鸡球虫单卵囊的分离与雏鸡感染试验

用饱和盐水漂浮法收集鸡球虫卵囊,放入平皿,加入适量的2.5%重铬酸钾溶液,置于室温或20℃恒温箱中培养。待球虫卵囊孢子化后取出5滴,加10～15ml 生理盐水稀释,然后在载玻片上先后各加1滴于事先加温到60～70℃的2%琼脂溶液,将稀释后的球虫卵囊溶液包埋,待完全凝固后,在低倍显微镜观察下用分离针、刀片分割琼脂球虫块,直至分离为单个球虫卵囊为止。用分离的球虫单卵囊感染雏鸡,感染率为50～70%。     

鸡艾美耳球虫单卵囊分离技术的建立

以玻璃纸做材料,用毛细吸管分离单卵囊,通过显微镜"重复"鉴定法,对柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)进行分离.单卵囊感染20只鸡,在感染后5 d～15 d,用饱和盐水漂浮集卵法进行检测.结果显示,有15只鸡粪便中检出卵囊,经鉴定均为所要分离的虫种(E. tenella),感染成功率为75%,准确率达100%.另外,应用改进后的玻璃纸单卵囊分离技术还成功分离到毒害、巨型、堆型、布氏、和缓和早熟艾美耳球虫的单一虫种.结果表明,改进后的单卵囊分离技术简单易行,感染方便,成功率和准确率都较高,而且所用材料易于获得,消毒方便.     

影响鸡球虫单卵囊分离纯化的因素分析

单卵囊分离技术是获得品种单一、基因型纯净的卵囊,以便更有效的鉴别球虫种类和建立球虫纯种体系的重要手段.论文主要从雏鸡日龄、卵囊侵袭力、分离方法和材料的选择三个方面来分析其对鸡球虫单卵囊分离纯化的影响,从而为单卵囊分离技术的改进提供指导,进一步为球虫的各项研究提供基础.     

鸡球虫单卵囊分离技术与雏鸡感染试验

把收集到的新鲜带血鸡粪用饱和食盐水漂浮法收集鸡球虫卵囊,在装有25 g/L重铬酸钾溶液的平皿中保存,置于29℃的恒温箱中2 d~3 d,得到混合种孢子化卵囊。生理盐水稀释卵囊液至每滴1个~2个卵囊,在载玻片上用自制的毛细吸管在显微镜下吸取1个卵囊于备好的40 g/L琼脂糖薄片上,确保只有1个卵囊,用手术刀切割琼脂糖薄片并包埋卵囊,即完成单卵囊分离。将包埋好的单卵囊感染雏鸡,感染率为60%~90%。     

针头及透明塑料纸球虫单卵囊分离感染法

球虫卵囊悬液适当稀释后,用14 号注射器针头沾取少许,滴点到放置于载玻片的0.8 cm×0.8 cm大小的透明塑料纸片上,随即置于镜下观察。发现符合条件的单个卵囊后,用镊子夹取玻璃纸片一角,插进鸡的嗉囔中使鸡感染。此技术与其他分离方法相比,用材简单,操作方便,节省时间,成功率高,是一种很实用的方法。     

鸡巨型艾美耳球虫单卵囊分离及雏鸡扩增试验

采用饱和食盐水漂浮法收集就诊病死球虫阳性鸡小肠中段内容物中的球虫卵囊,恒温培养至孢子化后,用2%琼脂薄板进行球虫单卵囊分离,分别感染7只5日龄雏鸡,对据形态学鉴定为巨型艾美耳球虫的分离株进行2代单卵囊分离和雏鸡感染,取其后代以每只1.0×10⁴个卵囊感染10只10日龄雏鸡进行卵囊扩增,获得大量纯种巨型艾美耳球虫卵囊。结果表明,刀片切割琼脂薄板单卵囊分离法操作简便,单卵囊感染成功率较高,准确率达100%,适用于纯种卵囊的分离与扩增。     

鸡球虫疫苗的研制与应用

球虫强毒活苗是直接从自然发病的病鸡体内或粪便中收集球虫混合卵囊，然后采用单卵囊分离法纯化球虫，并按一定比例混合，配以适当的稳定剂，即组成强毒活苗。Edgar（1952）在4-10日龄通过饮水或拌料给鸡接种含有8种鸡球虫的混合孢子化卵囊（即世界上第一种商品化球虫苗——Coccivac），     

影响巨型艾美耳球虫单卵囊纯化试验成功的因素分析

鸡球虫病是重要的寄生性原虫病,由顶复器门的艾美耳属(Eimeria)球虫感染引起,全世界每年因球虫病造成的损失约80亿美元。巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)是鸡的9种球虫之一,也是集约化养鸡场最常见的三种球虫之一,危害严重,呈世界性分布,我国已有25个省(市、区)报道存在。1929年     

艾美耳球虫单卵囊分离及PCR鉴定

目前为止,鸡主要有7种艾美耳球虫,在卵囊形态、结构、大小、肠道病变、寄生部位、最短孢子化时间、最短潜伏期等方面均具有自身特征[1].这使球虫诊断问题复杂化.     

鸡柔嫩艾美耳球虫广西株的分离与鉴定

目的建立一种简单、实用的单卵囊分离方法，并对一株广西柔嫩艾美耳球虫进行分离。方法采用电泳制胶槽来制作琼脂块进行球虫单卵囊的分离，单卵囊实验感染9只1日龄雏鸡，感染后收集粪便，用饱和盐水漂浮法进行卵囊检测。纯种卵囊经口感染10只1日龄雏鸡，观测卵囊寄生部位、最短孢子化时间，以及其潜在期和排卵高峰期。结果2只雏鸡粪便中检出卵囊，单卵囊感染成功率为22％。通过对其中一株球虫的研究，根据其卵囊的形状、大小、寄生部位、潜在期、卵囊最短孢子化时间、排卵高峰期等生物特征，鉴定该株球虫为柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）。结论本研究成功建立一种单卵囊分离技术，可作为球虫单卵囊分离的常规方法。     

成都地区鸡球虫种类的初步调查

我们于2000年9－11月对成都地区5个郊县或郊区9个鸡场的47只鸡进行了鸡球虫种类的初步调查，发现成都地区鸡球虫种类有世界公认的7个种中的6个种，即：柔嫩，毒害，和缓，早熟，巨型及布氏艾美氏球虫，调查结果为我成都地区鸡球虫的预防用药提供了科学依据。     

鸡球虫重组活载体疫苗研究进展

对细菌和病毒为载体的鸡球虫重组活载体疫苗研究进行了综述,旨在为鸡球虫病的免疫预防提供新思路和参考.     

L-NMMA对鸡球虫早熟弱毒疫苗免疫鸡增重的影响

为了研究鸡球虫早熟弱毒疫苗对免疫鸡增重的影响及一氧化氮合成酶抑制剂(L-NMMA)对免疫鸡增重和免疫效果的影响。取40只SPF雏鸡,分为空白对照组(C1、C2)和单剂量重复接种组(T1、T2),T1、T2组按推荐免疫剂量单剂量重复接种鸡球虫早熟弱毒疫苗,C1和T1、C2和T2分别于二次接种后第7、14天逐只空腹称重,剖检记录十二指肠、空肠和盲肠病变记分,取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、腺胃、肌胃、十二指肠、空肠和盲肠进行病理组织学检查。另选取40只SPF雏鸡,分为空白对照组C20、攻毒对照组T21、免疫对照组T22和免疫加药组T23,T22和T23按推荐免疫剂量两次免疫鸡球虫早熟弱毒疫苗,T23在免疫的同时腹腔注射L-NMMA,二免后第14天T21、T22和T23均接种鸡球虫混合强毒,测定SPF雏鸡平均增重、相对增重、肠道(十二指肠、空肠和盲肠)病变记分、病变记分减少率(RLS)、血便记分、死亡率及卵囊产量等指标。结果显示,接种组的平均增重显著低于未接种组(P<0.05),接种组的十二指肠、空肠和盲肠有轻微病变且黏膜上皮细胞均有不同程度损伤和脱落;免疫加L-NMMA组一免、二免后及攻毒后试验鸡的平均增重均极显著高于免疫攻毒对照组(P<0.01),且与空白对照组鸡的平均增重无显著差异(P>0.05),且免疫对照组和免疫加药组肠道病变记分和卵囊产量无显著差异(P>0.05)。说明鸡球虫早熟弱毒疫苗对雏鸡肠道有轻微损伤,且对鸡增重有一定影响;L-NMMA可降低鸡球虫早熟弱毒疫苗对试验鸡增重的影响,且不影响疫苗的免疫效果。     

甘露寡糖脂质体纳米制剂对鸡球虫致病力的影响

评价了甘露寡糖脂质体纳米制剂对鸡球虫致病力的影响,为临床应用该制剂提供依据。将甘露寡糖脂质体纳米制剂给予14日龄的鸡,连续用药7d,于鸡15日龄时人工感染5×104个/只鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊,测定抗球虫指数（ACI）、增重率。试验结果：成功建立鸡球虫感染病理模型,甘露寡糖脂质体纳米制剂能够提高鸡的增重率,与药物对照组相...     

复方球虫散对人工感染鸡球虫病治疗效果的临床试验

为科学、客观地评价复方球虫散对实验性鸡球虫病的防治效果,采用人工接种柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的方法复制鸡球虫病,使用纯中药组方复方球虫散进行鸡球虫病的临床疗效试验,观察并计算复方球虫散对试验鸡的死亡率、相对增重率、病变值和卵囊值的影响,并求出复方球虫散的抗球虫指数(ACI).试验结果表明:复方球虫散按1.0%拌料混饲,对鸡球虫病有较好的治疗效果.     

柔嫩艾美耳球虫广西南宁株的分离及鉴定

利用从南宁市郊养鸡场球虫病鸡粪便中收集的球虫混合种卵囊感染小鸡,再应用单卵囊分离感染技术,从感染鸡盲肠中收集的卵囊分离纯化获得1株纯种球虫,经鸡体传代增殖,对该虫株的卵囊大小和卵形指数、潜在期、排卵高峰期、最短孢子化时间、寄生部位、致病性等指标进行观察和测定。结果测得该虫株卵囊的平均大小为(25.743±1.94126)μm×(21.4±1.85985)μm,平均卵型指数为1.2067±0.07;潜在期为140 h;其排卵囊峰期在第6～9天,最高峰在第7天;最短孢子化时间为19 h;寄生部位在盲肠;对两周龄的艾维茵鸡,当使用5×104的孢子化卵囊感染剂量时死亡率为7.5%。根据这些测定和观察到的指标综合鉴定该分离株球虫为柔嫩艾美耳球虫,并命名为柔嫩艾美耳球虫广西南宁株(Eimeria.tenella-GXNN),该研究结果为进一步研究本地区鸡球虫病的药物治疗和免疫预防等奠定了基础。