蜡样芽孢杆菌YSQ08与角质蛋白酶联合降解羽毛的研究

对蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶、酶菌联合降解羽毛3种方式进行比较,结果表明酶菌联合降解羽毛的效果更突出。深入研究蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶添加顺序、菌培养时间以及酶添加时间对羽毛降解率的影响,结果显示采用菌+酶的方式能降解更多的羽毛,同时数据表明菌液在培养14h时产酶达到高峰,加入菌液后的24h再添加角质蛋白酶能保持其较高的活力。以pH值、羽毛添加量、酶添加量、菌液添加量、培养天数为试验因素,设计L_(16)(4~5)正交试验,结果表明在pH9.0、羽毛添加量3.0%、酶添加量2 000U/g、菌液添加量1.5%、培养时间为96h条件下,发酵结果最优,此时氨基酸含量为223.26mg/L,降解率为81.76%。菌+酶降解羽毛的方式为工业化处理羽毛废弃物提供新的思路。     

响应面法优化黑水虻幼虫蛋白肽的制备工艺

试验以黑水虻幼虫为主要原料,以多肽含量为指标,应用响应面法对菌酶协同发酵工艺条件进行优化。通过单因素试验对菌液接种量、菌液接种比例、加酶量、发酵温度和发酵时间5个主要工艺参数进行研究,在此基础上,通过响应面法优化菌酶协同发酵工艺,建立数学模型。结果表明,最佳菌酶协同发酵条件为植物乳杆菌和芽孢杆菌混合菌液接种量2.0%,发酵温度39℃,发酵时间62 h,在该条件下多肽含量为11.78%,实际值与理论值偏差较小,说明该模型能较好的预测黑水虻幼虫蛋白肽最佳制备工艺条件。     

环状芽孢杆菌发酵产物在改善肉鸡体重均匀度及健康状况方面的应用研究

为了探究饲料中添加环状芽孢杆菌发酵产物(β-甘露聚糖酶)对改善畜禽体重均匀度和抵抗病菌感染方面的作用,试验将1日龄AA肉鸡随机分组,通过测定和计算体重、采食量、料重比、增重及死亡率等指标评价发酵产物的作用效果。结果表明:添加发酵产物的试验组鸡群体重均匀度比对照组平均提高23.4%,平均增重80 g/只,料重比降低0.2。而肉鸡在感染条件下(球虫及产气荚膜芽孢杆菌)添加发酵产物同样有效改善了肉鸡的采食量、料重比及增重,并显著降低了死亡率。说明发酵产品能有效改善肉鸡体重均匀度,并通过某种途径提高肉鸡的抗病性能,改善健康状况,恢复生长水平。     

添加不同辅料对黑水虻幼虫处理菠萝加工废弃物效果的影响

为有效利用菠萝加工废弃物（菠萝渣）,增加菠萝产业附加值,用黑水虻处理菠萝加工废弃物,研究黑水虻幼虫对菠萝渣的转化效率,从而为菠萝加工业废弃物处理提供参考。试验设计8种不同处理,其中麸皮设置4个水平（10%、20%、30%、0%）,玉米粉设置2个水平（0、10%）,枯草芽孢杆菌添加水平为0.10%。以菠萝渣发酵产物作为饲料分别饲喂黑水虻幼虫,随机分为8组,每组3个重复,每个重复1.5 g幼虫,研究添加不同配比的麸皮、玉米粉和复合枯草芽孢杆菌组合的辅料添加对菠萝渣发酵及其对黑水虻幼虫生长性能、黑水虻干虫营养品质、菠萝渣转化效果及减量率的影响。结果显示：(1)随辅料麸皮和玉米粉整体比例增加,菠萝渣发酵产物的粗蛋白、粗脂肪含量逐渐提高,除水分外,其他营养成分整体水平也逐渐提高。且在菠萝渣含量相同时,单独添加麸皮的发酵产物其粗蛋白、总磷、粗脂肪含量高于同时加麸皮与玉米粉相比的发酵产物,但前者的粗纤维比后者低;相同辅料配比时,添加枯草芽孢杆菌发酵的处理与对照相比,粗蛋白、粗纤维含量降低。(2)不同辅料配比的菠萝渣饲喂黑水虻幼虫后,T1组（80%菠萝皮渣+10%麸皮+10%玉米粉+0.10%枯草芽孢...     

枯草芽孢杆菌发酵菌糠制备饲料微生物添加剂的研究

试验旨在优化枯草芽孢杆菌发酵金针菇菌糠的条件进而制备饲料微生物添加剂。试验采用L1(645)正交试验,测定枯草芽孢杆菌发酵金针菇菌糠的培养温度(A)、外源氮水平(B)、初始pH值(C)、发酵时间(D)、菌液接种量(E)5个因素对芽孢数的影响,同时测定发酵产物的有毒、有害物质含量。结果表明,枯草芽孢杆菌的最适发酵条件为培养温度35℃、棉粕添加量3%、初始pH值7.5、发酵时间48 h、菌液接种量10%。对其发酵结果的影响程度依次是外源氮水平>初始pH值>发酵时间>接种量>培养温度。此添加剂中的黄曲霉毒素B1以及重金属砷、铅、汞、镉的含量均符合国家饲料添加剂卫生指标。在此条件下固态发酵菌糠,枯草芽孢杆菌的芽孢数为8×109cfu/g(干重),对其发酵后产品烘干即得到饲料微生物添加剂。     

饲料中油脂和盐分含量对黑水虻幼虫生长性能的影响

试验利用调和油、氯化钠探究饲料中油脂及盐分含量对黑水虻幼虫生长性能的影响。在人工饲料中添加不同比例的调和油(3.0%～21.0%,W/W)和氯化钠(0～6.0%,W/W),对比分析黑水虻幼虫存活率、幼虫干重总增重、饲料转化率(ECD)、表观消化率(AD)、饲料利用率(ECI)和料重比(FCR)等指标的差异。结果表明,当饲料油脂含量为3.0%～12.0%时,幼虫存活率(93.83%)、总增重(2.69 g)、ECD(0.34 g/g)、AD(0.54 g/g)、ECI(0.15 g/g)及FCR(1.77 g/g)最优。饲料氯化钠含量在3.0%以内对黑水虻幼虫存活率、增重及ECD的影响不显著;饲料氯化钠含量为2.0%时,幼虫存活率高至100.00%,增重高至2.52 g,ECD高至0.26 g/g,FCR低至1.42 g/g。因此,饲养黑水虻时,油脂含量不宜超过12.0%,氯化钠含量不宜超过3.0%。     

肉鸡全价饲料发酵条件优化及其应用效果研究

试验旨在研究混合菌株发酵肉鸡全价配合饲料的条件优化及其饲喂效果。采用四因素三水平的正交试验设计对枯草芽孢杆菌菌株CB-11和植物乳酸杆菌菌株FJ-38在接种量、温度、料水比、发酵时间4个因素对全价料pH值、小肽和干物质回收率(DMR)3个指标加权评分影响,对固体发酵全价料进行优化。为进一步验证发酵饲料的饲养效果,进行为期42 d的肉鸡饲养试验。结果表明:①混合菌发酵全价料的最佳工艺条件为:接种量9%、发酵温度39℃、料水比1:1、发酵时间72 h。②10%和15%发酵料添加量显著提高了肉鸡的平均日增重、养分消化率和盲肠中乳酸杆菌和双歧杆菌的数量(P0.05),降低了料肉比和盲肠中大肠杆菌和沙门氏菌数量(P0.05)。由此可见,发酵肉鸡全价料在条件优化后营养价值在一定程度得到提高,饲粮添加10%和15%的发酵全价料能提高肉鸡生长性能和养分利用率,改善肠道微生态。     

益生菌发酵豆粕制备生物活性饲料的研究

利用纳豆芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌TQ33对豆粕进行固态发酵。结果表明:最适发酵工艺为先接纳豆芽孢杆菌,发酵12h后再接凝结芽孢杆菌,接种量为10%,两菌比例为1:1,发酵基质中豆粕与麸皮质量比为7:3,初始含水量为40%,初始pH值自然,37℃发酵48h;发酵豆粕饲料的蛋白水解度为20.14%,其中大多数肽类的相对分子质量在620～1242之间;TI降解率达95%,产品中含纳豆芽孢杆菌1.0×109cfu/g,凝结芽孢杆菌9.2×107cfu/g,此外,还含有蛋白酶、短肽和乳酸等生物活性物质。     

金针菇菌渣发酵饲料制作的工艺优化

旨在用含植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母的复合菌制剂发酵金针菇菌渣饲料,提高金针菇资源的利用率。利用正交试验,研究复合菌剂的接种比例、接种量、水分、发酵温度和发酵时间等因素对发酵金针菇菌渣饲料的pH值和乳酸、氨态氮、还原糖、挥发性脂肪酸等指标含量的影响;在此基础上,筛选出复合菌固态发酵金针菇菌渣的最优工艺。结果显示,最优发酵参数为:植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌接种比例2∶2∶1,接种量5%,固体培养基含水量50%,温度33℃,发酵时间5 d。与发酵前相比,发酵后金针菇菌渣的粗蛋白含量显著提高(P0.05),pH值显著下降(P0.05)。研究表明:以植物乳杆菌、酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌复合菌发酵金针菇菌渣饲料后,菌渣pH值降低,且营养成分得到改善。     

凝结芽孢杆菌发酵绞股蓝工艺研究

为了摸索凝结芽孢杆菌发酵绞股蓝的工艺并明确发酵产物特性,促进绞股蓝在畜牧养殖中的应用,试验用凝结芽孢杆菌对绞股蓝进行发酵,通过单因素试验摸索发酵最佳碳源、氮源及发酵工艺,并检测发酵前后凝结芽孢杆菌含量、霉菌数量、黄曲霉毒素B_1含量、pH值、产物抑菌性及绞股蓝皂苷含量的变化。结果表明:最优的发酵体系为5%硫酸铵、5%玉米粉作为能量来源,凝结芽孢杆菌起始接种量为10%,水分为40%,发酵时间为48 h。该发酵体系下,凝结芽孢杆菌含量增加,pH值下降,霉菌未检出,黄曲霉毒素B_1含量降低、发酵的绞股蓝抑菌能力加强,绞股蓝皂苷含量增加。     

复合菌分步发酵大豆皮对其抗营养因子降解效果的影响

研究采用复合菌分步发酵技术发酵大豆皮,以评估不同发酵时间、发酵温度、含水量等发酵工艺条件对大豆皮发酵效果的影响。结果表明:碳源和氮源添加比例为15∶4时,其对抗营养因子的降解效果优于其他组合;不同的发酵时间、发酵温度、接种量、含水量等发酵参数对大豆皮抗营养因子的降解效果具有明显的影响,尤其以发酵温度37℃、含水量50%、枯草芽孢杆菌接种量1%、发酵时间为48 h为宜;复合菌厌氧发酵大豆皮可明显改善发酵料的气味和适口性,提高发酵料产品品质和产品稳定性。可见,采用复合菌分步发酵技术可使发酵大豆皮达到很好的发酵效果。     

外加酶提高发酵豆粕蛋白质水解度的研究

在枯草芽孢杆菌发酵豆粕的工艺基础上添加外源蛋白酶进行优化,以蛋白质水解度为指标,试验得到酶添加量、接种量、料水比、温度、时间5个单因素的最佳条件为:加酶量120U/g,接种量1%、料水比1:1.2、温度35℃、发酵时间48h。对5个因素进行正交优化试验,得到优化发酵方案为:加酶量50U/g、接种量1.5%、料水比1:1.2、温度35℃、发酵时间48h,发酵豆粕水解度从对照的16.25%提高到37.29%,提高了1.3倍。     

固态发酵饲料工艺优化及抗营养因子降解效果研究北大核心CSCD

本研究旨在对黑曲霉和乳酸杆菌(植物乳杆菌和发酵乳杆菌)二段固态发酵大豆皮和菜籽饼工艺条件进行优化,并对其发酵前后营养物质和抗营养因子含量变化进行研究。采用单因素试验设计,以发酵产物中还原糖含量为指标,筛选出黑曲霉发酵阶段适宜的发酵温度、料液比、发酵时间、大豆皮和菜籽饼原料比例和接种量,并通过四因素三水平(L 934)正交试验探究料液比、发酵时间、大豆皮和菜籽饼原料比例和接种量对黑曲霉发酵产物中还原糖含量的影响。在黑曲霉固态发酵的最佳工艺基础上,采用单因素试验设计,以发酵产物中乳酸杆菌活菌数为指标,探究乳酸杆菌发酵阶段适宜的发酵时间、发酵温度、接种量和尿素添加量,并通过四因素三水平(L 934)正交试验探究发酵时间、发酵温度、接种量和尿素添加量对乳酸杆菌发酵产物中乳酸杆菌活菌数的影响。结果表明:黑曲霉最优发酵工艺为发酵温度35℃,料液比1.0∶2.8 g/mL,发酵时间60 h,大豆皮和菜籽饼原料比例2∶1,接种量5×107 CFU/g。乳酸杆菌最优发酵工艺为发酵温度35℃,发酵时间60 h,接种量5×106 CFU/g,尿素添加量1.0%。经黑曲霉和乳酸杆菌二段固态发酵后,发酵产物中粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分含量较发酵前均显著增加(P<0.05),粗纤维、大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白、硫代葡萄糖苷和单宁含量较发酵前均显著降低(P<0.05)。由此可见,黑曲霉和乳酸杆菌(植物乳杆菌和发酵乳杆菌)二段固态发酵可提高大豆皮和菜籽饼饲用价值。     

枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵条件的优化

通过单因素试验和正交优化试验,对枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的发酵条件进行优化。通过单因素试验表明,枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的最佳碳源、氮源、无机盐种类、碳源添加量、氮源添加量、发酵温度和初始pH值分别为麦芽糖、蛋白胨、氯化钙、麦芽糖添加量8%、蛋白胨添加量4%、发酵温度37℃、初始pH值7.0。在单因素试验的基础上进行正交优化试验得到了枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶最优发酵条件为:麦芽糖添加量8%、蛋白胨添加量8%、氯化钙添加量8 g/L、发酵温度37℃、初始pH值7.0。在最优发酵条件下,枯草芽孢杆菌所产的中性蛋白酶酶活为420.36 U/mL,比优化前98.36 U/mL提高了3倍。     

混菌固态发酵法生产大豆多肽饲料的研究

采用枯草芽孢杆菌、米曲霉和酿酒酵母混合菌株固态发酵法生产大豆多肽饲料。利用枯草芽孢杆菌和米曲霉分泌蛋白酶降解基料中的蛋白质,使其分解成小肽;利用米曲霉将淀粉和纤维素降解为简单糖类物质;利用酿酒酵母分解糖类,产生醇香味,增加多肽饲料的适口性。以高温豆粕为原料,研究了发酵培养基组成、接种菌配比、接种量、发酵温度和发酵时间对发酵豆粕中多肽得率的影响,得到了最佳工艺条件:豆麸比为8:1(m:m),加蜜量为2%,混菌菌种比(枯草芽孢杆菌、米曲霉、酿酒酵母)为5:1:1(V:V:V),加水量为120%,接种量为25%,发酵温度为34℃,发酵时间为96 h。最终发酵物中多肽得率达54.89%,发酵产物中多肽含量为21.47%(干基)。     

豆粕微生物固态发酵工艺优化及其营养物质含量变化北大核心CSCD

本试验以小肽含量为指标,对解淀粉芽孢杆菌单菌固态发酵豆粕以及解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌和酿酒酵母菌3个菌种混菌固态发酵豆粕的工艺条件进行优化,并对其发酵前后的营养物质含量变化进行研究。通过解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌和酿酒酵母3个试验菌的生长曲线确定其接种到固态培养基的最佳接种时间。采用单因素试验设计研究解淀粉芽孢杆菌接种量、温度、料水比、发酵时间4个因素对豆粕发酵产小肽的影响,并在此基础上采用四因素三水平的正交试验设计对单、混菌固态发酵豆粕的工艺条件进行优化。对豆粕发酵前后豆粕营养物质含量、大豆球蛋白含量、蛋白质分子质量、发酵产物p H进行测定。结果显示:3株试验菌接在各自种子培养基扩大培养至21 h为其接种到固态培养基的最佳时间。解淀粉芽孢杆菌单菌固态发酵豆粕的最佳工艺条件为:接种量为10%、温度为40℃、料水比为1.0∶1.2、发酵时间为72 h;解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌、酿酒酵母混菌固态发酵豆粕的最佳工艺条件为:接种量为15%、温度为31℃、料水比为1.0∶1.0发酵时间为120 h,3个菌株的接种比例为:解淀粉芽孢杆菌∶植物乳杆菌∶酿酒酵母=9∶3∶2。经微生物发酵后,发酵产物中小肽、粗蛋白质、粗灰分、粗脂肪含量较发酵前均得到显著提高(P<0.05),粗纤维含量则显著下降(P<0.05);单菌发酵组和混菌发酵组发酵产物中大豆球蛋白含量均较未发酵组显著降低(P<0.05);单菌发酵组和混菌发酵组发酵产物中蛋白质分子质量较未发酵组降低;混菌发酵组发酵产物的p H较未发酵组显著降低(P<0.05),而单菌发酵组发酵产物的p H则与未发酵组差异不显著(P>0.05)。综上所述,豆粕经微生物固态发酵后营养价值在一定程度上得到改善,大分子蛋白质被降解,p H也发生了变化,并且单菌发酵和混菌发酵的效果存在差异。     

豆粕微生物固态发酵工艺优化及其营养物质含量变化

本试验以小肽含量为指标,对解淀粉芽孢杆菌单菌固态发酵豆粕以及解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌和酿酒酵母菌3个菌种混菌固态发酵豆粕的工艺条件进行优化,并对其发酵前后的营养物质含量变化进行研究。通过解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌和酿酒酵母3个试验菌的生长曲线确定其接种到固态培养基的最佳接种时间。采用单因素试验设计研究解淀粉芽孢杆菌接种量、温度、料水比、发酵时间4个因素对豆粕发酵产小肽的影响,并在此基础上采用四因素三水平的正交试验设计对单、混菌固态发酵豆粕的工艺条件进行优化。对豆粕发酵前后豆粕营养物质含量、大豆球蛋白含量、蛋白质分子质量、发酵产物p H进行测定。结果显示:3株试验菌接在各自种子培养基扩大培养至21 h为其接种到固态培养基的最佳时间。解淀粉芽孢杆菌单菌固态发酵豆粕的最佳工艺条件为:接种量为10%、温度为40℃、料水比为1.0∶1.2、发酵时间为72 h;解淀粉芽孢杆菌、植物乳杆菌、酿酒酵母混菌固态发酵豆粕的最佳工艺条件为:接种量为15%、温度为31℃、料水比为1.0∶1.0发酵时间为120 h,3个菌株的接种比例为:解淀粉芽孢杆菌∶植物乳杆菌∶酿酒酵母=9∶3∶2。经微生物发酵后,发酵产物中小肽、粗蛋白质、粗灰分、粗脂肪含量较发酵前均得到显著提高(P0.05),粗纤维含量则显著下降(P0.05);单菌发酵组和混菌发酵组发酵产物中大豆球蛋白含量均较未发酵组显著降低(P0.05);单菌发酵组和混菌发酵组发酵产物中蛋白质分子质量较未发酵组降低;混菌发酵组发酵产物的p H较未发酵组显著降低(P0.05),而单菌发酵组发酵产物的p H则与未发酵组差异不显著(P0.05)。综上所述,豆粕经微生物固态发酵后营养价值在一定程度上得到改善,大分子蛋白质被降解,p H也发生了变化,并且单菌发酵和混菌发酵的效果存在差异。     

菜籽粕混合菌固体发酵脱毒条件的响应面优化研究

为找到一种脱毒较为彻底且稳定的菜籽粕脱毒方法,以复合芽孢杆菌为发酵剂,采用单因素试验研究了葡萄糖和硫酸铵添加量、料水比、接种量、起始pH、发酵温度及发酵时间等发酵条件对硫代葡萄糖苷降解率的影响。在此试验结果的基础上,采用响应面法评价了料水比、接种量、发酵温度和发酵时间及其交互作用对硫代葡萄糖苷降解率的影响,用Design Expert7.1.6软件分析试验数据建立了菜籽粕混合菌固体发酵条件的一个二次多项式数学模型。结果表明:该模型极显著(P<0.001),拟合度良好。得出混菌固体发酵脱毒过程的工艺参数为:接种量7.7%,发酵温度44℃,料水比1.000∶0.585,发酵时间53h。在此条件下,硫代葡萄糖苷降解率达到了94.850 6%。本试验确定了混合菌发酵菜籽粕脱毒的最佳条件,为混合菌发酵菜籽粕降低硫代葡萄糖苷含量的研究提供了相应的工艺参数和理论依据。     

短小芽孢杆菌B-15产酶条件的优化及酶学性质的研究

从本实验室分离短小芽孢杆菌B-15能降解羽毛角蛋白生产角蛋白酶,本试验对该菌株的产酶条件进行了优化.结果表明,在羽毛发酵培养基中,B-15产酶的最佳辅助碳源为葡萄糖.最佳辅助氮源为酵母粉,最佳接种量为2%,培养基最佳初始pH值为7.0,产酶最佳温度为30℃,最佳培养时问为48 h.在以上条件下培养,角蛋白酶活力可达2.03 U/mL,是优化前的2.5倍.对B-15所产的角蛋白酶进行了粗酶酶学性质的初步研究,结果表明.该酶最佳反应温度为55℃;最佳反应pH值为7.0;pH 5.5～8.0时酶活力较稳定,可达最大酶活力的70%以上.Mg2 对酶有激活作用,Fe3 对酶有抑制作用.羽毛被降解后,其残渣和发酵后的液体可以作为动物的蛋白饲料.     

复合菌发酵奶牛精饲料工艺条件的研究

主要探讨混菌发酵奶牛精饲料发酵条件的优化,采用枯草芽孢杆菌和酵母菌混合发酵的方法,研究种子液中腐植酸钠添加量、发酵底物中腐植酸钠添加量、麸皮含量、含水量、接种量、发酵时间和发酵温度对发酵产物中活菌数的影响。结果表明:在枯草芽孢杆菌与酵母菌接种比例3∶7的前提下,奶牛精饲料的最佳发酵工艺条件:种子液中腐植酸钠添加量2.0%,发酵底物中腐植酸钠添加量2.0%,麸皮5.0%,含水量50.0%,接种量5.0%,发酵时间48 h,发酵温度34℃。在此试验条件下进行发酵,测得产品中枯草芽孢杆菌数量可达48.00亿CFU/g,酵母菌数量可达4.96亿CFU/g。