绣球菌多糖的提取与抗氧化活性研究

采用微碱法提取绣球菌多糖,通过单因素分析和L9(34)正交试验探究提取温度、提取时间、pH值、料液比4个因素对多糖提取率的影响;同时利用体外邻苯三酚自氧化法和smirnoff法对多糖进行抗氧化活性的测定。微碱法提取绣球菌多糖的最佳提取工艺条件为提取温度60℃、提取时间2h、提取液pH值9、料液比为1∶30。此条件下的多糖提取率为1.7%。多糖在0.06mg·mL-1时对羟自由基清除率达到最大,为10.5%;在0.08mg·mL-1时对超氧阴离子自由基清除率达到最大,为21.5%。绣球菌有望成为天然的抗氧化药用真菌。     

绣球菌双向液体发酵条件优化及其菌丝体多糖抗氧化活性分析

【目的】优化马尾松松针-绣球菌双向液体发酵条件,并探究绣球菌菌丝体多糖的抗氧化活性,为绣球菌菌丝体的高效生产提供参考。【方法】采用双向液体发酵法,即在绣球菌发酵培养基中添加适量马尾松松针粉末,通过单因素试验和正交试验探究马尾松松针添加量（0.50,0.75,1.00,1.25,1.50 g/L）、发酵时间（12,16,20,24,28,32 d）、绣球菌接种量（25,50,75,100,125,150 mL/L）、pH（4,5,6,7,8）对绣球菌菌丝体生物量的影响,优化双向液体发酵条件。以未添加马尾松松针粉的处理为对照组,提取菌丝体多糖,采用红外光谱对菌丝体的多糖结构进行分析。测定菌丝体多糖对ABTS自由基和羟基自由基的清除率,分析其抗氧化活性。【结果】单因素试验结果显示,当马尾松松针粉末添加量为1.25 g/L、发酵时间为24 d、接种量为100 mL/L、pH为5时,绣球菌菌丝体生物量均较高。正交试验结果显示,马尾松松针 绣球菌双向液体发酵的最优条件为：马尾松松针粉末添加量1.25 g/L、发酵时间24 d、pH为4、接种量125 mL/L,在此条件下绣球菌菌丝体生物量可达到(11.16±0.22) g/L。与对照组相比,双向液体发酵绣球菌菌丝体生物量提高了约162.10%。红外光谱分析结果表明,马尾松松针-绣球菌双向液体法发酵得到的菌丝体多糖的红外主要吸收峰与对照组一致。抗氧化试验结果显示,绣球菌菌丝体多糖对ABTS自由基、羟基自由基均具有较好的清除能力。【结论】得到了马尾松松针-绣球菌双向液体发酵产绣球菌菌丝体的最佳条件,此条件下得到的菌丝体多糖具有良好的抗氧化活性。     

绣球菌水溶多糖的提取及其抑菌效果

[目的]从绣球菌中提取水溶多糖,研究其抑菌的效果,为绣球菌的开发利用提供试验依据。[方法]采用水煮醇沉法获得绣球菌水溶粗多糖,并采用三氯乙酸法对其进行脱蛋白后,通过滤纸片法和平板打洞法研究水溶粗多糖与脱蛋白后多糖的抑菌效果。[结果]水溶粗多糖含量与得率分别为28.5%、3.0%;脱蛋白后糖含量与得率分别为48.9%、2.2%。绣球菌水溶多糖与去蛋白多糖对大肠杆菌抑菌效果明显,滤纸片法去蛋白多糖最小抑菌浓度低于1.6 mg/ml;平板打洞法去蛋白多糖最小抑菌浓度低于25 mg/ml,对酿酒酵母、根霉菌、黑曲霉具有抑菌效果;去蛋白水溶多糖抑菌效果较水溶粗多糖好。[结论]绣球菌水溶多糖对不同菌具有不同的抑菌效果。     

绣球菌及其栽培

<正>绣球菌,又名绣球菇、花椰菜菇等,属于真菌门,层菌纲,非褶孔菌目,绣球菌科,绣球菌属,绣球菌种。绣球菌的野生数量极少,是一种食药兼用型真菌,偶见于东北及云贵川等地海拔2 400米以上高山的云杉、冷杉林中,此即所谓生于高端。一般野生木腐菌类多生长在背阴处或阳光稀少的环境,而绣球菇则需每天10小时以上的光照,是迄今为止唯一的阳光蘑菇;绣球菇所独有的一种特别的清香之气,既似     

卡介菌多糖核酸体外抗病毒活性试验

为探讨卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)的抗病毒效果,对离体培养的鸡胚成纤维(CEF)细胞进行水疱口炎病毒(VSV)感染,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测BCG-PSN对CEF细胞活性的影响;用细胞病变法(CPE)检测BCG-PSN对VSV的抑制作用,并在安全浓度范围内筛选BCG-PSN抑制VSV的最佳作用时间和作用剂量。试验结果表明:BCG-PSN能显著抑制VSV在CEF细胞上的生长,但抑制作用并非随着其剂量的增加和作用时间的延长而增强,质量浓度为144.0μg/mL的BCG-PSN在CEF细胞上作用24 h后,产生的抗病毒活性最强;当BCG-PSN质量浓度大于800μg/mL时则对CEF细胞具有明显的毒性作用。BCG-PSN可诱导CEF细胞产生IFN-α和IFN-β,研究结果显示:BCG-PSN的抗病毒作用与其诱导的干扰素有关。     

杜仲叶多糖的制备及其体外活性

【目的】分离制备杜仲叶多糖,研究其体外抗氧化和抗肿瘤活性,为杜仲叶多元化开发利用提供依据。【方法】以杜仲叶为原料,采用水提醇沉法制备杜仲叶粗多糖,以DEAE-52纤维柱色谱法进行分离纯化。测定多糖对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基、ABTS自由基的清除作用;采用MTT法、LDH法和流式细胞术,检测多糖对乳腺癌MCF-7细胞生长抑制和细胞周期的影响。【结果】水提醇沉法制备的杜仲叶粗多糖经DEAE-52柱分离纯化后得到EFPs-1、EFPs-2共2个组分,其多糖质量分数分别为75.8%和84.3%。EFPs 2个组分对各自由基体系的清除能力均呈现良好的剂量依赖关系,其中EFPs-2的作用比EFPs-1强。EFPs-1对DPPH自由基、超氧阴离子、羟基自由基和ABTS自由基的半数有效浓度（EC₅₀）分别为3.393,5.259,3.692和2.463 mg/mL,EFPs-2的EC₅₀值依次为2.379,2.893,2.516和2.066 mg/mL。EFPs 2个组分对MCF-7细胞均有一定的体外生长抑制作用,其半数抑制浓度（IC₅₀）分别是226.23 μg/mL（EFPs-1）和173.04 μg/mL（EFPs-2）,其中EFPs-2可使MCF-7细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期。【结论】杜仲叶多糖具有良好的体外抗氧化和抑瘤活性。     

红毛七多糖体外抗氧化活性研究

测定了红毛七多糖对DPPH、O-2·、·OH、亚硝酸盐的清除作用.结果表明,红毛七多糖对DPPH、O-2 ·、·OH、亚硝酸盐具有较强的清除能力.当多糖浓度为4.0 mg/mL时,对DPPH清除率接近80%,对O-2 ·的清除率达78.1%,对·OH的清除率达96.6%,对NO2-的清除率达85.1%.     

响应面法优化绣球菌多糖脱色工艺研究

利用弱酸性离子树脂HZ-830对绣球菌多糖进行脱色,通过Box-Benhnken中心组合试验和响应面分析法,在前期单因素试验基础上,以脱色温度、脱色pH和脱色时间为自变量,脱色率为响应值,将 HZ-830树脂对绣球菌多糖的脱色工艺进行优化。优化后确定的最佳脱色工艺条件为：脱色温度（A ）＝41℃, pH （B）＝8,脱色时间（C）＝3.5 h ,平均脱色率为87.73％。     

绣球菌多糖粗提物对小鼠抗疲劳作用的研究

为研究绣球菌多糖对小鼠抗疲劳能力的作用,将小鼠分成4个试验组,分别为对照组(生理盐水)、绣球菌多糖低剂量组(100 mg/kg)、中剂量组(200 mg/kg)和高剂量组(400 mg/kg),连续灌胃32 d。绣球菌多糖低、中、高剂量组分别与对照组比较,分析小鼠抗疲劳相关数据。结果表明：绣球菌多糖中、高剂量组小鼠爬杆力竭时间比对照组均显著增加(P<0.05);绣球菌多糖低、中、高剂量组小鼠跑台力竭时间比对照组均极显著增加(P<0.01);绣球菌多糖低、中、高剂量组小鼠负重游泳力竭时间比对照组均显著增加(P<0.05);力竭运动后绣球菌多糖剂量组与对照组相比糖原含量增加(P<0.01),乳酸含量降低(P<0.01),表明绣球菌多糖对机体运动具有一定的抗疲劳作用。     

党参粗多糖的组成及其免疫活性研究

【目的】研究党参粗多糖的组成及其对小鼠主要免疫细胞活性的影响,为党参的开发利用提供依据。【方法】以东党参为试材,提取分离其粗多糖,利用气相色谱法对其单糖组成进行分析。制备小鼠（ICR雄性）脾脏B淋巴细胞悬液和纯化的巨噬细胞,分别应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）和中性红吞噬试验测定党参粗多糖对小鼠脾脏B淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬功能的影响。【结果】党参粗多糖收率为9.7%,单糖组成为葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）、木糖（Xyl）、鼠李糖（Rha）、阿拉伯糖（Ara）、半乳糖醛酸（GalA）,其物质的量比为102.7∶7.9∶2.2∶1.8∶1.1∶1.0。党参粗多糖能够刺激小鼠脾脏B淋巴细胞增殖,并呈现一定的量效关系,当粗多糖质量浓度为400 μg/mL 时,可以显著促进小鼠B淋巴细胞的增殖(P<0.05);党参粗多糖可极显著增强小鼠巨噬细胞吞噬中性红的能力。【结论】本研究提取党参粗多糖的方法简单,提取的粗多糖可促进小鼠B淋巴细胞的增殖,提高巨噬细胞的吞噬功能,从而增强免疫细胞活性,有望成为新一代免疫调节剂。     

超声降解香菇多糖及其体外抗氧化活性的研究

[目的]研究超声降解香菇多糖及其体外抗氧化活性。[方法]用脉冲超声降解香菇多糖,通过单因素实验考察超声功率、多糖浓度及体系温度对降解过程中溶液特性粘度变化的影响,并研究降解前后香菇多糖的体外抗氧化活性的变化。[结果]超声功率的增大及体系温度的增加均有利于香菇多糖超声降解作用增强。香菇多糖浓度对降解作用影响由大到小的顺序为1.00g/dL>0.75g/dL>0.50g/dL>2.00g/dL,在香菇多糖浓度为1.0g/dL时降解速度较快。在抗氧化活性方面,降解后的香菇多糖(UD-LNT)较未降解的香菇多糖(LNT)在清除超氧负离子和羟基自由基上有一定的提高。[结论]该研究为进一步开发和利用降解香菇多糖提供理论依据。     

蘘荷多糖的提取工艺及其体外抑菌活性研究

在单因素实验的基础上,进行3因素3水平的Box-Behnken中心组合实验设计,利用响应面分析优化蘘荷多糖的最佳提取工艺;对此工艺下的提取液进行浓缩,通过牛津杯法和二倍稀释法探讨其抑菌活性。结果表明:在优化工艺条件处理温度91.67℃、液料比25.0m L/g、处理时间1.5h时,蘘荷多糖得率为10.15%,与预测值9.94%的相对误差仅2.07%;蘘荷多糖对大肠杆菌、黑曲霉和酿酒酵母没有体外抑制作用,但对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌有体外抑制作用,其MIC分别为0.4930mg/m L、1.9722mg/m L,MBC分别为1.9722mg/m L、7.8886mg/m L。蘘荷多糖可作为一种新型抗菌药物开发,其提取工艺可用响应面法进行回归分析和参数优化。     

蒲公英多糖提取工艺及其体外抗氧化活性的研究

本文采用超声波辅助提取蒲公英多糖,利用苯酚-硫酸法测定其含量,并进行体外抗氧化活性测定。结果表明最佳提取条件:提取时间30分钟,物液比1∶40克/毫升,提取温度60℃,在此条件下蒲公英叶部、根部、全株多糖得率分别为19.52%、22.82%、23.82%;蒲公英多糖对DPPH、羟自由基的最大清除率分别为89.89%、46.69%。     

绣球菌水提物的免疫促进作用

本文系统研究了绣球菌水提物对小鼠非特异性免疫功能及细胞免疫功能的影响。研究发现,绣球菌水提物300和600 mg·kg^-1剂量灌胃给药15 d,对环磷酰胺诱导小鼠免疫下降具有一定的保护作用,可增强巨噬细胞的吞噬功能;体外试验结果表明,绣球菌水提物0.4和0.8 mg·mL^-1单独或联合ConA(5 μg·mL^-1)用药均具有明显的促淋巴细胞增殖作用。上述结果表明,绣球菌水提物具有促进免疫功能的药效学作用。     

五味子药渣多糖的提取及其免疫活性

提取并纯化得到五味子药渣多糖,对其体外免疫活性进行初步评价。经水提醇沉、乙醇分级、活性碳脱色、Sevage法和链蛋白酶联合脱蛋白,从五味子药渣中获得c SDP、f SDP和SDP 3种多糖。通过体外淋巴细胞转化试验验证3种多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,结果表明:3种五味子药渣多糖在一定质量浓度下对未经活化的小鼠淋巴细胞有增殖作用,对Con A诱导的小鼠T淋巴细胞增殖有显著促进作用;多糖的纯化程度越高对小鼠脾淋巴细胞的增殖促进作用越强;五味子药渣粗多糖中的蛋白对小鼠脾淋巴细胞的增殖没有影响。     

灵芝多糖的提取纯化及其免疫活性

【目的】从灵芝孢子粉中提取纯化多糖,研究灵芝多糖对小鼠细胞免疫功能的影响,为灵芝开发利用提供试验依据。【方法】利用水煮醇沉法从灵芝孢子粉中提取粗多糖,经反复冻融、Sevag法脱蛋白和Sepharose CL-6B柱层析,纯化得灵芝多糖(GLP)。通过HPLC鉴定GLP的纯度,G.C.分析其单糖组成。采用MTT法、中性红试验、Griess法、比色法和ELISA法,分别检测GLP对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬功能、NO产量和iNOS活性以及TNF-α产量的影响。【结果】GLP为白色粉末,分子质量为51ku,HPLC分析GLP为单一狭窄对称峰,其单糖组成为葡萄糖(Glc)和半乳糖(Gal),二者物质的量之比为16.8∶1。GLP能够刺激小鼠T淋巴细胞增殖,并呈现剂量依赖关系;当GLP质量浓度达到100μg/mL时,能显著增强腹腔巨噬细胞的吞噬能力,提高其分泌iNOS的活力和NO的生产量;同时,当GLP质量浓度≥200μg/mL时,能显著促进腹腔巨噬细胞分泌TNF-α的能力,具有剂量依赖性。【结论】GLP能够增强小鼠免疫细胞活性,有望成为重要的生物免疫调节剂。     

植物多糖免疫活性研究进展

植物多糖是一类具有多种生物学活性的天然产物,调节免疫功能是其主要生物学活性之一。分别从细胞、分子及器官水平就近几年对植物多糖的免疫调节作用研究进行归纳综述,可为植物多糖免疫调节活性研究提供参考。     

绣球菌驯化栽培研究

观察了绣球菌菌丝、子实体的形态特征;分析了子实体的营养组成;筛选出以PDPA为较理想的母种培养基,以松木屑、糯米粉为主成份的适合绣球菌菌丝生长、子实体发育的原种培养基;其菌丝生长适宜温度为20~25℃;子实体发育适宜温度为16~18℃,适宜相对湿度90%~95%;培养基适宜pH值为5~6。     

响应面法优化绣球菌副产物多糖提取工艺的研究

为开发利用绣球菌副产物,提高绣球附加值,考察提取温度、提取时间、料水比3个因素对绣球菌副产物多糖得率的影响,在此基础上建立响应面分析模型,经线性回归拟合,回归模型:多糖得率(%)=7.19+0.26A-0.35B-0.84C-0.088AB-0.57AC+0.54BC-0.35A~2-3.38B~2-0.42C~2,P0.000 1,达极显著水平;失拟项P=0.510 1,不显著,说明该模型成立。利用Design-Expert8.0软件对模型进行优化,以多糖得率最高为优化目标,得出绣球菌副产物多糖提取的最优工艺条件为:提取时间3.83 h,提取温度为78.75℃,料液比为1∶30,多糖得率达到7.89%。根据实际情况将工艺参数修正为:提取时间3.83 h,提取温度为79.00℃,料液比为1∶30。采用上述最优工艺条件进行绣球菌副产物多糖提取,测得实际多糖得率为8.01%。     

香菇多糖提取工艺优化及其体外抗氧化活性

采用微波预处理(功率为250 W,时间为30 s)超声波辅助提取法提取香菇多糖,以正交试验优化工艺条件,且通过测定香菇多糖的总抗氧化能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和羟自由基清除能力,研究其体外抗氧化活性。结果表明,最佳工艺参数为料液比1 g∶20 m L、超声功率80 W、超声温度60℃、超声时间20 min,在此优化条件下,香菇多糖提取率最高,为7. 16%。香菇多糖具有良好的抗氧化活性,其总抗氧化能力随着质量浓度的升高而明显增强,在其质量浓度为25 mg/m L时,其DPPH自由基、羟自由基清除率分别达到76. 22%、92. 41%。