朱砂叶螨阿维菌素抗性品系选育及适合度研究

为研究朱砂叶螨抗性适合度,在抗性选育基础上实验室组建了朱砂叶螨相对敏感品系、抗阿维菌素品系在豇豆和棉花上的生命表(26℃),比较了相对敏感品系和抗性品系在两种寄主上发育历期、繁殖力及种群参数的差异.结果表明:连续汰选42代,朱砂叶螨对阿维菌素(乳油制剂)产生约8.7倍抗性;与相对敏感品系相比,抗性品系在棉花上若螨期缩短0.55天、世代历期延长0.88天,平均产卵量无显著差异;在豇豆上卵期缩短1.71天,若螨期延长0.41天,世代历期缩短2.06天,平均产卵量减少84.29粒/雌.抗性品系在棉花和豇豆上的相对适合度分别为0.89和0.58,表明该螨产生抗药性后,存在适合度缺陷.     

朱砂叶螨抗药性与羧酸酯酶活性的关系

羧酸酯酶是昆虫体内普遍存在的一种水解酶。昆虫对多数有机磷、氨基甲酸酯及有些菊酯类杀虫剂产生抗性羧酸酯酶活性有关[1～2]。桃蚜(Muscapersicae)对有机磷的抗性与其体内所含酯酶活力呈正相关,E4酯酶的量随着抗性程度的增加而呈几何级数上升[3]。棉蚜(Aphisgossypii)对对硫磷和对氧磷产生抗性后,α-乙酸萘酯酶活力分别增加15.25倍和60.30倍[4]。本文研究了朱砂叶螨(Tetranychuscinnabarinus)对氧化乐果(有机磷)、三氯杀螨醇(有机氯)、双甲脒(有机氮)及哒螨灵(杂环类)的抗性与羧酸酯酶的关系。1　材料与方法1.1　供试叶螨在人工气象室内…     

二斑叶螨抗阿维菌素品系选育及其解毒酶系活力变化

采用室内生物测定和生化分析方法, 以采自甘肃兰州国家级森林公园兴隆山的二斑叶螨为敏感品系(SS), 研究二斑叶螨对阿维菌素的抗药性及抗性生化机理。结果表明：在室内用阿维菌素强化筛选24代, 获得了二斑叶螨抗阿维菌素品系(Ab-R24), 抗性指数(resistance index, RI)为321.5。对SS和Ab-R24解毒酶活性的分析表明, Ab-R24品系体内羧酸酯酶(CarE)、乙酰胆碱酯酶(AchE)、酸性磷酸酯酶(ACP)、碱性磷酸酯酶(ALP)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和多功能氧化酶(MFO)活性分别是SS品系的1.43、1.18、1.56、1.48、1.55倍和4.02倍, 差异达到显著水平(P < 0.05), 其中MFO的活性上升最为显著。对SS和Ab-R-24解毒酶动力学常数的分析表明, Ab-R-24品系体内AchE、GSTs和MFO的 Km分别是SS品系的1.14、2.31倍和2.58倍; Vmax分别是SS品系的1.19、2.34倍和1.76倍, 差异均达到显著水平(P <0.05)。说明二斑叶螨对阿维菌素抗性增高与MFO活性快速升高有关, AchE和GSTs也参与阿维菌素抗性的形成。     

阿维菌素与植物精油复配对朱砂叶螨杀螨的增效作用研究

为了得到对朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)具有较好杀螨活性的植物精油与阿维菌素复配配方,并为杀螨剂开发应用提供指导,本研究采用喷雾法测定了柠檬草、广藿香、山鸡椒、亚洲薄荷植物精油及阿维菌素对朱砂叶螨的毒力,分别采用共毒因子法和共毒系数法评价了山鸡椒和亚洲薄荷精油对阿维菌素的增效作用和复配最佳...     

二斑叶螨与朱砂叶螨种间竞争的研究

１９９７年４～６月对二斑叶螨与朱砂叶螨的种间竞争进行了研究。结果表明,无论单种种群还是混合种群,二斑叶螨的活动虫态和雌成虫的ｒｍ均高于朱砂叶螨。二斑叶螨具有更强的种间竞争能力,在该螨发生地极有可能取代朱砂叶螨而成为农田中的优势种。     

寄主植物对二斑叶螨解毒酶活性的诱导作用

[目的]明确不同蔬菜寄主对二斑叶螨解毒酶活性的诱导影响,为叶螨的寄主适应性及叶螨对寄主的抗性机制研究提供基础.[方法]将饲养在菜豆上的二斑叶螨分别转移到黄瓜、甘蓝和茄子上饲养3代后,测定包括菜豆在内的4种不同寄主植物对叶螨体内解毒酶系活性的诱导影响.[结果]取食不同寄主植物的二斑叶螨体内解毒酶系活性差异显著.从菜豆寄主转养到黄瓜、甘蓝和茄子上后,后3个寄主上叶螨种群体内谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性显著下降,茄子上种群活性最低,菜豆种群是茄子种群的2.75倍;而后3个寄主种群的乙酰胆碱酯酶(AChE)比活力显著上升,茄子种群最高,是菜豆种群的6.03倍.4种供试寄主植物的二斑叶螨种群中,在黄瓜寄主上羧酸酯酶(CarE)和多功能氧化酶(MFO)活性显著高于其他3种寄主植物,CarE活性的高低顺序为黄瓜＞菜豆和甘蓝＞茄子,而MFO活性为黄瓜＞茄子和菜豆＞甘蓝.[结论]取食不同寄主植物可诱导二斑叶螨体内的解毒酶系活性发生不同程度的变异,这可能是二斑叶螨对寄主具有广泛适应性的生理基础之一.     

阿维菌素和温度胁迫对朱砂叶螨自由基及保护酶活性的影响

应用酶活力测定的方法,研究朱砂叶螨经阿维菌素和高(低)温处理后对其体内自由基(O2.-)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性的影响。结果表明,朱砂叶螨经阿维菌素处理后,两种群体内的O2.-含量急剧升高,药后4h抗性种群和敏感种群O2.-含量分别是对照的3.42、3.54倍,同时SOD、CAT活性也明显高于对照;处理组中抗性种群体内O2.-含量低于敏感种群,SOD、CAT活性高于敏感种群。不适宜的高温和低温均能使朱砂叶螨体内的O2.-、SOD、CAT、POD活力升高,敏感种群在42℃的热激下SOD、CAT、POD的活性达到最大,分别是对照的4.25、2.06、1.81倍,与其它温度处理差异显著(P<0.05),其后呈下降趋势,而抗性种群酶活性在实验温度下,始终保持平稳上升的趋势;酶活性变化率分析结果显示,SOD对热胁迫的应激性最强,CAT次之,POD最小,抗性种群三种酶活性的变化率均大于敏感种群。     

重庆潼南朱砂叶螨田间抗性监测及其抗性机制分析

本研究通过生物测定检测了重庆潼南田间朱砂叶螨种群对5种杀虫杀螨剂的抗药性,并测定了主要代谢酶活性及抗性相关基因的表达量。抗性监测结果显示,朱砂叶螨对联苯肼酯和哒螨灵表现为中等水平抗性,对阿维菌素、丁氟螨酯和甲氰菊酯为低水平抗性。代谢酶活性检测结果显示:田间种群的P450和GST活性明显提高,且多个相关基因的表达也显著上调,而CarE的活性没有显著变化。综上所述,重庆潼南田间朱砂叶螨种群已对联苯肼酯、哒螨灵、阿维菌素、丁氟螨酯和甲氰菊酯产生了不同程度的抗药性,P450和GST活性提高和有关基因过表达是抗性产生的主要原因。     

香茅精油微乳液对朱砂叶螨的生物活性及其解毒酶系活性的影响

为明确香茅精油微乳液对朱砂叶螨的生物活性及其解毒酶系活性的影响,采用熏蒸法测定香茅精油微乳液对朱砂叶螨的熏蒸活性及香茅精油微乳液亚致死剂量处理下朱砂叶螨的产卵情况、趋避情况及解毒酶系活性。结果表明,当剂量达到2.5 μL时,香茅精油微乳液处理下朱砂叶螨的死亡率达到80.37%以上;香茅精油微乳液熏蒸24 h时,其对朱砂叶螨的亚致死剂量LD₁₀和LD₃₀分别为0.082 μL和0.284 μL;香茅精油微乳液LD₁₀和LD₃₀处理24 h时,其对朱砂叶螨的产卵抑制率分别为76.30%和78.67%,对朱砂叶螨的趋避率分别为80.00%和88.00%;香茅精油微乳液LD₁₀和LD₃₀处理后,朱砂叶螨体内酯酶活性在0~8 h表现出激活作用,随后一直处于抑制状态,谷胱甘肽-S-转移酶活性一直处于激活状态,而多功能氧化酶活性处于抑制状态。表明香茅精油微乳液是一种很有前景的绿色杀螨剂。     

10%甲氰·阿维乳油配方的筛选及其对朱砂叶螨的联合作用

通过对助剂和配方的筛选,确定10%甲氰·阿维乳油的溶剂为20∶1(质量比,下同)的二甲苯与乙酸乙酯混合溶液,乳化剂为30∶1的QR-9与QR-11混合物,其添加量为60 mg/g。采用玻片浸渍法测定9种不同配比复配剂对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus (Boisduval)的联合毒力作用。结果表明:9种复配剂对朱砂叶螨的共毒系数均在200以上,表明两种单剂复配具有显著的增效作用,其中以甲氰菊酯与阿维菌素按有效成分97∶3的比例复配,其增效作用最为显著,共毒系数高达357.7,为最佳配比。     

朱砂叶螨对两种杀螨剂的抗性遗传力及风险评估

在室内抗性培育的基础上,应用数量遗传学中的域性状分析法研究了朱砂叶螨对甲氰菊酯和阿维菌素两种杀螨剂的抗性现实遗传力,并对两种药剂在不同杀死率下,朱砂叶螨抗性发展的速率进行了预测。结果表明,用甲氰菊酯、阿维菌素分别连续汰选16、18代后,朱砂叶螨对两者的抗性分别为28.61和4.36倍,抗性现实遗传力分别为0.2685和0.1385。在室内选择条件下,杀死率为50％～90％时,要获得10倍抗性,甲氰菊酯需要约13～6代,阿维菌素需要约28～13代。生物源农药阿维菌素的抗性风险明显低于菊酯类药剂甲氰菊酯。试验结果为朱砂叶螨抗性治理提供了理论依据。     

Resistance selection and biochemical mechanism of resistance to two Acaricides in Tetranychus cinnabarinus (Boiduval)

A Tetranychus cinnabarinus strain was collected from Chongqing, China. After 42 generations of selection with abamectin and 20 generations of selection with fenpropathrin in the laboratory, this T. cinnabarinus strain developed 8.7- and 28.7-fold resistance, respectively. Resistance to abamectin in AbR (abamectin resistant strain) and to fenpropathrin in FeR (fenpropathrin resistant strain) was partially suppressed by piperonyl butoxide (PBO), diethyl maleate (DEM) and triphenyl phosphate (TPP), inhibitors of mixed function oxidase (MFO), glutathione S-transferases (GST), and hydrolases, respectively, suggesting that these three enzyme families are important in conferring abamectin and fenpropathrin resistance in T. cinnabarinus. The major resistant mechanism to abamectin was the increasing activities of carboxylesterases (CarE), glutathione-S-transferase (GST) and mixed function oxidase (MFO), and the activity in resistant strain developed 2.7-, 3.4- and 1.4-fold contrasted to that in susceptible strain, respectively. The activity of glutathione-S-transferase (GST) in the FeR strain developed 2.8-fold when compared with the susceptible strain, which meant the resistance to fenpropathrin was related with the activity increase of glutathione-S-transferase (GST) in T. cinnabarinus. The result of the kinetic mensuration of carboxylesterases (CarE) showed that the structure of CarE in the AbR has been changed.     

加州新小绥螨对朱砂叶螨的控制作用

为明确加州新小绥螨Neoseiulus californicus（McGregor）国内种群对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus（Boisduval）的控制潜力,应用功能反应、数值反应及实验种群生命表参数评价了该捕食螨对朱砂叶螨的控制能力。加州新小绥螨对朱砂叶螨的功能反应能很好地拟合Holling Ⅱ方程。在25℃,加州新小绥螨雌成螨对朱砂叶螨卵、幼螨、若螨和成螨的功能反应参数a/T_h值分别为42.4195、81.6275、54.3044和17.9399,对朱砂叶螨幼螨、若螨和卵的控制力高于成螨。在19~31℃,加州新小绥螨对朱砂叶螨雌成螨日均捕食量和对猎物的控制能力a/T_h随温度升高而增大,在31℃时达最大值,分别为10.80头和29.5364。在28℃时,加州新小绥螨的净增殖率和内禀增长率分别为26.1522和0.2213。表明加州新小绥螨国内种群表现出重要的生物防治潜能。     

抗梅岭霉素和阿维菌素二斑叶螨种群生命力和繁殖力的研究

采用营养液培养的棉苗饲养二斑叶螨Tetranychus urticae Koch,用梅岭霉素、阿维菌素对其逐代进行抗性选育,至第9代,测定了两个抗性种群的抗性水平、生命力和繁殖力。结果表明:梅岭霉素抗性种群的抗性达7.9倍,其雌成螨寿命、产卵量、卵的孵化率和后代若螨成活率分别比对照增加54.08%、39.93%、6.57%和-15.44%。阿维菌素抗性种群的抗性达5.8倍,其雌成螨寿命、产卵量、卵的孵化率和后代若螨成活率分别比对照增加15.88%、10.87%、5.86%和-9.32%。由此发现梅岭霉素和阿维菌素对二斑叶螨的生长发育和繁殖有一定有利作用,抗性风险性较大,应引起重视。     

Transcription and induction profiles of two esterase genes in susceptible and acaricide-resistant Tetranychus cinnabarinus

The carmine spider mite Tetranychus cinnabarinus is the most serious of crop mite pests in China. Their ability to rapidly develop resistance to acaricides has caused difficulty in controlling this mite. In this study, the molecular mechanism of acaricide resistance associated with esterase genes TCE1 and TCE2 was investigated in susceptible and acaricide-resistant strains of T. cinnabarinus. The quantitative real-time PCR (qrtPCR) method was adopted to compare the expression level of two esterase genes TCE1 and TCE2 among four different strains (abamectin-resistant, AbR; fenpropathrin-resistant, FeR; omethoate-resistant, OmR and susceptible strains, S) of T. cinnabarinus. The relative expression level of TCE2 was 1.39-2.47 fold in the three resistant strains compared with the S strain. And after inducing with abamectin, fenpropathrin, and omethoate the highest expression level of TCE2 in the S was 1.64-, 2.92- and 2.24-fold compared with the control, respectively, and this difference was found to be significant. However, there was no obvious difference of the mRNA relative expression levels of TCE1 genes among the four strains, and those of TCE1 were not higher than the control throughout the study. Furthermore, the expression modes of TCE1 and TCE2 in AbR and FeR were similar with that in the S after being treated with abamectin and fenpropathrin, respectively. These results indicated that the enhanced expression of esterase gene TCE2 was associated with acaricide-resistance in T.cinnabarinus.