猪胚胎手术法移植试验报告

胚胎移植于1890年首先在兔体获得成功,猪的胚胎移植开始于50年代初。1975年Curnock等人首次报道了猪胚胎移植技术的实际应用,从此,猪胚胎移植技术作为试验手段应用于猪的繁殖生理和早期妊娠的各项研究。国内猪胚胎移植研究的报道很少。为了加快我省养猪事业的发展,我们于1986年首次进行了猪胚胎手术法移植试验,并获得成功。材料与方法一、试验药品及冲卵液     

KF-1型牛胚胎移植器的研制及移植

我国自1975年开展牛胚胎移植技术的研究以来,虽已先后获得新鲜胚胎及冷冻胚胎移植成功,但移植成功事均偏低。据1985年全国牛胚胎移植试验材料统计,新鲜胚胎移植成功率平均为23.8%(32/160),冷冻胚胎的移植成功率平均仅为9.6%(5/52)。移植成功率低的主要原因之一,是我国还没有定型的配套牛胚胎移植器械,非手术移植胚胎时,很难将胚胎放置在子宫最适部位,并易造成胚胎丢失和子宫环境的感染。因而,移植后可能造成部份胚胎的早期死亡。     

影响山羊胚胎移植效果的因素初探

为探讨最佳的胚胎移植方案,提高胚胎移植效率,试验以不同受体山羊为研究对象,比较了不同受体品种、移植胚胎数目、不同季节等因素对胚胎移植效果的影响。结果表明:不同品种受体和移植季节对胚胎移植效果影响不显著(P>0.05);胚胎移植数目对妊娠率没有显著影响(P>0.05),但移植一枚胚胎的胚胎受孕率显著高于移植二枚和三枚胚胎(P<0.01)。     

胚胎移植方法和受体母猪因素对克隆猪生产效率的影响

【目的】建立高效的胚胎移植技术体系,以提高克隆猪的生产效率。【方法】比较不同移植方法和不同受体母猪状况的胚胎移植分娩率和克隆猪的出生效率,利用体外发育能力相似的不同品种和发育阶段的克隆胚胎混合移植确定最佳的受体母猪发情同期时间。【结果】克隆胚胎经由输卵管伞移植比输卵管打孔移植具有更高的移植分娩率和克隆猪效率（2.2% 和0.4%,P＜0.01）,而胚胎移植后辅助人工授精会降低克隆效率（0.6% 和 2.2%,P＜0.01）。利用经产母猪作为移植受体比青年猪受体具有更高的克隆效率（3.0%和0.8%,P＜0.01）和平均窝产仔数（（5.5±0.7）头和（2.7±0.3）头,P＜0.05）。受体母猪发情时间比胚胎激活时间晚12-36 h组的克隆效率分别为显著（P＜0.05）和极显著（P＜0.01）,高于晚0 h和早12-24 h 组的克隆效率（2.0%、0.5%和0%）。最佳的受体母猪发情时间为晚于克隆胚胎激活后24 h,克隆效率达3.0%。【结论】选择自然发情时间晚于克隆胚激活后24 h的经产母猪为受体,通过输卵管伞端移植胚胎,能够获得较高的克隆效率,是猪克隆胚胎移植的较理想方法。     

异体颗粒细胞线粒体移植对牛孤雌激活胚胎发育的影响

为了探讨线粒体对孤雌激活胚胎发育潜能的影响,比较了异体颗粒细胞线粒体移植的牛孤雌激活胚胎、胚胎培养液移植的孤雌激活胚胎和正常孤雌激活胚胎的发育情况。结果表明,异体颗粒细胞线粒体移植组和胚胎培养液移植组的牛孤雌激活胚胎的激活率差异不显著(P>0.05),但均显著低于正常激活组(P<0.05);异体颗粒细胞线粒体移植组与正常激活组的孤雌激活胚胎卵裂率差异不显著(P>0.05),但均明显高于胚胎培养液移植组(P<0.05);异体颗粒细胞线粒体移植组的孤雌激活胚胎桑椹胚率极显著高于胚胎培养液移植组和正常激活组(P<0.01)。可见牛异体颗粒细胞线粒体移植可改善牛孤雌激活胚的发育。     

黄牛受精卵移植试验

受精卵(胚胎)移植技术的成功,为提高优良母畜的繁殖力开辟了新的途径。目前这一技术已成为现代家畜繁殖科学研究中的主要内容。近三十年来,国外这方面研究进展很快,猪、羊、牛、马的胚胎移植相继获得成功。从七十年代起受情卵移植技术已应用于肉牛业(诱产双胎),有的国家成立了胚胎移植的专门机构,我国1973年绵羊胚胎移植获得成功。据最近报导,1977年我国乳牛胚眙移植也获得成功,黄牛(肉牛)胚胎移植,也正在进行试验。为了加速我国这一技术的进展,尽快用于我国的肉牛业,1978年我们对黄牛超数排卵、受精卵采集和移植等技术进行了试验。     

绵羊体外胚胎对移植受胎率及后代生长性能的影响

【目的】为了在不影响后代生产性能的基础上最大限度地提高体内、体外胚胎移植效率,从而为体外胚胎在生产中的应用奠定基础。【方法】从移植胚胎数量方面着手,比较其对体内、体外胚胎移植受胎率和产羔率的影响;并以常用的胚胎移植作为对照,研究体外胚胎与其生产效率存在的差距;并对不同来源的后代生产性能进行测定,对比体外胚胎在生产中的生产效率。【结果】(1)移植2枚体外早期胚胎的受胎率(60.42%)显著高于移植1枚胚胎的结果(48.54%)(P0.05),前者的产羔率也极显著高于后者(74.68%vs 41.96%,P0.01);(2)移植单枚体外胚胎的受胎率和产羔率皆显著低于体内胚胎(P0.05);(3)受体移植双枚体内或体外胚胎,受胎率和产羔率都没有差异(P0.05)。(4)体外胚胎移植后代的公羔比例与体内胚胎没有差异,但显著高于自然繁殖(P0.05)。(5)体外胚胎的后代虽然初生重要显著低于体内胚胎(4.98 vs 6.2,P0.01),但其3月龄体重和存活率与体内胚胎后代皆没有差异(P0.05),且与自然繁殖组间都没有差异(P0.05)。【结论】相对于早期胚胎,体外胚胎移植2枚,体内胚胎移植1枚的生产效率较高。并且对后代生产性能没有影响。     

微滴中胚胎数量对猪孤雌胚早期体外发育的影响

[目的]优化猪早期胚胎培养体系,为单精子显微受精及体细胞核移植等研究提供依据。[方法]以猪的早期孤雌胚胎为材料,分别将人工激活后的70、50、30、15和5枚卵母细胞放入100μlNCSU-23培养液的微滴中进行培养,探讨了胚胎培养数量对猪早期孤雌胚发育的影响。[结果]100μl的培养微滴中培养30、50和70胚胎组,其分裂率分别为64.0%、65.2%和67.1%,显著高于5胚胎组,而与15胚胎组的差异不显著 在囊胚率方面,70胚胎组的最高,为3.0%,与50胚胎组的（1.7%）无显著差异,与5、15和30胚胎组的差异显著 各组的囊胚细胞数之间没有显著差异。[结论]在该研究条件下,当微滴体积为100μl时,培养50~70枚猪孤雌胚胎的效果最好,即,胚胎数∶培养滴体积=（1∶1.43~2.00）。     

黑龙江省科技进步一等奖 东北民猪体细胞核移植及绿色荧光蛋白转基因猪研究

<正>主要研究内容包括:1、猪卵母细胞体外成熟培养体系;2、东北民猪、大白猪和哈白猪体细胞采集培养和冷冻保存;3、绿色荧光蛋白基因转染体细胞及筛选:4、体细胞核移植胚胎的构建和体外发育;5、绿色荧光蛋白转基因阳性细胞核移植、体外胚胎发育以及外源基因表达检测;6、受体猪选择、移植前处理、胚胎移植及妊娠受体猪管理。     

牛胚胎移植技术

胚胎移植是一项动物细胞工程的实用技术,这项技术是将1头良种母畜的早期胚胎取出,移植到生殖生理状态相同的母畜体内,使胚胎在其体内继续发育至胎儿出生,胚胎移植实际上就是产生胚胎的供体和养育胚胎的受体分工合作共同繁殖后代。采用胚胎移植技术可充分发挥优良母牛的繁殖潜力,提高母牛的繁殖力,缩短家畜的改良周期,加     

科苑荟萃

云南水牛的同期发情、超数排卵和胚胎移植试验；无角道塞特绵羊超数排卵技术研究；胚胎移植技术在云南半细毛羊上的应用研究；受体品种、体重及移植季节对杜泊羊胚胎妊娠率和新生羔羊体重的影响；波尔山羊胚胎徒手分割试验；波尔山羊胚胎回收和移植器械研制与应用；OPS法玻璃化冷冻绵羊胚胎的移植效果观察；影响绵羊、山羊超数排卵及胚胎移植效果因素分析；安胎散提高羊胚胎移植受胎率及其机理的研究；[编者按]     

育成波尔山羊的胚胎移植

通过选取育成波尔山羊进行胚胎移植，旨在探讨育成波尔母羊提供胚胎的质量、数量和年龄，供受体发情同步差，移植胚胎数等对胚胎移植成功率的影响因素分析，进一步开拓胚胎移植的技术应用研究。     

小鼠非手术胚胎移植方法

<正>小鼠作为发育和生殖生物学研究中最常见的模式动物,其研究的主要环节离不开胚胎移植技术。小鼠非手术胚胎移植法是将供体小鼠的胚胎经子宫颈移植到受体小鼠子宫内的一种移植方法。它与手术法相比,简单快捷,对小鼠的损伤小,大大简化了胚胎移植的操作过程。早在1951年,R.A.Beatty首先对动物非手术胚胎移植法进行了报道,随后L.Marsk、T.     

牛胚胎移植技术推广应用注意事项

<正>牛胚胎移植是将一头良种母牛配种后的早期胚胎取出,移植到另一头同种生理状态相同的母牛体内,使之发育成为一个个体的技术,所以又叫借腹怀胎。提供胚胎的个体叫供体,接受胚胎的个体叫受体。胚胎移植技术在种公畜的选育和优质核心母畜群的培育以及加快育种步伐方面均具有极大的优越性。优良的受精卵、受体牛、技术人员是取得较高移植受胎率的决定性因素,而受体牛组织、受体牛条件成为制约胚胎移植工作的主要因素。复杂的组织工作和受体牛的低可用率     

我国移植波尔山羊胚胎获成功

我国首例波尔山羊胚胎移植在山东省无棣县良种畜禽繁育场获成功。这次波尔山羊胚胎移植 ,采用国内先进的药物超数排卵技术 ,在一只纯种波尔山羊供体内 ,一次性采集胚胎 37枚 ,其中可用胚胎 2 9枚 ,并顺利移到当地 2 1只山羊腹中。这次胚胎移植创下了我国胚胎移植中一次性采集胚胎数量最多、成功率最高的新记录。(摘自《四川畜牧兽医》2 0 0 0年第 2期 )我国移植波尔山羊胚胎获成功     

奶牛胚胎移植实用技术的研究

我们于１９９６年至１９９７年进行了奶牛胚胎移植实用技术的研究。三年共移植奶牛胚胎１３７枚,受胎率为３５．７７％,移植Ａ级胚胎的受胎率为７０％,移植Ｂ级胚胎受胎率为４３．０２％,移植Ｃ级胚胎的受胎率为１２．１９％,移植Ａ级胚胎的受胎率比移植Ｂ级胚胎受胎率高２６．９８％;移植Ａ组胚胎的受胎率分别比移植Ｃ级胚胎受胎率有５７．８１％和３０．８３％。     

牛胚胎移植技术中供受体牛的同期发情技术

动物胚胎移植在一个世纪前已试验成功,近些年来才在畜牧生产中作为提高母畜繁殖力的一项新技术而在实际中应用。20世纪60年代以来,对家畜胚胎的采集、保存和移植等技术环节进行了大量试验,取得不少进展。20世纪70年代以后,牛的胚胎移植已经有许多发达国家进入了商业生产阶段,成为一种常规的繁殖手段。我国进入20世纪70年代开始牛胚胎移植的研究工作,也已取得较大的成功。胚胎移植是将一头良种母畜的早期胚胎取出,移植到生殖生理状态相同的母畜体内,使胚胎在其体内继续发育至胎儿出生。提供胚胎的个体称为供体,接受胚胎的个体称为受体。所以,胚胎移植实际上就是产生胚胎的供体和养育胚胎的受体分工合作共同繁殖后代。胚胎移植可充分发挥优良母畜的繁殖潜力,一般情况下,一头优良成年母牛,一年只能繁殖一头良种犊牛,应用胚胎移植,一年内可得到几头甚至几十头良种犊牛。胚胎移植提高了母牛的繁殖力,便于良种牛群的建立和扩大,有利于选种工作的进行和品种改良规划的实施,是育种工作的有力手段。应用胚胎移植还可以减少繁殖母畜的饲养头数。可以代替种畜的引进、保存品种资源等。本期专家论坛和种业研究中就这一话题整理了业内专家的一些观点和试验,以期对广大胚胎移植从业者起到帮助。同时,本刊希望广大读者就这一问题展开探讨,投稿信箱:zgxq010@126.com。     

控制环境提高绵羊胚胎移植妊娠率

影响绵羊胚胎移植妊娠率的原因很多,而环境条件是其中重要的因素之一,只有为移植胚胎提供良好的成活和生长发育的环境条件,才能提高胚胎移植妊娠率。     

SMYD3对克隆猪早期胚胎发育的影响研究

目的:检测并分析SMYD3基因在猪卵母细胞体外成熟、孤雌激胚胎与体细胞核移植早期胚胎中的表达模式,研究SMYD3基因表达对猪核移植早期胚胎发育及多能性基因表达的影响.方法:通过在猪体细胞核移植胚胎中过表达和干扰SMYD3基因,观察卵裂率、四细胞率和囊胚率,并采用RT-qPCR检测不同处理组各时期SMYD3的表达情况以及多能性基因Nanog和Oct4的表达量.结果:qRT-PCR结果显示,SMYD3基因在猪卵母细胞体外成熟过程中表达较低;在孤雌激活和核移植早期胚胎发育过程中均呈现先升高后降低的表达规律,其中在4细胞和8细胞期胚胎中表达较高.过表达SMYD3基因显著提高猪核移植胚胎的囊胚率(14.63%vs 9.68%,p0.05),下调SMYD3基因表达显著降低囊胚率(6.74%vs 9.68%,p0.05).上调SMYD3组猪核移植囊胚Nanog和Oct4基因表达水平显著提高(p0.05);下调组囊胚中Nanog基因检测不出,Oct4基因表达无显著差异.结论:上调SMYD3基因表达可提高猪体细胞克隆的囊胚发育率,提高核移植胚胎体外发育能力.     

牛胚胎移植的基本程序

胚胎移植(embryotransfer)是将一头良种母畜配种后的早期胚胎取出,移植到另一头同种的生理状态相同的母畜体内,使其继续发育为新个体。其技术环节包括收集、检查、培养、保存和移植等几个基本步骤,由于胚胎移植时,希望一次从供体母畜得到较多胚胎,所以要进行超数排卵处理,同时移植成功的基本条件是供体和受体必须同时发情,故需人为控制受体的发情时间,进行同期发情处理。