茶树愈伤组织继代培养与体细胞胚发生

利用添加不同种类,浓度的１／２ＭＳ修改培养基、Ｂ５培养基交叉培养茶树（ＣａｍｅｌｌｉａｓｉｎｅｎｓｉｓＬ．）愈伤组织,有利于延长愈伤组织继代培养时间,并维持胚性愈伤组织高的体细胞胚分化能力,不同品种的胚性愈伤组织体细胞胚分化率存在明显差异,试管苗茎胚性愈伤组织分化率高于大田栽培的成龄茶树叶柄胚性愈伤组织。胚性愈伤组织随着继代培养时间的延长,体细胞胚分化率随之有所下降,胚性愈伤组织在继代培养过程中,     

唐菖蒲体细胞胚的诱导及植株再生

以唐菖蒲球茎芽切片为外植体,经体细胞胚发生途径,进行胚性愈伤组织诱导、胚状体的诱导、胚状体发育过程及植株再生的研究。胚状体诱导培养基为MS＋2,4-D1.0mg/L＋TDZ0.2mg/L,诱导率为68.3%;将产生的胚状体首先接种于MS培养基使其充分发育,之后转入MS＋6-BA2.0mg/L培养基中诱导发芽,在转入MS培养基中使其形成完整植株。采用石蜡切片法和临时压片法对胚状体的发育过程进行了观察发现,首先外植体表层薄壁细胞经脱分化恢复分生能力,形成愈伤组织,随后在愈伤组织表面形成许多瘤状突起即胚性细胞团,胚性细胞团继续发育成球形胚、盾形胚,最后发育成熟形成完整植株。     

豌豆愈伤组织及不定芽诱导影响因素的研究

以豌豆品种陇豌1号为试验材料,对愈伤组织和不定芽诱导过程中种子处理、外植体选择、最适培养基、不定芽诱导及生根等因素进行研究。确定了最适的种子消毒处理为75%乙醇消毒30s,0.1%升汞消毒10min。以下胚轴为外植体诱导愈伤组织,最适激素配比为0.2mg/L 2,4-D和1.0mg/L TDZ,愈伤组织诱导率为91.11%。具有分化能力的愈伤组织持续培养在只添加TDZ的培养基上即可诱导出不定芽,但这些不定芽生根率仅为8.89%,为此分析了影响生根的因素,为后续的研究提供依据。     

木蓝愈伤组织诱导与不定芽分化培养

初步建立了木蓝(Indigofera bungeana Walp.)的离体再生培养体系，为其基因工程育种研究提供前期技术参考。通过种子无菌播种技术获得野生木蓝无菌实生苗，以胚轴、茎段和叶片为外植体，筛选木蓝愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖、壮苗培养的最适培养基配方。结果显示，木蓝种子无菌播种发芽率达98%，最适培养基为1/2MS。3种外植体在不同培养基下均能诱导出愈伤组织，根据愈伤组织生长及质地色泽筛选出最适诱导培养基，其中，叶片为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L NAA；茎段为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA；胚轴为MS+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L2,4-D+0.5 mg/L NAA。相比较叶片和茎段，胚轴来源的愈伤组织适于不定芽分化，最适分化培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA和MS+2.0 mg/L 6-BA。不定芽增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA，壮苗和生根的最适...     

茄子花药愈伤诱导及不定芽分化研究

以4个茄子品种的花药为外植体,研究茄子诱导花药愈伤组织及不定芽分化.结果表明,西安绿茄,豫艺2号主要分化黄白色紧密型愈伤,这种类型的愈伤分化不定芽较多,翠绿二号,黑仙子分化黄白色松散型愈伤.松散型和紧密型愈伤组织均能分化出绿苗,但松散型愈伤分化的绿苗畸形率高,容易生长缓慢,玻璃化.豫艺2号和西安绿茄适合在F1培养基上分...     

黄棪茶树体细胞胚的诱导与分化

茶树遗传转化主要以组织培养为前提,但其外植体材料易褐化、胚性愈伤组织难以诱导、组织培养高频再生重复性差,从而限制了茶树功能基因发掘和遗传改良研究。本研究以黄棪未成熟种子的子叶为外植体,通过比较不同光照条件和不同基本培养基,探究初级、次级体细胞胚诱导及植株再生的适宜培养基和培养条件,首次对体细胞胚的分化方式进行了描述。结果表明,培养基IM:1/2 MS+1 mg/L BAP+50 mg/L KAl(SO4)2·12H2O+100 mg/L精氨酸+0.5 mg/L叶酸适于初级体细胞胚的诱导,诱导率达73.5%;培养基SEMⅡ：B5+2 mg/L ZT+100 mg/L KAl (SO4)2·12H2O+100 mg/L肌醇+0.5 mg/L叶酸适用于次级体细胞胚诱导,诱导率为44.4%;体细胞分化培养基RMⅡ：1/2 MS+1 mg/L BAP+9 mg/L GA3+50 mg/L KAl (SO4)2·12H2O+0.5 mg/L叶酸能诱导单个体细胞胚同时分化出多个芽。     

茶树体细胞胚发生的研究进展

体细胞胚胎发生(somatic embryogenesis, SE)是植物特异性的发育过程和植株再生的关键因子,其对于茶树的育种及繁殖具有重要意义。为了系统认识茶树体细胞胚胎发生的适宜培养条件,本研究总结了茶树体细胞胚发生的研究进展;综述了影响茶树体细胞胚胎发生的主要因素;剖析了茶树体细胞胚胎诱导过程中存在的问题;并对如何解决这些问题提出了研究展望。以期为茶树遗传转化体系的建立和新品种培育提供重要的理论和技术支撑。     

茶树体细胞胚的形态分析

以茶树子叶为外植体,研究茶树体细胞胚产生方式及形态。结果表明：茶树体细胞胚在子叶柄处直接发生,或产生胚性愈伤组织间接发生。体细胞胚间接发生途径中,子叶表面隆起是发生脱分化的标志,随后细胞团膨大、颜色变绿转化成胚性愈伤组织,其表面分化出半透明的颗粒状突起即为体细胞胚。继代培养中,体细胞胚的发生、萌发以及次级胚性愈伤组织的产生同时进行。体细胞胚的石蜡切片表明,此处细胞小且排列紧密,细胞质浓,有若干个分生区域,具有分生能力。     

通过多种培养基优化长白落叶松体细胞胚再生

为建立稳定高效的落叶松体细胞胚再生体系,本研究以长白落叶松未成熟合子胚作为外植体材料,选择生长良好的胚性愈伤组织,依次通过液体培养基A,半固体培养基B,固体培养基C三种成熟培养基诱导体细胞胚形成。其中,愈伤诱导培养基为S培养基+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+KT 0.3 mg/L,蔗糖20 g/L,琼脂3 g/L;继代培养基为S培养基+2,4-D 0.15 mg/L+6-BA 0.05 mg/L+KT 0.05 mg/L,蔗糖30 g/L,琼脂6 g/L;成熟培养基A为S培养基+PEG-4000 100 g/L+ABA 15 mg/L+Ag NO310 mg/L,蔗糖45 g/L的液体培养基;成熟培养基B和C分别为添加了2 g/L和10 g/L琼脂的成熟培养基A。该方法体胚成熟时间为32 d左右,同步率为78.0%,正常形态体胚比例为83.0%。正常形态体胚形成效率可达223.0个/g胚性愈伤,体细胞胚萌发率可达47.2%。相较于单一成熟培养基,缩短成熟时间,使体胚生成更同步,并提高了体胚产量和质量。为落叶松体胚再生的商业化提供了途径,为大规模化育种繁殖、生理生化研究和转基因改良带来极大的方便,具有较大实际应用价值。     

向日葵未成熟胚培养中不定芽的发生

研究了向日葵未成熟胚培养中不定芽的发生情况,结果表明,向日葵子叶(?)未成熟胚再生不定芽的能力很强,下胚轴较子叶容易产生不定芽;基因型和培养基是影响不定芽再生频率的重要因子.基因型不同,其不定芽的再生频率差异很大.本实验中大多数基因型都能诱导出不定芽.再生频率在40%以上.最高的达91%.自交系、杂一代和保持系的再生频率高于普通品种.培养基中高含量蔗糖及适宜的6—BA含量有利于不定芽的发生.由不定芽培育出的绿苗在温室条件下,大部分可以正常开花结实.     

掌叶半夏悬浮培养下的体细胞胚胎发生的研究

掌叶半夏种子在附加２，４－Ｄ２．０，ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上形成浅黄色或白色颗粒状胚性愈伤组织。胚性愈伤组织在附加２，４－Ｄ１．０，ＢＡ０．５，ＣＨ３００ｍｇ／Ｌ的ＭＳ液体培养其中振荡培养，可产生大量的体细胞胚。２，４－Ｄ对体胚诱导效果显著并促进其早期发育，但抑制其进一步发育成熟。ＮＡＡ对体胚诱导效果不如２，４－Ｄ，但可使体胚正常发育。水解酷蛋白明显提高体胚诱导频率。显微观察表明：体胚起源     

韭葱愈伤组织和不定芽诱导研究

以韭葱假茎和葱薹为外植体,进行离体培养。结果表明,在MS附加不同浓度的NAA和6-BA培养基上,韭葱假茎和葱薹均能诱导形成愈伤组织,但二者出愈率差异极显著。在MS+NAA1.0mg/L+6-BA2.0mg/L培养基上,韭葱假茎愈伤组织出愈率仅为27.09%,在MS+NAA2.0mg/L+6-BA1.0mg/L培养基上,韭葱葱薹愈伤组织出愈率高达77.09%。愈伤组织继代培养后,葱薹形成的愈伤组织不能分化形成芽,而假茎形成的愈伤组织可以诱导产生不定芽,在MS+NAA1.0mg/L+6-BA2.0mg/L培养基上,假茎芽的诱导率为20.83%,且假茎靠近茎基部处诱导产生的愈伤组织分化芽的能力最强。     

植物生长调节剂对橡胶树不定芽诱导的影响

为了研究植物生长调节剂对橡胶树不定芽诱导的影响,本研究以橡胶树优良无性系‘云研73-477’花药体胚植株为外植体,采用正交试验法研究了6-BA、NAA、KT、GA₃对橡胶树不定芽诱导的影响。结果表明,4种激素对茎尖不定芽诱导率的影响差异不显著,对繁殖系数的影响差异达显著水平,其主次顺序为：NAA＞6-BA＞KT＞GA₃,优组合为1.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+0.2mg/LKT+0.4mg/LGA₃;6-BA、NAA、GA₃对茎段芽繁殖系数的影响差异达显著水平,KT则不显著,NAA、GA₃对死亡率的影响差异达极显著水平,其他2种激素则不显著。茎段不定芽诱导的优组合为1.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.2mg/LKT+0.2mg/LGA₃。     

植物生长调节剂对草石蚕愈伤组织和不定芽诱导的影响

以草石蚕叶片和茎段为外植体,研究植物生长调节剂对草石蚕愈伤组织和不定芽诱导的影响,筛选愈伤组织及不定芽诱导的适宜培养基配方。结果表明,茎段在MS+NAA0.6mg·L^-1+6-BA6mg·L^-1培养基上愈伤组织诱导率和干重最高,分别为96.25%和0.027g;叶片在MS+NAA0.6mg·L^-1+6-BA6mg·L^-1培养基上愈伤组织诱导率、干重和鲜重均最大,分别为97.5%、0.647g和0.132g;在MS+NAA0.1mg·L^-1+6-BA6mg·L^-1+GA33mg·L^-1培养基上愈伤组织分化不定芽率最高,为76.67%;分化芽数最多的是MS+NAA0.1mg·L^-1+6-BA4mg·L^-1+GA32mg·L^-1培养基,其芽数为13.25个。     

陆地棉体细胞胚的白化与植株再生的关系

通过对棉花体细胞胚胎发育过程的观察发现，其发育的四个时期即球形期，心形期，鱼雷期和子叶期均有白化现象。成熟期的白色叶胚比绿色子叶胚在成苗培养基上生长快，且形成再生植株的频率高。     

茶树解除休眠前后体内激素等物质变化及锌的积极影响

为了探讨茶树解除休眠前后内源激素的变化及锌对此过程的作用，测定了成龄茶树休眠芽和顶端新梢核酸、可溶性蛋白、二种形态的脱落酸（ABA）含量及不同浓度锌处理苗体内吲哚乙酸（IAA）、赤霉素（GAs）和ABA含量。结果表明，茶树解除休眠前后ABA的形态明显不同，游离太代谢趋于活跃，蛋白质合成加速。锌处理促进GAs和IAA含量     

大豆幼胚子叶体细胞胚诱导主要影响因素的研究

本研究选用东北地区4个主栽大豆品种的幼胚子叶, 探讨了培养基中氮源、生长素和蔗糖, pH值和低温预处理对体细胞胚诱导的影响; 并首次将低温预处理和pH=7.0的培养基应用到体细胞胚诱导中. 结果表明, MSB培养基附加40 mg/L 2,4-D和6%蔗糖, 其体细胞胚诱导率和诱导效率最高, 分别为49%和2.94%. 于4℃低温预处理的材料, 在pH=7.0