 mg.kg-1那西肽组与8 mg.kg-1黄霉素组和4 mg.kg-1那西肽组肾脏中ACP活性分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)高于对照组;15 mg.kg-1大蒜素组显著降低了肝脏中MDA含量(P<0.05),2 mg.kg-1那西肽组显著降低了肾脏和鳃中MDA含量(P<0.05)。表明在饲料中添加不同饲料添加剂,能提高虹鳟的免疫活性和抗氧化能力,从而提高其对疾病的抵抗能力。     

生物素对吉富罗非鱼幼鱼生长、体成分及血清生化指标的影响

【目的】研究生物素对吉富罗非鱼幼鱼生长、体成分及血清生化指标的影响,以确定其需要量。【方法】选用初始体质量为(64.04±1.26)g/尾的吉富罗非鱼幼鱼270尾,随机分成6组(每组3重复,每重复15尾),分别投喂生物素水平为0.00(对照组),0.03,0.07,0.31,0.61和1.26mg/kg的饲料10周,测定并分析生物素对吉富罗非鱼幼鱼体质量增长率、特定生长率、体成分及血清生化指标的影响。【结果】饲料中添加一定水平的生物素可显著提高鱼体质量增长率、特定生长率、饲料效率和肥满度(P0.05)。0.07 mg/kg生物素添加组鱼粗脂肪以及1.26mg/kg生物素添加组鱼灰分含量最高,均显著高于对照组(P0.05);水分和粗蛋白含量在各组间无显著差异(P0.05)。0.61mg/kg生物素添加组鱼血清总蛋白、白蛋白和球蛋白质量浓度显著高于其余各组(P0.05);0.61和1.26mg/kg生物素添加组鱼血清甘油三酯、总胆固醇浓度显著高于对照组(P0.05)。血清过氧化氢酶与超氧化物歧化酶活性分别以0.07和0.31mg/kg生物素添加组最大,均显著高于对照组(P0.05);0.03~0.31mg/kg生物素添加组血清丙二醛浓度均显著低于对照组(P0.05)。【结论】饲料中添加生物素可提高吉富罗非鱼生长性能,改善饲料利用效率,吉富罗非鱼幼鱼饲料生物素适宜需要量为0.08mg/kg。     

亚麻籽木脂素对初产奶牛体重及乳房外型指数的影响

【目的】研究亚麻籽木脂素对初产奶牛增重及乳房外型指数的影响。【方法】初产荷斯坦奶牛36头随机分为对照组与试验组,对照组饲喂基础日粮,试验组:基础日粮基础+精料(添加亚麻籽木脂素3.75 g/kg),连续饲喂95 d,分析亚麻籽木脂素对初产奶牛增重及乳房外型指数影响的情况。【结果】添加亚麻籽木脂素的试验组奶牛体重与对照组比较差异不显著(P>0.05),平均日增重试验组奶牛极显著高于对照组(P<0.01);试验组奶牛后乳房高度极显著高于对照组(P<0.01),后乳房宽度对照组比较无变化,乳房深度试验组极显著高于对照组(P<0.01),乳头长较对照组无差异,悬韧带较对照组提高了11.11%(P<0.05),乳房直径试验组较对照组提高了49.25%(P<0.01),乳房宽度试验组显著高于对照组(P<0.05)。【结论】亚麻籽木脂素在一定程度上具有促进初产奶牛体重增加以及奶牛乳腺外型增大的作用。     

3种复方保健剂在种鸡中的应用效果

【目的】探讨3种复方保健剂在种鸡中的应用效果。【方法】选取产蛋日龄相同、产蛋率相近的384只海蓝褐种鸡,将其分成4组:对照组、牛膝复方制剂(TARCP)组、女贞子复方制剂(LLACP)组和麻黄复方制剂(CECP)组,每组96只,12个重复,每个重复8只。对照组鸡喂以生产常规饲粮,其他组鸡在常规饲粮中分别添加1%TARCP、1%LLACP、0.5%CECP后饲喂。先进行7d的预试验,对鸡群进行调整,消除组间产蛋率明显差异后,进入为期8周的正式试验,通过对鸡群健康指标、生产性能指标、血清生化指标和组织生化指标的测定,考察3种复方制剂的应用效果。【结果】(1)LLACP组鸡产蛋率显著高于对照组(P0.05);CECP组鸡产蛋量极显著多于对照组(P0.01),TARCP、LLACP组鸡产蛋量显著多于对照组;TARCP、CECP组饲料转化率显著高于对照组;CECP组鸡种蛋受精率极显著高于对照组,LLACP和TARCP组鸡种蛋受精率显著高于对照组。(2)LLACP组鸡血清总蛋白质和总胆固醇含量显著高于对照组(P0.05),TARCP、LLACP和CECP组鸡血清超氧化物歧化酶活性显著或极显著高于对照组,LLACP组鸡血清总抗氧化力显著高于对照组,TARCP、CECP组鸡血清谷丙转氨酶活性显著低于对照组和LLACP组,TARCP、LLACP和CECP组鸡血清丙二醛含量极显著低于对照组。(3)LLACP和CECP组鸡肝丙二醛含量显著低于对照组和TARCP组(P0.05),LLACP组鸡胸肌和鸡蛋超氧化物歧化酶活性极显著高于对照组(P0.01),LLACP和CECP组鸡胸肌和鸡蛋丙二醛含量极显著低于对照组。【结论】3种复方制剂能提高种鸡的产蛋机能和饲料转化率,增强种鸡的抗氧化能力,提高种蛋受精率;3种复方制剂在种鸡中的应用效果为LLACPCECPTARCP。     

拜克罗I型添加剂对保育仔猪生长、免疫性能及肝功能的影响

【目的】探讨拜克罗I型添加剂对保育仔猪生长、免疫性能及肝功能的影响。【方法】选择42头体况良好,胎次、体重相近的21日龄二元杂断奶仔猪,按公母比例为1∶1随机分成两组;对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加拜克罗I型添加剂(4kg/t),预饲期7d,试验期21d。【结果】与对照组相比,试验组仔猪的末重和日增重分别提高了16.40%和21.40%,而料重比降低了8.14%;血清总蛋白(TP)和球蛋白(GLO)显著升高(P<0.05),丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)降低,其中γ-GT极显著降低(P<0.01)。【结论】拜克罗I型添加剂能够促进保育仔猪生长,降低料重比,保护肝脏功能,提升机体免疫力,是一种理想的促生长剂和免疫增强剂。     

益生菌制剂对凡纳滨对虾生长、营养代谢及抗氧化能力的影响

【目的】研究饲料中添加地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌对凡纳滨对虾生长性能、营养代谢及抗氧化能力的影响。【方法】将凡纳滨对虾幼虾随机分成3组,对照组投喂仅用蛋白液包裹的基础饲料,试验组分别投喂含活菌量达10~8 CFU/g的凝结芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的试验饲料,养殖周期为28 d。于试验第7,14,21和28天取样,测定血清总蛋白(TP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、一氧化氮(NO)含量及谷氨酰胺合成酶(GS)、苹果酸脱氢酶(MDH)、脂肪酶(LPS)、已糖激酶(HK)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活性和总抗氧化能力(T-AOC);试验结束后测定凡纳滨对虾的生长性能和肌肉营养成分。【结果】(1)与对照组比较,2个试验组凡纳滨对虾的终末体质量显著提高(P0.05),饲料系数显著降低(P0.05),肌肉中粗蛋白质、肌糖原含量和呈味氨基酸总量显著提高(P0.05);凝结芽孢杆菌组血清中TP、TC及TG含量与对照组差异显著(P0.05),地衣芽孢杆菌组TG含量显著高于对照组(P0.05)。(2)凝结芽孢杆菌组GS活性在试验第14天显著高于其他2个组(P0.05);2个试验组HK活性在第21天显著高于对照组(P0.05);凝结芽孢杆菌组MDH活性在第21天显著高于对照组(P0.05);2个试验组LPS活性在第7天显著高于对照组(P0.05),2个试验组之间无显著差异(P0.05)。(3)凝结芽孢杆菌组T-AOC活性在试验第7天最高(55.21 U/mL),地衣芽孢杆菌组在第14天最高(45.08 U/mL),均显著高于对照组(P0.05);2个试验组CAT活性在第21天最高,SOD活性在第7天最高,均显著高于对照组(P0.05),而2个试验组之间无显著差异(P0.05);凝结芽孢杆菌组GSH-PX活性在第28天最高(957.30 U/mL),地衣芽孢杆菌组在第21天最高(932.25 U/mL),均显著高于对照组(P0.05);凝结芽孢杆菌组NOS活性和NO含量均在第14天最高,显著高于对照组(P0.05);地衣芽孢杆菌组NO含量在第28天最高,显著高于对照组(P0.05)。【结论】地衣芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌均可作为饲料添加剂使用,提高凡纳滨对虾的生长性能,增强其营养物质代谢水平,提高其抗氧化能力。     

甘草提取物对肥育猪生长性能、胴体性状和肉品质的影响

【目的】研究甘草提取物对肥育猪生长性能、胴体性状及肉品质的影响。【方法】选取体重约60 kg杜长大三元杂交猪240头,随机分成4个组,每组3个重复,每个重复20头。对照组饲喂基础饲粮,处理组分别在基础饲粮中添加300、600和900 mg/kg甘草提取物,试验期12周。【结果】添加不同水平甘草提取物对肥育猪末重、平均日增重、平均日采食量、料重比、成活率均无显著影响(P0.05),但900mg/kg组的末重、平均日增重最高;肥育猪的屠宰率、胴体长和瘦肉率在4个组间差异不显著(P0.05);900 mg/kg添加组的眼肌面积得到显著提高(P0.05);添加甘草提取物提高了肌肉中粗蛋白和粗脂肪含量但没有达到显著水平(P0.05),肌肉中氨基酸含量在不同组间差异不显著(P0.05);饲粮中添加甘草提取物可显著的提高肌肉中油酸的含量(P0.05),且添加甘草提取物与油酸含量呈极显著的线性关系(P0.01),600、900 mg/kg添加组育肥猪肌肉中不饱和脂肪酸的含量显著高于对照组(P0.05);600、900 mg/kg添加组饱和脂肪酸的含量显著低于对照组(P0.05)。【结论】在肥育猪饲粮中添加甘草提取物不影响肥育猪的生长性能,提高了肥育猪的眼肌面积,增加肌肉中不饱和脂肪酸含量,改善了肉质。综合试验中育肥猪生长性能、肉质性状等指标,建议生长育肥猪中甘草提取物饲料中适宜添加量为900mg/kg。     

内皮素3对不同毛色绵羊黑色素细胞的影响

【目的】探索内皮素3(EDN3)对来源于不同毛色体外培养的黑色素细胞产生黑色素作用机制及差异的影响。【方法】体外培养不同毛色皮肤来源的黑色素细胞,通过MTT法检测不同细胞在EDN3影响下的增殖率,分别提取两种细胞的总RNA和总蛋白,总RNA经反转录合成c DNA,采用实时荧光定量PCR方法检测EDN3对两种细胞内EDNRB、NRas及TYR在m RNA水平相对表达量的影响,总蛋白通过Western blot方法检测EDN3对两种细胞内EDNRB、NRas及TYR在蛋白水平的表达量是否发生变化,结果均使用SPSS19.0软件进行差异显著性分析。【结果】MTT法测得EDN3对黑白两种来源的黑色素细胞的增殖均产生促进作用,实时荧光定量PCR结果显示添加EDN3的白色来源细胞内EDNRB m RNA的相对表达量是正常细胞组的1.7992倍,NRas是正常细胞组的1.8536倍差异极显著(P0.01),但TYR m RNA的相对表达量未发生明显变化;添加EDN3的黑色来源细胞内EDNRB m RNA的相对表达量是正常细胞组的2.2512倍,NRas是正常细胞组的1.3859倍,TYR是正常细胞组的15.5710倍差异极显著(P0.01);Western blot结果显示添加EDN3的白色来源细胞内EDNRB蛋白表达量是正常细胞组的3.0827倍差异极显著(P0.01),NRas是正常细胞组的1.2936倍差异显著(P0.05),TYR蛋白表达量未发生明显变化;添加EDN3的黑色来源细胞内EDNRB蛋白表达量是正常细胞组的3.9800倍差异极显著(P0.01),NRas是正常细胞组的1.3658倍差异显著(P0.05),TYR是正常细胞组的1.8498倍差异显著(P0.05)。【结论】EDN3促进白色来源的黑色素细胞增殖但对色素合成的限速酶TYR未产生促进作用;EDN3促进黑色来源的黑色素细胞增殖并可能促进黑色素生成。     

迟钝爱德华氏菌外膜蛋白基因工程表达产物的免疫原性

构建迟钝爱德华氏菌外膜蛋白重组表达载体后,表达纯化获得分子质量约53ku的外膜蛋白。将100尾日本鳗鲡均分为2组,分别腹腔注射牛血清白蛋白(BSA,0.5mg/mL)和迟钝爱德华氏菌外膜蛋白(Omp,0.5mg/mL)0.2mL/尾。于免疫后第7、14和28天采集鳗鲡血液、粘液、肝脏和肾脏,测定各时间点的补体活性、溶菌酶活性、全血细胞转化水平和血清抗体效价。结果发现,外膜蛋白组鳗鲡的补体活性于免疫后第7天极显著高于对照组;其抗体效价于第14天和第28天显著或极显著高于对照组。免疫后第28天以迟钝爱德华氏菌、嗜水气单胞菌和创伤弧菌(1.0×107 cfu)腹腔注射感染鳗鲡。结果发现,外膜蛋白组鳗鲡对迟钝爱德华氏菌、嗜水气单胞菌和创伤弧菌的相对免疫保护率分别为71.4%、50.0%和12.5%。表明鳗鲡注射迟钝爱德华氏菌基因工程表达外膜后显著提高了其对迟钝爱德华氏菌感染的抵抗力,对嗜水气单胞菌的感染也有明显的交叉保护效果,但对创伤弧菌的交叉保护效果较弱。     

中草药添加剂对滩羊泌乳性能的影响

【目的】研究不同中草药添加剂对滩羊泌乳性能的影响及作用机理,为滩羊中草药饲料添加剂的配制提供参考。【方法】将24只妊娠滩羊母羊随机分为A、B、C、D4组,其中A组为对照组,B、C、D组为试验组,每组6只,每只为1个重复。对照组饲喂基础日粮,试验组B、C、D分别饲喂基础日粮中添加Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3种中草药添加剂后混合而成的日粮;饲喂期为产前10d至产后15d,其中产前添加剂饲喂量为每只25g/d,产后为50g/d。试验期每天测量母羊产奶量,从试验期第3天开始,每5d采1次血样,测定生长激素(Growth hormone,GH)和催乳素(Prolac-tin,PRL)含量。【结果】3种中草药饲料添加剂,均可不同程度地提高母羊产后1~15d的日产奶量,且具有后续效应,其中B、C、D试验组1~15d的日产奶量分别较对照组提高了6.93%,1.72%和5.21%;1~30d的日产奶量分别较对照组提高了5.76%,2.49%和4.38%,B、D组与对照组差异显著(P0.05)。3种中草药饲料添加剂均可提高血浆GH含量,但不同的中草药添加剂的提高程度略有差异;不同的中草药饲料添加剂对血浆PRL含量会产生不同的影响,在整个试验期,B、C组母羊血浆的PRL含量始终高于对照组,而D组的PRL含量在用药期低于对照组,但停药后又高于对照组。【结论】中草药饲料添加剂通过调节血浆PRL和GH含量改善滩羊的泌乳性能。     

沉默SOCS3对TNF-α诱导3T3-L1前体脂肪细胞凋亡的抑制作用

【目的】运用si RNA沉默小鼠前体脂肪细胞3T3-L1的细胞信号负调控因子3基因(SOCS3),探讨SOCS3在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导3T3-L1细胞凋亡中的作用。【方法】体外培养3T3-L1细胞,用0,20,40,60,80,100,150,200 ng/mL TNF-α处理细胞24 h后,观察细胞凋亡情况。利用脂质体LipofectamineTM2000,用化学合成的SOCS3小干扰RNA(si RNA)转染3T3-L1细胞,用100 ng/mL TNF-α刺激24 h,荧光显微镜下观察细胞凋亡的变化,RT-PCR检测SOCS3、c-myc和survivinmRNA的表达情况。【结果】SOCS3 si RNA抑制了3T3-L1细胞中SOCS3 mRNA的表达(P<0.05)。与空白对照组相比,SOCS3 si RNA组的SOCS3 mRNA表达量极显著减少,c-myc和survivinmRNA的表达水平极显著或显著升高,而脂质体组和阴性对照组无显著差异。【结论】体外试验结果证明,靶向抑制SOCS3基因表达可以有效抑制TNF-α诱导的3T3-L1细胞凋亡。     

黄芪多糖脂质体对肉鸡生长性能及免疫器官指数的影响

【目的】探讨不同添加剂量的黄芪多糖脂质体对肉鸡生长性能及免疫器官指数的影响,为黄芪多糖的临床推广提供参考。【方法】在肉鸡日粮中添加不同剂量的黄芪多糖脂质体,于试验第14、28及42天计算其平均日增重、饲料转化率、特定生长率、胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数。【结果】黄芪多糖脂质体能够显著提高肉鸡平均日增重、饲料转化率、特定生长率、胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数。【结论】提高肉鸡生长性能的最佳黄芪多糖脂质体添加剂量为100 m L/kg,连续添加14 d效果最佳。提高肉鸡免疫器官指数的最佳黄芪多糖脂质体添加剂量为50 m L/kg,连续添加28~42 d效果最佳。