我国棉花主栽品种的RAPD指纹图谱研究

利用ＲＡＰＤ技术，对我国９个棉花主栽品种基因组进行ＤＮＡ片段扩增，以研究棉花不同栽培品种的指纹图谱。结果表明：１８个不同的随机引物中有１３个扩增出多态性ＤＮＡ片段，其中１个引物（ＯＰＰ－０９）可使每一品种具有其自身的特征谱带，展示了ＲＡＰＤ技术可从ＤＮＡ水平上鉴别我国现有棉花推广品种的分子差异，用它鉴定品种纯度是可行的。     

南瓜属三个种的亲缘关系与品种的分子鉴定研究

用随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术,对南瓜属三个主要栽培种即美洲南瓜、中国南瓜（Ｃ。ｍｏｓｃｈａｔａＤ．）和印度南瓜（Ｃ．ｍａｘｉｍａＤ．）的２３个品种（系）及种间杂交后代进行亲缘关系与品种（系）的分子鉴定研究。从２００个随机引物（１０ｂｐ）筛选出１７个引物,对２３个南瓜品种（系）的染色体组ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增,共产生８０条扩增带,其中７７条在南瓜属三个种间表现出差异,可作为遗传标记（ＲＡＰＤ标     

中国春Ph1基因的RAPD标记鉴定

用２６０个１０ｂｐ随机引物对中国春（ＣＳ）、ｐｈ１ｂ突变体及其Ｆ２分离群体基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析,筛选出两个特异的ＲＡＰＤ标记ＯＰＲ７９３６和ＯＰＲ１７５２４。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析,并结合减数分裂Ｍ１染色体配对分析,认为这两个ＲＡＰＤ标记位于５ＢＬ染色体ｐｈ１ｂ基因缺失区中,可以作为ｐｈ１ｂ基因的分子标记。     

22个甘薯品种（系）遗传背景的RAPD图谱分析

通过１０个随机引物的ＤＮＡ扩增，首次报道了２２个甘薯品种的ＲＡＰＤ多态性，不同品种具有不同的ＤＮＡ扩增带型，反映了不同品种遗传背景上的差异，计算了２２个甘薯品种的Ｎｅｉ‘ｓ相似系数与遗传距离，建立了它们的ＵＰＧＭＡ系统树，并通过聚类分析与对应分析，讨论了２２个甘薯品种间的亲缘关系，ＲＡＰＤ多态性分析从分子水平上反映了甘薯品种复杂的遗传背景，并为育种的亲本选配提供了依据。     

水稻农垦58与农垦58s的RAPD和ISSR分析

以光敏核不育水稻农垦５８ｓ及其原始株农垦５８核ＤＮＡ为模板,进行了ＲＡＰＤ和ＩＳＳＲ多态性分析,结果表明：在可扩增的１５４个ＲＡＰＤ引物和７８个ＩＳＳＲ引物中,８个ＲＡＰＤ引物和７个ＩＳＳＲ引物的扩增产物表现出ＤＮＡ多态性,ＲＡＰＤ－ＰＣＲ产物的多态性标记分别出现在农垦５８ｓ,农垦５８或二者同时出现,而ＩＳＳＲ－ＰＣＲ扩增产物的多态性标记只出现在农垦５８或农垦５８ｓ中。获得多态性ＲＡＰＤ标记及ＩＳ     

鸡传染性法氏囊病毒Ts,OH毒株,鱼传染性胰脏坏死病毒DRT …

用幼鸡成纤维细胞繁殖鸡传染性法氏囊病病毒（ＴＢＤＶ）Ｔｓ毒株,病毒颗粒经提纯后提取基因组ｄｓＲＮＡ。根据已报道的加拿大ＯＨ株序列设计引物,用ＲＴ－ＰＣＲ进行ｃＤＮＡ扩增,获得９７６ｂｐ、７７４ｂｐ和９９７ｂｐ的三个部分重叠的片段,分别克隆于ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙ载体,利用ＳＰ６,Ｔ７ 异引物及ＰＣＲ引物进行序列分析,并连接为一个寒带的大片段,结果表明,所克隆片段为２６６５ｂｐ的ＩＢＤＶＶＰ、基因的大     

苹果属(Malus)显性矮化主基因Dw的RAPD分子标记

以具兼性无融合生殖特性的优良苹果砧木平邑甜茶与主基因显性矮化资源“扎矮７６”杂交所获得的实生后代中的有性杂种群体为试材,采用集群分析法共筛选７３０个Ｏｐｅｒｏｎ随机引物或引物组合,获得２个与Ｄｗ基因连锁的ＲＡＰＤ标记,分别是Ｆ０４－８００和Ｆ０３－１１５０,且与Ｄｗ基因的连锁距离分别是１４．０ ｃＭ和２５．５ｃＭ。     

烟草品种RAPD分子标记遗传差异研究

用２３５个随机引物对来源于中国,美国等国家的２３个烤烟和地方晒晾烟品种基因组ＤＮＡ进行了ＲＡＰＤ分析。结果表明：２５个引物可以扩增出多态性产物;利用其中１６个引物共扩增出１２８条带,其中４６条品种间表现多态性,这种多态性可以进行品种鉴定;根据多态性的带计算了品种间遗传距离,按类平均法可将２３个品种划分６类,各类内含不 地理来源和不同调制类型的品种,说明品种地理来源和调制类型差异与遗传差异没有必然的     

传染性法氏囊病病毒VP2基因的克隆及其重组鸡痘病毒转移载…

根据已发表的ＩＢＤＶ基因组序列设计并合成一对特异扩增ＩＢＤＶ ＶＰ２ｃＤＮＡ的引物，以纯化的ＩＢＤＶ－Ｄ７８弱毒疫苗株基因组为模板，利用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增出约１．５ｋｂ产物。将ＰＣＲ产物克隆到ｐＵＣ１９的Ｓｍａｌ位点，经酶切图谱分析等方法鉴定出重组ＶＰ２ｃＤＮＡ质粒（ｐＶＰ２）。将ＶＰ２基因正向插入ＦＰＶ启动子ＬＰ２３Ｐ２下游，连同痘苗病毒启动子Ｐ１１启动的ＬａｃＺ报告基因盒插入ＦＰＶ转移载体中     

在大肠杆蓖TG1中克隆和表达苏云金芽胞杆菌cryI基因

本研究分离并提纯苏云金芽胞杆菌８０１０菌株的质粒ＤＮＡ，经ＢａｍＨＩ／ＰｓｔＩ双酶解后与ＤＩＧ标记的ｃｒｙＩ基因ＥｃｏＲＩ－Ｆ片段的ＲＮＡ探针杂交，显示出分子量分别为６．５６ｋｂ和４．４ｋｂ的阳性片段。用Ｂｌａｓｓｍｉｌｋ回收４．４ｋｂ的阳性片段并与双功能载体ｐＲＩＴ５重组，转化感受态大肠杆菌ＴＧ１细胞，通过斑点杂交和快检获得含４．４ｋｂ片段的克隆株Ｔ２，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳表明它表达了１３０ｋＤ     

甜菜坏死黄脉病毒新疆分离物外壳蛋白基因的序列分析

用根据国外已报道的甜菜坏死黄脉病毒（ＢＮＹＶＶ）的ＲＮＡ２的序列合成的两个引物，通过对ＢＮＹＶＶ新疆分离物的ＲＮＡ逆转录获得了ＢＮＹＶＶ的外壳蛋白基因的ｃＤＮＡ，经ＰＣＲ扩增后用Ｔ４聚合酶补平两端，克隆到ｐＧＥＭ－７Ｚｆ（＋）质粒的ＳｍａＩ位点，转化大肠杆菌ＤＨ５α，经筛选得到正向插入的重组质粒ｐＧＥＢ３。用ＰＣＲ扩增和酶切均得到５９０ｂｐ的ＤＮＡ片段。用ＡＢＩ３７０Ａ型ＤＮＡ全自动序列仪测出该ｃ     

RAPD技术在基因组指纹图谱构建研究中的应用

遗传图谱的建立，是遗传学研究中一个很重要的领域，是对基因组进行系统性研究的基础，也是遗传育种的依据。９０年代发展起了一种ＤＮＡ多态性分析的新方法－ＲＡＰＤ技术，克服了以往ＲＦＬＰ和ＰＣＲ技术的很多缺陷，已被广泛应用于基因组研究的各个方面。文中介绍了ＲＡＰＤ技术的原理，研究成果，以及未来展望。     

马铃薯Y病毒普通株系外壳蛋白基因的克隆与原核表达载体的构建

本研究报道马铃薯Ｙ病毒普通株系外壳蛋白基因ｃＤＮＡ克隆,全序列分析及其原核表达载体构建的结果。从感染ＰＶＹ的烟草叶片中提取病毒粒体,ＳＤＳ－酚法提取病毒核酸。以所提核酸为模板,用一对ＰＶＰＣＰ基因引物进行ＲＴ－ＰＣＲ,扩增了０．８０ｋｂ的特异性核苷酸片段。该片段大小五国外报道的ＰＶＹ ＣＰ基因一致,将ＰＤＲ产物插入到克隆载体ｐＧＥＭ７Ｚｆ（＋）中转化大肠杆菌ＤＨ５α。     

小麦杂种优势群研究：Ⅱ.普通小麦,西藏半野生小麦和斯卑尔…

选用我国的２２份普通小麦，７份西藏半野生小麦及来自国外的１７份斯卑尔脱小麦等共４６从材料，利用ＲＡＰＤ标记进行小麦品种，亚种及种间分子标记遗传差异研究，分析扩大杂交小麦育种亲本遗传基础和构建小麦杂种优势群的途径。２６个引物在４６份材料间共扩增出２７９条带，其中１８２条带具有多态性，每个引物可扩增２－１８条多态性带，平均为７条带。种间ＲＡＰＤ多态性表现为斯卑尔脱小麦〉西藏半野生小麦〉普通小麦。利用８     

水稻三系及其杂种的RAPD指纹图谱分析

从三套三系及它们的杂种共１０个水稻材料无菌苗叶片提取ＤＮＡ，用随机的ＤＮＡ引物分别做ＰＣＲ扩增（ＲＡＰＤ）。扩增产物在琼脂糖胶上电泳产生可重复的指纹图谱。４７％的引物产生的图谱可以把不育系和恢复系区别开来，它们各自的特异带可以作为品种鉴定的分子标记，同时这种标记能够用来检测亲本系间的遗传距离，从而为强优势组合的亲本选配提供分子水平的依据。     

利用RAPD技术检测转绿型白化突变系W25基因组的变化

转绿型白化突变系Ｗ２５系γ射线辐照籼型温敏核不育水稻２１７７ｓ获得的一个叶色突变体。在整个生育阶段，其叶色呈现白色－转绿－返白－复绿规律变化。ＲＡＰＤ分析结果表明，７０个随机引物中有３个引物不能扩增出多态性ＤＮＡ，共扩增出４９３条ＤＮＡ条带，平均每个引物７．４条，其中引物Ｈ０５能扩增出Ｗ２５和２１７７ｓ多态性产物，２１７７ｓ表现出缺失２条特异性ＤＮＡ条带。     

利用PCR法从文库中快速克隆人促红细胞生成素基因

本文介绍一种利用ＰＣＲ技术从基因文库中快速克隆基因组ＤＮＡ的方法。含有１０７个克隆的人基因文库分成１０份，小量提取ＤＮＡ，利用特异性的寡核苷酸引物检测ＥＰＯ基因的存在与否。经过４轮ＰＣＲ筛选，从阳性管中取１０３个噬菌体进行铺板培养，经原位杂交获得含有ＥＰＯ基因的阳性克隆。阳性克隆的插入片段被亚克隆到质粒上。酶切分析及序列分析的结果均证明我们获得ＥＰＯ基因。ＰＣＲ－筛库法可以快速从文库中获得目的基因     

马哈利樱桃PGIP基因克隆及全序列测定

以马哈利樱桃（Ｐｒｕｎｕｓ ｍａｈａｌｅｂＬ．）基因组ＤＮＡ为模板,用ＰＧＩＰ（多聚半乳糖醛酸酶抵制蛋白）基因保守序列为引物进行ＰＣＲ扩增,得到长度约为１．２ｋｂ的目的片段,将其克隆到ｐＵＣｍ－Ｔ载体上,进行序列测定,结果表明,目的片段全长１１９２ｂｐ,由２个外显子和１个内含子构成,外显子总长９９６ｂｐ,编码３３０个氨基酸,与杏的ＰＧＩＰ基因ｍＲＮＡ序列、编码的氨基酸序殓同源性分别达到９４．１％、     

应用RAPD技术快速进行西瓜杂交种纯度鉴定的研究

本研究建立了简单,快速提取西瓜半粒种子ＤＮＡ方法,并简化了适合西瓜的ＲＡＰＤ－ＰＣＲ分析程序。对“无籽京欣一号”西瓜种子纯度开展了分子鉴定研究,找到了一个随机引物ＯＰＰ－０１,用它扩增的ＯＰＰ－０１／５６４只在父本与杂交种上出现,母本不出现,本文还针对ＲＡＰＤ技术在西瓜杂交种纯度鉴定上实际应用的可能性进行了讨论。     

芽孢杆菌(Bacillus spp.)拮抗基因的分子标记

用ＢＯＸ－ＰＣＲ指纹图谱进行了１８４个格兰氏生菌株,其中有４１个菌株与标准菌种Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ之间的ＤＮＡ指纹图谱相似性大于７０％,在离体条件下,测定这些菌株对水稻纹枯菌的拮抗性能。选出４个代表菌株（Ｇ４３３、Ｇ４３４＾－、Ｇ３９６＾＋、Ｇ２９２＾＋）用于筛选ＲＡＰＤ－ＰＣＲ的有效引物、先后共测试了１２４个随机引物,有８个随机引物能够产生明显与拮抗基因相关的ＤＮ