木聚糖酶的酶学性质研究

采用DNS法对木聚糖酶的一些性质进行了研究。结果表明:该酶的最适反应pH为6.0,在pH5～10之间保温不同时间后可保持较高的活性;最适反应温度50℃,液态下低于60℃热稳定性较好。在50℃、pH6.0下,以燕麦木聚糖为底物时,该木聚糖酶的米氏常数Km=6.49mg/mL,最大反应速度Vmax=21.05μg/(mL·min)。用不同底物测定酶活,以燕麦木聚糖为底物的酶活最高。酶在动物胃中活性较低,而在肠道中活性较高。     

温度和pH值对嗜热毛壳菌木聚糖酶活性影响的研究

本试验采用DNS法,分别在温度为20．100℃,pH值2．4—7．2的条件下,研究了不同温度和pH值对嗜热毛壳菌木聚糖酶活性的影响。结果表明：温度在20—50℃时,木聚糖酶的活性随温度的升高而线性增强,40-60℃表现较高的水平,70—100℃活性逐渐稳定,并维持在20℃时的活性水平。说明动物体温为40℃左右时,木聚糖酶能表现出较高的活性;在制粒温度范围内,80℃热处理与未处理组木聚糖酶的活性比较损失不大,说明其在制粒工艺过程有一定的优势;在pH值3．6以前,随着pH值的增大,木聚糖酶的活性逐渐升高;pH值为3．6时,木聚糖酶的活性最高;且在3．2-4．4范围内木聚糖酶的活性维持较高浓度,说明消化道中食麇从胃的酸性环境转化成十二指肠后段碱性环境的过渡时期,木聚糖酶能表现出较高的活性,有利于促进其对底物的降解,从而提高营养物质的消化吸收。本研究得出：嗜热毛壳菌木聚糖酶在40-60℃表现较高的水平,实验室条件下的100℃以内的加热不会导致酶活性的严重损失。维持嗜热毛壳菌木聚糖酶活性的适宜的pH值范围为3．2—4．4。     

中华蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶最佳反应体系的建立

乙酰胆碱酯酶是昆虫体内重要的生化标记物,利用其活性的变化可以监测农药对昆虫的亚致死效应。乙酰胆碱酯酶活性测定的条件会因为来源于不同的物种甚至同一物种不同部位而改变。本文采用正交试验排列的25个组合试验探究了酶浓度、底物浓度、pH、反应温度及反应时间5个因素对测定中华蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶比活力的影响,并从中选择出最佳测定组合。试验结果表明,5个因素对中华蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶比活力影响的大小顺序为酶浓度反应温度pH反应时间底物浓度,各因素最佳组合为酶浓度0.25g/L、底物浓度0.8mmol/L、pH值7.5、反应温度40℃及反应时间5min。本文优化了中华蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶测定条件,为今后评估有机磷类、氨基甲酸类和新烟碱类杀虫剂提供条件。     

不同底物及NaOH的添加对木聚糖酶酶活测定的影响

本试验采用DNS法对测定木聚糖酶酶活的底物性质进行研究。结果表明：以小麦木聚糖为底物时的木聚糖酶酶活最高,其次是燕麦木聚糖,再其次是山毛榉木聚糖,以桦木木聚糖为底物时的酶活最低;在底物配制过程中一般加入NaOH时测得的酶活低于不添加NaOH时的酶活,但以小麦木聚糖为底物时加入NaOH时测得的酶活高于不添加NaOH时的酶活。     

温度和pH值对嗜热毛壳菌木聚糖酶活性影响的研究

本试验采用DNS法,分别在温度为20~100℃,pH值2.4~7.2的条件下,研究了不同温度和pH值对嗜热毛壳菌木聚糖酶活性的影响。结果表明:温度在20~50℃时,木聚糖酶的活性随温度的升高而线性增强,40~60℃表现较高的水平,70~100℃活性逐渐稳定,并维持在20℃时的活性水平。说明动物体温为40℃左右时,木聚糖酶能表现出较高的活性;在制粒温度范围内,80℃热处理与未处理组木聚糖酶的活性比较损失不大,说明其在制粒工艺过程有一定的优势;在pH值3.6以前,随着pH值的增大,木聚糖酶的活性逐渐升高;pH值为3.6时,木聚糖酶的活性最高;且在3.2~4.4范围内木聚糖酶的活性维持较高浓度,说明消化道中食糜从胃的酸性环境转化成十二指肠后段碱性环境的过渡时期,木聚糖酶能表现出较高的活性,有利于促进其对底物的降解,从而提高营养物质的消化吸收。本研究得出:嗜热毛壳菌木聚糖酶在40~60℃表现较高的水平,实验室条件下的100℃以内的加热不会导致酶活性的严重损失。维持嗜热毛壳菌木聚糖酶活性的适宜的pH值范围为3.2~4.4。     

瘤胃厌氧真菌木聚糖酶基因的表达与酶学特性研究

旨在表达来源于瘤胃厌氧真菌基因组的4个木聚糖酶基因A、C、D和F,并比较分析其酶学特性。首先根据大肠杆菌基因编码偏好,合成可在大肠杆菌中表达的木聚糖酶基因序列,然后采用同源重组的方法将各序列分别插入载体pET-28a中,在大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中异源表达,并研究其酶学特性,结果成功表达出来源于厌氧真菌的4个木聚糖酶基因。测定其酶学性质发现,4种木聚糖酶的反应最适pH值均为8.0;木聚糖酶D的反应最适温度为37℃,其余3种木聚糖酶的反应最适温度均为45℃;4种木聚糖酶具有广泛的温度稳定性和pH稳定性;金属离子Ca²⁺、Mg²⁺、Mn²⁺显著促进木聚糖酶活性(P<0.05),而Zn²⁺则有明显的抑制作用(P<0.05);4种木聚糖酶降解山毛榉木聚糖的能力显著高于其他底物(P<0.05)。本研究成功表达了4种来源于厌氧真菌的木聚糖酶,其良好的温度和pH稳定性具有潜在的工业应用价值。     

半乳甘露寡糖和金霉素在育肥猪日粮中的效果对比试验

1材料与方法 1．1供试材料 试验组用半乳甘露寡糖产品由北京中科艾迪动物营养保健技术有限公司提供（以预混料形式),其中半乳甘露寡糖(GMOS）的含量在全价料中相当于0．1％添加,它是由中国科学院微生物研究所利用新的β-甘露聚糖酶和木聚糖酶特异降解田菁胶的甘露聚糖主糖链和甘蔗渣的木聚糖链在不同温度、pH、反应时间、底物量等条件下经过转化试验而获得：对照组用金霉素产品由郑州七配合公司提供（也以预混料形式),在全价料中相当于50mg／kg添加。     

康宁木霉产木聚糖酶的稳定性研究

本文研究了不同无机离子、pH值和温度对康宁木霉(Trichoderma koningii)产木聚糖酶稳定性的影响.结果表明:(1)不同种类、不同浓度的无机离子对木聚糖酶的活性表现出不同程度的激活或抑制作用.Cu2+、Mn2+和Ba2+可抑制木聚糖酶活性,而Co2+、Na+、K+、Fe2+、Ca2+和Mg2+可激活木聚糖酶活性.(2)不同pH和温度对木聚糖酶的活性也有显著影响.康宁木霉产木聚糖酶的最适保存pH和温度分别是7.0和30℃.且在pH 5～8时相对酶活可保持80%以上.     

不同酶促反应条件及热处理对木聚糖酶活的影响

本试验研究了还原糖法不同酶促反应时间、温度和ｐＨ值及干热、温热处理等因素对木聚糖酶活的影响。结果表明：大多数酶制产品获得最高木聚糖酶的促反应条件是１０ｍｉｎ、６０℃和ｐＨ６．３５。酶活测定时各酶制剂具有较宽的温度适应范围（３５￣７５℃）和较宽的ｐＨ值适应范围（ｐＨ４．５￣７．４）。各酶制剂在较高温度（６５￣９５℃）下干热处理１０ｍｉｎ，其酶活损失较少，而在８５℃温热处理时间愈长，其酶活损失愈多。     

耐热木聚糖酶水解法制备木寡糖的研究

为探讨耐热木聚糖酶水解自制甘蔗渣木聚糖制备木寡糖的工艺条件和分析水解液的寡糖成分,试验以产耐热木聚糖酶的基因工程菌1020为原料,水解自制的甘蔗渣木聚糖,分别研究水解过程中酶的用量、木聚糖的浓度及酶解温度对酶解反应的影响,并采用高压液相色谱和质谱联用技术对水解液成分进行分析。试验结果表明,2%的木聚糖浓度,水解温度95℃,酶液用量100U/g,酶解3h后DP值可降至2.94,满足生产木寡糖对聚合度的要求;并且水解液的成分主要为木糖、木二糖和木三糖,没能检测到木四糖。耐热木聚糖酶在高温下酶解木聚糖对酶法制备木寡糖具有重要的应用价值。     

底物浓度对饲用木聚糖酶酶活测定的影晌

针对运用终点法以DNS还原糖法测定木聚糖酶活力过程中,底物浓度对测定结果的影响进行了试验分析,并结合实际和理论意义进行综合考虑,提出了在测定过程中对试验结果影响较小的适宜底物浓度,提高准确性和可重复性.     

底物浓度对饲用木聚糖酶酶活测定的影响

针对运用终点法以DNS还原糖法测定木聚糖酶活力过程中,底物浓度对测定结果的影响进行了试验分析,并结合实际和理论意义进行综合考虑,提出了在测定过程中对试验结果影响较小的适宜底物浓度,提高准确性和可重复性。     

绿色木霉水解甘草渣产糖条件的研究

为了延长甘草渣加工产业链,利用废弃甘草渣中的纤维素、半纤维素、木质素等大分子碳水化合物水解为单糖,再由单糖发酵成蛋白质用于饲料生产,试验采用甘草渣为原料,以绿色木霉为催化剂,研究产糖工艺条件。结果表明:各因素对产糖率影响由大到小依次为反应温度反应时间酶的用量反应pH值;最佳工艺条件为1.0 g甘草渣底物中加入绿色木霉活化液90 mL,反应时间为35 h,反应温度为55℃,pH值为4.8,在最佳工艺下水解甘草渣产糖率为9.93%。     

饲用木聚糖酶、β-葡聚糖酶活力测定方法的调研

对国内外有代表性的十几家饲用制剂科研单位和生产企业的半纤维素酶酶活测定方法进行了调研。结果为绝大多数单位都使用还原糖法，测定条件的pH值在定，国内大多数单位选用国产底物。β-葡聚糖及木聚糖底物的浓度一般在0.5-1.0%(W/V)。缓冲液选用醋酸钠缓冲液、磷酸氢二钠缓冲液或柠檬酸缓冲液，而且浓度差别较大。由结果可知：国外和国内对半纤维素酶酶活测定方法的条件都未统一，酶活测定方法的统一存在一定的难度。     

饲用复合酶制剂中β-葡聚糖酶活测定方法的研究

本试验研究了不同酶促反应时间、温度和ｐＨ值对还原糖法β－葡聚糖酶活测值的影响。结果表明：大多数饲用复合酶制剂获得最高β－葡聚糖酶活的酶促反应条件是２０ｍｉｎ、６０℃和ｐＨ６．３５。但为使体外测定条件尽可能接近酶在畜禽体内的作用环境,建议测定温度选为４０℃;鸡用酶制剂测定ｐＨ值选为５．８５,猪用酶制剂测定ｐＨ值选为６．３５;反应时间选为２０ｍｉｎ。     

基因工程酵母产木聚糖酶(xylA)的性质初探

将高效分泌表达木聚糖酶的基因工程酵母S2接种于FA、FB诱导培养基，200r／min，30℃=发酵培养4d，研究其分泌的木聚糖酶性质。结果表明，该基因工程菌产木聚糖酶分子量约为34．4kDa，最适作用pH值为4．O，最适作用温度为37℃。镁、亚铁、镍、锌、钙等金属离子对木聚糖酶活性有不同程度的促进作用，汞、银、锰、铜、铁、碘等金属离子对木聚糖酶有显著的抑制作用，EDTA对木聚糖酶的活性没有显著的影响，但5mM的SDS几乎使木聚糖酶完全失活。     

玉米皮中阿拉伯木聚糖碱提取工艺的研究

为提高玉米皮中阿拉伯木聚糖的得率．在考察温度、时间、碱液浓度和料液比4个单因素对阿拉伯木聚糖得率影响的基础上．采用正交试验对阿拉伯木聚糖的碱提工艺条件进行了优化。结果表明,在提取温度80℃、时间4h、NaOH浓度0．3mol／L、料液比1：30的条件下．阿拉伯木聚糖的得率达到最大值24．57％。     

用酶联吸附法测定木聚糖酶活力的研究

酶联吸附法(ELSA)检测纤维酶活力是一种利用未降解的酶底物间接测定酶活力的新方法。笔者对该方法的反应条件进行了系统的研究,并对其进行了一定的改进,从而提高了其灵敏度。结果表明:木聚糖酶的反应温度为30℃、时间为20min、pH值为5.4;碱性磷酸酶的显色反应温度为35℃。但为了使木聚糖酶的反应温度接近动物肠道温度,建议在该方法中选用40℃。酶联吸附法检测酶活具有灵敏度高(能够测到样品中含有0.0001μmol/min·g的酶活)、操作简单(1个人在1个工作日内可处理200～300个样品)、成本低等优点。     

Bacillus subtilisT15产木聚糖酶的学特性及其在禽饲料中应用的初步研究

对Bacillus subtilisT15生产的木聚糖酶作了部分酶学性质考察,研究表明该酶是一种中性木聚糖酶,最适pH值为6.4,pH值稳定范围为5.6～8.0;最适温度为55℃,酶液在40～50℃处理4h后活力保持100%,含水量17%～20%的酶泥在85℃条件下2.5min活力保持67.4%;对燕麦木聚糖的主要降解产物为聚合度2～5的木寡糖.在考察酶学性质基础上,对该酶作了在禽饲料中的初步应用实验.饲养试验表明,在禽饲料中添加0.002%该酶能提高料肉比9.94%,饲养效果显著优于对照组(P＜0.05).     

Bacillus subtilisT15产木聚糖酶的酶学特性及其在禽饲料中应用的初步研究

对BacillussubtilisT15生产的木聚糖酶作了部分酶学性质考察,研究表明:该酶是一种中性木聚糖酶,最适pH值为6.4,pH值稳定范围为5.6～8.0;最适温度为55℃,酶液在40～50℃处理4h后活力保持100%,含水量17%～20%的酶泥在85℃条件下2.5min活力保持67.4%;对燕麦木聚糖的主要降解产物为聚合度2～5的木寡糖。在考察酶学性质基础上,对该酶作了在禽饲料中的初步应用实验。饲养试验表明,在禽饲料中添加0.002%该酶能提高料肉比9.94%,饲养效果显著优于对照组(P<0.05)。