Thin-layer chromatography of vitamin B12 and its analogues

Summary The separation of vitamin B₁₂ from its analogues is difficult because they are chemically closely related to cyanocobalamin.On the grounds of our experiments we suggested a new method for the separation of corphyrins on dry alumina (basic, second degree of activity according toBrockmann). As solvent system the mixture of isobutanol, isopropanol and water (1 : 1 : 1) was used. The separation with good compact spots was obtained of the following corphyrins: cyanocobalamin (vitamin B₁₂), factor B_{12 III}, pseudovitamin B₁₂, factor A, factor B and factor V (nB).A new simple and rapid method for separation of hydroxocobalamin and cyanocobalamin on thin layer of dry alumina (neutral, second degree of activity according toBrockmann) was reported by us. Advantage was taken of the property of hydroxocobalamin to form with NH₄ OH a compound of the cobalichrome type. Under these conditions cyanocobalamin does not change so that both compounds can be easily separated.The best separation was obtained by mixture of isobutanol, isopropanol and water (1.5 : 1 : 1.25) as solvent system (with addition of NH₄ OH until the ph was 8.5).On the grounds of the results from attempts on the separation of cyanocobalamin from its analogues we reported a method for quantitative determination of vitamin B₁₂ in microbial fermentations, commercial preparations, and concentrates. The method involved the precipitation of vitamin B₁₂ and other analogues (accompanying it) as coper-cyanide complexes, the decomposition of complexes with addition of NaCN-solution to obtain the dicyanocomplexes, the separation of cyanocobalamin on thin layer of dry alumina and its colorimetric determination to 361 nm.

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Zusammenfassung Die Trennung des Vitamin B₁₂ und seiner Abkömmlinge ist wegen der großen Ähnlichkeit mit dem Cyanocobalamin schwierig. Basierend auf unsere Experimente schlagen wir eine neue Methode zur Trennung der Corphyrine auf Tonerde (basisches Aluminiumoxid, 2. Aktivitätsgrad nachBrockmann) vor. Als Lösungsmittel wird eine Mischung Isobutanol, Isopropanol und Wasser 1 : 1 : 1 benutzt. Eine Trennung mit scharf begrenzten Flecken der folgenden Corphyrine wurde erhalten: Cyanocobalamin, Faktor B_{12 III}, Pseudovitamin B₁₂, Faktor A, Faktor B und Faktor V (nB).Eine neue, einfache und rasche Methode zur Trennung der Hydroxocobalamine und der Cyanocobalamine auf Dünnschicht mit trockener Tonerde (neutrales Aluminiumoxid, 2. Aktivitätsgrad nachBrockmann) ist von uns beschrieben worden. Man benutzte die Eigenschaft der Hydroxocobalamine, mit NH₄OH eine Verbindung der Gruppe der Cobalichrome zu bilden. In diesem Fall verändert sich das Cyanocobalamin nicht, so daß die zwei Verbindungen leicht getrennt werden können. Die beste Trennung wurde mit der Mischung Isobutanol, Isopropanol und Wasser (1,5 : 1 : 1,25) als Lösungsmittel erhalten (mit Zusatz von NH₄OH, bis pH = 8,5).Auf Grund der Trennungsergebnisse der Cyanocobalamine von verwandten Stoffen wird eine Methode quantitativer Bestimmung des Vitamin B₁₂ in mikrobiellen Gärungen, in Handelspräparaten und in Konzentraten beschrieben. Diese Methode schließt die Fällung des Vitamin B₁₂ und anderer Abkömmlinge als Kupfer-Cyan Komplexe, die Zersetzung der Komplexe durch Zusatz einer Lösung NaCN, um Dicyan-Komplexe zu bekommen, die Trennung der Cyanocobalamine auf Dünnschicht mit trockener Tonerde und deren kolorimetrische Bestimmung bei 361 nm ein.

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Résumé La séparation de la vitamine B₁₂ d'avec ses analogues est difficile du fait de leur grande similitude avec la cyanocobalamine.En nous basant sur nos expériences nous avons suggéré une nouvelle méthode de séparation des corphyrines sur de l'alumine anhydre (alumine basique, du 2ème degré d'activité selonBrockmann). Comme système solvant un mélange isobutanol, isopropanol, eau, (1 : 1 : 1) a été employé. Une séparation avec des tâches bien délimitées des corphyrines suivantes fut obtenue: cyanocobalamine (vitamine B₁₂), facteur B_{12 III}, pseudovitamine B₁₂, facteur A, facteur B et facteur V (nB).Une nouvelle méthode, simple et rapide, de séparation d'hydroxocobalamine et de cyanocobalamine sur couche mince d'alumine anhydre (alumine neutre, du 2e degré d'activité selonBrockmann) fut décrite par nous. On a utilisé la propriété de l'hydroxocobalamine de former avec le NH₄ OH un composé appartenant au type des cobalichrome. Dans ces conidtions la cyanocobalamine ne subit pas de modifications, de sorte que les deux composés peuvent être facilement séparés. La meilleure séparation fut obtenue à l'aide du mélange isobutanol, isopropanol, et eau (1,5 : 1 : 1,25) comme système solvant (avec addition de NH₄ OH jusqu'à pH 8,5).Sur la base des résultats des essais de séparation de la cyanocobalamine d'avec ses analogues on décrit une méthode pour la détermination quantitative de la vitamine B₁₂ dans les fermentations microbiennes, les préparations commerciales, et les concentrés. La méthode implique la précipitation de la vitamine B₁₂ et d'autres analogues l'accompagnant, sous forme de complexes cuivre-cyanure, la décomposition des complexes par l'addition d'une solution de Na CN afin d'obtenir des di-cyano-complexes, la séparation de la cyanocobalamine sur couche mince d'alumine anhydre et sa détermination colorimétrique à 361 nm.

     

The saponins content of some Nigerian oil seeds

Three oil bearing seeds grown in Nigeria were found to contain saponins. The oil seeds, African oil bean seed (Pentaclethra macrophylla) rubber seed (Havea brasilienses), andMucuna uriens were defatted and saponin fractions extracted with 20% aqueous ethanol. Saponins obtained after extraction were 2.1% for African oil bean seed, 1.8% for rubber seed, and 2.1% forMucuna. These figures were similar to that of defatted soyabean with 2.4%. Results are discussed in relation to the possible beneficial or detrimental effects of saponins to man or animals that may consume these oil seeds.     

几种油料作物种子中类胡萝卜素含量的分析

利用分光光度计对油菜、花生、大豆、芝麻、苏子、红花6种油料作物种子以及胡萝卜、南瓜、玉米、桔子4种果蔬进行了类胡萝卜素的含量比较分析。在6种油料作物种子中,只有油菜和大豆具有类胡萝卜素的特征吸收峰,芝麻、花生、苏子和红花没有出现类胡萝卜素的特征吸收峰,胡萝卜、南瓜、玉米、桔子4种果蔬都有类胡萝卜素的特征吸收峰。而且不同油菜和大豆品种的类胡萝卜素的含量有很大的差异,其中油菜种子与胡萝卜中的类胡萝卜素含量相近。     

Some environmental effects on the oil yield components of sunflower seeds

Summary and Conclusions Three sunflower varieties were tested at three sowing dates and three spacings, in a field experiment conducted under dryland conditions in Israel. Number of normal and empty seeds per head, weight of thousand seeds, kernel percentage, oil percentage and protein content were determined.Delay in sowing definitely decreased oil yield and its components except kernel percentage which was moderately increased.Protein percentage in kernels increased markedly at the late sowing.Narrowing of spaces between plants decreased the number of seeds per head and their weight, but did not affect composition of seeds. It caused an obvious increase of yield per unit of area.The number of empty seeds per head was not influenced by spacing but was markedly augmented by late sowing, due to a great increase of the central infertile part of the head.The total number of achenes seems to be determined during the vegetative period. Moisture or nutrient deficiencies during flowering and seed set may reduce the number of seeds, by increasing the infertile parts of the heads. Adverse moisture and temperature conditions throughout ripening interfere with the accumulation of oil and carbohydrates in seeds, thus reducing their weight and oil percentage.Kernel percentage was the character least affected by environmental variations, and may therefore be of considerable importance for breeding high oil yielding varieties.

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Zusammenfassung In einem unbewässerten Feldexperiment in Israel wurden drei Sonnenblumen-Sorten in drei Aussaaten zu verschiedenen Zeiten und in verschiedenen Pflanzabständen untersucht. Dabei wurde festgestellt: die Anzahl der normalen und der tauben Körner pro Korb, das Tausendkorngewicht, der Prozentsatz der Kerne, der Prozentsatz des Öl- und Protein-Gehalts.Die Verzögerung der Aussaat beeinträchtigte deutlich den ölertrag und die ihn beeinflussenden Faktoren. Der Prozentsatz des Proteins nahm bei später Aussaat beträchtlich zu.Die Verringerung der Abstände zwischen den Pflanzen beeinträchtigte die Anzahl der Körner pro Korb und ihr Gewicht, hatte aber keinen Einfluss auf die Zusammensetzung der Körner. Sie verursachte eine unverkennbare Zunahme des Ertrages pro Flächeneinheit.Die Anzahl der tauben körner pro Korb war nicht beeinflusst von dem Abstand der Pflanzen, aber auffallend vermehrt durch späte Aussaat infolge einer starken Zunahme des mittleren unfruchtbaren Teiles des Korbes.Es scheint, dass die Gesamtzahl derAchänen während der Vegetationsperiode bestimmt wird. Mangel an Feuchtigkeit oder Nährstoffen während Blüte- und Samenansatz können die Anzahl der Körner herabsetzen, infolge der Zunahme des unfruchtbaren Teiles des Korbes. Ungünstige Feuchtigkeits- und Temperatur-Bedingungen während der Reifezeit wirken störend auf die Bildung von Öl und Kohlehydraten in den Körnern und vermindern dadurch deren Gewicht und den Prozentsatz an Öl.Am wenigsten beeinflusst durch Verschiedenheit der Umweltbedingungen war der Prozentsatz der Kerne. Dieser kann daher von beträchtlicher Bedeutung sein für die Züchtung neuer Sorten mit hohem Öl-Ertrag.

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Résumé L'étude décrite ci-dessus porte sur trois variétés de tournesol, sémées à trois dates et suivant trois espacement différents. L'expérience a été réalisée en Israël dans des conditions non irriguées. Le nombre de graines normales et vides par capitule, le poids de mille graines, le pourcentage d'amondes, le pourcentage d'huile et de protéines ont été déterminé.Les semailles tardives réduisent nettement le rendement en huile et les facteurs correspondants, sauf le pourcentage d'amandes qui est accru modérément. Le pourcentage de protéines dans les amandes est accru de facon marquée par les semailles tardives. La réduction de l'espacement entre les plants fait décroitre le nombre de graines par capitule et leur poids, sans en affecter la composition; elle produit un accroissement certain du rendement à l'unité de surface.Le nombre de graines vides par capitule n'est pas influencé par l'espacement des plantes, mais il est accru de facon marquée en cas de semailles retardées; ceci est du à un fort accroissement de la partie contrale infertile des capitules.Le nombre total d'akènes semble être déterminé durant la période végétative. Il est possible qu'une déficience d'eau ou de matières nutritives pendant la floraison et pendant la formation des fruits, réduise le nombre de graines en provoquant l'accroissement de la partie infertile des capitules.Des conditions défavorables de température et d'humidité durant la période de maturation affectent l'accumulation d'huile et d'hyrates de carbone dans les graines en produisant une réduction de leur poids et de leur pourcentage d'huile.Le caractère le moins affecté par les variations du milieu fait le pourcentage d'amendes. Celui-ci peut par conséquent être d'une importance considérable dans l'amélioration de varietés à haut rendement en huile.

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with 2 figs.

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Part of the data presented herein were included in a dissertation submitted to the Senate of the Hebrew University, by MosheJ. Pinthus in May 1957.     

Extraction of simmondsin and oil in one step from jojoba seeds

Approximately all simmondsin and oil can be easily removed in one step by repeated extraction with water at 90 °C from ground jojoba seeds. The optimum time and temperature of extraction were respectively 1.5 h and 90 °C. Quantitative analysis of simmondsin was made by HLPC method using adenosine as internal standard.     

Chemical composition of seeds and oil of Xylopia aethiopica grown in Nigeria

The chemical composition and mineral constituents of Xylopia aethiopica, which is valued as a spice in Nigeria, were determined along with the physicochemical characteristics of the seed oil. The seeds had the following chemical compositions moisture (8.43 g/100 g), ash (5.89 g/100 g), crude lipid (9.58 g/100 g), crude protein (12.45 g/100 g) crude fiber (8.66 g/100 g) and carbohydrate (63.65 g/100 g). Calcium and potassium were the major minerals in the seed. The extracted lipid was examined for fatty acid composition. Linoleic (45.1 g/100 g) and oleic (26.5 g/100 g) acids were the predominant unsaturated fatty acids, while palmitic acid (18.0 g/100 g) was the major saturated acid. The iodine value of 97 g/100 g indicates that the seed oil is a non-drying type.     

葵花子油不同提取工艺的比较

通过比较超临界CO3提取葵花子油的均匀设计实验和微波、超声波诱导提取葵花子油的正交实验结果,考察影响提取的主要因素,寻求最佳萃取工艺.超临界CO2萃取最佳工艺条件为:压力32MPa,温度32℃,CO2流量25kg/h,萃取时间80min,得率36.45%;微波萃取最佳工艺条件为:溶剂为正己烷,物料质量与溶剂质量比例1:3,辐射时间7min,辐射功率720w,得率27.12%.超声波萃取最佳工艺条件为:物料质量与溶剂质量比例1:7,溶剂为正己烷,浸泡时间18h,得率17.37%.结果表明超临界CO3萃取葵花子油品质最好,而且萃取也最高,质量最稳定.     

四种油料作物中的细菌型PEPC基因的鉴定及在发育种子中的表达

鉴定和获取了四种油料作物（油菜、大豆、花生和芝麻）中的细菌型PEPC基因,分析了所编码蛋白的保守结构域（BOX I-IV）和蛋白作用功能位点。基因包括甘蓝型油菜的Bna10093361、Bna1009749和Bna10093360,大豆的Glyma10g34970.1, Glyma01g22840.1和Glyma02g14500.1,芝麻的SIN1018296和花生的AhPPC5。这8个基因含有19～21个内含子,内部插入一个约350～600bp的高度变异区,编码的蛋白在C端形成R/KNTG结构域,在N端缺乏磷酸化作用位点。在种子发育的不同时期,油菜中仅Bna10093360表达,但其表达量不到油菜BnActin表达量的0.1%;大豆中Glyma10g34970.1表达量最高（接近大豆GlymaActin的2%）,Glyma02g14500.1次之;花生AhPPC5表达量为花生AhActin的32%～175%,在种子不同发育时期表达量为早期>中期>晚期;芝麻SIN1018296表达量为芝麻SINActin的3%～18%,在种子发育时期的表达趋势和花生AhPPC5相似。8个基因种子中的表达模式差异明显,说明细菌型PEPC基因可能存在着广泛的功能分化。       

Amino acid composition of single seeds and cotyledons of some brassica species by gas liquid chromatography

There are considerable differences in amino acid pattern between the seed coat and the embryo (separated after 5 h of imbibition in water) but only minor differences between the various embryonic parts, the hypocotyl, the inner and outer cotyledons. Thus, the seed coat is high in proline and hydroxyproline and relatively low in glutamic acid. No change in amino acid pattern was observed in the cotyledons after an additional 19 h of imbibition. This is of pratical significanse since a separation of the seed parts — of value in genetic studies — is greatly simplified if performed with swollen seeds as compared with dry seeds.The variation in the amino acid composition among single seeds of heterozygousB. campestris was higher than the variation among single seeds of homozygousB. tournfortii.

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Zusammenfassung Es bestehen bedeutende Unterschiede im Aminosäuremuster der Samenschale und des Embryos (getrennt nach 5 Stunden Inhibition in Wasser) aber nur geringere zwischen den verschiedenen Teilen des Embryos, dem Hypocotyl und den inneren und äusseren Cotyledonen. So sind die Gehalte der Samenschale hoch an Prolin und Hydroxyprolin sowie relativ niedrig an Glutaminsäure. Keine Anderung trat im Aminosäuren-Muster der Cotyledonen ein, wenn sie einer weiteren 19 Stunden-Inhibition unterworfen wurden. Dies ist von praktischer Bedeutung, da eine Trennung der Samenbestandteilewichtig für genetische Studien-im inhibierten Zustand sstärker vereinfacht wird als im normalen trockenen Zustand.Die Variation des Aminosäuren-Spektrums zwischen einzelnen Samen vonBrassica campestris-Heterozygoten war gröszer als die der Heterozygoten vonBrassica tournefortii.

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Résumé Il y a des différences considérables dans la composition en aminoacides entre le tégument séminal et l'embryon (séparé après 5h d'imbibition dans l'eau); par contre il y a peu de différences entre les diverses parties de l'embryon, l'hypocotyle, l'intérieur des cotylectons. Ainsi le tégument séminal est riche en proline et hydroxyproline, et relativement pauvre en acideglutamique. Aucun changement dans les taux d'amincides n'a été observé lors d'une imbibition supplémentaire de 19 heures.Ce fait a une importance pratique, car la séparation de la graine en ses diverses parties — importante dans les recherches génétiques — est grandement simplifiée si elle est pratiquée sur des graines gonflées et non sur des graines sèches. La variation du taux d'aminoacides entre graines isollées deB. campestris hétérozygote était plus grande que chez les graines homozygotes deB. tournefortii.

     

长叶榧叶部油挥发性成分的色谱/质谱分析研究

采用气相色谱/质谱(GC-MS)联用法测定了长叶榧叶部精油的挥发性成分,初步发现其主要成分是柠檬烯、反式α-蒎烯、β-蒎烯、顺式α-蒎烯、3-莰烯、6,6-二甲基-2-亚甲基-环庚烷、β-月桂烯,其含量分别为32.2%、12.5%、7.1%、6.6%、6.6%、5.5%、4.4%.     

Optimizing mechanical oil extraction of Jatropha curcas L. seeds with respect to press capacity, oil recovery and energy efficiency

The objective of this study was to optimize the mechanical oil extraction of Jatropha curcas seeds by increasing the efficiency of oil recovery and decreasing oil residues in press cake. The experiments were carried out with mechanical screw press type - Komet D85-1G. Four setups were created by parameter combination of two different screws (16 and 21.5 mm choke ring size), with two different press cylinders (1 and 1.5 mm bore size), three different nozzles (8, 10 and 12 mm nozzle diameter) and three rotational speeds (low, medium and high). Oil recovery reduced when rotational speed increases for all setups; highest oil was 89.4% (m/m). The oil recovery was increasing when energy input increased and decreasing when seed material throughput increased. The relations between energy input and seed material throughput followed a strict pattern, which correlated with oil recovery. This correlation can be used for determining the optimal operation parameters.     

Changes in oil,sugars and nitrogenous components during germination of sunflower seeds,Helianthus annuus

Since germination has been found to improve the nutritional quality of grains, sunflower seeds Helianthus annuus were germinated for up to five days, and the cotyledons were analyzed for oil, sugar, free amino acid, non-protein nitrogen, lysine, tryptophan and methionine contents. Protein was fractionated. Soaking and germination increased the non-protein nitrogen, total free amino acid, lysine and tryptophan contents. Protein content and dry weight decreased. The oil content decreased significantly after 72 hours of germination. The reducing sugars increased gradually until day five of germination.The saline soluble albumin and globulin fractions decreased while the glutelin content increased during germination. No changes were noticed in the prolamin and methionine contents.     

基质固相分散—气相色谱法测定植物油中多种拟除虫菊酯类及有机磷类农药残留

通过对基质固相分散吸附剂、淋洗剂、样品填料比等处理条件的优化研究,建立了植物油中22种农药残留分析方法——基质固相分散—气相色谱法,实现对植物油中8种拟除虫菊酯类和14种有机磷类农药残留的同时测定。加标实验结果表明,22种农药回收率均在80.6%～110.3%之间,相对标准偏差均小于4.9%;8种拟除虫菊酯类农药检出限为0.0005 ㎎/㎏～0.015 ㎎/㎏,14种有机磷类农药检出限达到0.01㎎/㎏～0.05㎎/㎏。本方法操作简便,成本低,回收率高,精密度好。     

电场处理油葵种子在干旱胁迫下萌发及酶活性的变化

用电场处理油葵种子，研究其在干旱胁迫条件下种子的萌发及萌发种子和幼苗叶片中丙二醛含量，超氧化物歧化酶，过氧化氢酶、酸性磷酸酯酶的活性及脂肪酸组分的变化，结果表明，电场处理能提高油葵种子在干旱胁迫条件下的发芽率，发芽指数和活力指数，减缓萌发种子和幼苗叶片中的超氧化物歧化酶，过氧化氢酶及膜不饱和脂肪酸的下降程度及丙二醛含量和酸性磷酸酯酶活性的增加幅度，这些变化说明电场处理种子可以减轻发育过程中细胞膜对干旱胁迫的敏感性，降低膜脂过氧化和磷脂脱酯化作用，进而维持了细胞膜的稳定性和完整性。     

Biochemical changes during the fermentation of castor oil (Ricinus communis) seeds for use as a seasoning agent

Castor oil seeds were fermented under conditions commonly used in some local communities in Eastern Nigeria. Levels of selected biochemical constituents of fermented seeds were compared with those of unfermented seeds. The free amino acids — phenylalanine, tryptophan, tyrosine, serine, glutamic acid, cysteine, and gluamine — were detected by using thin-layer chromatography in the fermented sample extract, while none were detectable in the extract of unfermented seeds. Lipid analysis showed that the fermented seeds contained more unsaturated fatty acids than the unfermented seeds. Glutamine produced by the microorganisms responsible for fermentation is probably responsible for the characteristic flavor of foods seasoned with fermented castor oil seeds, known locally as ogiri.     

Leuco-anthocyanins in seeds

Summary When present in the leaves of a plant, leuco-anthocyanins are almost always present also in the seeds, but they may be present in the seeds although absent from the leaves. It is usually in the seed-coats that they are found, but occasionally (as in cacao) they are also present in the cotyledons. In legumes, leuco-anthocyanins when present (as they usually are) in the seed-coats can produce undesirable effects in food technology, but their presence or absence is under gene control and they can therefore be eliminated by breeding. In certain fruits, such as grapes, it is the leuco-anthocyanins in the seeds that are responsible in large degree for the tannin content of the fruit as a whole or of products made from them, and for this reason also they are important in commerce and technology.

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Résumé Lorsqu'ils sont présents dans les feuilles d'une plante les leuco-anthocyannes le sont aussi presque toujours dans les graines, mais ils peuvent être présents dans les graines quoique absents des feuilles. On les rencontre généralement dans les enveloppes des graines mais aussi quelque fois dans les cotylédons (dans le cacao par exemple). Dans les légumes les leuco-anthocyannes, quand ils sont présents (ce qui est généralement le cas), dans les enveloppes des graines peuvent produire des effets indésirables en technologie alimentaire; mais leur présence ou leur absence étant sous le contrôle de gênes, ils peuvent être éliminés par croisements. Dans certains fruits, comme les raisins, ce sont les leuco-anthocyannes des graines qui sont pour une grande part, responsables de la teneur en tannin du fruit dans son ensemble ou des produits à la fabrication desquels ils servent; pour cette raison aussi les leuco-anthocyannes sont importants au point de vue commercial et économique.