宁夏牛支原体病的血清学调查报告

为掌握宁夏牛场牛支原体的感染状况,应用牛支原体间接ELISA检测试剂盒对宁夏银川市、吴忠市、中卫市的16个规模化养殖场的460份牛血清进行了牛支原体抗体的检测,结果显示：有148份血清牛支原体抗体阳性,阳性率为32．17％。说明宁夏地区牛支原体隐性感染普遍存在,应做好各牛场的管控和防治工作。     

云南省边境地区牛流行性出血病病毒血清学调查

云南省边境地区属热带亚热带气候,吸血昆虫种类繁多,虫媒病毒活动频繁,但流行性出血病病毒对牛的感染情况不清。为了明确流行性出血病病毒在云南省边境地区的活动情况,分别从云南省边境的8个市(县)共收集了2 737份牛血清,通过竞争性酶联免疫吸附试验进行检测,并对部分代表性阳性血清样品进行细胞微量中和试验,确定了各地存在的流行性出血病病毒血清型。本次调查结果对于云南省边境地区流行性出血病的防控提供了科学依据。     

流行性出血病病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒的研制

为研制流行性出血病病毒(epidemic hemorrhagic disease virus,EHDV)ELISA抗体检测试剂盒,用饱和硫酸铵浓缩EHDV灭活病毒作为包被抗原,以EHDV鼠源单克隆抗体作为阻断抗体,商品化的IgG-HRP羊抗鼠二抗作为检测抗体,通过优化检测试剂中各组分含量和反应程序,建立了一种EHDV阻...     

青海省民和县牛支原体肺炎血清学调查

采用ELISA方法对青海省民和县全县范围内收集的495份肉牛血清进行了肺炎支原体抗体监测。结果从采集的495份牛血清中检出牛肺炎支原体阳性血清107份,阳性率为21.62%。该结果证实,全县范围内的肉牛中存在牛支原体的感染和流行。     

青海省民和县牛支原体肺炎血清学调查研究

采用ELISA方法对从民和县范围内收集的495份肉牛血清进行了肺炎支原体抗体监测,结果从采集的495份牛血清中检出牛肺炎支原体阳性血清107份,阳性率为21．62％。该结果表明,民和县范围内肉牛中存在支原体的感染和流行。     

2021年昆明市晋宁区流行性出血病调查报告

为了解流行性出血病(epizootic hemorrhagic disease, EHD)在昆明市晋宁区流行和分布情况,采用竞争性酶联免疫吸附测定方法,对2021年该地区1 413份肉牛、山羊(包括奶山羊和肉山羊)血清样品进行流行性出血病病毒(epizootic hemorrhagic disease virus, EHDV)抗体检测。结果显示：山羊血清EHDV抗体阳性率较低(肉山羊阳性率为0,奶山羊阳性率为0.73%),而肉牛血清EHDV抗体阳性率较高(48.99%),舍饲牛群血清EHDV抗体阳性率高于半牧半舍牛群和放牧牛群。结果表明：昆明市晋宁区肉牛群中EHD普遍流行。该调查结果对昆明市晋宁区EHD流行病学研究具有重要意义。     

流行性出血病病毒抗原捕获ELISA方法的建立

为建立流行性出血病病毒(EHDV)病原学检测方法,本试验用纯化处理的4种血清型病毒(EHDV-2、5、6和8)混合免疫兔和豚鼠,制备高免血清。以兔抗EHDV为捕获抗体,豚鼠抗EHDV为检测抗体,羊抗豚鼠IgG-HRP为酶标抗体,建立了EHDV抗原捕获ELISA(antigen capture ELISA,AC-ELISA)方法。通过反应条件优化,获得最佳工作条件:5%马血清为稀释液,包被抗体1∶15 000稀释,检测抗体1∶20 000稀释,酶标抗体1∶15 000稀释。通过检测60份阴性样品确定临界值,P/N值≥2为阳性、P/N值1.5为阴性;特异性试验表明该方法仅能检测出各血清型EHDV、蓝舌病病毒(BTV)、赤羽病病毒(AKAV)及中山病毒(CHUV)无交叉反应;敏感性试验表明该方法可以检出102.47±0.07 TCID50的病毒;批内和批间变异系数均10%;用RT-PCR与该方法同时对70份参考样品进行检测,符合率为92.86%。表明本试验建立的AC-ELISA方法为EHDV抗原检测提供了一种可靠实用的技术手段。     

新疆牛群中鹿流行性出血热血清学调查

本研究采用鹿流行性出血热(EHD) cELISA诊断试剂盒分别对2014年和2015年6、7月份从新疆10个地(州、市)随机采集的662份牛血清进行了EHD检测。结果检出阳性48份,阳性率为7.25%;检出地区有:哈密市、巴里坤县、伊吾县、尉犁县、岳普湖县,其中哈密市和岳普湖县的阳性率较高,在20%左右。这是首次对新疆部分地区进行EHD血清学调查,检测结果为今后新疆地区的EHD研究,特别是病原学方面研究提供了科学依据。     

云南边境地区流行性出血热病毒血清学监测及血清型鉴定

为了解近几年云南边境地区牛、羊流行性出血热病毒（EHDV）的感染和流行情况,本研究从2014年起连续3年在与老挝、越南接壤的江城县设置EHDV监测点,每年选择投放EHDV抗体阴性的10头牛和5只山羊作为哨兵动物进行跟踪监测。每年5~10月份对哨兵动物采血,每周1次,11、12月每月采集一次,进行EHDV抗体、抗原监测和病毒分离。针对致细胞病变的样品,采用EHDV群特异性S7基因片段引物进行RT-PCR方法检测,同时利用EHDV-1、-5、-6、-7、-10标准阳性血清对分离到的病毒进行中和试验鉴定。结果显示,2014－2016年江城县牛EHDV抗体阳性率分别为41.9%、58.6%和75.4%;3年期间共监测到15头EHDV抗体阳性黄牛,并从中分离到20个可致细胞病变样品,经RT-PCR确认为EHDV,遗传进化分析发现有11个毒株与1997和2003年日本分离的EHDV毒株亲缘关系较近,9个毒株与1977和1981年澳大利亚分离的EHDV毒株亲缘关系较近,5个毒株与2015年广西分离株的亲缘关系较近;3年期间在山羊体内未检测出抗体,未发现抗原阳性动物;经中和试验血清型鉴定,确定20株毒株包括EHDV-5、-6、-7、-10型4种血清型,感染时间均在5~9月之间。本研究发现,江城县长期存在多种血清型EHDV同时流行,2014－2016年EHDV抗体阳性率逐年增加,亟需加强对EHDV感染情况及活动规律的持续研究,提高流行性出血热的防控效率。     

2021年云南省边境地区牛口蹄疫血清学调查

为了解云南省边境地区牛口蹄疫（FMD）免疫情况,对2021年采自云南省7个边境县市的1 522份牛血清样品,采用O、A型口蹄疫病毒（FMDV）c ELISA抗体检测试剂盒及FMDV结构蛋白单抗阻断ELISA试剂盒进行抗体检测。结果显示：O、A型抗体阳性率平均分别为57.61%、67.29%,未达到70%的国内最低免疫标准;勐腊、盈江两地非结构蛋白抗体阳性率偏高,分别为57.50%、54.62%;入境牛O型、A型、非结构蛋白抗体阳性率分别为70.29%、79.70%、58.23%,本地牛分别为54.31%、63.87%、40.52%,差异显著（P <0.05）;规模场、散养户、隔离场的O型抗体阳性率分别为61.04%、52.24%、70.29%,A型抗体阳性率分别为63.73%、63.12%、79.70%,非结构蛋白抗体阳性率分别为37.78%、42.31%、58.52%,隔离场阳性率场显著高于规模场和散养户（P <0.05）。结果表明：云南省边境地区FMDV免疫抗体水平不高,且存在一定的病毒传入风险,需持续开展血清学调查和监测,提高疫苗接种强度,降低FMDV向国内扩散的风险...     

Studies on the Pathogenesis of Experimental Epizootic Hemorrhagic Disease of White-tailed Deer

Observations were made of clinical signs, gross and microscopic lesions in white-tailed deer infected with epizootic hemorrhagic disease (EHD) virus. Typically, animals became weak and lethargic and developed hyperemia of the oral and nasal mucosa, tongue, ears and sclera of the eyes six to seven days following intramuscular inoculation with virus. Body temperature increased initially and then fell to subnormal levels just prior to death.

A decrease in levels of circulating blood platelets was correlated with the occurrence of fever and the appearance of platelet and fibrin thrombi in small vessels of many organs of the body. Thrombosis resulted in tissue degeneration, necrosis and hemorrhages in the terminal stages of the disease. Tissues most seriously affected were oral, nasal and tongue mucosa, mandibular salivary glands, myocardium and epithelium of the forestomachs. The lesions resembled those of blue-tongue in deer.

Inoculation of domestic sheep with EHD virus-infected deer spleen tissues was without clinical effect. Blood collected from the sheep, representing the third blind passage of EHD virus in sheep, was not infective for deer.

     

2020年云南省边境地区牛蓝舌病血清学调查

为了解蓝舌病(bluetongue,BT)在云南边境地区的流行和分布情况,2020年采用竞争ELISA方法,在云南省边境地区12个县市随机采集135个养殖场、活畜交易市场和散养户的3800份牛血清样品进行蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)抗体检测。结果显示:12个边境县市均检出阳性血清样品,平均样品阳性率为77.9%,场户阳性率为93.3%;样品阳性率有一定的地区差异,其中陇川县最高(92.0%),孟连县最低(48.0%),差异存在统计学意义(P<0.05);境外牛血清样品阳性率(84.8%)显著高于本地牛(67.9%),P<0.05;不同饲养方式下的样品阳性率存在差异,其中舍饲最高(81.4%),半放牧半舍饲(62.5%)最低,P<0.05;黄牛样品阳性率(80.0%)明显高于水牛(61.4%),P<0.05。结果推断,BT在云南边境地区可能广泛存在且流行严重,需要持续开展血清学调查、监测,重点加强对境外牛的控制。本研究为我国西南边境地区BT防控提供了数据参考。     

BHV-1、BRSV、BPIV-3和BVDV四重荧光PCR检测方法的建立与应用

为建立检测牛疱疹病毒(BHV-1)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)单一或混合感染的荧光PCR检测方法,根据BHV-1 gB基因、BRSV F基因、BPIV-3 M基因和BVDV 5'UTR基因保守区序列分别设计特异性引物和TaqMan荧光探针,经条件优化,...     

贵州省部分规模化鸡场鸡白痢血清学调查

为了解贵州省规模化鸡场鸡白痢流行现状,2017—2019年选取31个规模化鸡场抽检1340份鸡血清样品,采用鸡白痢抗体平板凝集试验,结合鸡场生物安全措施及净化情况,开展了鸡白痢血清学调查.结果显示:鸡白痢平均场群阳性率为83.87％,个体阳性率为13.43％;商品场(15.24％)鸡白痢个体阳性率最高,与父母代鸡场差异...     

鹿流行性出血病病毒双抗夹心ELISA方法的建立

为建立鹿流行性出血病病毒(EHDV)病原学检测方法,用纯化的抗EHDV特异性单克隆抗体包被ELISA板,用兔抗EHDV IgG作为夹心抗体,IgG作为夹心抗体建立EHDV双抗夹心ELISA方法,并对该方法的特异性和敏感性进行了试验.用ELISA分别检测EHDV、蓝舌病病毒(BTV)、水疱性口炎病毒(VSV)、赤羽病病毒...     

青海省牛羊蓝舌病血清学调查

从青海省玉树、共和、格尔木、果洛、大通、祁连、德令哈、同德8个地区采集牛羊血清样品413份,应用琼脂免疫扩散法对蓝舌病进行了血清学调查。结果在被检的209份羊血清中,共检出阳性血清样品4份,平均阳性率为1.91%;而在被检的204份牛血清中则未检测到阳性样品。