四种检测番鸭细小病毒抗原方法的比较

用ＬＰＡ、Ｖ少ＥＬＩＳＡ四种方法平行检测了９羽人工感染鸭和用ＬＰＡ、ＶＩ及ＦＡ三种方法平行检测了２８羽野外送检鸭肝、脾及肝和脾混合组织中ＭＰＶ抗原,结果显示：ＬＰＡ、ＦＡ和ＥＬＩＳＡ均有很强的特异性;四种方法对人工感染鸭ＭＰＶ抗原的检出率均在８８．９％以上,任何两种方法之间检测结果的条例率均在８８．９％以上,无显著性差异（Ｘ＾２检验,Ｐ〉０．０５）;三种方法中两两之间检测野外送检鸭ＭＰＶ抗原结果的     

雏番鸭细小病毒检测方法的研究进展

雏番鸭细小病毒病是由雏番鸭细小病毒感染引起的一种急性、败血性传染病.除常规的临床症状及病理变化诊断外,雏番鸭细少病毒病的确诊依赖于实验室诊断方法,主要有病毒分离和鉴定、血清学试验、免疫学试验、分子生物学方法等.作者从传统的实验室检测方法和分子生物学检测方法两个方面综合阐述了雏番鸭细小病毒的检测方法研究进展,为雏番鸭细小病毒病的临床快速诊断和深入研究提供科学依据.     

两种方法检测雏番鸭细小病毒抗体效价的比较

本文对检测雏番鸭细小病毒抗体效价的LPAISN两种方法进行比较,现报道如下:1材料与方法1.1病毒和血清:番鸭细小病毒福州株(MPV-F),鸭细小病毒阳性血清、阴性血清和单抗致敏的胶乳由本室提供。雏番鸭细小病毒活疫苗也由本室提供。1.2试验鸭及疫苗免疫1日龄雏番鸭45羽购自田县,分别腿部肌肉注射2001、2003和2005批号疫0.2ml。每批号疫苗注射15羽。隔离饲养15天后,心采血,分离血清。每批次随机抽取5份血清,56℃水灭活30min后供测试。1.3胶乳凝集抑制试验(LPAI):参照程由铨的方法取被检血清50μl加入第一孔(4单位抗原孔)中,混后取50μl加入…     

雏番鸭细小病毒病的研究进展

本文对雏番鸭细小病毒病的临床症状、危害、病原学、疾病的诊断和防制等方面的研究进展进行了综述,重点介绍了该病的特征和病原的生物学特性,并对番鸭细小病毒新的研究方向做出了展望。     

雏番鸭细小病毒病显微和超微结构研究

应用光镜和电镜技术研究了人工感染雏番鸭细小病毒病死鸭的心、肝、脾、肺、肾、胰、法氏囊和大脑等8种器官的显微结构和发病鸭的心、肝、脾、肺、肾、胰等6种器官的超微结构变化。结果如下：1．显微结构变化主要表现为：各器官的血管扩张、充血，以肺脏尤为严重，并见少量淋巴单核细胞浸润，同时心、肝、肾、胰和大脑均呈现不同程度的变性；而免疫器官脾、法氏囊则主要表现为淋巴细胞数量减少。2．超微结构变化主要表现为：（1）各实质细胞内线粒体肿胀，嵴变少而或崩解，内质网减少，脂滴增多，部分细胞水肿坏死；（2）血管内皮均有不同程度的脂滴增多，水肿以至脱落；（3）吞噬能力加强，表现为细胞内次级溶酶体增多，吞噬细胞数量增加，其胞浆内含大量的吞噬体。     

应用琼脂免疫扩散试验检测番鸭细小病毒抗体

将分离的番鸭细小病毒通过正常发育的番胚传代,分别取不同代次的病毒尿囊液经氯仿、聚乙二醇浓缩处理后制成不同代次的抗原。该抗原与抗番鸭细小病毒抗血清在含有２０ｇ／ＬＰＥＧ６０００的琼脂平板上作用,可见有明显的沉淀线。     

雏番鸭细小病毒和小鹅瘟病毒特性比较及二联活苗的应用

三周龄以内的雏番鸭常由雏番鸭细小病毒和小鹅瘟病毒引起的疫病，其发病率和死亡率较高。自1985年以来，在福建、广东、广西、浙江、江西、江苏、山东等省先后发生流行，对养番鸭业危害极大。1988年国内一些学者进行番鸭细小病毒分离与防治研究。法国学者报道了1989年在法国两个地区爆发雏番鸭细小病毒病，并从病群中分离到NX3和GM两个毒株进行部分特性的研究，数年来，在流行的疫区应用小鹅瘟免疫血清和活疫苗进行免疫有保护率。在此基础上，我们于1991年从患病雏番鸭分离到一株病毒(代号为M91)，进行与GPV之间的相关性和差异性研究，为本病的防制提供科学依据。     

雏番鸭细小病毒病研究进展

雏番鸭细小病毒是由雏番鸭细小病毒引起幼龄番鸭的一种新的番鸭疫病。该病于１９８０年在中国首次报道。本病因日龄不同而异,３周龄以下的雏番鸭主要是急性感染,主要症状是喘气、厌食、腹泻、脱水、迅速消瘦、死亡率高,特征病变是胰炎、肠炎和肝炎。３周龄以上的番鸭主要是慢性感染。雏番鸭细小病毒怀小鹅瘟病毒均属于细小病毒科,其理化特性和基因组结构非常相似,常规的病毒分离和血清学诊断方法不能区分雏番鸭细小病毒与小鹅瘟     

雏番鸭细小病毒和传染性法氏囊病病毒混合感染的检测

2017年12月,广西某番鸭养殖场的鸭群出现生长缓慢,临床表现软脚,拉白色粪便的腹泻并伴有一定的神经症状等;剖检可见肝脏肿大出血、腹腔有纤维素性渗出物、肠黏膜有不同程度的充血,法氏囊萎缩等病变;于20日龄开始发病,30日龄送检时发病率20%、死亡率10%。无菌取番鸭的病变组织,分别进行番鸭细小病毒(MDPV)和传染性法氏囊病病毒(IBDV)的核酸特异性检测,结果均呈阳性,并成功分离到一株番鸭细小病毒(命名为MDPV GX1712)和一株传染性法氏囊病病毒(命名为GL1712);基因序列分析结果显示,分离株GX1712与GX5、P 1988、 SAASSHNH等MDPV参考株的亲缘性最近,相似性高达98.5%～99.1%,在进化树中处同一个分支,并且与疫苗株FZ91-30亲缘性相距较远,表明该分离株为MDPV野毒株;基于VP1-b序列分析IBDV分离株GL1712与中国新型超强毒株HLJ0504同属HLJ0504-like cluster,而基于vVP2序列则与中等偏强毒力参考株同属C2-intermediate IBDV genotype,为基因重排毒株。根据发病日龄、临床症状、病理剖检和实验室诊断,确诊该临床发病番鸭群混合感染了番鸭细小病毒和传染性法氏囊病病毒。     

番鸭细小病毒琼扩抗原研制及初步应用

应用番鸭细小病毒鹅胚适应毒Ｍ９１毒株接种易感鹅胚,收获鹅胚尿囊液毒经浓缩后制成琼扩抗原。此抗原与抗番鸭细小病毒免疫血清和鹅细小病毒免疫血清有共同交叉反应并成功应用于番鸭细小病毒疫苗的免疫检测。     

雏番鸭疑似细小病毒病的诊断与防治

近年来,番鸭发展很快,继而经常出现一种雏鹅、雏番鸭均易感的德兹西氏病(国外病名)其病原均为细小病毒.福建农学院1990年首先发表了雏番鸭小鹅瘟的诊断报导.目前,浙江省各地均有发生,余姚市某番鸭养户,于1991年连续饲养番鸭三群计2000余只,均在11-30日龄发病.金华县曹宅镇有番鸭饲养户20余户,1992年5-7月份暴发本病,每户均受不同程度病害.对8户12批3717只雏番鸭疫情调查,均在20-25日龄发病,其死亡2301只,平均死亡率为61.     

番鸭细小病毒分离鉴定

采集以腹泻、呼吸困难为主要症状的雏番鸭肝、脾病料,接种１４日龄非免疫番鸭胚,８０％胚在３－７天死亡,胚体呈弥漫性充血、出血。接种番鸭胚成纤维原代细胞７２小时可见细胞圆缩、聚团等变化。聚苯乙烯乳胶凝集试验呈阳性,提取病毒接种细胞及尿囊液 ＤＮＡ,用自行设计引物扩增到与设计相符的 ６００ｂｐ片段,克隆至 Ｔ载体,经酶切及序列分析表明我们所分离到的病毒为雏番鸭细小病毒（Ｍｕｓｃｏｖｙ　 Ｄｕｃｋｉｌｉｎｇ　 Ｐａｖｏｖｉｒｕｓ,ＭＰＶ）。     

番鸭三种细小病毒多联PCR检测方法的建立与初步应用

根据GenBank中番鸭"三周病"病毒(MDPV)、小鹅瘟病毒(GPV)的NS基因和VP基因,以及华南农业大学禽病组分离到的细小病毒型"白点病"病毒(MDWNV)的NS和VP基因序列,设计3对特异性引物,并在建立单项PCR技术的基础上,优化多联PCR反应条件(EX-Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度以及退火温度等),建立了MDPV、MDWNV和GPV三种病毒的多联PCR检测方法。本研究结果表明,该番鸭三种细小病毒多联PCR检测方法具有特异、快速、准确、敏感的特点,能同时鉴别诊断这三种番鸭细小病毒,并可直接应用于临床典型病变组织的检测。     

安徽番鸭细小病毒的分离和PCR检测

为研究安徽省番鸭细小病毒遗传变异状况,通过番鸭胚接种分离了安徽流行株,并进行PCR检测。将扩增基因序列AH-MDPV-1和AH-MDPV-2在NCBI数据库中进行相似性搜索比对,结果显示,两者与番鸭细小病毒基因同源性均大于99%;与鹅细小病毒基因同源性分别介于79%~90%和78%~81%之间。进一步将AH-MDPV-1与7条参比的细小病毒基因序列进行比对,可见番鸭细小病毒的该部分基因相对较为保守,而与鹅细小病毒基因相应区域具有明显差异,表明该基因特异性较强,可以作为番鸭细小病毒的鉴定依据。同时可判定该病毒分离株为番鸭细小病毒。     

雏番鸭细小病毒病快速诊断方法的建立

番鸭三周病、番鸭细小病毒型“白点病”以及番鸭小鹅瘟在临床上发病日龄非常相似,也是各个养鸭场经常出现的疾病,它们有时会出现混合感染或继发感染,给诊断带来了困难。针对这种情况,本文通过对三周病病原、番鸭细小病毒型“白点病”病原以及番鸭小鹅瘟病原核酸的分析比较,在三周病病原的特异性区域设计了一对特异性引物,通过PCR检测,能够快速、准确的诊断出雏番鸭细小病毒病。     

雏番鸭细小病毒病研究进展

雏番鸭细小病毒病，俗称“三周病”，是由番鸭细小病毒(Mscovy Duck Parvovirus,MPV)引起的以腹泻、喘气和软脚为主要症状的一种新的疫病。特征病变是胰腺炎、肠炎和肝炎。多发生于1～3周龄雏番鸭。该病由我国林世棠等(1980)首次报道，当时主要发生于福建省莆田县的一些禽场和专业户饲养的雏番鸭群。1985年以后，福建省的仙游、安溪、福州和闽候等地区也发生了类似的疾病。程由铨等分别从福州和莆田病死鸭的肝、脾等组织中分离到两株病毒，根据病毒的形态结构、理化特性、血清学鉴定和动物回归等试验确定本病的病原是细小病毒科的一个新…     

鹅细小病毒和番鸭细小病毒双重PCR检测方法的建立

根据GenBank上登录的鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)基因序列,分别设计合成针对GPV非结构蛋白(NS)和MDPV NS2-VP1基因片段的2对引物GPV U/L和MDPV U/L,将GPV和MDPV提取核酸混合后作为模板,优化PCR反应条件,建立了能同时检测这2种病毒的双重PCR。特异性试验结果显示,引物GPV U/L仅特异性扩增出GPV-GZ1和GPV-GZ2株730bp核酸片段,引物MDPVU/L仅特异性扩增出MDPV的624bp核酸片段,双重PCR扩增出长度分别为730bp和624bp的2条特异性片段,而扩增鸭瘟病毒(DPV)和鹅副黏病毒(GPMV)的核酸扩增结果均为阴性。敏感性试验结果显示,双重PCR能同时检测到14.4pg的GPV核酸和28.8pg的MDPV核酸。结果表明,建立的双重PCR可用于GPV和MDPV的鉴别诊断和联合检测。