海洋低温碱性蛋白酶的急性毒性研究

应用酶工程技术,得到在室温下有较高酶活力的海洋低温碱性蛋白酶。为对海洋低温碱性蛋白酶进行安全性评价,作者应用小鼠和大鼠急性毒性试验及最大耐受量（MTD）测定,观察海洋低温碱性蛋白酶对小鼠1次口服后产生的急性毒性反应和大鼠完整皮肤短期内接触海洋低温碱性蛋白酶所产生的毒性反应。结果表明,小鼠1次口服海洋低温碱性蛋白酶的MTDM＞20g/kg为实际无毒物,其中毒的靶器官是肝脏,未见大鼠经皮的急性毒性反应。     

海洋低温碱性蛋白酶的遗传毒理学研究

应用NIH纯系小鼠骨髓细胞微核试验和染色体畸变试验,探究海洋低温碱性蛋白酶的遗传毒性作用及对人类的潜在危害。观察并计数嗜多染红细胞（PCE)与正红细胞（NRBC）的比值、微核率;染色体的畸变类型和畸变率,检测海洋低温碱性蛋白酶的诱变作用。结果表明,皮下注射环磷酰胺的小鼠,P／N比值＜1,微核率为22.97‰,染色体畸变率为18.32,与生理盐水（NS）对照组比较差异极显著（P＜0.01),而海洋低温碱性蛋白酶各组小鼠微核率均＜4‰,染色体畸变率为0.19%-0.25%,与NS组比较无显著性差异（P＞0.05）。未见海洋低温碱性蛋白酶各组对小鼠骨髓细胞的遗传毒性。     

益倍康对刺参生长、消化和免疫相关指标的影响

以刺参为试验对象,在其基础饲料中分别添加1、5、10、20g/kg的微生态制剂益倍康,进行60d的饲养试验,研究益倍康对刺参生长、消化和免疫功能的影响。结果表明,益倍康具有一定的促长作用,20g/kg组的特定生长率显著高于对照组(P<0.05)。益倍康对提高刺参消化酶活性、免疫功能具有积极作用,其中20g/kg组的淀粉酶、蛋白酶活性显著高于对照组(P<0.05);5g/kg组的淀粉酶、蛋白酶、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)等活性均显著高于对照组(P<0.05);统计分析表明,5g/kg为益倍康最适添加量。     

海洋低温碱性蛋白酶的皮肤变态反应研究

利用酶工程技术制得的海洋低温碱性蛋白酶,主要用于加酶的洗涤剂,在室温下有较高的酶活力。为确保海洋低温碱性蛋白酶使用的安全性,并为其应用提供实验依据,本文以豚鼠为受试动物,进行皮肤致敏反应试验。结果表明,经致接触和激发接触,2,4－二硝基氯苯组（DNCB）皮肤最大平均反应值为3.3,致敏率为100％。海洋低温碱性蛋白酶组皮肤最大平均反应值为0.05,致敏率为5％。提示海洋低温碱性蛋白酶为弱致敏物。     

海洋低温碱性蛋白酶的刺激性研究

探究海洋低温碱性蛋白酶的刺激性,并为其应用提供实验依据。作者应用新西兰大耳白兔,以40％、20％和5‰浓度的海洋低温碱性蛋白酶进行皮肤急性刺激试验,5‰海洋低温碱性蛋白酶的皮肤多次刺激性试验,1‰的海洋低温碱性蛋白酶的兔角膜刺激性试验,评价其安全性。结果表明,5‰和20％海洋碱性蛋白酶单次应用实验皮肤未出现红斑和水肿,对皮肤无刺激性。40％海洋低温碱性蛋白酶液对皮肤有中度刺激性。皮肤病理学显示5‰的海洋低温碱性蛋白酶液未见皮肤的慢性刺激反应,皮肤结构完整、层次清晰。1‰的海洋低温碱性蛋白酶液对兔眼亦无刺激性。     

高植物蛋白饲料中添加蛋白酶对克氏原螯虾生长、免疫力及消化力的影响

为探讨低鱼粉高植物蛋白饲料中蛋白酶的适宜添加范围,在克氏原螯虾基础饲料中分别添加0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 g/kg蛋白酶,制作成6组饲料。选择初始体质量为(8.18±0.11) g的克氏原螯虾,随机分为6组,每组3个重复,每个重复15尾虾,在室内养殖桶中饲养8周。结果显示,随饲料蛋白酶添加量的增加：(1)各组间存活率、肝体比、腹部含肉率均无显著差异;增重率和特定生长率均先升高后降低,且在蛋白酶添加量为0.2 g/kg时达到最大值。当蛋白酶添加量为0.4 g/kg时饲料系数最低;蛋白质效率和蛋白质沉积率分别在添加量为0.4和0.2 g/kg时达到最高值。经折线回归分析,增重率、饲料系数、蛋白质效率分别在蛋白酶添加量为0.16、0.24、0.23 g/kg时有最佳值。(2)腹部肌肉和全虾粗蛋白质含量先升高后降低最终趋于平稳,均在0.2 g/kg组有最大值。(3)肠道及肝胰腺蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性均先增加后缓慢降低,均在0.2 g/kg组出现最大值,且显著高于对照组。(4)血清总蛋白含量在0.4 g/kg组出现最大值;谷草转氨酶及谷丙转氨酶活性先降低后增加,均在0.4 ...     

银杏叶发酵提取物对中华绒螯蟹蟹苗存活和生长速度的影响

在21～28℃下,将中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)蟹苗(大眼幼体)饲养在144 m²、水深1.2 m的垫有少量泥土的水泥池中,微流水,定时充氧,每天换水量约1/5,每池6 000只,投喂分别添加0.0 g/kg(对照组)、10.0g/kg(Ⅰ组)、50.0 g/kg(Ⅱ组)、100.0 g/kg(Ⅲ组)、150.0 g/kg(Ⅳ组)和200.0 g/kg(Ⅴ组)银杏叶发酵提取物的饲料60 d,研究了银杏叶发酵提取物对中华绒螯蟹蟹苗存活和生长速度的影响。结果表明,添加提取物试验组中华绒螯蟹蟹苗的成活率较对照组高0.6%～5.37%;各试验组中华绒螯蟹蟹苗群体生长速度和个体生长速度均高于对照组;100.0～200.0 g/kg银杏叶发酵提取物的添加量能显著提高中华绒螯蟹蟹苗的成活率和群体生长速度。     

胸腺肽对AA肉鸡血液常规指标的影响

目的研究胸腺肽对AA肉鸡血液常规指标的影响。方法将125只14日龄健康AA肉鸡随机分为五个组,每组25只,其中4个试验组(a、b、c、d组)分别按50μg/kg、150μg/kg、300μg/kg、500μg/kg剂量,肌肉注射胸腺肽,阴性对照组(e组)同样的方式和剂量注射生理盐水,1次/d,连续注射5 d。分别于用药前(14日龄)、用药5 d(19日龄)及停药5 d(24日龄)对各组肉鸡进行血液常规指标的测定。结果连续5 d肌肉注射,各实验组的肉鸡淋巴细胞的百分比显著升高,中性粒细胞百分比显著降低;d组(500μg/kg)肉鸡的白细胞总数、嗜碱性粒细胞百分比较对照组显著增高,淋巴细胞百分比差异不显著。停药后5 d,各组肉鸡的血液生理指标除红细胞数量减少外,其他均趋于用药前水平。结论注射500μg/kg以下各剂量时,胸腺肽可能增强AA肉鸡的免疫力,对其他各项血常规指标没有明显的不良影响,可在临床上推广使用。     

饲料中添加氯化钠对草鱼生长性能和肌肉品质的影响

为研究饲料中添加氯化钠对草鱼生长性能和肌肉品质的影响,在基础饲料中分别添加0（对照组）、10、20、30和40 g/kg氯化钠,配制成5组饲料,饲养平均体质量为（12.26±0.03） g的草鱼60 d。结果显示,添加10和20 g/kg氯化钠对草鱼增重率和饲料系数没有显著影响,但30和40 g/kg氯化钠添加组的增重率显著低于对照组,饲料系数显著升高。各组肌肉水分、粗蛋白与粗脂肪含量没有显著差异,但肌肉灰分含量随氯化钠添加量的增加而升高;与对照组相比,各氯化钠添加组的肌肉蒸失水率、离心失水率和冷冻失水率（除10 g/kg氯化钠添加组外）显著增加,10和20 g/kg氯化钠添加组的肌肉总游离氨基酸含量显著升高,20、30和40 g/kg氯化钠添加组的肌肉游离谷氨酸、天冬氨酸含量显著降低;各氯化钠添加组的肌肉硬度及30、40 g/kg氯化钠添加组的肌肉咀嚼性均显著低于对照组,而肌肉弹性和回复性无显著差异;在肠道组织学方面,30和40 g/kg氯化钠添加组的绒毛高度和绒毛宽度较对照组显著降低,各氯化钠添加组的肌层厚度显著增加。研究表明,在饲料中添加10~40 g/kg氯化钠,对草鱼幼鱼的生长性能和肌肉品质没有改善作用。     

免疫多糖对湘云鲫生长和消化酶活性的影响

选用体重为16.85±0.68g的湘云鲫180尾,随机分为三组,每组两个重复,每个重复30尾鱼.采用单因子实验设计,在基础日粮中添加0mg/kg(对照组)、500mg/kg、1000mg/kg免疫多糖,经45d的生长试验研究免疫多糖对湘云鲫生长和消化酶活性的影响.结果表明:500mg/kg免疫多糖组对湘云鲫的生长,肠道和肝胰脏的各消化酶活性影响均不显著(P>0.05),而1000mg/kg免疫多糖组能显著促进湘云鲫生长和提高蛋白酶活性(P<0.05),但对淀粉酶和脂肪酶活性影响不显著(P>0.05).     

Toxicity and absorption of dietary leucomalachite green in Nile tilapia Oreochromis niloticus

Farmed fish are exposed to risks from feed-borne chemical contamination, such as leucomalachite green (LMG) in fish meal. Consequently, the use of malachite green is prohibited in aquacultural practice. An improved understanding of the toxicity of dietary LMG provided to farmed fish is needed in order to manage risk. Oreochromis niloticus specimens were fed experimental diets containing 0, 100, 500, and 2500 μg/kg LMG for 28 days. On sampling days 7, 14, and 28, fish in the exposed groups had detectable levels of LMG. Accumulation levels were approximately 12.2 % (in the liver) and 6.2 % (in the muscle) of the LMG concentration in the feed (104, 510, and 2200 μg/kg). Hematocrit and mean corpuscular hemoglobin concentrations in the 500 and 2500 μg/kg groups were significantly elevated at 7 and 14 days. Hemoglobin in the group that received the highest dose was significantly higher than that in the control group. Significant increases in the activities of alanine aminotransferase and alkaline phosphatase were also detected in the group receiving the highest dose. Total cholesterol concentrations in all of the exposed groups were significantly higher than those in the control group. These observations of toxicity were dose dependent. Histological changes in gills and livers were observed in LMG-exposed fish.     

微囊藻毒素急性暴露对斑马鱼卵巢的损伤效应

为了探究蓝藻(Cyanobacteria)大量爆发产生的微囊藻毒素(microcystins,MCs)对鱼类的生殖毒性,以斑马鱼(Danio rerio)为实验对象,采取腹腔注射毒性最强的microcystin-LR(MC-LR)方式,研究MC-LR对斑马鱼卵巢的损伤效应及其作用机制。对性成熟雌性斑马鱼腹腔注射50μg/kg和200μg/kg MC-LR,在注射3、9、24、48 h后取卵巢分析其生理活性指标的变化。结果显示,染毒24 h后,200μg/kg剂量组斑马鱼性腺指数(gonad somatic index,GSI)14.14与对照组性腺指数16.98相比显著降低(P<0.05),其他组别无显著变化;卵巢发生卵母细胞空泡化、卵母细胞膜与滤泡细胞层连接组织缺失等病理现象;MC-LR显著抑制了斑马鱼卵巢蛋白磷酸酶(protein phosphatase 2A,PP2A)活性,并激活促成熟因子(maturation promoting factor,MPF)活性;MC-LR处理后,斑马鱼卵巢内丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)家族中的p 38MAPK、ERK1/2的转录水平显著上调,JNK未发生显著变化。研究表明,MC-LR抑制斑马鱼卵巢PP2A活性,并激活MPF活性与MAPK信号通路中ERK1/2与p 38MAPK的转录水平,进而干扰其卵母细胞的发育进程并产生生殖毒性。     

麒麟菜膳食纤维对SD大鼠30天喂养实验和致畸作用

为评价麒麟菜（Eucheuma）膳食纤维的食用安全性，按照中国食品安全性毒理学评价方法对SD大鼠进行了30d喂养和传统致畸实验。30d喂养实验，分对照组和低、中、高剂量组，分别将麒麟菜膳食纤维用0％、1％、5％、10％的剂量添加于饲料中通过30d混饲方式给予受试物，实验期间观察其一般状况、体重、摄食量、食物利用率。第30天处死各组大鼠，对血液学指标、血清生化指标、器官以及组织病理学检查。传统致畸实验，分阴性对照组和10％饲料添加量的剂量组，另设阳性对照组，以浓缩鱼肝油25mL／kgBW灌胃，实验期间按时检查孕鼠体重，实验末期取胎检查其外观、记录死、活胎数及骨骼和内脏的异常情况。结果表明，30d喂养实验中，动物生长正常，无一死亡或中毒症状，各项观察指标不随剂量的增大和受试时问的延长出现剂量反应关系；致畸实验中，孕鼠生长良好，胚胎发育正常，胎鼠异常率均在自然发生率范围内。因此，可认为麒麟菜膳食纤维无毒、无致畸作用，食用安全可靠。     

吡啶甲酸铬对热应激异育银鲫血清生化指标的影响

选取240尾初始体重为(31.80±1.07)g的异育银鲫(Carassius auratus gibelio),分为4组,分别饲喂在基础饲料中添加0μ/kg(对照组和热应激1组)、300μg/kg(热应激2组)、600 μg/kg(热应激3组)吡啶甲酸铬(以Cr3+计)的试验饲料,在室内可控温循环水养殖系统中常温(2...     

敌百虫对泥鳅、鲤鱼的急性毒性试验

以渔用双效速溶敌百虫为试验药物,对泥鳅、鲤鱼进行急性毒性试验。在不同的浓度组药物作用下,泥鳅1mg/L、2mg/L、4mg/L、8mg/L、16mg/L试验,半致死浓度3.4mg/L,安全浓度0.34mg/L;鲤鱼0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、5mg/L试验,半致死浓度1.5mg/L,安全浓度0.15mg/L。每间隔2h观察、记录试验鱼的自然状况、死亡尾数、体色、呼吸状况及活动状况;同时,测定水体温度、气温、pH值及水体溶氧量。试验验证了敌百虫对泥鳅、鲤鱼的毒副作用较强,敌百虫对泥鳅的最低致死浓度为2mg/L,对鲤鱼的最低致死浓度为1mg/L,说明泥鳅比鲤鱼的抗药性强。中毒症状主要表现为焦躁不安、上下窜动、呼吸减弱、鱼体弯曲、翻肚且倒挂于水中的神经中毒现象;检查可见,鳃丝淤血、鳍部充血、眼球突出、嘴大张。