豆类丝核菌次级代谢产物对小鼠围产期毒性的研究

[目的]为豆类丝核菌次级代谢产物在临床上的安全用药提供试验依据。[方法]将受孕0 d的母鼠随机分为正常对照组,豆类丝核菌次级代谢产物56.62、14.15、3.54 mg/kg 4个组,研究豆类丝核菌次级代谢产物对小鼠的围产期毒性。[结果]中剂量组母鼠21 d体重显著下降（P〈0.05）。各试验组F1代小鼠出生胎数、0 d成活率与对照组无显著差异（P〉0.05）,而生长指数、内脏指数、游泳生存时间、生理发育指标、反射发育指标与对照组有显著或极显著差异。[结论]在该试验条件下豆类丝核菌次级代谢产物对小鼠有围产期毒性,在临床上作为抗肿瘤药物使用时孕妇应禁用。     

豆类丝核菌次级代谢产物对小鼠行为致畸学研究

研究了豆类丝核菌次级代谢产物对小鼠后代的行为致畸作用.将5组孕鼠分为空白对照组、豆类丝核菌次级代谢产物低剂量组、中剂量组、高剂量组及阳性对照组,分别灌胃给予生理盐水、低剂量（SW含量3.54 mg/kg）、中剂量（SW含量14.15 mg/kg）、高剂量（SW含量56.62 mg/kg）豆类丝核菌次级代谢产物及10 mg/kg环磷酰铵（CP）,待其自然分娩后,观察其后代生长发育及行为状态.结果表明,豆类丝核菌次级代谢产物3个剂量组在反射能力、协调运动能力、学习记忆能力及自主活动能力各方面指标与空白对照组相比差异均不显著（P＞0.05）,而与阳性对照组相比差异极显著（P＜0.01）.在本实验的剂量和条件下,豆类丝核菌次级代谢产物对小鼠后代不具有行为致畸作用.     

豆类丝核菌次级代谢产物对阿霉素所致小鼠骨髓和心肌毒性的保护作用研究

探讨了豆类丝核菌次级代谢产物对阿霉素(ADR)所致小鼠骨髓抑制及心肌损伤的保护作用。建立小白鼠骨髓抑制和心肌损伤模型。检测血常规,描记心电图,测定血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。心肌组织石蜡切片,HE染色,光镜观察。结果表明阿霉素4 mg.kg-1可致小白鼠骨髓抑制和心肌损伤。豆类丝核菌次级代谢产物可抑制阿霉素引起的白细胞数、红细胞数、血红蛋白量的减少;使心率加快,心电图Q波振幅减小,QRS波时间缩短和S-T段回升;降低血清CK、LDH活力,增强心肌SOD活力,降低MDA含量,减轻心肌组织损伤。豆类丝核菌次级代谢产物对ADR所致小白鼠骨髓和心肌毒性有一定的保护作用。     

豆类丝核菌次级代谢产物与阿霉素在小鼠体内联合抑瘤作用

探讨豆类丝核菌次级代谢产物与阿霉素(ADR)对小鼠肉瘤的体内联合抑制作用.建立小鼠肉瘤S180动物模型,分别用豆类丝核菌次级代谢产物、阿霉素、两药联合进行处理.计算抑瘤率、脾指数,测定小鼠T淋巴细胞活化指数、腹腔巨噬细胞吞噬活性,并对小鼠进行病理学观察.试验结果表明,两药联合能提高抑瘤率,次级代谢产物能显著提高小鼠的脾指数,使T淋巴细胞活化指数升高,腹腔巨噬细胞吞噬活性增强,同时能使瘤细胞密度降低,瘤组织出现大量变性坏死.豆类丝核菌次级代谢产物具有免疫增强作用,该产物与阿霉素联合对抑制小鼠移植性肉瘤S180具有相加作用.     

豆类丝核菌次级代谢产物对动植物细胞损害作用的对比

【目的】探索豆类丝核菌或其次级代谢产物的动植物损害在细胞生物学上的作用，为苦马豆素（swainsonine, SW）的毒理学研究提供新的思路。【方法】通过制作豆类丝核菌次级代谢产物污染的饲料和人工污染豆类丝核菌饲料，饲喂家兔17d ,剖检家兔并取其脑、肝脏、肾脏等组织分别进行病理组织学和电镜观察；并将不同浓度的次级代谢产物和不同株的豆类丝核菌分别污染回接的绿豆，待84h培养后，进行组织学和电镜观察。【结果】在对动植物细胞损害作用中，豆类丝核菌次级代谢产物使家兔脑组织和淋巴细胞呈现空泡变性，神经细胞核糖体脱颗粒，粗面内质网扩张等变化；同时还能使植物根部组织结构受损，细胞呈现空泡变性，内膜破裂等变化。【结论】豆类丝核菌引起的动物中毒作用主要是其次级代谢产物中SW发挥毒性，且同疯草中毒引起的病理变化基本一致；菌株对植物根部的致病性与其次级代谢产物中SW含量呈正相关。即推测，SW很有可能不仅是动物豆类丝核菌中毒的主要毒素，而且是豆科植物丝核菌病中细胞损害的主要化学物质。     

豆类丝核菌次级代谢产物对化疗骨髓抑制小鼠的保护作用

【目的】探讨豆类丝核菌次级代谢产物对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的保护作用及其作用机制。【方法】将昆明种小白鼠60只均分为6组:Ⅰ组(正常对照组)、Ⅱ组(CTX模型对照组)、Ⅲ组(苦马豆素(SW)低剂量组)、Ⅳ组(SW中剂量组)、Ⅴ组(SW高剂量组)、Ⅵ组(SW16 mg/kg)。Ⅰ、Ⅱ组灌胃生理盐水,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组分别灌胃浓度为8,16,32,16 mg/kg的SW液,剂量皆为0.4 mL/d,共10次;末次灌胃6 h后,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组腹腔注射环磷酰胺(CTX)80 mg/kg,每天1次,连续3 d,末次注射后24 h,眼眶采血并处死小鼠,测定血常规、脾脏指数、脾集落形成单位(CFU-S)、骨髓有核细胞(BMC)数及骨髓细胞增殖试验,研究豆类丝核菌次级代谢产物对小鼠骨髓造血功能的影响。【结果】腹腔注射CTX80 mg/kg连续3次,可致小鼠骨髓抑制。豆类丝核菌次级代谢产物(SW剂量为16mg/kg)可较好抑制CTX引起的白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、血红蛋白含量(HgB)、骨髓有核细胞数(BMC)减少;各剂量的SW能明显增加CFU-S数,其中以SW16 mg/kg效果最佳。当SW为8 mg/kg时,能很好地刺激骨髓细胞增殖。【结论】豆类丝核菌次级代谢产物对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制有较好的保护作用,其机制可能是通过刺激骨髓细胞增殖,增加BMC数和髓外造血来实现。     

豆类丝核菌次级代谢产物与阿霉素的体外联合抑瘤作用研究

［目的］研究豆类丝核菌次级代谢产物与阿霉素的降毒增效作用。方法］分别采用6种不同浓度的豆类丝核菌次级代谢产物（苦马豆素含量分别为10.00、5.00、2.50、1.25、0.62、0.31 μg/ml）处理人肝癌细胞HepG2,测量其IC50;然后用此代谢产物与2种不同浓度（60、6 μg/ml）阿霉素（ADR）联合处理HepG2,分析两者的增效作用。结果］豆类丝核菌次级代谢产物可抑制肝癌细胞HepG2生长,其对HepG2细胞作用72 h的IC50为1.25 μg/ml;ADR可显著抑制肝癌细胞HepG2生长,加入豆类丝核菌次级代谢产物后HepG2细胞的形态和存活率变化不大。结论］豆类丝核菌次级代谢产物与阿霉素体外联合不具有增效作用。     

重组溶葡萄球菌酶的致突变实验

实验用ICR小鼠经口罐胃染毒（骨髓细胞微核实验和精子畸形实验的剂量分别为2500、5000、10000mg·kg^-1）,取其股骨或睾丸组织常规制片,观察分散良好的中期分裂相鼠伤寒沙门氏菌回复突变（Ames）试验采用平板掺入法（剂量分别为0．01、0．04．0．2、1．00、5．00μg·皿^-1）,探讨了重组溶葡萄球菌酶的致突变性;预防其遗传危害性和潜在致癌作用的可能性。结果表明：小鼠骨髓、睾丸细胞染色体畸变实验显示：重组溶葡萄球菌酶给药组与阴性对照组比较,差异无显著性（P〉0．05）,Ames试验显示各菌株的各测试酞度的回变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍。由此证明在本实验条件下,重组溶葡萄球菌酶无致突变性。     

苯甲酸钠对小鼠骨髓细胞的致突变作用研究

采用小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠骨髓细胞染色体畸变试验研究了食品防腐剂苯甲酸钠对小鼠骨髓细胞的致突变作用。结果显示:小鼠骨髓细胞微核试验及小鼠骨髓细胞染色体畸变试验均呈阳性(P<0.01),证明苯甲酸钠是染色体断裂剂,而且对雄性动物的致突变作用更大,所引起的染色体结构畸变以染色体断裂为主要类型。     

代森锰原药的致突变性试验研究

[目的]探讨代森锰原药的致突变性。[方法]用KM小鼠进行小鼠骨髓多染红细胞微核试验和小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验,以及鼠伤寒沙门氏菌回复突变（Ames）试验。[结果]在小鼠骨髓多染红细胞微核试验和小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验中．阴性对照组与阳性对照组比较,差异有显著性（P〈0．01）;各剂量组与阴性对照组比较,差异均无显著性（P〉0．05）,且均低于阳性对照组（P〈0．05,P〈0．01）。在Ames试验中,4株试验菌在0．1～1．0mg／皿的试验剂量下（活化或非活化）均没有引起自发回变数2倍增加。[结论]根据《农药登记毒理学试验方法》中的评定标准,小鼠骨髓多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验和鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames试验）在所选剂量范围内结果均为阴性,代森锰原药未呈现致突变性。     

豆类丝核菌次级代谢产物抗肿瘤作用的病理学观察

通过建立种植性肝癌(H22)实体瘤动物模型,并给荷瘤小鼠灌胃含有苦马豆素(swainsonine,SW)且剂量分别为2.7mg·kg-1·d-1和16.2mg·kg-1·d-1的豆类丝核菌次级代谢产物稀释液,分别于灌药后8d、16d剖检荷瘤动物并取肿瘤组织与肝组织制做石蜡切片,HE染色,普通光镜观察。结果表明,该次级代谢产物能抑制种植性实体瘤(H22)的生长和转移。因此,该次级代谢产物具有抗肿瘤药用价值。     

苷肽注射液对鼠致突变作用的研究

通过Ames试验、骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验研究了苷肽注射液对鼠致突变作用的影响。采用多氯联苯(PCB)诱导的大鼠肝匀浆(S9)混合液作为体外代谢活化系统进行Ames试验;采用间隔24 h小鼠腹腔注射0.07,0.13,0.33,0.66 g/kg受试药品法进行骨髓细胞微核试验;采用小鼠腹腔注射0.17,0.33,0.66g/kg苷肽注射液进行精子畸形试验。结果表明:Ames试验受试药品对鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100T、A102 4菌株(加与不加S9)均未呈现遗传毒性;骨髓细胞微核试验各剂量试验组微核率与阴性对照组比较差异不显著(P>0.05);精子畸形试验各剂量试验组精子畸形率与阴性对照组比较差异不显著(P>0.05)。     

禾谷丝核菌的次生代谢产物

禾谷丝核菌 (RhizoctoniacerealisVanderHoeven)菌株对小麦的致病性测定结果表明 ,3个菌株的致病力存在显著差异。小麦品种和禾谷丝核菌菌株间存在显著的相互作用 ,在两个感病品种“苏麦 3号”、“宁麦 6号”和R7、R4 6 两个强致病力菌株间 ,这种相互作用尤为明显。禾谷丝核菌在马铃薯蔗糖培养液中产生的次生代谢物种类多 ,产量高。试验明确了进行禾谷丝核菌次生代谢物分析的最佳液相色谱条件。液相色谱和气质联用的结果显示 ,致病力不同的 3个菌株间 ,次生代谢物的构成上有差异 ,呋喃甲酸和苯甲酸衍生物的产量在菌株间差异最大。禾谷丝核菌的酸性粗提物具一定的生物活性 ,在高浓度和低浓度下的作用相反。禾谷丝核菌的次生代谢物处理后 ,小麦组织的电导率与对照 (未处理 )没有差异 ,表明次生代谢物对小麦的细胞膜半渗透性可能没有影响     

豆类丝核菌次级代谢产物对肿瘤细胞超微结构的影响

通过建立种植性肝癌(H22)实体瘤动物模型,并给荷瘤小鼠灌胃含有苦马豆素(swainsonine,SW)且剂量分别为2.7mg/(kg·d)和16.2mg/(kg·d)的豆类丝核菌次级代谢产物稀释液,于灌药后16d剖检荷瘤动物并取肿瘤组织与肝组织制作超薄切片,透射电镜观察。结果表明,该次级代谢产物能抑制种植性实体瘤(H22)的生长和转移。因此,该次级代谢产物具有抗肿瘤药用价值。