百合试管小鳞茎高效再生体系的研究

以百合试管鳞茎诱导丛生芽,适宜诱导的培养基为MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA+ 30 g/L蔗糖+5500 mg/L琼脂,光照强度1 500 ～2 000 lx.芽长至1～2 cm时,转入鳞茎分化培养基,适宜的鳞茎分化培养基为MS+1.0 mg/L NAA+ 90 g/L蔗糖+300 mg/L活性炭+5500mg/L琼脂,黑暗条件.提高培养基中的糖浓度可以提高百合再生小鳞茎的重量;在培养基中添加活性炭可提高再生小鳞茎形态的正常率.     

虾脊兰原球茎诱导及植株高效再生体系研究

以野生虾脊兰(Calanthe discolor)未成熟蒴果为材料,MS为基本培养基,探讨不同光照度、热激和不同培养基配方对虾脊兰种子萌发、原球茎发生及植株再生的影响。结果表明,未完全成熟的种子在1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+20 g/L马铃薯+1.0 g/L活性炭培养基中萌芽率最佳;在1 500 lx光照度条件下培养时种子萌发速率较快。通过黑暗条件下35℃热激5 d有利于已萌动种子脱分化形成原球茎。使用MS+3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖培养基诱导原球茎形成胚性愈伤组织效果最好。MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+20 g/L马铃薯培养基分化形成植株分化率最高,1/2MS+0.2 mg/L IBA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+0.1 g/L活性炭培养基则为最佳生根培养基,生根率100%,植株根系发达,长势健壮。该研究建立了虾脊兰无菌快繁体系,为保护野生虾脊兰资源和种苗人工繁育提供了有效技术途径,也为其遗传转化研究奠定基础。     

铁皮石斛高效快速繁殖体系研究

为了建立铁皮石斛(Dendrobium officinale)种子高效快速繁殖体系,以铁皮石斛种子为外植体,在萌发培养基上萌发为原球茎,原球茎经悬浮培养增殖,再接种于分化培养基分化、生根长成完整植株。结果显示,原球茎增殖最佳培养基为1/2 MS培养基+0.1 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+0.33 g/L(NH4)2SO4+0.525 g/L KNO3+30 g/L蔗糖;原球茎分化最佳培养基为N6+0.1 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+100 g/L土豆汁+25 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂+1 g/L活性炭;幼苗生根最佳培养基为1/2 MS+0.3 mg/L NAA+50 g/L土豆汁+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂+1 g/L活性炭;悬浮培养与固体培养相结合的技术优于固体组织培养技术,其具有生长周期短、节省空间、节约成本,促进原球茎增殖、提高分化率,促进生根的特点,可为铁皮石斛快繁和大规模化生产提供基础。     

云南独蒜兰×陈氏独蒜兰种子萌发与幼苗生长研究

以云南独蒜兰(Pleione yunnanensis)×陈氏独蒜兰(P.chunii)授粉120 d成熟未开裂蒴果的种子作为试验材料,研究不同浓度6-BA、NAA和花宝2号对其种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明:种子萌发的适宜培养基为3 g/L花宝2号+0.5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA+20 g/L蔗糖+50 g/L马铃薯+50 g/L香蕉+2 g/L蛋白胨+2 g/L活性炭+7 g/L琼脂,萌发率(94.45%)显著高于其他处理组,且萌发后植株生长速度最快;NAA对该杂交种无菌萌发具有明显的促进作用,而细胞分裂素6-BA则在一定程度上抑制其萌发。针对假鳞茎膨大和植株高度2个指标,幼苗生长的适宜培养基为1 g/L花宝2号+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+25 g/L蔗糖+1 g/L蛋白胨+1 g/L活性炭+7 g/L琼脂,在所研究的3个因素中花宝2号对该杂交种假鳞茎膨大作用最大,NAA对植株高度促进作用最大。     

不同激素对怀山药不同外植体分化的影响

研究了6-BA、NAA和IBA对怀山药不同外植体分化和植株再生的影响。结果表明:以节为外植体,改良的MS+100 g/L香蕉+0.5mg/L 6-BA+1.00 mg/L NAA+0.5%琼脂+0.5%活性炭+3%蔗糖培养基为最优组合,其分化率达100%;最适根块分化培养基是,改良的MS+100 g/L香蕉+0.5 mg/L 6-BA+0.25 mg/L NAA+0.4 mg/L IBA+0.5%琼脂+0.5%活性炭+3%蔗糖;最适无菌茎段分化培养基是,改良的MS+100 g/L香蕉+0.5 mg/L 6-BA+0.50 mg/L NAA+0.8 mg/L IBA+0.5%琼脂+0.5%活性炭+3%蔗糖;最适无菌叶柄分化培养基是,改良MS+100 g/L香蕉+1.5 mg/L 6-BA+0.25 mg/L NAA+0.5%琼脂+0.5%活性炭+3%蔗糖。     

墨兰绿墨素与大花蕙兰世界和平杂交种组培快繁技术

以墨兰绿墨素与大花蕙兰世界和平杂交种原球茎为试材,探索不同培养基配方对其增殖、分化及生根的影响。结果表明,原球茎增殖的最佳培养基配方为1/2MS+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)1.0 mg/L+萘乙酸(NAA)1.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L,增殖率可达317.77%;原球茎使用培养基1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L培养时的分化率为54.96%,分化效果相对最好;培养基1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L有利于不定芽的增殖,增殖率为227.5%;1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L+活性炭1.0 g/L为最适生根培养基,生根率达81.00%,且苗体生长健壮。     

白芨瓶内假鳞茎诱导研究

[目的]研究白芨组培苗瓶内假鳞茎形成的影响因素,提高白芨组培苗炼苗成活率,为白芨组培苗在生产上的应用提供技术支持.[方法]以优质白芨组培苗为材料,探讨基本培养基、蔗糖用量、激素和添加物对白芨瓶内假鳞茎诱导的影响.[结果]在MS培养基中,假鳞茎诱导率和平均粒径达到最大值,最适宜白芨假鳞茎诱导.30.0g/L蔗糖较适宜诱导白芨假鳞茎,其诱导率较高,且有利于假鳞茎生长膨大.在6-BA、KT、NAA、IBA 4种激素不同组合中,以6-BA＋KT＋NAA组合的假鳞茎诱导率和平均粒径均显著高于其他组合,其最佳激素配比是6-BA 1.0 mg/L＋KT 0.5mg/L＋NAA 0.2 mg/L.在最佳激素配比培养基中添加40.0 g/L香蕉泥、40.0 g/L上豆泥和1.0 g/L花宝四号,其假鳞茎诱导率和平均粒径均最高,且植株长势较好.[结论]白芨组培苗瓶内假鳞茎诱导的最佳培养基配方是MS＋6-BA 1.0mg/L＋KT 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L＋香蕉40.0 g/L＋土豆40.0 g/L＋花宝四号1.0 g/L＋活性炭1.0 g/L＋蔗糖30.0 g/L.     

大岩桐的组织培养

为探索大岩桐快速繁殖方法,以大岩桐嫩芽为试验材料,研究附加不同浓度6-BA的MS培养基对大岩桐愈伤组织形成及芽分化的影响。结果表明:大岩桐最适宜的愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA0.3 mg/L+NAA 0.01 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L;最适宜的芽分化培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,芽分化率达88%;添加活性炭抑制了大岩桐植株的增殖和生长。     

建兰种子无菌萌发技术初探

以赣南地区野生建兰蒴果为材料,研究了不同培养基对种子无菌萌发的影响以及生长素浓度对无菌芽生根的影响,并对建兰种子无菌萌发过程进行了观察。结果发现：添加外源植物生长调节剂6-BA与NAA以及适宜的蔗糖浓度都能显著提高建兰种子的萌发率,建兰种子无菌萌发最适培养基为：1/2 MS +8 g/L 琼脂粉+ 60 g/L蔗糖+2.0 mg/L NAA+ 0.4 mg/L 6-BA+1g/L活性炭;当0.8 mg/LNAA与0.4mg/L 6-BA组合时,生根率最高,在90天时最高可达80.50%;通过观察建兰种子萌发无菌芽的过程发现,建兰种子在播种后到形成根状茎分枝大约要经历250d。     

金边虎尾兰组织培养的研究

以金边虎尾兰(Sansevieria trifasciata var.laurenttii)肉质叶片作为外植体材料,进行组织培养研究。结果发现,金边虎尾兰叶龄与叶片部位对愈伤组织的诱导有影响,其中采用一年生叶片中部的组织诱导率最高;诱导叶片愈伤组织最适培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖;诱导芽分化最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖;诱导试管苗生根最适培养基为1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖。     

珍稀药材白及“两段式”组培快繁技术研究

为简化白及组培苗生产过程,提高移栽成活率,以成熟白及种子为外植体,采用"两段式"组培法,通过不同激素配比及L_(16)(4~3)正交试验优化筛选萌发培养基和鳞茎诱导、壮苗培养基.研究结果表明:以萌发时间、苗高、出苗率为指标统计,白及种子在培养基1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+GA_3 0.1 mg/L+白糖20 g/L上的萌发效果最佳;鳞茎诱导、壮苗培养阶段的最佳培养基为:1/2 MS+NAA 0.6 mg/L+6-BA 0.8 mg/L+PP 333 0.5 mg/L+香蕉泥30 g/L+白糖30 g/L,鳞茎分化时间仅为20.7 d,培养60 d后,鳞茎分化率为91%,鳞茎直径达6.91 mm,组培苗生长健壮,移栽至大田后成活率为95%.实现了仅通过两段培养,即可获得白及优质组培苗,大大降低了育苗成本.     

蝴蝶兰的组织培养技术

探讨了蝴蝶兰的组织培养技术和方法。实验证明:用幼叶在散射光下培养诱导蝴蝶兰原球茎的效果最好,最适培养基为:MS+6-BA10mg/L+NAA1mg/L水解乳蛋白500mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L(pH值5.4);最适增殖培养基为:MA+6-BA2mg/L+NAA1mg/L+水解乳蛋白500mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L(pH值5.4);最适生根长苗培养基:1/2MS+IBA1.5mg/L+NAA0.05mg/L+0.3%活性炭+蔗糖30g/L+琼脂7g/L(pH值5.4)。     

柠条组织培养体系的建立

为了建立柠条的组织培养体系,用KF/MS加激素培养法,选择不同的消毒剂,对柠条茎段愈伤组织诱导,并进行芽分化、芽的继代增殖和生根培养。结果表明,次氯酸钠的消毒效果最好,最适浓度为2%,且浸泡外植体的最佳时间为8 min;诱导芽分化的基本培养基以KF+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂7 g/L为宜,继代增殖最适培养基配方为KF+6-BA 1.2 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂7 g/L,适合生根的最佳培养基为1/2 MS+NAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L+活性炭0.5 g/L。     

金线莲组培快繁技术研究

以金线莲的茎段为外植体,进行组织培养研究,以期建立完整高效的快繁体系。试验结果表明,金线莲最佳诱导和增殖培养基为MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L,p H值5.8;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+活性炭0.3%+蔗糖15 g/L+琼脂8 g/L,p H值5.8。     

大蒜微型鳞茎诱导培养基的筛选初报

以吉木萨尔白蒜为试验材料,利用大蒜鳞茎盘为外植体,在B5+6-BA0.5 mg/L+NAA0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.5 g/L培养基进行初始培养获得绿芽,在此基础上开展试管内诱导微鳞茎培养基配方研究。结果表明,1/2 MS＋IBA 1.5 mg/L＋NAA 0.1 gm/L＋蔗糖50 g/L＋琼脂4.5 g/L为组培苗试管内诱导鳞茎较好的培养基配方,在该培养基上大蒜绿芽第45天开始形成鳞茎,第90天鳞茎直径为0.3～0.5 cm。     

正交试验优化虎舌红茎尖离体培养条件

采用正交设计及方差分析对影响虎舌红植株离体培养的因素进行优化研究,结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D0.7 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+蔗糖28 g/L+琼脂6.0 g/L;不定芽诱导最佳培养基为MS+NAA0.2 mg/L+CPPU0.4 mg/L+AgNO34.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L,分化率为96%,增殖率为5.5;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.4 mg/L+IBA 0.3 mg/L+蔗糖26 g/L+琼脂5.0 g/L,生根率为93%。     

红叶石楠离体培养与高效再生体系建立

以红叶石楠(Photinia×frasery)带芽茎段、叶片为外植体,对其启动培养、叶片愈伤诱导与分化、芽增殖、生根培养及试管苗驯化等技术进行了较为系统的研究,建立了红叶石楠离体培养的高效再生体系。结果表明,幼茎启动培养适宜培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达63.3%;叶片愈伤诱导适宜的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,愈伤诱导率达86.0%;愈伤分化不定芽的适宜培养基为N6+6-BA1.5mg/L+IAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达21.6%,增殖率为1.4倍;芽增殖培养适宜的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.7mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,最高增殖率达6.1倍;生根培养方法为用25mg/LNAA溶液浸泡0.5～1.0h后接种于1/2MS培养基中,生根率达93.4%以上;试管苗驯化的适宜混合基质为泥炭∶珍珠岩=3∶1,成活率可达96.7%。     

野生鼓槌石斛的有性扩繁方法

[目的]采集野生鼓槌石斛的成熟蒴果,利用组培无菌快繁技术获得大量野生鼓槌石斛种苗。[方法]将野生鼓槌石斛成熟蒴果消毒灭菌,并将其种子播种于MS培养基上获得大量原球茎,然后分别转接到不同的培养基上,最后在不同阶段的培养基上筛选出适合野生鼓槌石斛分化和生长的培养基。[结果]将野生鼓槌种子在MS培养基上培养,种子萌发率达95%以上;最利于原球茎分化的培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+土豆泥4%+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,成苗率高、出苗整齐;最适幼苗生长培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+香蕉汁7%+土豆泥2%+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,小苗粗壮、叶片浓绿;最适生根壮苗培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+香蕉汁7%+土豆泥2%+AC 0.5 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,瓶苗生根多而粗壮,叶片浓绿生长整齐。[结论]该研究为野生鼓槌石斛资源的收集与保存提供了参考。     

文心兰组培快繁技术研究

以文心兰具有休眠芽的花梗节段为外植体进行组培快繁试验,结果表明:选取发育初期的花芽较容易诱导出丛芽,其最佳诱导培养基为MS+6-BA4.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7 g/L(pH5.8);适合的丛芽增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+Ad 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L(pH5.8);较适宜的生根壮苗培养基为1/2MS+NAA1.0mg/L+IBA0.2 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂8 g/L+0.2%活性炭(pH5.8)。     

石蒜愈伤组织增殖分化及试管鳞茎膨大研究

以石蒜愈伤组织为材料,分别采用完全随机和L9(34)正交试验设计,研究不同激素浓度配比对石蒜愈伤组织增殖及不定芽分化,以及大量元素浓度、蔗糖浓度和活性炭(AC)含量对石蒜鳞茎膨大等影响。结果表明:MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L为适宜的愈伤组织增殖培养基,增殖系数为3.02;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.3 mg/L为适宜的分化培养基,分化率达到92.58%;MS+蔗糖40 g/L+AC 1.0 g/L为适宜的鳞茎膨大培养基,鳞茎质量可达0.86 g,增加6.62倍,直径达1.00 cm。