猫泛白细胞减少症病毒研究进展

猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV),又称为猫瘟病毒、猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)或猫传染性肠炎病毒,具有很强的传播性,变异快,分布广,会导致猫科和部分其他科的动物突然发病并且精神沉郁、体温上升、出血性肠炎、腹泻、呕吐、白细胞显著减少等。各年龄的猫都能感染猫细小病毒,其中幼龄猫最为易感。猫瘟可以发生在各个季节,其中秋冬季节更常见。该病会造成猫养殖行业的严重经济损失。近年来,由于猫细小病毒导致严重疫情的相关报道越来越多,猫细小病毒也越发引起大家的关注。本文从病原学特征、流行病学、临床特征、病理特征、临床检测方法、治疗和预防等方面对FPV进行了综述,以期为猫泛白细胞减少症病毒疫苗的研制提供理论基础。     

一株猫泛白细胞减少症病毒的分离鉴定

为分析现阶段猫泛白细胞减少症病毒(FPV)基因组变异情况,采集疑似FPV阳性的猫粪便样品,接种F81细胞进行病毒分离,通过PCR技术、间接免疫荧光试验对分离株进行鉴定.并对分离株全基因组进行分段扩增,克隆决定病毒宿主范围和抗原性的VP2基因,与GenBank中相关的参考毒株序列VP2基因进行同源性比较.结果表明:成功获...     

猫泛白细胞减少症的诊治

猫泛白细胞减少症是由于猫感染细小病毒后引起的一种急性传染病。猫在感染后主要表现为体温升高,腹泻、呕吐等临床症状,病猫具有较高的死亡率,所以在养猫过程中要注意防控此病。本文针对猫泛白细胞减少症进行详细的归纳和总结,旨在为本病诊断和防治提供一些参考。     

猫泛白细胞减少症的诊治与预防

猫泛白细胞减少症又称为猫瘟热、猫传染性肠炎、猫细小病毒感染,是由猫泛白细胞减少症病毒（FPV）引起的猫及猫科动物的一种急性高度接触性传染病。临床表现为发热、呕吐、腹泻、脱水及白细胞严重减少和肠炎。猫泛白细胞减少症是危害我国家养、圈养、野生和经济猫科动物的主要传染源,每年造成巨大经济损失。     

广州地区猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定及全基因组遗传分析

【目的】分析广州地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV)的自然重组、跨宿主传播以及流行变异情况。【方法】采集疑似感染猫泛白细胞减少症病毒的猫粪便样品进行细胞分离,并对阳性病料提取基因组DNA,PCR扩增获得病毒的全基因组序列,并与Gen Bank中相关的参考毒株序列进行遗传进化分析,同时对VP2基因与NS1基因的主要氨基酸位点进行差异分析。【结果】成功获得2株猫泛白细胞减少症病毒及其全基因组序列。遗传进化分析显示,广州地区分离的猫泛白细胞减少症病毒FPLV-GZ01、FPLV-GZ02与我国其他分离毒株FPLV-XJ01、FPLV-HRB属同一分支,提示FPLV-GZ01、FPLV-GZ02由FPLV-XJ1进化而来;NS1基因系统进化树显示,FPLV存在与CPV-447重组的可能。主要氨基酸位点分析显示,FPLV在VP2基因中的主要氨基酸位点上的遗传变异比CPV保守;在NS1基因上发现FPLV-GZ01、FPLV-GZ02分别存在不同程度的氨基酸位点突变。【结论】广州地区分离的猫泛白细胞减少症病毒仍在不断地重组进化。     

猫泛白细胞减少症的诊断与防治

介绍了猫泛白细胞减少症的发病特点、临床症状、诊断方法及防治措施。     

猫泛白细胞减少症的诊断与预防

猫泛白细胞减少症是一种猫及猫科动物的高度接触性致死性传染病。通过对猫泛白细胞减少症的流行特点、临床症状、诊断及预防等进行概述,以期为该病在临床的诊断和预防提供参考。     

猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的制备及其制备胶体金检测试纸条的应用

制备猫泛白细胞减少症病毒(FPV)单克隆抗体,研制胶体金检测试纸条.用FPV临床分离株免疫Balb/c小鼠,取血凝抑制(HI)效价最高的小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,采用HI方法筛选获得2株可稳定分泌FPV单克隆抗体的杂交瘤细胞,并对其用于胶体金检测试纸条进行评价.2株杂交瘤细胞3C3和4A1株,分泌的单克隆抗体重链亚型分别为IgG2b、IgG2a,轻链亚型均为kappa;腹水纯化后单克隆抗体3C3、4A1的HI效价分别为1:5120、1:10240.用胶体金标记单克隆抗体4A1,单克隆抗体3C3作为检测线,羊抗鼠二抗作为对照线制备的胶体金检测试纸条,检测FPV病毒液的灵敏度为103.7 TCID50/mL;检测猫源其他病毒如FHV-1、FCV均为阴性;批内和批间重复性检测不同含量的FPV结果一致;检测513份临床样品,与PCR的阳性符合率为76％(71/93),阴性符合率为100％(420/420),总符合率为96％(491/513).该研究制备的FPV单克隆抗体可用于FPV胶体金检测试纸条的生产,用于FPV的现场快速检测.     

水貂细小病毒性肠炎的预防措施

水貂细小病毒性肠炎是由细小病毒引起，病貂表现出极度消化紊乱，以腹泻、肠黏膜出血、坏死、脱落，排出灰白色、粉红色混有纤维蛋白、黏液样无结构的管形稀便，血液中自细胞高度减少为特征的急性、接触性传染病。与猫泛白细胞减少症有亲缘关系，特别是幼龄水貂有较高的发病率和死亡率，多数病貂转归死亡，从而造成巨大损失。本病为世界公认的危害水貂饲养业较严重的病毒性传染病之一。     

猫泛白细胞减少症的临床症状、诊断和防治

猫泛白细胞减少症是由猫细小病毒病引起以高热、呕吐、脱水、白细胞严重减少、出血性肠炎为主要特征的传染病。该病传播速度快、感染性极强、对幼猫致死率高,是当前最主要的猫传染病之一。对猫泛白细胞减少症的病原特性、流行病学特点、致病机理、临床诊断、防治措施等方面进行介绍,为猫泛白细胞减少症防治提供参考。     

水貂细小病毒性肠炎的预防措施

水貂细小病毒性肠炎是由细小病毒引起的，病貂表现出极度消化紊乱，以腹泻，肠黏膜出血、坏死、脱落，排出灰白色、粉红色混有纤维蛋白、黏液样无结构的管形稀便，血液中白细胞高度减少为特征的急性、接触性传染病。与猫泛白细胞减少症有亲缘关系，特别是幼龄水貂有较高的发病率和死亡率，多数病貂转归死亡，从而造成巨大损失。该病为世界公认的危害水貂饲养业较严重的病毒性传染病之一。[第一段]     

水貂肠炎细小病毒PCR检测方法的建立和应用

根据GenBank上已发表的水貂肠炎细小病毒基因序列,在其编码VP2结构蛋白基因的高度保守区内,设计合成1对特异性引物,建立水貂肠炎细小病毒PCR诊断方法。经过敏感性及特异性检测,该引物能与MEV标准株和地方分离株核酸发生特异性结合,扩增出一段长度为570bp的DNA片段,而与CDV、ADV等病毒的PCR反应均呈阴性。设计的该对引物可用于MEV的临床检测。     

水貂肠炎病毒NS1基因进化分析

采用PCR方法,从辽宁省、吉林省、山东省、河北省采集的32份样品中检测出21份水貂肠炎病毒感染阳性样品。每个地区选取有代表性的样品共计11份进行NS1基因的克隆和测序,并与已知参考毒株进行比对及系统发育分析。结果显示,本次检测的11个阳性样品的核苷酸序列和氨基酸序列同源性为98.8%~100.0%和98.5%~100%;本次测序序列和国内毒株MEVB基因的核苷酸和氨基酸序列同源性为98.7%~99.9%和98.7%~99.9%;与国外毒株MEVAbashiri基因的核苷酸和氨基酸序列同源性为99.0%~99.5%和98.7%~99.1%。11份阳性样品中水貂肠炎病毒的NS1基因有24个氨基酸位点存在变异。11份阳性样品可划分为3个分支。     

虎源猫泛白细胞减少症病毒VP1、VP2和NS1基因的克隆与序列分析

根据Genbank上发表的猫泛白细胞减少症基因序列数据,设计了3对引物,并采用PCR方法对从东北虎粪便中分离出的FPV-HLJ的结构蛋白VP1、VP2和非结构蛋白NS1基因进行了扩增,将各片段克隆至pMD18-T载体,经PCR鉴定后进行了序列测定和分析.结果显示:FPV-HLJ与GenBank上公布的FPV、CPV和MEV毒株相比,核苷酸序列同源率VP1为98.8%～99.8%,VP2 为98.1%～99.4%,NS1为98.6%～99.7%.VP1氨基酸同源率为97.6%～99.2%,VP2、NS1氨基酸同源率与其核苷酸同源率相同.并且VP1、VP2和NS1上分别有 4、3和9处氨基酸发生变异.     

广州市部分区域猫泛白细胞减少症流行现状调查

[目的]了解猫泛白细胞减少症病毒在广州家猫和流浪猫中的流行情况,分析FPV威胁广州家猫和流浪猫的潜在风险。[方法]采用猫泛白细胞减少症免疫胶体金快速检测试纸条和PCR检测方法对广州5家动物医院采集的3 004份猫样品进行检测与分析。[结果]猫泛白细胞减少症免疫胶体金快速检测试纸条检出10份疑似猫泛白细胞减少症阳性样品,采用猫泛白细胞减少症PCR检测方法检出13份猫泛白细胞减少症阳性样品。13份阳性样品来源于96份具有临床症状且未免疫样品,49份家猫样品中有6份呈阳性,47份流浪猫样品中有7份呈阳性,阳性率分别为12.2%(6/49)和14.9%(7/47),发病季节以9~10月多发,发病年龄集中在0~6月龄。[结论]与外界接触和未免疫疫苗可能是导致猫感染FPV的重要原因。因此,家猫加强疫苗接种,减少与未知免疫背景的猫只接触,减少家猫感染FPV的潜在风险。     

猫泛白细胞减少症病毒的鉴定

关于猫瘟热病(现已正式定名)的研究初报,已在本刊1984年第3期上发表。而后,又进行了病原分离和鉴定,现简报如下: 我们从发病的猫肾细胞中分离到一株病毒(FNF-8毒株),并作了系统鉴定,其特性是:(1)本毒株在猫肾原代细胞或猫肾继代细胞上生长繁殖,并产生一定的CPE。在接毒后48小时细胞开始出现圆缩、肿胀、聚集,最后有脱落;(2)取出经培养96小时的感染细胞用     

水貂肠炎细小病毒结构蛋白VP2基因的克隆和序列分析

对水貂肠炎细小病毒SMPV-11株结构蛋白VP2基因进行扩增,获得了基因序列全长为1755bp的SMPV-11株VP2基因,其编码584个氨基酸;应用DNAStar分析软件对该序列进行同源性分析发现,SMPV-11株VP2基因与其他6株水貂肠炎细小病毒株核苷酸和氨基酸均有较高的同源性,分别为99.2%～99.4%和98.6%～99.1%,与猫泛白细胞减少症病毒标准株CU-4株同源性为99.3%和99.1%,系统发生树分析表明它们属于同一个分支。本研究为水貂肠炎细小病毒分子流行病学调查和新型疫苗的研究奠定基础。     

水貂肠炎病毒B株全基因克隆与序列分析

将水貂肠炎病毒基因组分4个重叠片段进行PCR扩增,并将产物克隆到pMD18-T载体中,测定基因组近全长序列。其中编码水貂肠炎病毒非结构蛋白基因(NS1基因)全长为2 007 bp,编码668个氨基酸;编码结构蛋白基因(VP2基因)全长为1 755 bp,编码584个氨基酸。序列分析结果表明:水貂肠炎病毒B株与犬细小病毒、猫泛白细胞减少症病毒NS1序列之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为98.8%～99.2%和98.8%～99.2%,与其他细小病毒毒株VP2序列之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为98.5%～99.8%和97.8%～99.5%,与MEVantigenic type 2株在亲缘上有着最密切关系。     

水貂肠炎病毒疫苗免疫实验运物效果观察与效检指标评价的研究

测定了水貂肠炎病毒无血清细胞培养灭活矿油疫苗和铝胶疫苗免疫接种水貂、豚鼠和家兔的轿清ＨＩ和ＳＮ抗体消长规律，证明豚鼠、家兔或水貂接种疫苗后１１－４０ｄ的血清ＨＩ抗体水平是检定ＭＥＶ矿油疫苗或名胶疫苗对水貂的体液免疫力和免疫保护率的经济、简便、可靠的指标，从而建立了ＭＥＶ疫苗免疫实验动物效力的检定指标－豚鼠、家兔或水貂注苗后１１－４０ｄ的血清ＨＩ抗体应签水平，以及可取代该动物用作检定ＭＥＶ疫苗免疫水     

虎源猫泛白细胞减少症病毒VP2基因主要抗原表位区的原核表达和蛋白纯化

利用PCR技术从FPV-HLJ株病毒细胞培养物中扩增VP2基因主要抗原表位区片段VP2’。扩增片段克隆至pMD18-T载体,经核苷酸序列测定确认后,亚克隆于pGEX-6p-1原核表达载体,构建pGEX-6p-VP2’重组原核表达质粒。将该质粒转化至表达菌BL21(DE3)中用IPTG进行诱导表达。表达蛋白采用切胶法纯化,并用SDS-PAGE和Westernblot检测纯化蛋白纯度和抗原特异性。结果表明,VP2基因全长1200bp,编码400个氨基酸。重组菌可表达相对分子量约为66kD的融合蛋白,包括目的蛋白40kD和GST标签26kD。该蛋白以包涵体形式存在,且GST融合蛋白具有良好抗原特异性。