山葡萄基因组DNA提取及RAPD鉴定

以雌花山葡萄（７３０６４）冷藏幼叶、香妃葡萄新鲜幼叶为试材,分别采用修改的ＣＴＡＢ法、高盐法、ＳＤＳ法提取基因组ＤＮＡ。结果表明,三种方法所提的ＤＮＡ纯度及产率有差别,从综合结果看,以ＣＴＡＢ法为好,所得ＤＮＡ不需经氯化艳梯度离心或柱层析,可直接用于ＲＡＰＤ分析。     

山葡萄基因组DNA提取及RAPD鉴定

以雌花山葡萄（７３０６４）冷藏幼叶,香妃葡萄新鲜幼叶为试材,分别采用修改的ＣＴＡＢ法,高盐法、ＳＤＳ法提取基因组ＤＮＡ。结果表明,三种方法所提的ＤＮＡ纯度及产率有差别,从综合结果看,以ＣＴＡＢ法为好,所得ＤＮＡ不需经氯化铯梯度离心或柱层析,可直接用于ＲＡＰＤ分析。     

适于宁夏枸杞RAPD分析的DNA高效提取方法

采用优化的CTAB法提取枸杞叶片基因组DNA.利用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳检测所得DNA的浓度和纯度,并进行了RAPD初步扩增分析.DNA浓度在300 μg /mL,可达400 μg/g(叶片鲜重).OD260/OD280比值为1.44～1.6(理想值为1.8).结果表明:优化CTAB法所提取枸杞总DNA的纯度高、完整、量大,能满足RAPD扩增,条带清晰、稳定,并且提取操作的程序快速、简便,试验成本低、效率高.优化的CTAB法高效提取的枸杞基因组DNA不需经氯化铯梯度离心或柱层析纯化,可以直接用于RAPD分析.     

岩虱子RAPD反应体系的研究

利用RAPD（随机扩增多态DNA）技术对濒危植物岩虱子进行了RAPD反应体系的研究.以岩虱子叶片为材料,采用改良的CTAB法提取其基因组DNA,进行RAPD反应条件的优化试验.通过单因子试验分别研究了模板DNA用量、Mg^2＋浓度、dNTPS浓度、Taq酶的用量和引物浓度对RAPD反应的影响,建立了适于岩虱子RAPD分析的有效的稳定的反应体系,即在25μL总反应体系中,模板DNA的最适用量为10 ng、Mg^2＋的适宜浓度为2.0 mmol/L、dNTPs的适宜浓度2.2 mmol/L、Taq酶的用量以1 U、随机引物的浓度以2.5 μmol/L为佳.     

李属植物DNA提取及RAPD反应体系的优化

以1号李,6号李和公主红为试材,对李属植物DNA提取方法进行改良并进行RAPD反应体系的优化.结果表明:改良CTAB(3%)法提取的DNA产量高,可满足RAPD扩增的需要.25 μL反应体系中,DNA聚合酶、Mg2 、引物、模板DNA和dNTPs 5种主要成分的适宜浓度或用量分别是:1.0 U、2.0mmol/L、10 pmol/L、20 ng和1.0mmol/L.     

观赏竹芋DNA的提取与RAPD体系优化

文章用多种方法对观赏竹芋进行DNA的提取和RAPD体系优化研究,结果表明CTAB法较适合于观赏竹芋DNA的提取,RAPD体系优化还有待进一步确定。     

一种从果树成熟叶片提取DNA的方法

针对果树成熟叶片富含多糖、多酚及其它次生代谢物质的特点,以8个果树树种的秋季成熟叶片为材料,采用改进的CTAB法对其基因组总DNA进行了提取,并对得到的DNA进行了电泳检测、含量测定和AFLP分析。结果表明,该方法从8种果树的成熟叶片中均能提取出基因组总DNA,且DNA的纯度和完整性都较好,D260nm/D280nm的比值均在1.8～2.0之间,无降解现象,RNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化;其AFLP分析(引物组合为EcoRI-TA/MseI-CTT,EcoRI-TT/MseI-CTT)条带清晰,多态性好,说明此方法提取的果树成熟叶片基因组总DNA完全适于AFLP分析。     

适于AFLP分析用的桃成熟叶片DNA提取方法

以多个野生桃秋季成熟叶片为材料,采用改进CTAB法对其基因组总DNA的提取进行了研究,并与其相应幼叶DNA的提取效果进行了比较分析。结果表明,从野生桃成熟叶片提取的DNA除产量低于幼叶外,DNA的纯度和完整性都较好,D260nm/D280nm的比值均为1.8～2.0,无降解现象,RNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化;其AFLP分析(引物EcoRI-TA/MseI-CTT)条带清晰,多态性好,说明此方法提取的野生桃成熟叶片基因组总DNA完全适于AFLP分析。     

苹果RAPD分析体系的建立

对富士苹果（Ｍａｌｕｓ Ｐｕｍｉｌａ Ｍｉｌｌ．ｃｖ．Ｆｕｊｉ）ＲＡＰＤ（Ｒａｎｄｏｍ Ａｍｐｌｉｆｉｅｄ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ＤＮＡ）分析体系的优化研究表明,ＲＡＰＤ反应体系中,ＤＮＡ、Ｔａｑ酶、引物和Ｍｇ＾２＋４种主要成分的最适用量分别为：２０ｎｇ、１．０Ｕ、０．２μｍｏｌ．Ｌ＾－１和３．０μｍｏｌ．Ｌ＾－１。采用该优化体系,以ＯＰＪ０３为引物,构建了我国及世界范围内苹果生产中重要的２８个     

硅胶干燥胡杨叶片DNA提取与RAPD反应体系的建立

以塔里木河流域胡杨(Populus euphratica)硅胶干燥叶片为材料,采用改进CTAB法提取胡杨基因组DNA,得到满足RAPD(Random amplif ied polymorphic DNA),随机扩增多态性DNA分析的胡杨基因组DNA。通过单因素优化试验,得到胡杨RAPD分析的最佳反应体系为:40 ng模板DNA,0.8 U rTaqDNA聚合酶,2.5 mmol/L Mg2+,0.3 mmol/L dNTPs,0.5μmol/L随机引物,1×buffer缓冲液,ddH2O补足至10μL。扩增反应程序为:94℃预变性5 min,94℃变性30 s,38℃复性30 s,72℃延伸120 s,35个循环,最后72℃延伸7 min。     

几个Mang果品种的RAPD分析

应用１０个十聚体机引物,美国红Ｍａｎｇ,桂香Ｍａｎｇ株系的基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析,筛选出Ｓ２７３、Ｓ２８１和Ｓ２８６３个随机引物,适用于Ｍａｎｇ果基因组ＤＮＡ的ＲＡＰＤ扩增,结果表明迟熟红苹Ｍａｎｇ,美国红Ｍａｇｎ和桂香Ｍａｎｇ三者在ＤＮＡ序上存在差异性。     

阿月浑子性别鉴定的RAPD分析

应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对新疆阿月浑子(PistaciaveraL.)地方品种雌、雄株进行性别鉴定的研究。通过叶片总DNA抽提、RAPD标记分析及反复的试验筛选,找到了一个适用于新疆阿月浑子的RAPD反应体系和循环参数。采用OPO08引物对雌、雄株基因组DNA扩增出性别之间差异性的核苷酸片段,证实雄性植株DNA的扩增产物有一条大约700bp的特异性条带,而雌性植株则无此特异性条带。即找到一条与阿月浑子性别相关的基因标记,表明RAPD技术可应用于新疆阿月浑子地方品种的性别鉴定。此研究是对我国雌雄异株果树阿月浑子在分子水平进行早期性别鉴定的一个尝试。     

玉木耳的RAPD分析

采用随机扩增多态性DNA (Randomly Amplified Polymorphic DNA,RAPD)技术分析玉木耳(white mutant strain of Auricularia fuscosuccinea)、九里湖木耳(A. fuscosuccinea)、黑木耳(A. auricula)8129和毛木耳(A.polytricha)781四个菌株之间的遗传差异性.结果表明,玉木耳与九里湖木耳之间的遗传相似系数大于0.99;4个菌株在遗传距离0.53的位置上可以分为三类:九里湖木耳和玉木耳为一类;黑木耳8129,毛木耳781各为一类.     

几个杧果品种的RAPD分析

应用１０个十聚体随机引物,对美国红杧、桂香杧和退熟红苹杧株系的基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析,筛选出Ｓ２７３、Ｓ２８１和Ｓ２８６３个随机引物,适用于杧果基因组ＤＮＡ的ＲＡＰＤ扩增,结果表明迟熟红苹杧、美国红杧和桂香杧三者在ＤＮＡ序列上存在差异性。     

杏品种的RAPD分析

实验从S系列(Sangon公司)100个引物中筛选出能稳定扩增的18个引物,用这些引物首次对新世纪与红丰等20个杏品种进行了扩增,均具有多态性。共扩增出218条带,106条具有多态性,多态性比例为48.6%;建立了红丰及新世纪等优新品种的DNA指纹图谱,找到了它们的特异谱带。利用特异谱带结合DNA指纹,可将参试品种鉴别出来。同时利用STATISTIC软件,根据RAPD标记相似系数采用UPGAM聚类策略,对20个杏品种进行了聚类分析。在LD=0.4时划等值线,将参试品种分为7类。     

部分栽培葱属植物叶绿体基因组的RAPD分析

  提取我国栽培的几种主要葱属植物的叶绿体DNA , 利用RAPD 技术进行遗传关系分析。从56 个10 bp 随机引物中筛选出18 个多态性引物进行扩增分析, 14 个材料共扩增出270 条带, 其中246 条具多态性。UPGMA 聚类将供试葱属品种分成4 个组。葱属在进化上存在两个方向, 分别形成了管状叶和扁平叶两种类型。     

RAPD技术及其在蔬菜育种上的应用

本文从ＲＡＰＤ技术的概念、意义、技术原理、在蔬菜遗传育种上的应用等方面作了较为全面的综述。然而任何一种分子生物技术都有它的局限性。ＲＡＰＤ技术也存在着缺陷，但其快速、简便的优势使它在基因组研究中发挥着很重要的作用，在蔬菜育种中有着其它方法不可取代的优势。     

利用RAPD方法鉴定两个春甘蓝品种的纯度

利 用 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ （ 随机 扩增多 态性 Ｄ Ｎ Ａ） 方 法, 通过 对１００ 个 随机 引物 的 筛选 获得 能 区分中甘１１ 号及其 亲本和８３９８ 及其 亲本的引 物 Ｏ Ｐ Ｒ１５ ,并 得到 单株 验证。 结果 表明 ,利 用 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ 方法对中甘１１ 号和８３９８ 这 两个早熟 春甘蓝一 代杂种 进行快速 、准确的 纯度鉴定 是可行 的。     

三种黑籽南瓜RAPD分析

以"绿皮"、"白皮"、"绿皮花纹"3种云南黑籽南瓜为试验材料,采用RAPD技术分析了3种类型黑籽南瓜间的亲缘关系。结果表明:从38种随机引物中筛选出20种引物,选取扩增清晰、重复性好的6种引物分析,共产生43条谱带,多态谱带39条,多态性位点比率为90.70%;"绿皮"、"白皮"和"绿皮花纹"之间的平均遗传距离是0.94,"白皮"和"绿皮花纹"间的平均遗传距离为0.40;"绿皮"与"白皮"及"绿皮花纹"间的亲缘关系较远,而"白皮"与"绿皮花纹"间的亲缘关系较近。     

李基因组DNA提取方法的探讨

本文通过采用改良CTAB法对幼嫩程度不同的李的叶片的DNA的提取进行研究,加大CTAB提取液的浓度,加入抗氧化剂以及RNase最大限度的降低DNA的降解,减少蛋白。多酚类物质的污染和破坏,提高DNA的产量,可以很好地用于PCR扩增和限制性酶切反应中。