鸡新城疫病毒的分离鉴定与交叉免疫保护试验

为了评价疫苗免疫保护效果,进而筛选出最佳的免疫方案,将分离到的鸡新城疫病毒(Newcas-tle disease virus,NDV)流行毒株制备成灭活疫苗进行交叉免疫保护试验研究。把采集到的疑似发生新城疫的病鸡肺、气管环等组织经处理后接种10日龄SPF鸡胚进行病毒的分离和增殖,并用血清学和分子生物学方法进行毒株的鉴定;用分离到的NDV/Chicken/TC/1/2011毒株制成油乳剂灭活苗,与La Sota疫苗以不同的疫苗组合免疫SPF鸡,进行交叉免疫保护试验。结果显示,共分离到9株新城疫病毒,其F蛋白裂解位点的氨基酸均为112 R-R-Q-K-R-F117,表现为强毒株的分子特征,与致病指数结果一致。分离株灭活苗组和分离株灭活苗+La Sota弱毒苗对试验鸡的免疫保护力最高,其次是La Sota灭活苗+La Sota弱毒苗和LaSota灭活苗,La Sota弱毒苗对试验鸡的免疫保护力最低。NDV分离株与疫苗株La Sota存在明显抗原性差异,这将对新城疫疫苗的发展和疾病控制策略制定至关重要。     

新城疫分离株疫苗免疫保护试验

用经过鉴定的新城疫病毒分离株按国家兽医生物制品质量标准制备油乳剂灭活疫苗，与标准的La Sota疫苗分别免疫带有新城疫母源抗体的白来航鸡，免疫后每7d采血监测新城疫抗体，并于免疫后21，28，35d用鸡新城疫分离毒和F48E9分别进行人工感染试验。结果显示，分离株灭活苗对鸡新城疫分离株的免疫保护效力优于La Sota灭活苗。     

鸡新城疫-鸡传染性支气管炎-禽流感-产蛋下降综合征四联灭活油乳剂疫苗的研制与免疫试验

用鸡新城疫La Sota株,鸡传染性支气管炎H120株,产蛋下降综合征127株和禽流感病毒HB1(H9N2)株做为抗原制成油乳剂灭活联苗,并对其进行了物理性状、纯净、安全性、灭活效果、保存期和免疫效力等方面的检验.证明所制备疫苗完全符合质量标准;鸡体对该疫苗4种抗原均产生了良好的免疫应答;攻毒试验证明,免疫鸡能良好地抵抗同种强毒的攻击;所制备疫苗于2～8℃保存12个月后,其免疫效力没有下降.     

重组鸡γ-干扰素联合鸡新城疫和禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗免疫效果的研究

为研究重组鸡γ-干扰素(Chicken interferonγ, ChIFN-γ)对鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗(La Sota株+WD株)的免疫增强效果,取重组鸡γ-干扰素作为免疫增强剂,联合鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗免疫SPF鸡,在免疫后24h和48h采集全血进行细胞因子检测,结果显示免疫后联合免疫组的IFN-γ和IL-4细胞因子水平要高于单独免疫疫苗组;免疫后7、14、21、28和35d分别采集血清测定抗体效价,通过检测血清中针对鸡新城疫病毒和禽流感病毒(H9亚型)的HI抗体水平可知,联合免疫组产生的针对鸡新城疫病毒和禽流感病毒(H9亚型)的抗体均高于单独免疫疫苗组。试验结果表明,重组鸡γ-干扰素对鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活苗(La Sota株+WD株)具有免疫增强作用。     

鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病三联弱毒疫苗与各自单苗的对比试验研究

用实验室自制的鸡新城疫(La Sota株),鸡传染性支气管炎(H120株),鸡传染性法氏囊病(B87株)单苗和三联疫苗分别免疫14日龄非免疫健康雏鸡研究其免疫效力。结果表明,用三联疫苗免疫雏鸡后,鸡新城疫La Sota株、鸡传染性支气管炎H120株与鸡传染性法氏囊B87株之间不产生明显的相互干扰作用,第14和21天的抗体效价与各自的单苗相比无明显差异(P>0.05)。     

NDV地方分离株与La Sota株抗原交叉性研究

用新城疫弱毒疫苗株La Sota阳性血清测定NDVMM,NDVLD,NDV-NH3株新城疫病毒地方分离株和标准株La Sota,F48E9的HI效价,以La Sota阳性血清对La Sota疫苗株的HI效价为参照,分析NDV地方分离株与疫苗株抗原交叉性。结果表明,NDV-MM,NDV-LD 2个野毒株HI效价与NDV-LD HI效价相近,但比La Sota HI效价低2．3个～2．7个滴度;NDV-NH与F48E9 HI效价相近,比La SotaHI效价低4．2个～4．3个滴度,提示以上3个野毒株与疫苗株之间的抗原相关性差异较大。动物免疫保护试验结果表明,经La Sota免疫（HI效价〉2^5）后攻毒保护率为80％-100％。     

鸡饮水免疫应注意事项

<正>饮水免疫是当前规模养鸡场(户)常用的主要免疫方法之一。饮水免疫常用的疫苗有鸡新城疫La Sota系活疫苗、鸡新城疫La Sota系和传染性支气管炎H120二联活疫苗、鸡新城疫La Sota系和传染性支气管炎H52二联活疫苗、鸡传染性法氏     

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活苗(La Sota株+M41株+Re-9株)应用效果研究

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活苗(La Sota株+M41株+Re-9株)(三联苗(Re-9株))为国内首个采用基因重组H9亚型禽流感疫苗株研制的新支流三联灭活疫苗.为研究疫苗上市后的实际应用效果,使用7日龄AA肉鸡和260日龄产蛋期蛋鸡评价三联苗(Re-9株)有效性.结果显示:肉鸡免疫后14 d...     

鸡新城疫病毒分离株与La Sota株灭活疫苗效力比较试验

用NDV分离株及La Sota株为抗源液，经福尔马林灭活后，与油佐剂混合，分别制成分离株灭活苗、La Sota株灭活苗及分离株与La Sota株二价灭活苗。将这三种灭活疫苗分别免疫SPF鸡后，均获得100%抵抗NDV分离株及F48株强毒攻击的保护力；而用这3种灭活苗与La Sota活苗单独或联合使用，免疫带有ND母源抗体的普通鸡后，3种灭活苗的免疫效力不同，分离株灭活苗与价灭活苗对NDV分离株攻击的免疫保护效力明显优于La Sota灭活苗；灭活苗与活苗同时使用，其免疫效力明显优于单独使用灭活苗或活苗。     

鸡新城疫Ⅰ系苗饮水免疫试验

本疫苗系中等毒力毒株制成,其免疫程序多是在经过鸡新城疫弱毒力疫苗(如Ⅱ系、B_1株、F株、La Sota株疫苗)免疫过的基础上进行Ⅰ系苗的免疫,且都是逐只捕捉进行肌肉注射,对饲养规模较大的养鸡场费人费时。使鸡惊扰和挣扎,使其生产能力有所下降。为克服这些弊端,吉林生物制品厂田春雨、姜崇子进行了鸡Ⅰ系苗饮水免疫试验,又据部颁《兽医生物制品制造和检验》规程有关条文,并结合我们点滴经验介绍于下。     

两种新城疫灭活疫苗免疫原性比较

新城疫作为家禽养殖业危害最大的疫病之一,近些年来常发生免疫失败的现象,究其原因,由于免疫压力的增大和变异株的增多,使疫苗的免疫效果受到极大的挑战,因此选择合适的病毒株制备疫苗对免疫效果具有重要的意义。论文通过测定抗体水平比较新城疫基因Ⅶ型A-Ⅶ株和传统基因Ⅱ型La Sota株油乳剂灭活疫苗对鸡只免疫效价的影响,通过攻毒后的保护、排毒情况及病毒载量的研究,综合比较了2种毒株的免疫原性。通过本试验发现,利用基因Ⅶ型A-Ⅶ株灭活苗与基因Ⅱ型La Sota株灭活苗免疫SPF鸡后,A-Ⅶ株灭活苗所产生的HI抗体效价明显高于La Sota株灭活苗。而通过基因Ⅶ型YND株和标准强毒F48E9株攻毒试验结果显示,2种疫苗均能100%的保护鸡只不死亡,但A-Ⅶ株比La Sota株灭活苗能够更好地抑制强毒在体内的复制和排毒。由此可见,基因Ⅶ型A-Ⅶ株对不同基因型强毒的抵抗能力优于基因Ⅱ型La Sota株,具有更好的免疫原性,通过本试验可为新城疫的防控选择合适的疫苗提供一定的参考。     

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活 疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)免疫程序研究

设计不同的免疫程序,用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)免疫黄羽肉鸡,通过对ND、IB、H9抗体滴度监测,探讨ND、IB、H9抗体消长规律及鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)的免疫程序。试验结果表明,用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)免疫黄羽肉鸡后,其诱导产生的ND、IB、H9抗体的消长规律基本同步;仅于10日龄免疫一次三联灭活苗,其抗体水平较低,于20、40日龄二免、三免或10日龄先用鸡新城疫病毒(La Sota株)、禽流感病毒(H9亚型,SS/94株)二联灭活疫苗作基础免疫,20或40日龄再用三联灭活苗作加强免疫,则上述3种抗体均快速上升,且维持时间长。根据试验结果,建议按照正常免疫程序作基础免疫的健康肉鸡,饲养期较短的可于20日龄左右用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)作加强免疫,0.3 mL/只;饲养期较长的则于40日龄左右用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)作加强免疫,0.5 mL/只。     

新城疫CHR株与La Sota株2种疫苗近期免疫效力比较试验

鸡新城疫CHR 株冻干疫苗中试产品3 批以及La Sota 株冻干疫苗( 符合质量要求) , 以5 种免疫途径: 肌注、滴鼻、喷雾、饮水、拌料分别接种11 日龄雏鸡。每批疫苗每种途径接种1 组, 20 只/ 组, 共20 组。雏鸡群免疫前血凝抑制抗体(HI) 效价为1∶2-13 , 于14 d 、28 d 后再测HI抗体水平, 并分别用10 000 鸡胚半数致死量(ELD50) 新城疫标准强毒北京株攻击。从而检测2 种疫苗用5 种免疫途径免疫后在不同时间的近期免疫效力。结果表明, 近期内CHR 株疫苗HI抗体呈上升趋势, 而La Sota 株疫苗HI抗体先升高后下降; CHR 株疫苗以饮水和拌料途径效果较好, 其它3 种途径效果相似。接种后14 d 攻毒, 2 种疫苗均能较好保护强毒攻击; 28 d 后, CHR 株保护率高于La Sota 株。     

鸡新城疫免疫（上）：疫苗和免疫程序

疫苗鸡新城疫疫苗分弱毒苗和灭活苗两大类。 (一)弱毒苗 1.毒力弱的弱毒苗,亦称B_1型疫苗。国内目前广泛使用的B_1型疫苗有Ⅱ系(B_1株)、Ⅲ系(F株)及Ⅳ系(La Sota株)。我省生产使用的B_1型疫苗主要是Ⅱ系苗,其优点是对鸡的反应较轻,适于雏鸡和各种鸡使用,缺点是免疫力产生较慢,需7—9天,免疫期较短,2月龄以下鸡仅能维持1—2月(门常平的研究中,Ⅱ系苗首免后的免疫持续期不超过20～25天,紧接着二免,二免后的持续期约为60天),疫苗用量较多,每只鸡滴     

一株鸡新城疫病毒的分离鉴定及其油乳剂灭活苗免疫效果评价

从河南某种鸡场发病鸡群中分离出1株毒株,经HA、HI和动物回归试验,确定分离的病毒为NDV,命名为HNYD株。经过测定,HNYD株鸡胚半数致死量（ELD50）为10^90/0．1mL;鸡胚最小致死量的平均致死时间（MDT）为53．8h;对1日龄SPF雏鸡脑内致病指数（ICPI）为1．86,提示HNYD株为强毒力株。血清交叉反应试验显示HNYD株和La Sota株存在一定的抗原性差异。用HNYD株油乳剂灭活苗对HNYD株和La Sota株的保护率分别为90％和100％,明显优于La Sota株油乳剂灭活苗,提示HNYD株制备的疫苗对流行毒株和经典毒株的攻击均能很好的保护。     

鸡新城疫油乳剂灭活疫苗免疫抗体消长规律的测定

将5000余只7日龄地方麻鸡随机分为2组,第一组肌肉注射山东泰丰生物制品公司生产的鸡新城疫(La Sota株)灭活苗0.25ml,同时滴鼻点眼鸡新城疫(La Sota株)一鸡传染性支气管(H120)二联冻干活疫苗各两滴;第二组只滴鼻点眼鸡新城疫(La sota株)一鸡传染性支气管(H120)二联冻干活疫苗各两滴,定期进行ND抗体检测.结果表明,第一组接种疫苗7d后产生ND抗体滴度为4.6log2,14d可达到高峰(9.6log2);整个试验期间第一组试验鸡免疫后所产生的ND抗体效价普遍高于第二组,抗体水平持续期较长,到175d时仍然能达到7.62log2.     

鸡新城疫及传染性法氏囊病二联油乳剂灭活苗的试制与应用

应用新城疫 ( ND)疫苗株 I系及 La Sota株、传染性法氏囊病 ( IBD)疫苗株 B87及自然强毒株制备成二联油乳剂灭活苗 ,通过免疫试验及区域试验 ,结果表明 ,疫苗安全可靠 ,免疫原性强 ,免疫鸡群一周后产生免疫力 ,3周后产生坚强免疫力 ,获得良好保护。受到用户好评。1　材料与方法     

鸡新城疫-鸡传染性支气管炎-禽流感三联灭活油乳剂疫苗的研制与免疫试验

用鸡新城疫弱毒株Lasota株、鸡传染性支气管炎病毒弱毒株M-H120和禽流感病毒HB1（H9N2）株做为抗原制成油乳剂灭活苗，并对其进行了物理性状、无菌情况、安全性、灭活效果、保存期和免疫效力等方面的检验。证明所制备疫苗完全符合质量标准，鸡体对该疫苗3种抗原均产生了良好的免疫应答。攻毒试验结果证明，免疫鸡能良好地抵抗同种强毒的攻击，所制备疫苗4C放置保存12个月后其免疫效力没有下降。     

鸡新城疫-传染性支气管炎二联油乳剂苗的研制

以NDV La Sota株，IBV呼吸道型H120株和肾型SN9301株为制苗毒株，病毒经鸡胚繁殖后甲醛灭活，灭活毒液依毒价按比例混合加入油佐剂中，乳化制成ND—IB二联油乳剂疫苗。对该疫苗的安全性、稳定性和免疫效果等进行了测定。结果表明：疫苗安全稳定，物理性状良好；将该苗与相应弱毒苗配合用于雏鸡首免，可获得稳定的免疫保护；单用该苗给雏鸡首免，或用相应弱毒苗免疫雏鸡，免疫效果均较差。     

新城疫病毒弱毒株对鹅的免疫效力试验

用新城疫病毒(NDV)疫苗株La Sota和NDV基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ为免疫原,分别以活苗和灭活苗的形式免疫2周龄试验鹅,免疫后第7、14天和21天采血分离血清用于抗体效价测定.免疫后3周以基因Ⅶ型强毒分离株JS2-06进行攻毒,攻毒后每天观察各组鹅的发病情况,并于第2、4天和7天分别采集喉气管和泄殖腔棉拭样品,用于病毒的分离.试验结果表明,活疫苗免疫后不能产生有效的免疫应答,而灭活苗免疫鹅对强毒的感染具有较强的抵抗能力,但基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ能更有效抑制鹅体的排毒,其免疫效力明显高于疫苗株La Sota.