桉树叶片双向电泳体系的建立及优化

对桉树(Eucalyptus spp.)叶片蛋白质的提取方法、溶解方法、溶解条件和上样量进行了优化.结果表明,TCA/丙酮沉淀/苯酚抽提法是桉树叶片蛋白质样品制备的最优方法;裂解缓冲液Ⅰ(7 mol·L-1尿素+2 mol·L-1硫脲+0.04 g·m L-1CHAPS+60 mmol·L-1DTT+0.5%(体积分数)IPG Buffer)可保证蛋白质样品的溶解,较适用于桉树叶片蛋白裂解;对于18 cm、p H 4-7的线性胶条,当每根胶条上样量为50μg时,采用银染可得到质量较高的2-DE图谱.     

ALA对辣椒低温胁迫下伤害的缓解效应

为了探明5-氨基乙酰丙酸(ALA)对缓解辣椒不同低温胁迫下伤害的作用及其机制,以较耐低温的辣椒品种超越五号为试材,研究了叶面喷施ALA对冬春季不同低温胁迫下辣椒花期植株叶片中渗调物质含量、超氧阴离子(O.2-)产生速率、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、电解质渗透率(EL)、丙二醛(MDA)含量、植株光合特性及生长的影响。结果表明,叶面喷施25 mg/L ALA后,明显提高了低温胁迫下辣椒叶片脯氨酸、可溶性蛋白质和可溶性糖的含量以及SOD、POD、CAT的活性;同时ALA也提高了低温胁迫下辣椒叶片叶绿素含量、净光合速率以及植株生长量,显著降低了叶片中电解质渗透率和MDA含量以及O.2-的产生速率。说明,ALA通过提高低温胁迫下植株叶片中渗透调节物质含量和抗氧酶活性,从而降低植株叶片中活性氧的含量,维持膜系统的稳定性;同时通过促进叶绿素的合成,增强植株叶片的光合作用,促进植株生长,从而缓解了辣椒受到的低温伤害。但不同低温胁迫下ALA的缓解程度有显著差异,并且随着温度的降低,其缓解程度降低。     

百子莲茎尖分生组织蛋白双向电泳体系的建立

以‘蓝色大花’百子莲(Agapanthus praecoxssp.orientalis‘Big blue’)茎尖分生组织为材料,对比研究了不同提取与裂解方法制备蛋白样品以排除多酚、多糖及核酸物质对蛋白双向电泳体系(Two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)的干扰。提取过程采用TCA/丙酮沉淀法和超声波破碎法;蛋白裂解过程中分别使用苯甲基磺酰氟(Phenylmethanesulfonyl Fluoride,PMSF)和乙二胺四乙酸(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid,EDTA)、Cocktail(广谱性)蛋白酶抑制剂、核酸酶Nuclease Mix和2-D Clean-Up蛋白纯化试剂盒。制备的各蛋白样品经过7cm IPG(pH 3~10)胶条上样、电泳后发现,使用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白,裂解液中加入Cocktail蛋白酶抑制剂裂解后,用2-D Clean-Up试剂盒所制备的样品其双向凝胶电泳图谱效果最好,获得蛋白点数量最多,且蛋白等电点pI主要分布于4~8之间。随后,应用分辨率更高的24cm IPG(pH 4~7)胶条进行电泳效果的验证,蛋白点在凝胶的2个方向上均得到了较好地分离,经过ImageMaster 2-D Platinum5.0软件分析后共检测到有效蛋白点820个。本研究初步建立了百子莲茎尖分生组织蛋白双向凝胶电泳体系,为后续开展百子莲属植物蛋白质组学研究提供了重要的技术保障。     

根际浇灌ALA溶液对苹果叶片生理特性与果实品质的影响

为了探讨5-氨基乙酰丙酸(ALA)在苹果生产上有效的使用方法,本研究以秦阳品种为材料,设置0.1 mg/L、1.0 mg/L和10.0 mg/L 3个浓度,以清水为对照,从4月底到6月底,每月根灌1次ALA溶液,分析不同处理对苹果叶片叶绿素含量、叶绿素快速荧光特性、活性氧代谢、矿质营养元素以及果实品质的效应。结果表明,根灌ALA溶液可以显著提高苹果叶片叶绿素含量、光合能量转换效率和抗氧化酶活性,缓解活性氧伤害,降低叶片中P、K、Na等元素含量,增加Ca、Mg、Fe、Cu、Zn等元素含量,提高果皮花青苷含量和果肉可溶性糖含量等品质指标。以上结果说明,根际浇灌ALA可以有效影响到叶片叶绿素含量和叶片光合能量转化效率,并最终改善果品品质。与叶面喷施不同的是,根际浇灌可以避开叶面喷施对果袋对药液的阻碍,因而,ALA溶液根灌可以在不解袋的苹果生产中也推广应用。     

小麦基础日粮添加酶制剂对断奶仔猪生长、代谢和血液IL-2水平的影响

在小麦基础日粮中添加酶制剂 ,研究其对断奶仔猪生长、代谢和血液IL 2水平的影响。试验将 4 8头杜洛克×大约克×二花脸三元杂交断奶仔猪分为玉米基础日粮组 (Ⅰ )、小麦基础日粮组 (Ⅱ )和小麦基础日粮添加 0 0 17% (质量分数 )酶制剂组 (Ⅲ )。预试期 4d ,正试期 2 8d。结果表明 ,Ⅰ组较Ⅱ组仔猪日增重提高 4 0 % (P>0 0 5 ) ;Ⅲ组较Ⅱ组仔猪日增重提高 7 6 % (P <0 0 5 ) ,但对仔猪饲料转化率无明显影响。Ⅰ组与Ⅱ组相比 ,仔猪血液尿素氮含量极显著降低 (P <0 0 1) ,T4含量显著升高 (P <0 0 5 ) ,其他指标变化不显著 ;而Ⅲ组较Ⅱ组仔猪血液尿素氮含量、T4和IL 2含量显著升高 (P <0 0 5 ) ,血糖和T3 含量有上升趋势 ,胰岛素 (Ins)含量却略有下降。结果提示 ,小麦日粮添加酶制剂可以显著提高仔猪增重 ,甚至超过玉米日粮 ;酶制剂可以通过影响仔猪代谢和免疫而促进仔猪生长     

甘蓝型油菜显性核不育双低杂交种核杂7号的选育

在纯合两型系48AB中选择硫甙含量低的可育株进行连续自交并淘汰育性分离的后代。当硫甙含量稳定在较低水平时,在有育性分离的后代中重新选可育株和不育株进行兄妹交,使纯合两型系的性状尽早稳定,由此育成双低纯合两型系72AB。对恢复系进行配合力测定,获得一般配合力最高的双低恢复系HF02。通过双低纯合两型系72AB和临保系LB03配制全不育系,并用全不育系和恢复系HF02生产杂交新品种核杂7号。它成为我国第一个通过国家品种审定的双低显性核不育三系杂交种。