白僵菌高毒株生产与应用试验研究

本研究通过对B_3等4个不同白僵菌的菌株进行工厂化生产,分别观测各菌株在各个生产阶段的表现性状和生长特点及菌粉质量;并对马尾松毛虫进行室内死亡速率测定和林间防治试验及大面积生产性防治。已筛选出适于我区扩大生产和应用的高毒白僵菌B_3菌株。B_3菌株在生产过程中表现出孢子萌发快,菌丝生长旺、产孢时间短、菌粉质量高等优良性状,在施菌处理后,对马尾松毛虫的前期感染死亡率(室内5天内,林间15天前)显著高于广激、广单、瓯单。试验表明、B_3菌株是具备对马尾松毛虫感染快、作用迅速、僵虫出现早等优良性状的高毒白僵菌株。     

白僵菌防治竹笋禾夜蛾的试验研究

采用室内毒力测定与林间防治相结合的方法,比较5株白僵菌菌株对竹笋禾夜蛾的防治效果.室内毒力测定结果表明:Bov07菌株对竹笋禾夜蛾幼虫的感染效果最好,校正死亡率达83.33％,LT50值为7.3d;其次是Bpp04,其校正死亡率达73.81％,LT50值为9.2d.用Bov07菌株生产的菌粉对竹笋进行林间防治试验,结果表明:用量为22.5 kg·hm-2时,15 d的林间防治效果达80％以上.说明Bov07菌株是防治竹笋禾夜蛾的优良菌株,可以进一步进行推广应用.     

刚竹毒蛾Bpp菌株白僵菌产品开发及其应用研究

通过对3株白僵菌菌株规范化工艺技术生产菌粉产孢量比较研究,并运用生物测定的方法将3株白僵菌菌株产品对刚竹毒蛾进行室内和林间毒力测定。试验结果表明:经过各菌株产品质量和毒力比较,Bpp菌株菌剂质量最好,对刚竹毒蛾幼虫的死亡率达96 1%～100%,LT50为3 96d,是所供试菌株产品中死亡率最高、致死速度最快的菌株,可作为开发生产刚竹毒蛾白僵菌菌剂产品的目的菌株。Bpp菌株通过大规模生产和大面积防治应用,菌粉平均含孢量高达2 725×1010个·g-1,平均孢子发芽率达98 6%,平均防治效果达95%以上,取得了明显的经济、社会和生态效益。     

刚竹毒蛾白僵菌优良菌株筛选及生产应用研究

本研究对天然刚竹毒蛾僵虫蛹分离纯化的 8个球孢白僵菌菌株 ,进行了菌落形态、菌落生长、产孢量和发芽率等培养性状测定 ,并与 4个马尾松毛虫球孢白僵菌菌株进行了室内外防治刚竹毒蛾试验比较 ,结果表明 :菌株间的培养性状和毒力有明显差异 ,各菌株存在较明显的寄主专化性 ,分离自刚竹毒蛾的菌株毒力较高。筛选出BP4和BP1 2个优良菌株 ,具有菌丝生长速度快 ,产孢时间短 ,产孢能力强 ,毒力高等优点 ,并将最优的BP4菌株应用于生产 ,菌粉平均含孢量达 2 3 8 7×1 0 8·g- 1 ,平均孢子发芽率达 96 2 % ,林间防治越冬代刚竹毒蛾平均效果达 92 3 % ,取得良好的防治效果。     

粉拟青霉菌菌株毒力复壮及其应用效应的研究

对粉拟青霉菌菌株的毒力复壮技术和其复壮菌的应用效应进行了系统的研究.经不断的探索获得了粉拟青霉菌复壮用的Pf-Ⅱ号培养基,对其复壮菌株作室内及林间的毒力测试,结果显示:(1)经复壮后的粉拟青霉菌菌株对松纵坑切梢小蠹成虫的感病死亡率为88.5 %,比未经复壮的菌株感病死亡率48.8 %提高了39.7 %.(2)林间温度对粉拟青霉菌使松纵坑切梢小蠹成虫感病死亡的影响不明显,但林间使用该菌防治松纵坑切梢小蠹成虫的适宜温度为15℃～20℃;粉拟青霉菌致使松纵坑切梢小蠹成虫感病的死亡率与林间相对湿度成正相关,最适相对湿度为90 %～95 %,下限不能低于80 %;1月中旬、6月下旬至10月下旬是应用粉拟青霉菌防治松纵坑切梢小蠹的最佳时期.用复壮后的粉拟青霉菌菌粉在云南省沾益县西平镇文家坟、火石梁子的150 hm2蠹害林区对云南松纵坑切梢小蠹进行防治.其林分的松纵坑切梢小蠹成虫受害株率由防治前的32.9 %降至4.6 %,受害株减退率为86.1 %,进一步表明:用毒力复壮后的粉拟青霉菌,防治松纵坑切梢小蠹虫虫害的效果显著.     

用于提取可纺性竹原纤维菌株的选育

从自然界腐朽的竹材或木材中,能分离和筛选高效降解木质素并只少量降解或者不降解竹纤维的优良菌株,通过GU-W A平板变色反应试验和菌株对竹材木质素、竹纤维降解试验,共获得了3株具有选择性降解竹木质素的优良菌株(15、18、21号菌株),经初步鉴定这3株菌为真菌菌株;测定了菌株在摇瓶培养时所产孢外酶的酶活.最后采用3株菌联合法进行降解竹材木质素试验.结果表明:3株菌联合降解木质素效果优于单一菌株,其降解率可达72.26%.     

球孢白僵菌防治危害橄榄的芒果小齿螟试验

应用7个球孢白僵菌菌株对橄榄蛀果虫———芒果小齿螟的致病力作了室内测定,并进行林间防治试验。结果表明,分离自竹绒野螟的BbCeFZ01菌株和思茅松毛虫的Bso6菌株有较强的致病力,在107个孢子.mL-1浓度下,校正死亡率分别为92.6%、88.9%。林间Bso6粉剂(含孢量2.7×1010孢子.g-菌1粉)防治效果最好,达96.5%;其次为Bso6菌株粉炮(125g菌粉.个-1)和BbCeFZ01水剂(1×107孢子.mL-1),效果分别为91.6%和87.8%。     

蜡蚧轮枝菌防治湿地松粉蚧的研究

采用蜡蚧轮枝菌的ＶＰ２８、ＶＲ、Ｖ３．４５４０和Ｖ５７等４个菌株防治湿地松粉蜡,结果表明：室内杀虫的浓度为０．１亿／ｍｌ时,其样正死亡率分别为４１．５％,７２．３％,７８．５％和５４．９％;浓度为０．１亿／ｍｌ时,其校正死亡率分别为５６．３％,７４．０％,９０．１％和７１．９％。采用ＶＲ菌株生产的菌粉粉菌液进行林地防治,湿地松粉蚧的校正死亡率分别为９６．９％和９８．８％。     

白僵菌优良菌株的自然筛选

球孢白僵菌[Beauveria bassiana(Ball)]制剂是防治马尾松毛虫的主要药物之一,菌粉年产量达数万kg以上。为了选育毒力强、人工培养菌丝生长快、产孢量高、优良品质稳定的菌株,从建阳、连城、莆田等地收集白僵菌虫体进行组织分离、单孢纯化、比较室内毒力以及在人工培养基上的性状,得到三个优良的白僵菌菌株,进行生产性试验,效果显著。     

一株耐As细杆菌对As3+的吸附特征与机理

【目的】评价细杆菌属去除水溶液中As^3+的可行性,为As污染的微生物修复提供必要的修复材料和理论依据。【方法】从湖南某矿区筛选分离等得到了一株高耐砷菌株,经过16S rRNA序列分析初步鉴定为细杆菌属Microbacterium,命名为A4,并采用单因素试验优化菌株生长条件,正交试验优化菌株菌粉吸附As^3+的条件。通过吸附动力学与等温吸附试验研究菌株菌粉对As^3+的吸附特征,并利用SEM-EDX与FTIR分析探讨了该菌株菌粉对As^3+的吸附机理。【结果】菌株A4对As^3+的耐受阈值为53 mmol/L;菌株A4的最适生长条件为温度30℃、pH值7.0~9.0、NaCl浓度0.25 m/v、转速180 r/min。正交优化试验结果表明:菌粉吸附As^3+的最佳条件为菌粉投加量为0.02 g/L、吸附时间为2 h、pH值为8.0和温度为20℃,此条件下菌粉对As^3+的吸附量为128 mg/g。Langmuir方程与准一阶动力学方程可被较好的用于描述菌粉对As^3+的等温吸附特性与动力学特性,拟合度均达0.99,菌粉对As^3+的最大吸附量达114.6 mg/g。SEM-EDX与FTIR分析表明:吸附过程中的主要功能团-COOH、-OH、-NH、-CHO和O-P-O等与As络合,以及As^3+在菌粉表面与Mg2+发生了离子交换作用,促进了菌粉对As^3+的吸附。【结论】可为未来水体As污染微生物修复提供菌株材料与技术应用思路。     

淡翅黎丽金龟生物防治试验

采用白僵菌Beauveria sp.、绿僵菌Metarrhizium sp.、粉拟青霉Paecilomycesfarinosus、苏云金杆菌Bacillus thuringiensis var.sandiego、芜菁夜蛾线虫Steinernemafeltiae对淡翅黎丽金龟Blitopertha pallidipennis Reitter进行致病力测定和苗圃防治试验。结果表明:卵孢白僵菌AB菌株和球孢白僵菌YB菌株室内致病率60％—83.3％,苗圃防治效果67.6％—86.6％;芜菁夜蛾线虫室内致病率98％,苗圃防治试验校正虫口减退率87.5％;绿僵菌室内致病率13.8％;苏云金杆菌室内致病率58.8％,苗圃防治效果3.4％;粉拟青霉不致病。     

金龟子绿僵菌防治竹笋禾夜蛾幼虫试验

在室内采用5种不同的金龟子绿僵菌菌株对竹笋禾夜蛾4龄幼虫进行感染试验,结果表明:Ma1291菌株对竹笋禾夜蛾幼虫的感染效果最好,校正死亡率达75.44%,其LT50值为8.2 d;其次是MaWP-04菌株,其校正死亡率达70.18%,LT50值为10.3 d。进一步对Ma1291和MaWP-04菌株的致病力测定结果表明,随着浓度的增加,致病力加强,其LC50分别为2.02×106孢子.mL-1和6.36×106孢子.mL-1;其致死中时间随着浓度的增加而缩短。利用Ma1291和MaWP-04菌株分别采用对笋撒菌粉和拌细砂土撒施的方法实施林间防治试验,结果表明:Ma1291菌株对竹笋禾夜蛾幼虫的防治效果达77.06%~81.36%以上,MaWP-04菌株防治效果为59.73%~67.06%。综合分析结果表明,Ma1291和MaWP-04菌株均有较好的应用效果。     

筛选球孢白僵菌菌株的试验

为防治松褐天牛筛选致病性强的白僵菌菌株，把来自不同寄主的１４株球孢白僵菌分离、纯化后，分别接种在ＰＤＡ和松褐天牛虫体培养基上进行生长速度，产孢能力测定，从中选出８株培养性状好的进行致病性试验。再选出致病力较强的菌株Ｂ１和Ｂ２生产高孢粉，用于做室内对松褐天牛致病力及防治方法的比较试验。结果显示，Ｂ１致病力优于Ｂ２，注射菌液法的防治效果优于撒菌粉法     

沙棘醋菌种筛选与应用研究初报

为筛选出适合沙棘酿醋的优良醋酸菌,以常规醋酸菌与优良的醋醅菌株为试材,进行产酸试验与品质分析.已筛选出沪酿1.01、JG1-1菌株,其沪酿1.01乙醇转化率达91.3%,JG1-1达86.3%.两菌种的发酵品均有沙棘和食醋特有的香气,酸味协调,醇厚,回味甜,典型性强.生产应用试验证明两菌种可在沙棘醋工厂化生产中选用.     

荔枝蝽白僵菌优良菌株的筛选及应用技术的研究

从林间采集的自然感染白僵菌的荔枝蝽僵虫，分离纯化菌株，进行不同菌株生长性状培养比较，以及在室内和果园中对荔枝蝽毒力生物测定，从中筛选出生长性状优良，对荔枝蝽毒力最强的菌株Bh1，应用该优良菌株的菌剂与农药混用防治，能有效地控制荔枝枝蝽的严重危害，适宜菌厂大规模生产和在闽中、南地区大面积防治推广。     

一株耐Cd罗尔斯通氏菌的分离、鉴定及其对Cd~(2+)的吸附特性研究

【目的】水体镉(Cd)污染日益加剧,严重威胁生态安全和居民身体健康,而微生物吸附法被认为是一种行之有效的Cd污染修复方法,本研究从Cd污染土壤中分离出了一株耐Cd菌株,探究其吸附能力,以期为微生物修复提供技术支持和理论依据。【方法】利用16S rDNA基因测序分析对其进行鉴定。采用单因素试验研究了菌粉吸附Cd~(2+)的影响因素及规律,用正交试验优化了菌粉吸附Cd~(2+)的最佳条件,通过吸附等温线的拟合与SEM、EDX、FTIR表征研究了菌粉吸附Cd~(2+)的机理。【结果】菌株LC经测序分析后鉴定为罗尔斯通氏菌Ralstonia spp.,Cd~(2+)的耐受阈值为850 mg/L。随着溶液温度的升高,LC菌粉对Cd~(2+)的吸附量先增大后减小;随着溶液初始pH值的增大,其吸附量先增大后减小;随着时间的延长,其吸附量先上升而后略微下降;随着Cd~(2+)初始浓度的增加,其吸附量先增大后基本稳定;随着投加量的增多,其吸附量先减少后趋于平衡。菌粉对Cd~(2+)的最佳吸附条件为:投加量0.1 mg/L,吸附时间2 h,pH值6.0,温度30℃,此时菌粉对Cd~(2+)的吸附量可达198 mg/g。LC菌粉对Cd~(2+)的等温吸附更符合Langmuir,其饱和吸附量为221 mg/g。LC菌粉对Cd~(2+)的吸附主要是Cd~(2+)与Na+、Mg~(2+)发生离子交换,以及菌粉表面的羟基、羰基、酰胺基、磷酸基等基团与Cd~(2+)发生络合作用。【结论】从Cd污染土壤中分离出来的LC,是一株耐性较强且吸附能力较好的细菌菌株。     

白僵菌防治松毛虫研究和技术推广

白僵菌防治松毛虫研究以及二十二年来在省内66个县撒放900t白僵菌粉,防治142万余亩松林松毛虫,实践证明应用白僵菌防治马尾松毛虫不会影响养蚕业,不会增加家蚕的僵病数量,这主要是由于防治松毛虫用的是松毛虫白僵菌,它对家蚕致病力低,对松毛虫致病力高,菌株不同;放菌治虫后,白僵菌数量很快消退到原来自然界的水平;松毛虫白僵菌在自然界的数量达不到使家蚕致病的数量。白僵菌的生产解决了三大技术难点:产品干燥技术,机械分离白僵菌孢子技术和高孢粉生产技术。解决了白僵菌的生产问题。明确了使用方法:纱布袋撒粉、机械喷粉和飞机喷洒;确定了放菌量,常规菌粉0.5～1.0kg/亩,高孢粉1.0～10.0g/亩;明确了放菌时间,每年10～11月份,3～4月份防治越冬代松毛虫;浙南、浙东南、沿海县市是我省最适合应用白僵菌防治松毛虫的地区,白僵菌的防治效果在70%以上。解决了白僵菌的使用问题。全省已广泛应用白僵菌防治松毛虫,有些地区白僵菌防治面积占总防治面积的1/3,已成为我省防治松毛虫的主要手段。应用白僵菌防治松毛虫挽回损失折合人民币3184.09方元,有显著的经济效益。     

常压一次灭菌土法生产白僵菌

今年四月,我们在华云山林管处卷硐林场,首次使用常压一次灭菌自己土法生产的白殭菌防治越冬代松毛虫,试验后一个月检查,与广东新会白殭菌厂生产的白殭菌粉比较,其殭死率还有所提高,常压一次灭菌土法生产取得初步成功。     

用半固体生产E_(19)菌粉和毒杀马尾松毛虫的试验初报

<正> 我所1978年从杉梢小卷叶蛾幼虫虫尸上分离出一种属苏云金杆菌类的E_(19)号菌株。前几年,采用了浅层液体培养和浅层固体培养,生产的菌粉含菌数低,易污染杂菌,生产不稳定,为此我们参照部分关于半固体培养的资料,结合自己的生产实际,进行了生产,暂名:“半固体生产”。此方法生产的菌粉菌数含量高,生产易控制。为了检验菌粉的生产质量     

白僵菌对生产工人危害的调查研究

<正> 白僵菌是半知菌类,链孢霉目,链孢霉科白僵菌属的一种寄生真菌。此菌可寄生6目15科190多种昆虫,是一种广谱性的生物杀虫剂。近年来,在农林业生产中广泛应用白僵菌防治农、林害虫,取得了显著的效果,但据许多生产单位反映,生产工人在接触白僵菌粉之后有发冷、发热、咳痰等反应。为探讨其致病机理,防止危害人体健康,我们于1980-1982年对217名白僵菌厂的生产工人健康状况进行了流行病学调查,并进行了动物毒性试验和生产工艺改革的卫生措施评价等研究工作。现将研究结果报道如下。一、工人健康状况的流行病学调查1.生产流程及生产环境中白僵菌粉浓度及孢子浓度我们根据目前白僵菌生产的工艺流程(即菌种分离→一级培养→二级扩大培养→三级扩大培养→出料→粉碎包装等工序),对38个厂次,各工序的101个操作点,125个菌粉样品进行了测定及孢子计数。其结果是,在