甜菜黄化病毒病防治技术

一、发病条件 甜菜黄化病毒病在我区主要由桃蚜、豆蚜传播.发病时期及流行程度与蚜虫的发生及其迁飞高峰和迁飞量有直接关系.当气温25 ℃、相对湿度40%～60%时,有利于有翅桃蚜的发生和迁飞.6～7月雨多量大会限制蚜虫迁飞,而天旱则会增大蚜虫迁飞量,加速该病的流行.     

甜菜黄化病毒发生与防治

0 引言 新疆是我国重要的糖料生产基地,随着甜菜种植面积的扩大和种植年限的增加,病毒病的危害日趋严重.病毒病是根甜菜的主要病害,分布广泛,发生普遍,一般病株率100%～20%,严重时可达40%以上,对产量和品质有较大影响.经专家在新疆甜菜主要产区开展广泛调查,根据甜菜上的症状表现分花叶型、黄化型、坏死黄脉型(具丛根症状)和黑色焦枯型,其中花叶型又分为黄色泡斑花叶、系统环斑花叶和黄脉皱缩花叶三个类型.     

甜菜坏死黄脉病毒对甜菜幼苗膜脂过氧化的影响

实验以抗丛根病性不同的4个甜菜品种为材料,研究了甜菜坏死黄脉病毒对甜菜幼苗膜脂过氧化的影响.结果表明,病毒侵染后甜菜抗病品种幼苗MDA、H2O2含量,CAT、APX、SOD、POD及PAL活性均有不同幅度的变化;甜菜坏死黄脉病毒作用的第2d、第3d时,以上各指标达到蜂值,且甜菜抗病品种H2O2含量、CAT、APX、SOD、POD及PAL活性显著高于感病品种;甜菜感病品种MDA含量显著高于抗病品种.结果说明,在甜菜坏死黄脉病毒作用下,甜菜抗病品种通过诱导抗氧化酶类活性升高,降低膜脂过氧化水平,从而提高甜菜对甜菜坏死黄脉病毒的抗性.     

新疆甜菜病毒病毒原类型的初步鉴定

１９９５～１９９８年从新疆甜菜主产区石河子、塔城、库尔勒、伊宁、奎屯等地采集病毒病样２２８个,初步归为４个类型,经寄主范围、病毒粒体形态观察、血清学试验、传播途径测定,初步确定这４个类型的病毒病样分属于黄瓜花叶病毒类群、马铃薯Ｙ病毒类群、真菌传杆状病毒类群、长线形病毒类群和甜菜黑色焦枯病害类群。     

甜菜褐斑病为害损失及防治指标研究

田间人工接菌试验表明，甜菜褐斑病三个不同发病期，甜菜块根产量和含糖率受损失的程度，依病情指数的增加而逐渐增大，二者呈显著正相关。在经济允许损失程度下依据相应产量损失回归方程得出了不同生产水平的防治指标。     

甜菜夜蛾核型多角体病毒对甜菜夜蛾幼虫的毒力测定

室内毒力测定表明,在一定范围内,不同浓度甜菜夜蛾核型多角体病毒(SeNPV)感染甜菜夜蛾2龄幼虫后,浓度越高,甜菜夜蛾死亡率越高,开始死亡时间越早,全程感染至死亡的天数越短,致死中时(LT50)为2.44~5.60 d,致死中浓度LC50=7.11×104PIB/m l。以剂量为2×105PIB/m l的SeNPV样品感染甜菜夜蛾1~4龄幼虫,低龄幼虫的死亡高峰期为4~5 d,全程期为6~7 d;3龄以上幼虫死亡高峰期为7 d左右,全程期为10~12 d。     

应用寄主植物筛选甜菜坏死黄脉病毒的无毒介体

病土培育藜、昆藜、老枪谷、虞美人、三白麦瓶草、繁缕，４周后用Ｎｉｋｏｎ倒置显微镜检测，在藜的根中观察到介体甜菜多粘菌的游动孢子，把藜的根磨碎接种甜菜，８周后镜检观察到介体的休眠孢子，ＥＬＩＳＡ检测甜菜坏死黄脉病毒结果为阴性，初步认为筛选到了不带毒的甜菜多粘菌。     

焉耆垦区甜菜褐斑病的发生及防治

焉耆垦区是新疆的甜菜主产区之一.随着甜菜种植期逐年增加,甜菜褐斑病日趋严重,病情指数轻则20～30,重则50～60,甜菜产量虽达4吨/666.7米2,但含糖率仅为12～15%,呈下降趋势,严重危及垦区的甜菜生产.     

甜菜夜蛾颗粒体病毒毒力的生物测定

以甜菜夜蛾２—３龄幼虫为供试虫，对国内外首次发现的甜菜夜蛾颗粒体病毒（Ｌａｐｈｙｇｍａｅｘｉｇｕｅｇｒａｎｙｌｏｓｉｓｖｉｒｕｓ，ＬｅＧＶ）进行了生物测定．在２３—２５℃相对湿度７０％—８０％下其样品死亡机率值与浓度对数值的回归方程是ｙ＝０．４５ｘ＋３．７６（ｒ＝０．９９），ＬＣ５０＝５７２．４颗粒体·ｍＬ－１，ＬＣ５０的９５％置信区为１５８—２０８４颗粒体·ｍＬ－１．甜菜夜蛾不同龄期幼虫对ＬｅＧＶ的敏感性不同，初孵幼虫敏感性最强，２、３龄次之，４龄幼虫极不敏感．此外，贮藏期温度对ＬｅＧＶ感染力的影响也进行了初步研究．     

贵州芸薹黄化病毒的分子检测及基因型鉴定

【目的】对贵州省白菜、萝卜和甘蓝感染芸薹黄化病毒（Brassica yellows virus,BrYV）进行分子检测及基因型鉴定,为马铃薯卷叶病毒属病毒的防治提供理论参考。【方法】在贵州省遵义市、威宁县、关岭县、平坝县等县（市）共采集284份蔬菜（白菜、萝卜和甘蓝）疑似病毒病样品,利用马铃薯卷叶病毒属的通用引物进行RT-PCR分子检测,并对检测出的16个BrYV分离物进行P0和CP基因序列扩增,再与已报道的BrYV基因序列进行比对,从而构建系统发育进化树,鉴定其基因型。【结果】284份疑似病毒病样品中,有43份样品检测出BrYV,检出率为15.14%,其中,感染BrYV白菜样品12份,占白菜总样品数的12.77%;感染BrYV萝卜样品14份,占萝卜总样品数的20.29%;感染BrYV甘蓝样品17份,占甘蓝总样品数的14.05%。贵州16个BrYV分离物P0基因核苷酸序列的相似性为89.9%~100.0%,CP基因核苷酸序列的相似性为93.5%~100.0%,二者编码的氨基酸序列相似性均为100.0%。基于P0基因构建的系统发育进化树可知,BrYV-Pingba-BC-2、BrYV-Zunyi-LB-1和BrYV-Zhijing-BC-1均与BrYV-BJS和BrYV-BBJ聚为一类,其余13个分离物均与BrYV-ABJ和BrYV-AJS聚为一类。基于CP基因构建的系统发育进化树可知,贵州不同地区不同蔬菜作物的16个BrYV分离与BrYV-A和BrYV-B基因型无明显分界,亲缘关系均较近。BrYV P0基因检测到5个重组事件,BrYV CP基因未检测到潜在重组事件。【结论】BrYV在贵州白菜、萝卜和甘蓝上普遍发生,但对萝卜的危害最重,主要存在BrYV-A和BrYV-B 2种基因型。     

枳砧甜橙黄化问题的研究

枳砧嫁接各种柑桔类品种,只有少酸类甜橙发生黄化。不同株系枳的单株嫁接甜橙,黄化程度有明显差异,用茎尖脱毒的暗柳橙接穗嫁接成苗后出现的黄化率反而高于用黄化的改良橙接穗。 在防虫网室中用实生暗柳橙接穗嫁接小叶大花系枳出现7.4％的黄化株和59.2％轻度黄化株,在这些黄化株上嫁接腊斯克枳橙不表现碎叶病症状,因而认为枳砧甜橙黄化系嫁接不亲和引起,与碎叶病毒无关。     

我国甜菜夜蛾核型多角体病毒研究新进展

核型多角体病毒是昆虫病毒中最大的类群,它能够专一性地侵染并杀死一种或者几种农林害虫,并对害虫天敌、环境和人畜无害,是一种值得推广的绿色生物农药。为有效利用绿色生物农药防治病虫害,对我国近几年关于甜菜夜蛾核多角体病毒的毒力、病毒制剂研究与生产、田间应用及药效试验、增效剂研究、分子生物学等方面进行了阐述,并提出了新的展望和应用需求。     

甜菜坏死黄脉病毒感染甜菜细胞的超微病变比较研究

用透射电镜观察了甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)对甜菜抗、感丛根病品种块根细胞超微结构的影响.结果表明,BNYVV对感病品种的细胞超微结构破坏严重,整个细胞变形,空泡化,细胞核结构发生紊乱,线粒体和高尔基体明显增多,细胞质中小液泡增多,在液泡膜边缘可见到一些纤细丝状物质的圆形或卵圆形小泡突入液泡中.而抗病品种细胞超微结构破坏较轻,寄主细胞产生一系列显著的结构防卫反应:形成细胞壁沉积物及液泡膜上显示出黑色颗粒状沉积物等,保证了胞内代谢相对稳定,为甜菜抗丛根病机理提供了细胞学基础.     

山东省辣椒主要病毒种类的分子检测与鉴定

【目的】鉴定山东省辣椒上的主要病毒种类,明确该地区辣椒上的主要病毒病原。【方法】2014—2015年,在山东省临沂、日照、青岛、烟台、潍坊、淄博、济宁、菏泽、聊城、德州共10个市(区)采集253份疑似感病的辣椒植株叶片,提取叶片总RNA和总DNA,利用双生病毒的通用引物(PA/PB)、马铃薯卷叶病毒属通用引物(POL-F/POL-R)及已报道侵染辣椒的主要病毒的检测引物对样品进行PCR、RT-PCR分子检测与鉴定,将扩增得到的目的条带经凝胶回收试剂盒回收纯化后连接到pMD18-T载体上,再送至公司进行克隆测序。分别将所得的PMMoV、PeVYV和BWYV序列在NCBI上利用BLAST进行检索,利用DNAStar软件中的Megalign将所得序列与Gen Bank中已登录的世界各地有代表性的序列进行同源性比对,利用软件MEGA 5.05的Clustal W法进行多序列比对分析以及邻接法(neighbor-joining,NJ)构建系统进化树,系统进化树中各分支置信度(Bootstrap)进行1 000次重复分析。【结果】PMMoV、CMV总检出率分别为61.66%、60.08%;TMGMV、BBWV-2、BWYV、TMV发生也比较普遍,检出率为41.90%、34.78%、33.20%和24.90%;PCV-2、ToMV、TYLCV、PVY、MABYV、PeVYV、PCV-1、ChiVMV、AMV发生侵染现象较少,检出率分别为11.86%、9.88%、9.09%、6.72%、5.53%、3.56%、3.16%、0.79%和0.40%;未检测到Ca CV、PSV、Chi RSV、TSWV和To MMV。通过对病毒复合侵染现象进行分析发现,病毒复合侵染率高达89.92%,其中3种病毒复合侵染现象最多,所占比例达28.63%,4种病毒复合侵染率为25.00%,2种病毒复合侵染率为21.77%,5种病毒复合侵染率为13.31%,一个辣椒样品最多可同时感染6种病毒,侵染率为1.21%;对山东省10个地区的辣椒病毒检测,结果表明在辣椒上检出病毒种类最多的为临沂、济宁,检测到12种病毒,其次是烟台、聊城,检测到11种病毒,潍坊、菏泽检测到9种病毒,青岛、德州检测到8种病毒,日照检测到7种病毒,淄博检测到6种病毒,日照地区辣椒病毒复合侵染率最高,为100%,菏泽地区复合侵染率最低,为69.23%。分别根据PMMoV的部分CP基因序列、PeVYV部分Rd Rp、CP、MP基因序列以及BWYV部分CP、MP基因序列构建系统发育树,结果表明本研究PMMoV山东分离物SD60与中国贵州分离物的亲缘关系最近,PeVYV山东分离物SDRZ31-1与意大利IT83分离物的亲缘关系最近,BWYV山东分离物SD与韩国分离物LS的亲缘关系最近。【结论】在山东省采集的253份辣椒样品可被15种病毒侵染,PMMoV、CMV为主要病毒种类;在山东新检测到的病毒有MABYV、PeVYV、BWYV、PCV-1和PCV-2;明确了山东省主要辣椒产区病毒病发生情况以及病毒种类的主次关系。     

甜菜黑色焦枯病毒经甘蓝油壶菌传播的研究

用甜菜黑色焦枯病毒（Ｂｅｅｔ Ｂｌａｃｋ Ｓｃｏｒｃｈ Ｖｉｒｕｓ,ＢＢＳＶ）直接接种甜菜根,ＢＢＳＶ轻度侵染甜菜;而将ＢＢＳＶ与某蓝油壶菌（Ｏｌｐｉｄｉｕｍ ｂｒａｓｓｉｃａｅ）游动孢子体外混合接种甜菜根,ＢＢＳＶ则严重侵染。结果表明,ＢＢＳＶ经由Ｏ．ｂｒａｓｓｉｃａｅ进行传播,传播方式属游动孢子体表带毒,另外,ＢＢＳＶ也可进行少量的机械传播。国内首次报道油壶菌传播植物病毒。     

新疆甜菜坏死黄脉病毒遗传分化的研究

 对来自新疆不同地区的 12个甜菜坏死黄脉病毒 (BNYVV)分离物的核酸组分进行RT PCR分析表明 ,不同地区的BNYVV分离物RNA组分有一定差异。塔城、奇台和石河子 14 5团的BNYVV分离物含有RNA1、RNA2、RNA3和RNA4 ;库尔勒地区的BNYVV分离物还含有RNA5 ;石河子甜菜研究所病圃的BNYVV分离物只含有RNA1和RNA2。对RNA1- 4的RT -PCR产物进行SSCP分析还表明 ,新疆的所有BNYVV分离物既不同于美国的BN TX ,也不同于我国黑龙江的He分离物 ,其内部也存在明显的遗传分化 ,将新疆的 12个BNYVV分离物初步归为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ共 4个类群。Ⅰ类群 :石河子分离物S1、S2 ;Ⅱ类群 :塔城T3、T6、T7和T8分离物 ;Ⅲ类群 :库尔勒K1、K2、K4、K5 ;Ⅳ类群 :奇台Q1、Q2分离物。而且这种遗传分化有明显的地域分布性。     

新疆甜菜花叶病发生和病原病毒的研究

1995-1998年对新疆甜菜主产区甜菜花叶病的发生进行了调查。采集花叶标样191个,并对毒原种类做了分离鉴定,结果表明,甜菜花叶病有4种症状类型,且有不同的地区分布,又由不同的病毒侵染所致,这些病毒是甜菜花叶病毒（BMV）,黄瓜花叶病毒（CMV）和真菌传杆状病毒属（Furoviuses)分离物,CMV自然感染甜菜在国内尚属首次报道。     

甜菜夜蛾核型多角体病毒对芦笋园甜菜夜蛾的田间防效

以芦笋园甜菜夜蛾幼虫为对象,开展甜菜夜蛾核型多角体病毒田间杀虫活性、持效性以及与氯虫苯甲酰胺的协同增效作用试验。结果表明,15亿PIB·mL^-1甜菜夜蛾核型多角体病毒水剂对甜菜夜蛾幼虫具有优良的杀虫活性,1 800 mL·hm^-2处理药后5 d防效达94.5%,药后10 d防效依然有75.7%,持效性较好。甜菜夜蛾核型多角体病毒与氯虫苯甲酰胺混合使用药后3和5 d的防效显著高于甜菜夜蛾核型多角体病毒或氯虫苯甲酰胺单用的防效,显著提高了速效性和综合防效。15亿PIB·mL^-1甜菜夜蛾核型多角体病毒水剂是一种新型生物农药,无毒无残留,对人畜及其他生物安全,可在生产上推广应用。