一株副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析

副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis , Hps）是格拉泽氏病（Glasser’s diseases）的病原,是猪上呼吸道常在菌,在机体遭受应激或感染病毒性疾病（高致病性猪蓝耳病、圆环病毒病、猪瘟等）导致免疫力下降时可以侵入机体引起发病。     

豫北地区副猪嗜血杆菌的分离鉴定与耐药性检测

副猪嗜血杆菌(Hps)是副猪嗜血杆菌病的病原菌,引起猪的浆液性、化脓性、多发性浆膜炎,影响2周龄到4月龄的猪,主要在断奶后和保育阶段发病,通常见于5～8周龄的猪,发病率一般在10％～15％,严重时死亡率可达50％.随着我国规模化、集约化猪场的发展,副猪嗜血杆菌病在我国出现流行趋势,发病率和死亡率均呈上升趋势,即使能耐过,也会造成仔猪生长发育不良,造成严重的经济损失.     

副猪嗜血杆菌的分离与鉴定

在通过对上海一发病猪群临床流行病学研究和病理学观察的基础上 ,从发病仔猪肺脏、气管和脾脏检出并分离到 1株革兰氏阴性细小杆菌 ,兼性厌氧。生化试验为 :接触酶阳性 ,氧化酶阴性 ,鸟氨酸脱羧酶、吲哚和脲酶阴性 ;生长需要NAD ,发酵果糖、半乳糖、葡萄糖和蔗糖 ;不分解D 甘露醇、D 山梨醇和海藻糖。用副猪嗜血杆菌的 1 6S小亚单位rRNA和tbpA基因的特异性PCR引物 ,通过PCR技术分别从该分离菌株扩增出 82 2bp及 1 9kb的特异基因片段 ,表明该分离菌株为副猪嗜血杆菌     

屠宰生猪副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析

为调查屠宰生猪副猪嗜血杆菌（Hps）的隐性感染情况,本研究从陕西省某规模化生猪屠宰场采集80份病变肺脏,应用PCR方法进行Hps核酸检测,无菌取阳性肺脏,通过平板划线分离获得疑似Hps,进一步对分离菌进行形态观察、培养特性分析、卫星现象观察、生化试验和分离菌核酸片段序列分析,纯化获得Hps分离菌;用药敏纸片法分析Hps分离菌株对常用药物的敏感性。结果显示,从80份病变肺脏中检出39份Hps阳性,阳性率48.75%（39/80）;从39份Hps阳性肺脏中分离获得3株疑似Hps,分离菌在显微镜下呈革兰氏阴性、短杆状;在添加有胎牛血清和NAD的TSA平板上生长良好;在金黄色葡萄球菌周围呈现出典型的"卫星现象"生长;能发酵葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、麦芽糖和阿拉伯糖,不发酵甘露醇;PCR扩增序列与Hps同源性在98%以上。药物敏感性试验结果显示,3株分离菌对环丙沙星、恩诺沙星和氟苯尼考等抗菌药物高度敏感,对青霉素、林可霉素和甲氧苄啶等抗菌药物耐药。本研究获得的Hps分离株为疫苗研制提供了基础材料,为生猪养殖场选择敏感药物防控Hps感染提供了参考依据。     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定

某猪场70日龄仔猪发生以呼吸困难、多发性关节炎和多发性浆膜炎为特征的传染病,从1头濒死猪心血和胸腔渗出液中各分离出1株有多形性趋势的革兰氏阴性小杆菌,生化试验和PCR鉴定为副猪嗜血杆菌;挑选心血分离株以1．5×10^10CFU／只腹腔接种,可引起成年豚鼠发病死亡（2／3）,剖检可见胸腔与腹腔积液、纤维素性心包炎、肝周炎,从心血、胸腔积液、腹腔积液、脑、肝脏及肺脏回收到该菌。     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定

副猪嗜血杆菌(Hps)为猪呼吸道疾病综合征(PRDC)的重要病原之一。在对广西65个猪场281份病猪组织样品进行PRDC病原学调查的基础上,对PCR检测的Hps阳性样品进行了细菌分离,并进行了生化特性、药敏试验、16 S RNA基因片段序列分析和基因组DNA的PCR指纹图谱分析。结果显示,11份(3.91%)检测样品为Hps阳性,且均为混合感染;从南宁市四塘、桂林市永福、玉林市容县和钦州市浦北分离出5株Hps,分离菌株的生化鉴定结果均符合Hps生化特性,且对头孢噻呋和头孢菌素高度敏感;其中3株为血清5型,1株为血清12型,另1株未能定型;分离菌株16 S RNA基因片段之间及与GenBank其他一些代表菌株的核苷酸同源性在99%以上。     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及血清型分析

从江西赣州18个县疑似患多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎的156份病料中分离到127株细菌,经细菌分离鉴定和PCR鉴定,确定47株为副猪嗜血杆菌。通过琼脂扩散试验确定分离株主要血清型为4型和5型,其次是13和14型,另有3株不能确定血清型。4型和5型血清型病料主要来自定南、龙南、全南3个县。药敏试验结果表明,分离株对喹诺酮类药物以及头孢拉定、卡那霉素、氨苄西林、庆大霉素、羧苄青霉素敏感,但对红霉素和壮观霉素有抵抗力。     

广东地区副猪嗜血杆菌的分离鉴定

采用细菌分离的方法,结合PCR检测,生化鉴定,对广东地区2007年9月~2008年9月37个患病猪场送检的372份病料进行副猪嗜血杆菌分离鉴定,通过数据统计分析,显示副猪嗜血杆菌分离率达24.00%,副猪嗜血杆菌感染猪场阳性率达40.54%,表明副猪嗜血杆菌病在广东地区已普遍流行。     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药敏试验

1910年,Glasser首先描述了以纤维蛋白性多发性浆膜炎、心包炎、腹膜炎、关节炎和脑膜炎为特征的猪病,即猪Glasser’s病(Glasser’s disease)。Scherm-er和Ehrlich于1922年首先分离到Glasser’s病病原体——副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps),故Glasser’s病也称副猪嗜血杆菌病[1]。近年来,我国由副猪嗜血杆菌引起猪多发性浆膜炎和关节炎的报道屡见不鲜,特别是在集约化猪场中,当蓝耳病、圆环病毒病等发生后,副猪嗜血杆菌病伺机爆发,造成严     

副猪嗜血杆菌病病原菌的分离鉴定

更有效地控制和防治副猪嗜血杆菌病,本试验从山西省晋中市疑似猪嗜血杆菌病感染的一个大型规模化猪场采集病料,选择改良巧克力琼脂培养基,从9头有关节炎、胸膜炎、腹膜炎等症状的疑似副猪嗜血杆菌病的临床病例中分离到5株疑似副猪嗜血杆菌菌株。生长特性观察发现分离株为多形性、革兰氏阴性小杆菌,生长缓慢(24～48h)。菌落呈光滑露珠样,不溶血。葡萄糖、树胶醛糖、乳糖、甘露醇、蜜三糖发酵和脲酶实验呈阴性,过氧化氢酶实验阳性,该结果符合副猪嗜血杆菌的生化特性,表明该分离菌株为副猪嗜血杆菌。     

副猪嗜血杆菌分离鉴定及药敏试验

副猪嗜血杆菌能够引起猪的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎等,是影响猪的最重要细菌之一,目前在所有的主要养猪国家均有存在。为了弄清河南省副猪嗜血杆菌病流行情况,2012年-2015年,从河南不同地区猪场送检的疑似病料,进行副猪嗜血杆菌分离和鉴定,共分离到5株细菌,通过细菌形态观察、培养特征鉴定、生化试验、PCR检测,鉴定为副猪嗜血杆菌,分别命名为A6-fei、C3-xin、C12-xin、D2-fei和E1-fei。采用纸片扩散法,对分离5株副猪嗜血杆菌进行药敏试验,其结果表明所分离的5株副猪嗜血杆菌的药物敏感性不尽相同,各分离菌株对头孢噻肟、氟苯尼考星最敏感,对复方新诺明敏感性最差,其中菌株C3-xin对复方新诺明、庆大霉素、卡那霉素、青霉素完全耐药。表明副猪嗜血杆菌病在河南省依然存在,并且不同地区菌株对常用药物的敏感性各不相同,应当引起养猪场重视。     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定与药敏试验

为了研究湖南省内副猪嗜血杆菌流行情况,从湖南省内岳阳、湘阴、娄底、郴州等10个规模化猪场送检的210份患呼吸道或关节病变的病猪组织样进行细菌分离。试验采用HPS16SrRNA的基因序列对可疑菌落PCR扩增,得到2株细菌基因序列与预期目的片段相符。细菌学试验证明2株细菌均符合HPS形态、培养与生化特性,药敏试验。结果表明,对头孢噻肟、环丙沙星和先锋Ⅳ高度敏感,对强力霉素、壮观霉素和呋喃妥因中度敏感,对新霉素、青霉素、林可霉素和庆大霉素等多种抗生素严重耐药。     

浙江省副猪嗜血杆菌流行株分离鉴定及药敏试验

为了研究浙江省副猪嗜血杆菌流行菌株耐药性,试验从浙江省杭州、嘉兴、湖州、绍兴和金华等地区8个不同规模猪场典型病例中分离鉴定出了13株副猪嗜血杆菌临床分离株,采用纸片法检测了其对21种临床常用药物的耐药性。结果表明:浙江省副猪嗜血杆菌分离株对大多数常用抗生素敏感,如多西环素、氟苯尼考、阿奇霉素等,对氨苄西林、复方新诺明、头孢类抗生素有较强的耐药性;不同分离株的耐药性有较大的地域、猪场甚至是猪只或分离部位差异。     

广东省副猪嗜血杆菌病原的分离鉴定及药敏试验

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)是存在于猪上呼吸道的一种常在菌,在特定条件下可以侵入机体引起以呼吸道症状为主的全身性疾病,以纤维素性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为特征,又称格拉瑟病(glasser's disease).近年来,随着养猪业规模化、集约化和工厂化的发展,饲养密度不断增大,空气环境控制不好导致副猪嗜血杆菌在各个猪场不断发生,已趋于流行.笔者对广东省清远、佛山、惠州市猪场的患病猪进行采样,通过分离鉴定确定病原为副猪嗜血杆菌(分别命名为GDQY1、GDFS2、GDHZ3),同时进行了药敏试验,现报道如下.     

副猪嗜血杆菌云南本地株的分离及鉴定

副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌引起的主要危害猪的一种急性、热性传染病。本试验对疑似副猪嗜血杆菌感染病例病料进行细菌分离培养,对分离菌株进行生化试验鉴定,结果可见菌落有卫星现象,革兰氏阴性的细小杆菌,分离菌株能发酵葡萄糖、乳糖,产酸不产气,不发酵蔗糖、木糖、甘露醇,不产生靛基质,不分解尿素,不分解精氨酸,过氧化氢酶阳性,氧化酶阴性。证明分离菌株为副猪嗜血杆菌。     

规模猪场副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药物试验

从数例疑似副猪嗜血杆菌病猪的病料中分离袋3株细菌,通过细菌形态特征、培养特性和生长特性的观察,确诊该病的病原菌是副猪嗜血杆菌.同时,对分离菌进行药敏试验,为今后防控该病提供试验依据.     

副猪嗜血杆菌病病原菌的分离与鉴定

本试验从山西省长治市疑似副猪嗜血杆菌病感染的一个大型规模化猪场采集病料,进行细菌的分离,获得1株疑似分离株。通过改良的培养和保存技术、染色镜检、卫星现象及生化试验等方法对病原菌进行了研究,结果符合副猪嗜血杆菌的生化特性。     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药敏试验

副猪嗜血杆菌病又称为革拉瑟氏病,是由副猪嗜血杆菌引起的一种严重的全身性疾病,以纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为特征.近年来,全国各地都有关于副猪嗜血杆菌感染甚至是流行的报道,并且发病严重,死亡率高,造成巨大的经济损失.鉴于此,对地方菌株进行分离鉴定,显得十分必要.本试验首先从广东地区疑似患多发浆膜关节炎猪的病料中分离到4株疑似细菌,进行了细菌形态观察、培养特性和生化特鉴定,证实为副猪嗜血杆菌.药敏试验结果显示,分离菌株对头孢拉定、环丙沙星、恩诺沙星和菌必治等药物敏感.     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药敏试验

从病猪中分离到4株细菌,经染色镜检、生化试验以及PCR等方法鉴定为副猪嗜血杆菌,。通过药敏试验确定其对药物的敏感性,以期对临床用药有一定的指导作用。     

副猪嗜血杆菌PCR鉴定方法的建立

以HPS的16SrRNA中的基因序列设计合成引物，进行PCR扩增，标准菌株NR4、SW124、SW114、SW140和分离株XX、FS在预计的821bp位置上扩增出特异性条带，NJING株、胸膜肺炎（APP）等没有特异性条带产生。这证明PCR检测副猪嗜血杆菌具有较高的特异性和敏感性。