蚁狮纤溶活性蛋白的发现及理化研究

本实验采用硫酸铵分段盐析法分离和提取得到了具有纤溶活性的蚁狮粗蛋白,使用纤维平板法检测目标蛋白纤溶活性,结果显示三个不同浓度梯度的粗蛋白均具有明显的纤溶活性;测得其最适温度为37℃,最适pH值约为6.0;金属离子Ba~(2+)、Cu~(2+)、Mg~(2+)、Mn~(2+)对蚁狮纤溶活性蛋白具有较强的抑制作用,Na~+对其抑制作用较小;抑制剂EGTA对粗蛋白抑制率较高,βME对其影响较小;使用BCA试剂盒测定蚁狮纤溶活性粗蛋白浓度为4mg/mL左右。     

美洲大蠊来源抗癌纤溶活性蛋白的发现与理化性质研究

本实验以美洲大蠊为研究对象,采用硫酸铵分段盐析法分离和提取得到了美洲大蠊粗蛋白,使用纤维活性平板法对该物种的蛋白进行活性检测,结果显示本实验所提取三个不同浓度梯度的粗蛋白均具有较强的纤溶活性;测得其最适温度为35℃,最适pH值约为9.0;Fe3+几乎完全抑制了美洲大蠊纤溶活性蛋白的活性,Ba2+和βME对其有轻微抑制作用,Na+和EDTA对其纤溶活性基本上无影响;经MTT实验初步测定发现美洲大蠊纤溶活性蛋白对癌细胞的生长有一定的抑制作用。     

发酵饵料对中华圆田螺生长性能和肠道菌群的影响

试验旨在探讨发酵饵料对中华圆田螺生长性能和肠道菌群的影响。选择平均体重25 g的中华圆田螺60只,随机分成2组,每组3个重复,每个重复10只螺。A组、B组田螺分别饲喂基础饵料和发酵基础饵料。试验期20 d。试验结束,取田螺肠道内容物,利用16S rDNA高通量测序技术检测肠道菌群多样性。结果显示,A组、B组田螺的成活率均为100%。与A组相比,B组田螺的增重率（WGR）、特定生长率（SGR）、蛋白质效率（PER）均有所提高,饵料系数降低（P>0.05）。高通量测序得到有效序列共375 141条,序列长度为416～455 bp。将有效序列进行聚类并划分,对OTU进行统计,发现每组样品的OTU覆盖率均在99.9%以上。A组、B组田螺肠道丰富度最高的前6个细菌门类依次为变形菌门、拟杆菌门、浮霉菌门、酸杆菌门、放线菌门和绿弯菌门。A组、B组田螺肠道排名前5的菌属为变形菌属、拟杆菌属、厚壁菌属、软壁菌属和衣原体,与A组相比,B组田螺丰度前5菌属的相对丰度均有提高,其中厚壁菌属和衣原体显著提高（P<0.05）。B组OTU数量、Chao1指数、Simpson指数均高于A组（P>0....     

蚯蚓纤溶酶活性研究

蚯蚓是优质的蛋白质饲料,但蚯蚓体内含有纤溶酶等生物活性物质,大量使用会造成动物机体的损害。为了保证蚯蚓作为蛋白饲料在畜牧业生产中的应用安全,本研究采用琼脂糖-牛血纤维蛋白原平板测定了蚯蚓水解液在不同时间、不同pH值和不同温度下的纤溶酶活性。结果表明,随着pH值降低和温度的升高蚯蚓纤溶酶的活性逐渐降低,但直至pH值为1时或温度达到100℃时纤溶酶仍具有较强的活性。因此认为,蚯蚓纤溶酶在胃液的酸性条件下或通常的环境温度下难以完全灭活,把蚯蚓作为蛋白饲料或饲料添加剂使用时应严格控制动物的摄入量,以保证养殖业的安全生产。     

活性蛋白在畜禽业的研究进展

近年来,饲料行业已经获得了跨越式发展,生物活性蛋白作为新型饲料,虽然价格较为昂贵,但发展前景不容小觑。大量研究表明,各类动物中均可提取具有纤溶活性的蛋白质:蝇蛆活性蛋白、黄粉虫活性蛋白、柞蚕活性蛋白、蚯蚓活性蛋白等,本文对活性蛋白的来源、现状、影响因素以及新型材料进行阐述,并展望未来发展。     

tPA体外纤溶活性及半定量检测方法的确立

在原有的纤维蛋白平板溶圈法 (fibrin agarose plate assay,FAPA)检测系统中引入纤溶酶原 (plasminogen) ,使该法检测组织型纤溶酶原激活剂 (tissue plasminogen activator,t- PA)的灵敏度提高 30倍以上 ,达到 0 .0 1ng(约0 .0 0 1IU )水平 ;并对不同反应时间、纤维蛋白含量、琼脂糖凝胶厚度下的溶圈结果进行对比研究。结果表明 ,37℃温育18～ 2 4h可以得到较满意结果 ;其他因素虽不同程度地影响溶圈出现时间及大小 ,但对其溶圈梯度及标准曲线无明显影响。从而确立了以 FAPA为基础的快速、灵敏、可靠的重组 t- PA体外纤溶活性半定量检测方法。     

瓜蒌纤溶酶的分离纯化及性质研究

利用亲和层析从瓜萎蛋白粗提液中分离纯化得到一纤溶酶,并对其部分酶学性质进行研究.结果表明,该酶表观分子量为66.0 kD;最适pH值为9.0;在4～40℃活性无明显变化,78℃以上完全失活;在以酪蛋白为底物的水解反应中,温度、酶底物比、pH值、反应时间4种因素对水解反应的影响力大小为:温度>酶底物比>反应时间>pH;Km值为1.89mg/mL,Vmax=555.56μmol/(L·min).     

蚯蚓纤溶酶的分离纯化及临床作用研究进展

蚯蚓纤溶酶是从蚯蚓中分离的一种丝氨酸蛋白水解酶,有抗凝溶血栓、抗癌抗肿瘤、抗炎、神经修复等作用,在临床上是预防和治疗血栓疾病的有效药物。本文对蚯蚓纤溶酶的分离纯化与药理作用加以概述,为临床蚯蚓溶栓药物的研究提供依据。     

重组溶葡球菌酶的体外抑菌活性研究

采用试纸片法和肉汤稀释法测定重组溶葡球菌酶(rLspn)的抑菌圈大小、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),通过与溶葡球菌酶标准品和两种抗生素相比较,评价rLspn的体外抑菌活性.试纸片法试验结果显示,rLspn有专一抑制金黄色葡萄球菌的作用,而对其他菌株无效;rLspn与标准品的抑菌活性差异不显著(P＞0....     

不同类型苏丹草种子醇溶蛋白的研究

本文首次采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对不同类型苏丹草种子醇溶蛋白谱进行研究。结果表明,4种类型苏丹草种子酸溶蛋白谱带数量和活性都存在明显的种内品种和类型间差异。初步认为,苏丹草种子醇溶蛋白谱可以作为不同类型苏丹草的亲缘关系研究及其遗传差异鉴定的重要标志。     

肝素钠对颈总动脉搭桥术犬纤溶系统的影响

选取10条雄性健康犬,随机分成对照组和治疗组,每组5条。实验动物模型采用同侧自体颈静脉行颈动脉45&#176;搭桥。术后均采取常规治疗,治疗组给予肝素钠。分别于术前及术后1、2、3天在颈静脉采血,检测D－二聚体、血清纤维蛋白（原）降解产物（FDP）、血浆血小板α颗粒膜蛋白（GMP－140）、纤溶酶原激活剂的抑制物－1（PAI－1）和组织纤溶酶原激活剂（t—PA）等纤维蛋白溶解系统（纤溶）指标的变化。结果：治疗组与对照组相比,D－二聚体、GMP－140、PAI－1显著降低（P〈0．05）,t—PA显著升高（P〈0．05）,FDP变化不显著（P〉0．05）。结论：肝素钠可改善血管搭桥术后纤溶系统,纠正血液高凝状态,恢复抗凝系统活性。     

大黄注射液对犬血管搭桥术后纤溶系统的影响

为研究大黄注射液对犬血管搭桥术后纤溶系统的影响,将20只犬随机分为高(0.8 g.kg-1)、中(0.4g.kg-1)、低剂量组(0.08 g.kg-1)及对照组,同侧自体颈外静脉重建颈总动脉,头静脉滴注大黄注射液,ELISA定量分析测定术前及术后1、2、3、5、7、14、21 d纤溶系统各指标的变化。结果显示,用药后血小板α颗粒膜蛋白、D-二聚体、纤溶酶原激活剂的抑制物-1显著降低,组织纤溶酶原激活剂显著升高,且成剂量依赖关系;血清纤维蛋白(原)降解产物无显著变化。结果表明,大黄注射液能纠正搭桥术后血液高凝状态,恢复抗凝系统活性,预防血栓形成。     

不同型犬腺病毒纤突蛋白基因序列的比较分析

根据已发表的CAV纤突基因序列,用PCR方法,对4个CAV-2毒株和4个CAV-1毒株的纤突基因进行了扩增和测序,测定的核甘酸序列经推导得到分别编码543和542个氨基酸CAV纤突蛋白垒序列。测定的CAV-2比较表明：我国流行的CAV-2SY强毒株与国外标准强毒株TorontoA26／61株相同．其驯化致弱的毒株与驯化前相比在1134位发生碱基颇换。测定的CAV－1比较表明：我国流行的CAV－1株与标准强毒R1261株差异相对较大,而国内CAV-1毒株互相之间相对差别较小CAV-2与CAV-1纤突基因的同源性为80．48％。     

红景天活性蛋白的分离及血凝活性测定

藏医药是祖国医学宝库中的一颗璀璨的明珠。据文献记载，藏药在抗病毒作用方面颇有潜力。根据西藏传统藏医经典，红景天具有养肺、清热、解毒功能。能滋补元气，提高免疫力，调节神经系统和内分泌的作用。具有抗衰老、抗缺氧和增强机体抵抗力等作用。笔者选用了红景天的根茎干制品（未经炮制处理）进行了活性蛋白的分离及血凝活性测定。报道如下。     

组织型纤溶酶原激活剂基因在小鼠体内的表达

将组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）基因ｃＤＮＡ经多次亚克隆插入到真核表达载体ｐＳＶＬ的ＳＶ４０启动子和ｐｃＤＮＡ３的ＣＭＶ启动子下游,构建了重组质粒ｐＳＶＬ－ｔＰＡ和ｐｃＤＮＡ３－ｔＰＡ。分别将这２种重组质粒直接注射于小鼠骨骼肌,观察了ｔ－ＰＡ基因在小鼠体内的表达情况。体外凝血试验结果显示,注射重组质粒ＤＮＡ后,第５天凝血时间有所延长,第１５～２０天达到高峰,小鼠体外凝血时间平均延长７ｍｉｎ左右,延长时间与基因注射量呈明显的正相关。     

三七活性蛋白的分离及浸提液的筛选

在32种高原药源性植物中筛选出血凝活性较强的三七，用不同pH值和不同盐浓度的缓冲溶液浸泡制备浸提液，测定了其血凝活性，并进行了糖专一性抑制试验、硫酸铵分级沉淀、活性蛋白含量和分子质量的测定。试验表明，高原药源性植物三七浸提液具有活性蛋白的血凝活性，在1mol／L NaCl的甘氨酸缓冲溶液中活性最强，能被半乳糖所抑制，硫酸铵分级沉淀在40%和60％时蛋白含量最多，血凝活性最高，活性蛋白含量为29％。     

活性肽蛋白中氨基酸的营养价值研究

选用45只成年来航公鸡,应用套测法和强饲法相结合的研究,在日粮中添加不同水平的活性肽蛋白对鸡的氨基酸代谢率和有效氨基酸含量进行测定。研究表明:家禽日粮中添加10%活性肽蛋白时,总氨基酸、赖氨酸、蛋氨酸和苏氨酸的表观代谢率分别为70.84%、60.53%、56.74%和62.4%,真实代谢率分别为81.13%、72.95%、68.14%和76.99%;添加15%活性肽蛋白时,总氨基酸、赖氨酸、蛋氨酸和苏氨酸的表观代谢率分别为70.82%、59.97%、56.53%和62.06%,真实代谢率分别为81.2%、72.55%、68.09%和76.91%;添加20%活性肽蛋白时,总氨基酸、赖氨酸、蛋氨酸和苏氨酸的表观代谢率分别为70.23%、59.13%、55.83%和61.49%,真实代谢率分别为80.82%、71.97%、67.55%和76.61%。由此证明,48.55%粗蛋白质活性肽蛋白的总氨基酸、赖氨酸、蛋氨酸和苏氨酸的表观代谢率分别为70.63%、59.88%、56.37%和61.98%;真实代谢率分别为81.05%、72.49%、67.93%和76.84%。活性肽蛋白有效赖氨酸的含量(g/100g)为2.17,有效蛋氨酸的含量为0.64,有效苏氨酸的含量为1.68。     

新型饲料蛋白质柞蚕免疫活性蛋白的研究应用

新型饲料蛋白质柞蚕免疫活性蛋白的研究应用辽宁省农科院大连生物技术研究所都兴范随着营养免疫学、免疫学及生物技术在饲料工业中应用的不断深入，使越来越多的人已将注意力转移到如何通过生物技术来调动动物自身的防御体系以及如何用自然产品来增强机体的免疫力上来。而...