Study on the Induction of Pollen Embryo in Anther Culture in vitro of Weigela florida cv. ＇Red Prince＇

通过对红王子锦带花粉胚发育的细胞学观测与统计分析，对适宜红王子锦带花粉启动分裂的因子、适宜的花粉发育时期、适宜的接种时期以及适宜的培养基组合等条件进行了筛选。结果表明：适宜花粉启动分裂的因子为6-BA与MS基本培养基，6-BA的浓度越高，MS的浓度越低，出胚率越高；适宜花粉启动分裂的发育时期为四分体时期，出胚率为6．73％；适宜诱导的接种时期为6月；适宜的培养基组合为：1／3MS＋6-BA2．0mg·L-1＋NAAl．0mg·L-1＋1％SUC。     

红王子锦带茎段离体培养基的筛选

以红王子锦带带腋芽的茎段为外植体进行离体培养基的筛选。结果表明 :红王子锦带的离体培养以MS、WPM为基本培养基 ,附加适当比例的细胞分裂素(0.1～1mg·L-16 -BA)和生长素(0.01～0.1mg·L-1NAA)为宜。本试验采用方差分析及多重比较方法对试验数据进行处理 ,筛选出红王子锦带各培养阶段最佳培养基分别为:(1)外植体诱导培养基(A2) :MS +6 -0.1mg·L -1BA +0.01mg·L -1NAA ;(2)分化及继代培养基(B3) :MS +0.5mg·L -16 -BA +0.05mg·L -1NAA ;(3)生根培养基(C2) :WPM +0.4mg·L -1NAA。     

以多胚品种“红江橙”为母本的杂交及幼胚离体培养研究

为获得以多胚优良品种为母本的杂种后代及以四倍体为亲本进行三倍体培育,本文以"红江橙"为母本,分别与沙田柚和柠檬(4x)进行了杂交,并对未成熟幼胚进行了离体培养。结果表明:两个杂交组合的适宜培养时期不同,红江橙×沙田柚幼胚适宜离体培养时期为授粉后80 d,红江橙×柠檬(4x)幼胚适宜离体培养时期为授粉后85 d。而两组合的幼胚适宜培养基为MS+GA31.0 mg.L-1+6-BA 0.4 mg.L-1+7%蔗糖。通过幼胚离体培养两杂交组合共获得植株277株。     

芦笋全雄品种WF-8茎尖组培快繁技术研究

为了快速建立芦笋全雄品种制种田,对全雄新品种 WF-8的父母本组培快繁和过渡移栽技术进行了系统研究.结果表明:适合全雄品种WF-8母本启动成苗的培养基配比为6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,适合父本启动成苗的培养基配比为6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.05 mg·L-1;适宜父本增殖的培养基为 MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,适宜母本增殖的培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+KT0.1mg·L-1;蔗糖浓度由30g·L-1增加到35g·L-1,琼脂浓度由4g·L-1增加到4.5g·L-1,可以防止芦笋试管苗玻璃化;移栽成活率高达95.3%.     

新铁炮百合品种沈香一号的幼胚培养研究

以新铁炮百合沈香一号(Lilium formolongi cv.Shenxiang No.1)的幼胚为试材,筛选适宜百合幼胚萌发的诱导培养基,结果表明,适宜的诱导培养基为1/2MS,萌发时间在接种后的22～43d之间。6-BA和NAA的浓度比与新铁炮百合幼胚的发芽率之间呈现出显著的相关性,在一定范围内,6-BA和NAA的浓度比越大,胚的萌发率越低。试验筛选出适宜新铁炮百合胚分化不定芽的诱导培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,继代增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L及MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.4mg/L。新铁炮百合试管苗易出现玻璃化现象,玻璃化程度与培养基的水势、环境湿度和外源激素的浓度有关。     

三个南方紫花苜蓿品种的耐盐性及其再生体系的建立

采用不同浓度的NaCl单盐系列溶液,以MS培养基为基本成分,附加不同浓度和组合的2,4-D、6-BA、KT、NAA和蔗糖,对我国南方广泛种植的‘Victoria’‘CW787’和‘Millennium’3个紫花苜蓿品种的耐盐性和再生体系进行研究.结果表明:3个紫花苜蓿品种随着NaCl溶液浓度的升高,发芽率均逐渐降低;下胚轴作为外植体的诱导效果较好;愈伤诱导以2.0 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-16-BA的配比最佳;0.5 mg.L-1KT+0.05 mg.L-1NAA的激素组合对体细胞胚的发育和幼苗的形成效果最好;适宜的生根培养基为1/2 MS+0.5 mg.L-1NAA+20g.L-1蔗糖+7.5 g.L-1琼脂;‘Millennium’的耐盐性和植株愈伤再生能力较好.     

三尖杉无菌增殖培养技术的研究

对同一时期三尖杉(Cephalotaxus fortunei)取材以及不同时期取材的灭菌效果进行对比试验,结果表明带芽茎段取材时期以3月中旬为最佳,此时萌发的新梢污染率较低、存活率较高,以75%酒精浸泡1 min,0.1%HgCl2灭菌12 min处理,存活率最高为63.3%,达到较好的灭菌效果。不同培养基与激素组合对三尖杉茎段腋芽诱导及增殖培养效果的试验,结果表明:6-BA质量浓度对带芽茎段启动速度、芽体诱导率影响极显著,改良MS+6-BA3.0 mg.L-1+IBA0.5 mg.L-1为三尖杉带芽茎段启动培养芽体分化的最佳培养基组合,芽体诱导率为82.8%;改良MS+6-BA2.0 mg.L-1+IBA0.2 mg.L-1为增殖培养最佳培养基组合,增殖系数为3.9。     

大苞鞘石斛胚组织培养及植株再生研究

为筛选出大苞鞘石斛各生长阶段最适培养基配方,并建立大苞鞘石斛快繁体系,以大苞鞘石斛种胚为材料,以1/2MS为基本培养基,通过正交试验研究不同种类激素和添加物的浓度配比对种胚萌发和植株再生的影响。结果表明,大苞鞘石斛种胚萌发和原球茎膨大的最适培养基为1/2 MS+IBA 1.0 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 2.0 mg·L-1+香蕉泥50 g·L-1,萌发率达91.29%;叶芽分化的最适培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+香蕉泥50 g·L-1;干物质积累的最适培养基为1/2 MS+IBA 2.0 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+香蕉泥200 g·L-1;丛生芽增殖的最佳培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+香蕉泥100 g·L-1,平均增殖系数达6.33;丛生芽生根培养的最佳培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L-1+6-BA 3.0 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1+香蕉泥50 g·L-1+土豆泥50 g·L-1。     

文冠果成熟胚离体培养及细胞学研究

以文冠果成熟胚为外植体,进行了初代培养、继代培养和生根培养研究,结果表明:初代培养诱导文冠果成熟胚形成不定芽的适宜培养基是MS+2.0mg.L-16-BA+0.1mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,分化率可达94.7%;继代高生长的适宜培养基是MS+0.5mg.L-16-BA+0.5mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,培养50d后,苗高大于0.5cm芽数量平均达11.67株;生根培养的适宜培养基是WPM+1.0mg.L-1IBA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,生根率为70.30%,平均根数为3.57条。并通过石蜡切片技术,观察愈伤组织诱导、愈伤组织分化不定芽以及不定芽发育过程。     

翠菊品种库蕾娜叶片和叶柄及茎段的再生研究

为加速翠菊新品种的培育和扩繁,研究利用种子消毒接种获得的无菌苗作为外植体,以MS、1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA依次进行愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽生根。结果表明:茎段为再生体系的最佳外植体,愈伤诱导培养基为MS+2.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 NAA,不定芽最佳生根培养基为1/2MS。叶片、叶柄最佳愈伤诱导培养基MS+4.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,愈伤分化培养基只分化不定根。     

南抗杨叶片快速繁殖体系的建立

以南抗杨叶片为材料,对其快繁体系进行研究。选用9种分化培养基、4种增殖培养基和6种生根培养基,研究不同激素组合对快速繁殖体系建立的影响。结果表明,适宜的诱导分化培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+KT 0.1 mg·L-1;丛生芽增殖培养基为MS+6-BA 1.2 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1+KT 0.1 mg·L-1;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg·L-1+NAA 0.01 mg·L-1。     

生长调节物质对菊花'小金黄'叶片再生不定芽的影响

MS培养基中添加1.0 mg·L-1 6-BA的菊花品种'小金黄'叶片再生频率为27.1,显著高于添加TDZ或KT.在6-BA 1.0 mg·L-1与不同浓度生长素的配比中, MS + 6-BA 1.0 mg·L-1 + NAA 0.6 mg·L-1的再生频率达96.9, 高于2,4-D和IBA.'小金黄'最适宜的生根培养基为MS + NAA 0.4 mg·L-1.     

‘李广杏’幼胚的离体培养

以‘李广杏’幼胚(盛花后30~40d)为试验材料,MS为基本培养基,研究了激素及其不同浓度组合对幼胚萌发和胚培苗继代增殖的影响.结果表明:幼胚萌发的适宜培养基配方为MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA0.2mg/L,在培养20d时萌发率达到100%,子叶生长健壮,叶片浓绿伸展;胚培苗继代增殖的适宜培养基配方为MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 0.05mg/L,增殖系数达3.42.     

长俊木瓜体细胞胚胎诱导的初步研究

以长俊木瓜为材料,研究了其体细胞胚胎诱导过程中各个环节的影响因素.结果表明:愈伤组织诱导的适宜外植体是叶片,培养基为MS 6-BA1.0 mg-1 2,4-D0.2 mg·L-1,黑暗培养;非胚性愈伤组织向胚性愈伤组织转化的适宜培养基是MS 6-BA1.0 mg·L-1 NAA1.0 mg·L-1;胚性愈伤组织的保持与增殖应在黑暗条件下进行,培养基为MS 6-BA1.0 mg·L-1 2,4-D0.2 mg·L-1;长俊木瓜叶片体胚的发生以加入ABA2.0 mg·L-1的MS培养基最为有利.     

山核桃幼胚不定芽的诱导

以山核桃Carya cathayensis花后60,75和100 d的幼胚为外植体,金属硫蛋白（MT）复合维生素+ 20 g·L-1葡萄糖+10 mg·L-1腺嘌呤+500 mg·L-1水解酪蛋白作为基本培养条件,研究山核桃幼胚的不同发育时期,不同植物生长调节物质及基本培养基对山核桃不定芽诱导的影响。结果表明,山核桃花后60 d的幼胚培养56 d后未形成不定芽,花后100 d的幼胚比花后75 d的幼胚诱导产生的不定芽多而且长;植物生长调节物质对山核桃不定芽诱导以0.010 0 mg·L-1 4-氨基-3,5,6-三氯吡啶羧-酸（Picloram） + 3.0 mg·L-16-苄氨基腺嘌呤（6-BA）为启动培养基较佳;当6-BA质量浓度一定时,随Picloram质量浓度增加不定芽数量差异不显著;当Picloram质量浓度一定时,随6-BA质量浓度增加,产生不定芽数逐渐上升,但当6-BA达10 mg·L-1时,不定芽出现明显玻璃化现象;2,4-D的添加不利于外植体不定芽产生;MS（Murashige and Skoog）是最佳基本培养基。图1表2参16     

6-BA浓度对库拉索芦荟试管苗生长的影响

以MS为基本培养基,研究了不同6-BA浓度对库拉索芦荟试管苗生长的影响,筛选出了有利于库拉索芦荟试管苗生长的最适6-BA浓度.结果表明,6-BA浓度为0.8 mg·L-1时,芦荟试管苗生长势最佳;培养基MS + 6-BA 3.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1适合芦荟试管苗的芽分化;培养基MS+6-BA 0.8 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1适合芦荟试管苗的增殖.     

四个玉簪品种组培快繁研究

为推进玉簪工厂化育苗进程,以MS为基本培养基,研究不同激素配比培养基对4个玉簪品种组培苗组培快繁的影响。结果表明:Hosta‘Big Daddy’在MS+4.0mg·L-16-BA+0.2mg·L-1 NAA培养基上的启动效果最好。金鹰和小黄金叶在MS+3.5 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1 NAA培养基上的启动效果最好。MS+2.5mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1 NAA为翠鸟最适启动培养基。4个玉簪品种均在6-BA5.0 mg·L-1+NAA0.2mg·L-1培养基上的增殖效果最好。     

基于均匀设计优化绶草体细胞胚胎发生发育体系及扫描电镜观察

以绶草Spiranthes sinensis茎尖为外植体,应用均匀设计法对各步骤各主要因子和水平的作用进行了试验探讨.结果表明,绶草茎尖胚性愈伤组织诱导的适宜培养基为:LS+6-BA0.78 mg.L-1+NAA2.0 mg.L-1,诱导率为98.7%;体胚发育及植株再生的适宜培养基为:LS+6-BA1.00 mg.L-1+IAA0.08 mg.L-1.在合适的培养条件下,体胚萌发率达到99%,萌发的体胚成苗率达到100%.扫描电镜的观察证实了绶草体细胞胚胎再生的实质.     

叶底红组织培养和快速繁殖条件的优化

应用正交试验方法研究6-BA,NAA及KT等3个因子对叶底红组培苗增殖系数的影响,同时考查了IBA、NAA和活性炭等3个因子对叶底红组培苗生根培养的影响,试验均按正交表L9(34)形成三因素、三水平的不同配比。结果表明:适宜叶底红增殖的培养基为MS+6-BA 1.2mg.L-1+NAA 0.4mg.L-1+KT 0.1mg.L-1,平均增殖系数3.62;适于生根的培养基为1/2MS+IBA 0.5mg.L-1+活性炭1.0g.L-1。以泥炭土和珍珠岩(2∶1)作为移栽基质,移栽成活率可达90%以上。     

葡萄柚品种腋芽茎段离体培养研究

以5个葡萄柚品种的无菌苗带腋芽茎段为材料,研究丛生芽的诱导、增殖及生根培养等,旨在构建葡萄柚的离体快繁体系。结果表明,在6-BA浓度为0.25和0.50 mg·L-1时,腋芽萌发率可达100.00%;0.10~0.40 mg·L-1的IBA处理利于腋芽的诱导和生长。在MS+0.50 mg·L-16-BA+0.20 mg·L-1IBA条件下,火焰的萌芽率最高,为88.89%。MS+0.50 mg·L-16-BA+0.20 mg·L-1IBA培养基适宜火焰、矮化、瑞路比、里约红丛生芽的增殖。在MS+0.25 mg·L-16-BA+0.20 mg·L-1IBA培养基条件下,星路比增殖系数达到最大。1/2 MS+1.00 mg·L-1IBA生根培养基适合火焰、瑞路比、里约红、星路比生根。里约红移栽成活率最高,达81.82%;瑞路比最低,仅39.39%。