苏芸金杆ＭＰ—３４２菌株发酵工艺技术

为了探索Ｂ．t．-342菌株的发酵工艺技术以便进行大规模批量生产，于１９９５－１９９７ 在湖北省农科院Ｂ．t．工发中心对ＢtMP-342菌株的发酵工艺技术进行了研究，，结果表明：采用ＭＰ－３４２菌株和ＹＭ－２Ｓ配方发酵生产液剂，原粉和高含量粉剂具有显著经济效益。ＭＰ－３４２菌株的发酵效价通常可达４０００１Ｕ／μ以上，采用离心－喷雾干燥工艺制备的ＭＰ－３４２原粉，其粉平均效价和晶体含量分别为５５７４４ＩＵ／μＬ和１０．４０％。原粉的物料收率平均为３．５％，效价和晶体平均总收率分别为４２．３０５和８３．３０５，喷雾干燥过程的效价和晶体损失率很小，分别 为９．２％和６．１％，ＭＰ－３４２原料贮存过程中性较好。彩和发酵液未经浓缩直价和晶体损失率很小。分别为９．２％和６．１％。ＭＰ－３４２原料贮存过程中稳定性较好，采用发酵液未经 缩直接喷雾干燥，可获得６６８００ＩＵ／mg的原粉，晶体含量为７．６％，原粉收率６．５％，含水量为９．４％，其效价收率和晶体收率分别为９５．７％和９９．８％，发酵液加６．８％ＣaCO3喷雾干燥。菌粉含水量４．５％，菌粉效价为３６１５３ＩＵ／mg，效价收率为１００．６％。晶体含量３．９％，晶体收率为１０１．７５。两种工艺的效价和晶体收率均达９５％以上，较离心工艺效价收率提高１倍，并报道了回收上清液增效物质的减压浓缩－喷雾干燥工艺、该工艺流程具有简较离心工艺效价收率提高１倍，并报道了回收上清液增效物质的减压浓缩－喷雾干燥工艺，该工艺。该工艺流程程具有简单，可操作性好，能耗较低等特点。增效粉对原粉肯很强的增效作用。当原粉和增效粉以１：１和１：２的比例混配时，增效倍数分别为２．７５和５．９６倍。     

拮抗链霉菌No.24菌株发酵条件优化研究

对1株拮抗链霉菌No.24菌株的发酵条件进行了初步研究,确定了其最佳培养基组成及培养条件。单因素发酵试验和正交试验结果表明,碳源以30g/L葡萄糖和30g/L小米最佳,有机氮源以10g/L黄豆饼粉最好,无机氮源以2g/L(NH4)2SO4最好,最适发酵时间为96h,最适发酵培养温度为32℃,最适初始pH值为7.2～7.4,最佳振荡频率为210r/min,装液量为40mL/250mL。     

不同菌株配伍摇瓶发酵蛋白酶的初探

探索产蛋白酶不同芽孢杆菌产蛋白酶的协同作用以提高发酵产物的蛋白酶活性.采取酪素平板初筛的方法,从分离的芽孢杆菌中筛选出产蛋白酶活性较高的菌株,再通过菌株两两配伍发酵和三者配伍摇瓶发酵培养,采用Foiln-酚法分别检测不同菌株配伍发酵产物的蛋白酶活性.酪素平板初筛结果表明,SH、TCP和B1 3株纳豆芽孢杆菌产蛋白酶活力高,SH和B1配伍发酵培养48 h后,酶活力比单菌株发酵分别提高了37.69%和59.23%.菌株之间的科学配伍在摇瓶发酵中能显著提高蛋白酶的活性.     

发酵猪血粉优良菌株的筛选

为了筛选到发酵猪血的优良菌株,利用平板划线法,从农村个体屠宰场土壤中分离获得了菌株B60,该菌株在以猪血为惟一氮源的培养基上生长旺盛且蛋白酶活力强,利用B60菌株发酵猪血粉,使猪血粉的蛋白质含量下降了44．8％,氨基酸态氮含量上升了8．25倍,可溶蛋白含量上升了190％,说明B60菌株是1株发酵猪血的优良菌株。     

拮抗菌株PM-1发酵条件研究

拮抗菌株PM-1对黄瓜灰霉病具有较好的抑菌效果,100μl发酵液对黄瓜灰霉病抑菌圈直径可达到30mm,菌株PM-1产抗生素最适培养条件为：接种量为装液量5％,28℃,240rpm、pH为7、装量体积为容器容积1／5以及发酵培养4d（96h）。     

拮抗青枯病90B4—2—2菌株模拟生产发酵工艺研究

90B4-2-2菌株的培养及最大菌落数产生的发酵模拟生产工艺条件，正交试验得到最适培养基碳、氮源组成为（%）黄豆饼粉1.0,淀粉1.5,酵母粉0.8;最适生长温度为30℃；pH7.0,接种量4%,在250mL三角瓶中装70mL培养基,200r/min摇床上培养35h,菌落数为6.69×10     

赤霉素高产菌株选育及其固态发酵研究进展

目前,工业大规模赤霉素生产采用液体深层发酵技术,但存在成本高、能耗大、环境不友好等突出问题。选育赤霉素高产菌株是提高赤霉素产量、降低生产成本的重要手段。同时,固态发酵技术以其独特优势在近30 a来重获关注,赤霉素固态发酵研究因此取得很大进展。综述了赤霉素产生菌的单一诱变、复合诱变、原生质体诱变手段,以及筛选稳定高产突变株的方法,总结了赤霉素固态发酵培养基种类以及固态发酵控制条件,并展望赤霉素固态发酵的巨大潜力。     

固态发酵玉米秸秆的菌株组合和发酵条件研究

为了提高玉米秸秆的综合利用效率,降低对环境的污染,保护生态环境,利用正交试验法研究了固态发酵氨化玉米秸秆生产饲料蛋白工艺中菌株组合、发酵温度和发酵时间对发酵产物真蛋白含量的影响.结果表明,发酵温度对发酵产物真蛋白含量具有显著影响(P<0.05),发酵时间、发酵温度与发酵时间之间的交互作用对发酵产物真蛋白含量具有极显著影响(P<0.01).最佳菌株组合为青霉和葱色串孢,最佳发酵条件为发酵温度25 ℃、发酵时间5 d.在最佳菌株组合和最佳发酵条件下,玉米秸秆经氨水氨化和固态发酵后真蛋白含量由2.05%提高到29.66%,比原料本身的真蛋白含量提高了13倍多;粗蛋白含量由2.80%提高到35.41%,比原料本身的粗蛋白含量高提高了11倍多.     

果胶酶G5512菌株深层液体发酵中试及提取工艺研究

以炭黑曲霉(Aspergilluscarbonarius)AS3.396的高产果胶酶突变株G5512为生产菌,在500L发酵罐中进行深层液体发酵中试。结果表明,在发酵过程中分别进行补料和调节pH,能大幅度提高酶活性;同时进行补料和调节pH,以高酯果胶为底物时发酵液最高酶活性可达1248.17U/mL,以低酯果胶为底物时达2235.75U/mL,分别较出发菌株提高了约2倍和11倍。通过试验,还确定了从发酵液中分离提取果胶酶的最佳工艺流程:发酵酶液→超滤→酒精沉淀→真空干燥,其酶活性回收率在以高酯果胶为底物时达到89.3%,以低酯果胶为底物时为80.3%。     

颉颃放线菌XA-1菌株发酵条件研究

对颉颃放线菌XA-1菌株的发酵条件进行初步研究,确定了其最佳发酵培养基组成及培养条件。当马铃薯淀粉为碳源、黄豆饼粉和蛋白胨混合为氮源时,发酵滤液的抑菌作用最强。选用优化的培养基组成,菌株XA-1的最佳发酵条件为26℃,120 r/min,培养基初始pH值为4.5,摇瓶装液量90 ml/250 ml,最佳发酵时间为88 h,培养96 h的种子液以10%的接种量转接有利于提高抑菌活性。经发酵培养基和发酵条件的优化,发酵液抑菌圈达到了34 mm以上,比原始发酵液抑菌圈增大了10 mm,获得了较多的抗生素产量。     

苏芸金杆菌MP-342IC-15工程菌构建

为了提高B.t.MP-342菌株对甜菜夜蛾的毒力,以B.t.MP-342菌株作亲株,根据MP-342菌株基因和毒蛋白的组成,采用重组DNA技术将对甜菜菜夜蛾高毒的CrylCa基因引入MP-342菌株,构建了工程菌B.t.MP-342IC-15工程菌.对该菌检测结果表明:MP-342IC-15工程菌表达两种Cry1类晶体蛋白,其分子量分别为135kD(CrylCa)和133kD(CrylAc),其CrylCa基因蛋白表达量占Cryl类晶体蛋白的35%和总晶体蛋白的29%.工程菌能良好表达CrylCa基因蛋白,且比例合适.据工程菌B.t.MP-342IC-15对甜菜夜蛾的生测表明.其毒力较亲株MP-342提高近1倍.对工程菌和亲株发酵上清液增效因子的增效活性进行了测定:工程菌上清液增效因子对小菜蛾具有一定增效作用;亲株上清液未显示对小菜蛾的增效作用.     

拮抗菌96-79发酵培养基的优化

以拮抗菌96-79为试验菌株进行发酵培养基的研究,比较不同碳、氮源对苹果褐斑病菌抑菌效果的影响,以便优化发酵培养基,降低发酵成本。通过L9(34)正交试验对碳氮组合进行优化,得到的优化培养基配方为:葡萄糖8 g/L、玉米粉15 g/L,黄豆饼粉15 g/L,发酵成本降低了33.7%,适合工业化生产。     

戊糖乙醇发酵菌种的选育及菌种特性的研究

[目的]选育能利用木糖产乙醇的菌株。[方法]从自然界中分离、筛选能够发酵戊糖产生乙醇的酵母菌株,并对所得菌株进行发酵性能研究。[结果]选出了1株能利用木糖产乙醇的菌株b-11。其特性研究结果表明,菌株b-11耐乙醇浓度为5%,对数生长期为12～18 h,在50 g/L的木糖发酵培养基中发酵48 h时乙醇浓度达到最高值3.105 9 g/L,木糖利用率达82.52%,糖醇转化率是理论转化率的16.36%。[结论]该研究为利用木质纤维素生产燃料乙醇提供了参考。     

黄麻链霉菌NF0919菌株发酵培养基的优化

以黄麻链霉菌(Streptomyces corchorusii)NF0919菌株发酵液对草莓炭疽病菌(Glomerella cingulata)的抑菌率为效价指标。通过单因素试验筛选出NF0919菌株发酵用最佳的碳源、无机盐和氮源,在此基础之上,再通过正交试验和二次通用旋转组合设计试验,对NF0919菌株发酵培养基进行优化。结果表明:与发酵初始培养基相比,优化后得到的最佳培养基发酵液对草莓炭疽病菌的相对毒力效价提高了13.77倍。筛选得到的最佳发酵培养基组成为:10.2%马铃薯淀粉、2.6%棉籽蛋白、0.1%CaCO3、0.05%K2HPO4、0.05%MgSO4。     

发酵条件对生防细菌B301生长及抑菌物质产生的影响

为明确生防细菌B301菌株的发酵条件对菌株繁殖及产生拮抗物质水平的影响,研究了发酵时间、温度、pH值、碳源、氮源及通气量对B301的繁殖量及抗菌物质产生量的影响作用。结果表明:生防细菌B301发酵适宜温度为28℃,在该温度下发酵3 d达到菌体最大数量,抑菌效价在发酵5 d后最高;pH值为7是适宜菌株生长繁殖的酸碱环境,并且在该条件下抑菌物质效价最高,蔗糖、葡萄糖和蛋白胨分别是最适合菌株生长及产生抑菌物质的碳源和氮源;加大通气量能更好地促进B301的繁殖及抑菌物质的分泌。     

产纤维素酶菌株B.subtilis SD-76产酶条件的优化

[目的]探讨培养基起始p H、碳源、氮源和发酵温度对高产纤维素酶菌株B.subtilis SD-76产酶的影响。[方法]通过正交分析确定菌株B.subtilis SD-76产纤维素酶(CMCase)的最佳培养条件。[结果]菌株B.subtilis SD-76产酶的最佳培养条件:培养基初始p H 6.8;培养基稻草粉浓度3.0 g/L;硫酸铵浓度3.5 g/L,发酵温度32℃。在最佳培养条件下,该菌株的CMCase活力达到462.34 U。[结论]为提高B.subtilis SD-76产纤维素活力和该菌株的工业产酶生产提供一定的参数和应用依据。     

放线菌GZ933菌株代谢产物的抗菌活性研究

[目的]对GZ933菌株发酵产物的杀菌活性进行了离体测定。[方法]采用抑制菌丝生长速率法和孢予萌发法测定菌株发酵产物对植物病原茵的生物活性。[结果]GZ933发酵产物对油莱菌核病菌、辣椒疫霉病菌、番茄灰霉病菌菌丝生长的EC50分别为183,96、128．43eh,117．39mg／L;对葡萄白腐病菌和黄瓜霜霉病菌孢子萌发的EC5。分别为133．46和188．73mg／L。[结论]GZ933菌株对许多植物病原菌具有较好的抗茵活性,有很高的推广和应用价值。     

放线菌Y23菌株发酵液抗菌活性及稳定性测定

从山东临沂、日照等主产烟区烟田采集病株根际土壤,分离到一株有抗菌活性的放线菌Y23,经初步鉴定为链霉菌（streptomyces sp．）。分别采用抑制菌丝生长速率法和琼脂扩散法测定了Y23菌株发酵液对15种病原真菌、3种病原细菌的抗菌活性。结果表明,Y23菌株发酵液对3种供试真菌的菌丝生长抑制率达60％左右,占供试真菌数的20％;琼脂扩散法生测结果表明,Y23菌株发酵液只对布克氏杆菌有抑制作用。对Y23菌株发酵液的稳定性测定结果表明,发酵液低温贮藏效果好,对热、酸碱及紫外光照稳定性较强,对日光稳定性较差。     

L-苏氨酸摇瓶发酵工艺的研究

采用L-苏氨酸基因工程菌FCD13进行摇瓶发酵工艺的研究,经研究表明,种子培养基配方对发酵有较大影响,最佳种子培养基配方为:蔗糖30.0(g/L)、碳酸钙35.0(g/L)、硫酸铵10.0(g/L)、磷酸二氢钾2.0(g/L)。最优的摇瓶发酵条件为:250mL三角瓶中装液量为20mL;接种量5%;摇床温度37℃;摇床转速240 r/min。     

植酸酶产生菌的选育及产酶条件研究

从不同来源的样品中分离筛选出1株热稳定性较好的植酸酶产生菌株X19,初步鉴定为Aspergillus.sp。对其进行诱变育种获得热稳定性和酶活均得到提高的正突变株A73,所产植酸酶在90℃下作用10 min,酶活仍保留93%。对菌株A73的最适液体培养基的组成和发酵条件的研究结果表明:培养基的最佳配比为6%玉米淀粉,1.0%葡萄糖,1.0%NaNO3,0.005%KH2PO4,0.05%MgSO4.7H2O,0.05%KCl,0.001%MnSO4.4H2O和0.001%FeSO4.7H2O;最佳培养条件为初始pH值5.5,培养温度28℃,摇床转速200 r/min,发酵时间96 h。在该条件下,摇瓶发酵酶活达到2 186 U/ml。