番鸭巴氏杆菌的分离鉴定及体外抑菌实验

为了对番鸭巴氏杆菌病的防治提供科学方法,对疑似番鸭巴氏杆菌病例进行细菌分离鉴定及体外抑菌试验。从病变部位划线接种血平板进行细菌分离培养;用微量生化法结合分子生物法对分离菌进行种属鉴定;用纸片扩散法和牛津杯扩散法检测分离菌抑菌活性;用腹腔注射分离菌来复制病例。结果:获得菌株Y-X-1、Y-X-2、Y-G-1、Y-G-2,在血平板上半透明、不溶血;对蔗糖产酸不产气,对乳糖不产酸也不产气;于1800bp处出现分离菌PCR电泳条带,分离菌16S rRNA基因序列与多杀性巴氏杆菌高度吻合,Y-G-1与MG597107.1菌株,Y-X-1与KX579748.1菌株的亲缘关系最近,进化树上处于同一分支;头孢曲松高度抑制分离菌生长,青霉素不影响分离菌生长;鸡唾液乳酸杆菌、猪小肠乳酸杆菌对分离菌均表现较强的抑菌性能;复制病例的试验动物,均死于攻菌后的12h之内,死亡动物呈现典型症状。结论:Y-X-1、Y-X-2、YG-1、Y-G-2为多杀性巴氏杆菌,该病例确诊为番鸭巴氏杆菌病。该病防治首选抗生素为头孢曲松,头孢曲松结合乳酸杆菌治疗效果更好。     

一株猪关节源链球菌的分离鉴定及体外抑菌试验

无菌采集病死仔猪关节积液,进行细菌分离鉴定及体外抑菌试验,为临床治疗提供用药参考.通过对分离菌ZF-1形态学观察、生化特性鉴定、16S rRNA基因序列分析,鉴定为链球菌.抑菌试验显示,ZF-1对部分青霉素类、头孢类、酰胺醇类等抗生素敏感,对部分大环内酯类、磺胺类、喹诺酮类、林可胺类等抗生素完全耐药.乳酸菌T-C-5对ZF-1有明显的抑制作用.庆大霉素、阿莫西林、头孢唑啉结合T-C-5可以治疗由链球菌引起的疾病.     

牛粪源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及体外抑菌试验

为了掌握呼伦贝尔奶牛养殖地区奶牛肠道金黄色葡萄球菌的分布及危害,试验对该地区不同奶牛户共206头奶牛的新鲜粪便进行了致病性金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验.结果表明:共筛选出34株疑似金黄色葡萄球菌,通过生化试验、血浆凝固酶试验和动物致病性试验,鉴定出致病性金黄色葡萄球菌7株,致病菌检出率为20.59%(7/34);...     

猪源乳酸杆菌的分离鉴定及体外抑菌试验

为了获得用于研制微生态制剂的乳酸杆菌菌株,从健康仔猪小肠中利用MRS固体培养基分离得到一株革兰氏阳性杆菌,通过培养特性、染色特征、菌落形态以及生化鉴定结果,初步判定该菌株为乳酸杆菌,再结合16S rDNA分子鉴定进一步确定该菌株为乳酸杆菌。牛津杯法体外抑菌试验结果显示,该菌对致病性大肠杆菌的抑菌效果较好,可以作为微生态制剂的保存菌种。     

仔猪溶血性葡萄球菌的分离鉴定及体外抑菌试验分析

剖解南昌某猪场死亡仔猪,呈现心肌炎、关节炎等症状,从其内脏分离得到病原菌ZGP-1、ZGP-2、ZGP-3.经过生化试验,分离菌鉴定为金黄色葡萄球菌;通过药敏试验,发现分离菌对头孢曲松、头孢唑啉高度敏感,对链霉素、甲氧嘧啶、强力霉素、乙酰螺旋霉素等完全耐药;通过体外抑菌试验,可知乳酸菌对分离菌ZGP-3有明显的抑制作用...     

雏鸡混合感染大肠杆菌与沙门氏杆菌的诊断鉴定

2006年5月4日,呼图壁县大丰镇甘河子林场王某,接肉雏鸡5300只。两天后雏鸡开始死亡,一周内死亡300余只。本实验室经细菌学鉴定结合ATB生化鉴定系统鉴定为大肠杆菌和沙门氏杆菌混合感染。经血清型鉴定确定分离菌株为大肠杆菌O2型和禽副伤寒沙门氏杆菌。     

福建省部分地区猪源沙门菌的分离鉴定

为了对福建省猪肉产品的安全性进行分析,在优化沙门菌分离鉴定方法的基础上,随机采集猪场饲料76份,以及屠宰猪肛门拭子、猪体表、屠宰肉样、结肠段以及市场售卖猪肉共991份样品进行沙门菌分离鉴定。结果:福建省猪源沙门菌的污染率比较高,且不同的采样环节污染率不一样。猪结肠的污染率最高,为34.13%(57/167);其次为屠宰场猪肉为21.97%(49/223);市售猪肉为20%(10/50),猪场饲料为11.84%(9/76),肛门拭子为9%(27/300),猪体表样品为3.98%(10/251)。说明福建省猪肉产业链中存在较为严重的沙门菌污染。     

猪源沙门菌分离鉴定与耐药性分析

2015年9月和2016年10月,河南省两猪场暴发保育仔猪的急性死亡,为了弄清原因,采集心血、肺脏和肝脏病料,通过常规分离、PCR鉴定、生化试验,分离到2株沙门菌,分别命名为HenanSep1、HenanSq2N。小鼠致病性试验结果显示,每只小鼠接种0.2mL菌液,其浓度为5×10~8 CFU/mL,均导致小鼠发病,但是无死亡。选取21种药物,采用K-B法对2个分离株进行药物敏感性测定。药敏试验结果表明,2株沙门菌对头孢噻呋、氨苄西林、磺胺甲恶唑/甲氧苄啶、磺胺异恶唑、氯霉素、恩诺沙星耐药,对美罗培南、亚胺培南、氨曲南、多黏菌素B、土霉素敏感,对其他药物敏感性不同。研究结果为猪沙门菌病临床诊断与防治提供了重要依据。     

南昌白猪大肠杆菌的分离鉴定及体外抑菌试验

为了诊断一起南昌白猪腹泻死亡病例,进行细菌分离鉴定及体外抑菌试验.从死亡猪病变部位分离出D2、D3、D4;在5％兔血平板上,菌落中等大小不溶血,革兰氏染色镜检均为G-直杆菌;在伊红美蓝培养基上,菌落闪发金属光泽;在麦康凯培养基上,菌落呈红色;在三糖铁斜面培养基上,底部无黑色沉淀;分离菌发酵木糖产酸产气,不能分解棉子糖和...     

鹅源巴氏杆菌的分离鉴定及体外抑菌试验

为了鉴定引起大白鹅死亡的病原,对两只病死的大白鹅进行临床剖检与无菌采集肝脏和心脏进行细菌分离培养.试验通过临床剖检、分离培养、培养特性鉴定、生化试验和16S rRNA PCR等方法进行鉴定,用琼脂扩散法进行药敏试验和抑菌试验,用腹腔注射法进行动物回归试验.结果显示从两只病死鹅的肝和心中分别分离得到4株革兰氏阴性短杆菌(...     

番鸭唾液乳杆菌的分离鉴定及体外抑菌试验

为了寻找番鸭肠道内优势益生菌株,用益生菌替代抗生素,将番鸭肠道细菌分离鉴定及体外抑菌试验。用微量生化法及16S rRNA基因序列检测分析法进行细菌分离鉴定;用纸片扩散法与牛津杯法做体外抑菌试验;用口腔灌服法进行动物安全性试验。结果显示,分离出的4株菌生化特性与乳酸杆菌基本一致,16S rRNA基因序列与唾液乳杆菌同源性大于99%;菌株生长速度快、产酸能力强,对胃蛋白酶、胆盐有一定的耐受性;对阿莫西林等敏感,对卡那霉素等耐药;对常见病原菌均有较强的抑制作用,上清液抑菌活性受pH和蛋白酶的影响,试验小鼠生长状况良好。说明分离菌具有广谱的抗菌效果,可以与卡那霉素等配合用药,作为微生态制剂用于多种病原菌疾病的防治,减少抗生素的使用。     

一株鸡源植物乳杆菌的分离鉴定及体外抑菌特性研究

抗生素耐药性严重威胁着人类和动物的健康,为在畜禽中寻找更经济、可持续、安全的非抗生素饲料添加剂.本试验以健康雏鸡粪便为试验材料,对粪便中的细菌进行分离鉴定并以特定致病菌(大肠杆菌、沙门氏菌)为指示菌,研究其体外抑菌特性.结果表明,试验从健康雏鸡粪便中分离鉴定出一株植物乳杆菌,编号为GX 20200417-1.分离获得的...     

猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及药敏试验

本试验从河南省多个养猪场采集有明显呼吸道症状的猪肺脏和鼻拭子,进行支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)的分离鉴定,通过病原的分离、培养对分离菌株进行形态观察、培养特性和生化试验鉴定,以及用支气管败血波氏杆菌flaB基因的特异性引物进行PCR鉴定,结果表明,有8株分离菌株扩增出了237 bp的特异性目的条带,结合形态观察及生化试验鉴定,确认成功分离到了8株猪源性支气管败血波氏杆菌;药敏试验结果显示,分离菌株对强力霉素、氯霉素、氟苯哒唑、氧氟沙星、四环素、卡那霉素、庆大霉素、奈丁酸和阿米卡星高度敏感。     

猪丹毒杆菌分离鉴定及体外抑菌试验

为了确诊临床疑似猪丹毒病例,采集病死猪的内脏,用常规生化法和PCR法进行细菌分离鉴定,用牛津杯法做体外抑菌试验。结果:分离菌H_2S、靛基质、枸橼酸盐等试验为阴性;分解葡萄糖、麦芽糖等,不能分解蔗糖;对青霉素、头孢唑啉等高度敏感,对氯霉素、链霉素等中度敏感;枯草芽孢杆菌、鸡唾液乳酸杆菌和猪小肠乳酸杆菌对其均有较强的抑制作用。结论:分离菌为猪丹毒杆菌,该病是由猪丹毒杆菌引起的急性热性传染病,防治首选药物为青霉素,枯草芽孢杆菌、鸡唾液乳酸杆菌和猪小肠乳酸杆菌可减少或部分取代抗生素对该病的防治。     

6种中草药对禽源沙门菌的体外抑菌试验

为了研究中草药对3种不同血清型禽源沙门菌的体外抑菌效果,采用水煎法制备黄连、黄柏、白头翁、金银花、女贞子、乌梅6种单味中草药水提液,然后进行药物敏感性试验,并进一步测定最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,鼠伤寒沙门菌LLCL-8株对黄连、金银花和白头翁较为敏感,MIC分别为(62.50±0) mg/mL、(83.33±29.46) mg/mL、(125.00±0) mg/mL,MBC分别为250.00 mg/mL、250.00 mg/mL、大于500.00 mg/mL;鸡白痢沙门菌LLC-51株对黄连敏感,MIC为(31.25±0) mg/mL,MBC为125.00 mg/mL;肠炎沙门菌S株对黄连、白头翁敏感,MIC分别为(62.50±0) mg/mL、(104.16±29.46) mg/mL,MBC均为250.00 mg/mL。说明黄连对3种血清型禽源沙门菌具有广谱抑菌作用,且抑菌效果相对明显;白头翁、金银花对某些血清型菌株具有较好的抑菌效果。     

甲鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定及体外抑菌试验

本试验采用分离培养法观察菌落形态特征,微量生化法检测生化特性,PCR扩增法进行分子鉴定,纸片扩散法检测耐药性,牛津杯法检测体外抑菌作用,人工感染动物法检测致病性,以期找到防控甲鱼大量发病的有效办法,对具有典型病状的甲鱼进行细菌分离鉴定。试验结果表明:得到4株形态一致的G-短杆菌JAY-1、JAY-2、JAY-3、JAY-4;均分解葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等,不分解乳糖、鼠李糖、木糖等,硝酸盐、枸橼酸盐等为阳性,H2S、尿素等为阴性;均在约1 500 bp处出现目的条带,与气单胞菌同源性最高,与嗜水气单胞菌同一分支;对青霉素G、阿莫西林、林可霉素、头孢氨卞等完全耐药,对红霉素、四环素等耐药,对头孢曲松、环丙沙星、恩诺沙星敏感;8株乳酸杆菌对分离菌均有明显的抑菌圈;攻毒小白鼠24 h内均死亡,均分离到与自然发病株一致的菌株。说明分离菌均为嗜水气单胞菌,乳酸杆菌对分离菌具有显著的抑致作用,头孢曲松、环丙沙星、恩诺沙星等与乳酸杆菌配合用药,可作为临床防控嗜水气单胞菌的参考依据。     

牛粪中致病性沙门杆菌的分离鉴定

为了追踪由牛源致病性沙门杆菌造成的粪便污染源头,对内蒙古某奶牛场200头健康状况良好的泌乳荷斯坦奶牛的新鲜粪便进行了致病性沙门杆菌的分离鉴定.试验共分离出55株疑似沙门杆菌,再经过形态学观察、动物试验、生化鉴定和血清型鉴定从55株疑似沙门杆菌中分离出8株致病性沙门杆菌,分离率为14.5%(8/55),其菌型分布为A群(O2)、B群(O4)、C1亚群(O7)、D群(O9),其中B群所占比例最高(37.5%),其次是C1亚群(25.0%)、D群(25.0%)、A群(12.5%).在此基础上选用乌梅、黄芩、大黄、黄连、穿心莲、金银花、板蓝根、桂枝等8种中草药按照试管液体2倍稀释法进行药物最低抑菌浓度试验,结果表明,抑菌效果较好的药物是乌梅、黄芩、大黄;其他中草药对沙门杆菌抑菌效果较差或无抑制作用.