大白菜带柄子叶离体不定芽再生过程中的组织学观察

以普通大白菜品种秋早55和彩色大白菜材料06J28的带柄子叶为试验材料,对离体带柄子叶不定芽再生过程中的组织学变化进行了观察研究。结果表明,在带柄子叶离体培养过程中,培养2~3 d,子叶柄切口端皮层及维管束薄壁细胞开始启动,细胞迅速分裂形成分生细胞团,秋早55和06J28分别在培养5 d、6 d时出现明显芽原基,不定芽的产生方式为直接出芽,在秋早55中还观察到有个别芽再生发生于愈伤组织内部,为内起源。     

接种方式对大白菜下胚轴离体不定芽再生及生理指标的影响

以大白菜品种‘贵龙5号’的下胚轴为材料,以3种不同方式接种,观察不定芽分化情况,并比较不同接种方式的下胚轴不定芽再生过程中可溶性蛋白质含量、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的变化。结果表明,以正插(形态学下端插入培养基)方式接种的下胚轴在接种8~10 d时不定芽开始产生,不定芽分化率达87.8%,平均每外植体再生的不定芽数为15.1个,其不定芽再生能力显著大于反插(形态学上端插入培养基)和平放的外植体;下胚轴在不定芽分化过程中各生理指标呈现规律性的变化,可溶性蛋白质含量、POD和SOD活性在芽原基形成以前表现出上升趋势而CAT活性下降,不定芽分化后呈相反变化趋势;不同接种方式的下胚轴在不定芽发生过程中各生理指标的变化有一定差异。以上结果表明大白菜下胚轴不定芽发生过程中形态学变化和生理变化紧密相关。     

葡萄柚不定芽再生体系建立研究

为建立葡萄柚上胚轴离体再生体系,且为遗传转化技术在葡萄柚上的应用提供产参考,以葡萄柚种子实生苗上胚轴为材料,研究了不同激素种类与浓度对上胚轴愈伤组织诱导与分化及无菌苗生根的影响。结果表明:在添加KT 1.5～2.0 mg/L的MT培养基上,上胚轴切口愈伤发生率及对应的不定芽发生率均高于对照及其它处理;在KT 2.0 mg/L的基础上,添加浓度为0.2～0.3 mg/L的NAA对愈伤分化无增加作用,但对不定芽分化率有较大的提高作用,不定芽分化率达87.23%;3种激素比较,ABT 1.0 mg/L的生根效果高于其它处理,生根率达81.3%;卡那霉素对上胚轴的选择压力为60mg/L。综上所述,MT基本培养基中添加KT 2 mg/L及NAA 0.2～0.3 mg/L对葡萄柚上胚轴的不定芽发生率有显著的促进作用;ABT是无菌苗生根的较合适激素;卡那霉素对上胚轴的选择压力为60 mg/L。     

植物生长调节剂和AgNO3对大白菜外植体不定芽再生的影响

通过L25(56)正交试验,优化及筛选最适合大白菜'鲁白6号'子叶及下胚轴不定芽诱导的4种植物生长调节剂和AgNO3的浓度组合。结果发现,在α-NAA、6-BA、TDZ、ABA和AgNO3中,α-NAA对子叶不定芽诱导率的影响达到5%水平显著差异,确定以MS 1mg/Lα-NAA 2mg/L TDZ 5mg/LAgNO3为最佳子叶不定芽诱导培养基,MS 0.8mg/Lα-NAA 5mg/L6-BA 1mg/L TDZ 7mg/L AgNO3为最佳下胚轴不定芽诱导培养基。     

悬铃木叶片不定芽再生

以普通果球和少果球悬铃木为供试材料,建立了叶片不定芽再生体系。结果表明:种子苗于附加IBA0.01 mg/L、ZT 0.10 mg/L及6BA 0.10 mg/L的WPM基础培养基上扩繁,叶片小而多,叶色深绿;取扩繁苗倒1~5叶片外植体,于附加不同浓度6BA、IBA及KT的WPM培养基上,普通果球和少果球悬铃木最高不定芽再生频率分别达59.5%和100.0%,每个外植体长芽数分别近5个和2个。再生所需最佳激素组合因品种而异,普通果球和少果球悬铃木分别为IBA 0.2 mg/L、6BA 2.0 mg/L及KT 0.5 mg/L和IBA 0.5 mg/L、6BA 2.0 mg/L及KT 0.5 mg/L;不定芽及芽点在WPM 0.01 mg/L IBA 0.10 mg/L ZT 0.10 mg/L 6BA伸长培养基上迅速伸长,且株体健壮;在WPM 0.2 mg/L IBA 0.5%活性炭生根培养基上,根系和上部发育较好。     

邓恩桉下胚轴不定芽再生体系建立的影响因素

以邓恩桉种子萌发的实生苗下胚轴为材料,研究了不同激素种类与浓度及多胺对下胚轴经愈伤组织阶段产生不定芽过程的影响,以建立一种下胚轴不定芽再生快繁体系。结果表明,以MS为基本培养基,在培养基中添加2,4-D 1.0~1.5 mg/L可诱导邓恩桉下胚轴产生高质量的愈伤组织;愈伤组织增殖的适宜培养基为MS+TDZ 0.5~1.0 mg/L,愈伤分化产生不定芽的适合培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L+腐胺15~25 mg/L,愈伤不定芽分化率达77.1%~79.2%,且外植体褐化率得以降低。愈伤组织块移入分化培养基初期,3~7 d暗培养可使愈伤不定芽分化率提高到82.8%以上。     

直接诱导不定芽的矮牵牛再生体系的建立

以矮牵牛的叶片作为外植体,研究了不同浓度的激素配比对叶片直接诱导不定芽、诱导愈伤组织分化不定芽及生根的影响。得到了最适的直接诱导不定芽培养基的激素配6-BA1.5mg/L IBA0.5mg/L、诱导愈伤组织分化不定芽的培养基的激素配比6-BA1.5mg/L NAA0.3～0.5mg/L及生根培养基IBA0.03～0.05mg/L。并在时间上,从芽的长势、芽的生根情况进行比较,结果表明:直接诱导的不定芽比诱导愈伤组织分化的不定芽所需的时间短、长势好、生根快。     

哈密大枣叶片不定芽再生体系研究

建立哈密大枣叶片离体再生体系,为遗传转化奠定基础.采用哈密大枣叶片为外植体,研究基本培养基、激素浓度、暗培养时间、AgNO3等因素对离体叶片不定芽诱导的影响,并获得再生植株.MS、NN69、WPM三种培养基相比较,NN69更适合做为诱导愈伤组织的基本培养基;TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于 BA;再生培养基中添加1 mg/L AgNO3对不定芽的形成有显著的影响（P ＜0．05）;培养初期经过2周避光培养更有利于提高再生效率;采用10 mg/L维生素 C浸泡15 min可以防止褐化,并能提高不定芽再生率;培养基中添加聚乙烯吡咯烷酮（PVP）或者维生素C,不定芽再生率无显著提高（P ＞0．05）;培养基添加活性炭（AC）会抑制外植体的分化.叶片在 NN69＋1．0 mg/L TDZ＋0．20 mg/L IBA＋AgNO31．0 mg/L培养基上,暗培养2周后转入光照培养,出芽外植体转入 MS＋1 mg/L 6GBA＋0．20 mg/L IBA 不定芽再生效果最好.不定芽生长至3 cm 以上时,转至0．40 mg/L IBA的1/2MS培养基上进行诱导生根.     

邓恩桉下胚轴不定芽再生体系建立的影响因素

以邓恩桉种子萌发的实生苗下胚轴为材料,研究了不同激素种类与浓度及多胺对下胚轴经愈伤组织阶段产生不定芽过程的影响,以建立一种下胚轴不定芽再生快繁体系。结果表明,以MS为基本培养基,在培养基中添加2,4-D 1.0¹.5 mg/L可诱导邓恩桉下胚轴产生高质量的愈伤组织;愈伤组织增殖的适宜培养基为MS+TDZ 0.51.5 mg/L可诱导邓恩桉下胚轴产生高质量的愈伤组织;愈伤组织增殖的适宜培养基为MS+TDZ 0.5¹.0 mg/L,愈伤分化产生不定芽的适合培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L+腐胺151.0 mg/L,愈伤分化产生不定芽的适合培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L+腐胺15²5 mg/L,愈伤不定芽分化率达77.1%25 mg/L,愈伤不定芽分化率达77.1%⁷9.2%,且外植体褐化率得以降低。愈伤组织块移入分化培养基初期,379.2%,且外植体褐化率得以降低。愈伤组织块移入分化培养基初期,3⁷ d暗培养可使愈伤不定芽分化率提高到82.8%以上。     

韭菜根再生不定芽的组织学观察

以胚根诱导的愈伤组织为材料,研究了韭菜石蜡切片的染色方法及根诱导愈伤组织并分化不定芽的组织学发生过程。结果表明,单独用番红染色,染色4,8 h后染色效果最佳;而单独采用固绿染色,10~20 s后就能够明显观察到组织细胞;若采用番红染色8 h与固绿20 s对染,组织结构清晰且立体效果明显,是韭菜组织的最佳染色方法。观察韭菜愈伤组织不定芽的发生过程,胚根尖首先脱分化形成愈伤组织,愈伤分化增长形成突起,成为胚性愈伤,然后分化形成叶片和不定芽。     

胡杨叶片不定芽再生体系的研究

该文以胡杨试管苗叶片为材料 ,进行了不同培养基及不同影响因子对胡杨叶片不定芽再生能力影响的试验 .结果表明 :胡杨叶片再生的最适培养基是MS +BA 0 .5mg L +NAA 0 1～ 0 2mg L +腺嘌呤 4 0mg L +水解乳蛋白 5 0 0mg L +白砂糖 2 5g L +琼脂 5g L ,再生频率达 10 0 % ;叶片培养的最佳取材位置是自茎尖展叶始第 1～ 3片叶 ;叶片正面向上或正面向下接种培养 ,对其形成不定芽无显著影响 ;由丛生芽和愈伤组织两个途径得到的无菌苗上的叶片在再生能力方面没有明显差异 .     

大白菜外植体分化诱导及村植株再生的研究

利用大白菜的下胚轴、子叶切块和带柄子叶等外植体诱导分化和植株再生。结果表明：在ＭＳ＋１￣２ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ培养基上获得的无菌苗质量最好，分化能力最强；在ＭＳ＋５．０／ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ分化培养基上，直插的带柄子叶分化频率最高，接种后４０天达４１．２％，并能形成大量不定芽（多者一个外植体可达２０多外不定芽）；幼苗在ＭＳ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ培养基上能正     

明水梨叶片不定芽再生体系的建立

以‘明水’梨(Akemizu)叶片为外植体,研究了不同基本培养基,不同浓度噻重氮苯基脲(TDZ)和吲哚丁酸(IBA)的组合,不同暗培养时间以及不同浓度的硝酸银(AgNO3)对梨叶片不定芽再生的影响。试验结果表明,在NN69+TDZ 1.5mg/L+IBA0.2 mg/L+AgNO31.0 mg/L中暗培养25 d后,叶片不定芽再生率最高,达到71.8%。     

切花菊高效不定芽再生体系的建立

以"神马"和"出水芙蓉"2个切花菊品种的叶片为外植体,来建立不定芽再生体系.结果表明:基因型和植物生长调节剂是影响叶片不定芽再生的重要因素,并且较高浓度生长调节剂会导致不定芽和再生小苗玻璃化,不利于植株再生."神马"的最适直接诱导不定芽再生培养基为MS+NAA 1 mg/L+6-BA 1 mg/L,再生率高达955%;...     

扶芳藤不定芽再生体系的建立

以扶芳藤无芽茎段和下胚轴为外植体,建立了稳定高效的不定芽再生体系。MS＋6-BA 1.5 mg/L＋IBA0.1 mg/L对诱导无芽茎段产生不定芽最为有利,再生率为82.6%。以下胚轴为外植体时,预培养50 d更有利于不定芽的诱导,中浓度的6-BA（1.3 mg/L和1.5 mg/L）对直接分化产生不定芽有利,培养基MS＋6-BA1.5 mg/L＋NAA0.1 mg/L上不定芽再生率最高,达到95.7%。以绵白糖和蔗糖为碳源均能达到较好的再生效果（80%以上）,以葡萄糖为碳源时再生率虽然高达100%,但玻璃化严重。生根培养基以1/2 MS＋IAA（0.7 mg/L）最好,生根率高达92.9%,经驯化后移栽成活率在90%以上。     

大白菜下胚轴不定芽再生过程中内源激素和多胺含量的变化

研究了大白菜[Brassica campestris ssp．pekinensis(L．)Olsson]下胚轴不定芽再生过程中内源激素和多胺含量的动态变化。结果表明,芽原基出现以前(接种后0～8d)外植体内源玉米素核苷(ZRs)和脱落酸(ABA)含量上升,而吲哚乙酸(IAA)含量下降；不定芽出现(接种后8d)后变化趋势相反；ABA／IAA值和ZRs／IAA值在培养初期(接种0～8d)增大,不定芽出现以后逐渐减小。不定芽分化过程中外植体内源腐胺(Put)、精胺(Spm)和亚精胺(Spd)含量都表现为先上升后下降,均在培养第8d时达到峰值；Spm／Put值和Spd／Put值的变化趋势也与此相似。说明大白菜下胚轴不定芽的再生与内源激素和多胺含量及平衡有密切关系。     

利用茎尖不定芽建立朝鲜蓟高效再生体系

为建立稳定、高效的朝鲜蓟植株再生无性繁殖体系,以农艺性状好、无病毒的朝鲜蓟茎尖为外植体,研究消毒方法、培养基、植物生长调节剂对朝鲜蓟组培苗增殖及生根的影响。结果表明：将朝鲜蓟的茎尖用70%乙醇消毒10 s,再用0.1% HgCl2(每1 000 mL该溶液加2滴吐温80)处理8 min的外植体消毒方式效果最好,接种污染较小;最适合朝鲜蓟离体培养的基本培养基为EM培养基,6–BA诱导朝鲜蓟丛芽增殖的效果比KT和2–ip好,在EM中添加1 mg/L 6–BA+0.5 mg/L NAA的培养基最适合朝鲜蓟茎尖初代培养;在丛生芽的继代培养中,以添加0.5 mg/L NAA的效果最佳,以GM为基本培养基,添加1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L β–CD的生根效果好,生根率达99.3%,且移栽后成活率达90 %以上。     

红皮云杉的不定芽诱导和植株再生

为了弥补红皮云杉体细胞胚受遗传影响的局限性,以红皮云杉未成熟胚为外植体进行不定芽诱导技术研究。结果表明:以8月3日采集的未成熟胚为外植体,在SH+0.2mg.L-1BA+0.4mg.L-12,4-D培养基上的不定芽愈伤组织的诱导效果最好,诱导率可达96.7%。在芽原基诱导与分化阶段以SH+0.2mg.L-1BA+0.2mg.L-12,4-D诱导分化率最高,不定芽形成的数量最多,分别为90.2%和15.4个,而且形成不定芽褐化死亡率也远低于其它组合。不定芽在1/2BMI培养基上,不定芽的伸长较果最好,不定芽伸长率能达到57.9%。红皮云杉不定芽在含0.02mg.L-1IBA的1/2BMI培养基上生根诱导效果最好,生根率为14.6%。     

沙棘叶片不定芽再生的研究

以"实优1号"沙棘枝条水培芽叶片为试材,研究了叶片着生节位、同一叶片不同部位、不同浓度比值的6-BA与IAA对愈伤组织产生和不定芽再生的影响.结果表明,适宜水培叶片愈伤组织产生的外植体材料为水培茎尖上部与中部叶片的基部和中部,适宜诱导不定芽的外植体为下部叶片与中部叶片;同一叶片不同部位对不定芽再生率影响研究表明叶片中部为首选材料;可迅速高效的诱导不定芽发生的培养基为1/2MS 6-BA 0.7 mg/L IAA0.5 mg/L,平均每外植体分化不定芽数达到6.75个.