红菜苔愈伤组织诱导条件的优化及防褐化研究

以红菜苔的根、茎、叶、花、种子为试材,用MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+2,4-D 0.5 mg·L^-1+NAA 0.8 mg·L^-1改良培养基诱导红菜苔不同外植体的愈伤组织,根据其诱导情况筛选出最佳外植体;通过单因素和响应面试验法,研究了6-BA、2,4-D和NAA 3种植物生长调节剂对红菜苔最佳外植体愈伤组织诱导的影响,进一步优化红菜苔愈伤组织的诱导条件;使用不同抗褐化剂研究其对红菜苔茎愈伤组织诱导情况的影响,以期筛选出能有效防止或减轻愈伤组织褐化,提高愈伤组织诱导率和生长率的最佳抗褐化剂。结果表明:红菜苔茎是诱导愈伤组织的最佳外植体,其诱导率为93.33%;茎愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 0.6 mg·L^-1+2,4-D 0.8 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1,诱导率达到94.2%,且大多数愈伤组织状态及长势良好;0.2 g·L^-1的活性炭是红菜苔茎愈伤组织诱导的最佳抗褐化剂,褐化率为23.4%且愈伤组织生长状况良好,可以为开展红菜苔的离体再生体系提供参考依据。     

木榄愈伤组织诱导影响因子研究

以木榄幼叶为外植体,进行其愈伤组织诱导的影响因子研究,通过灭菌条件、培养基成分、添加剂种类、外源植物激素浓度试验,比较外植体褐化率与愈伤组织诱导率。结果表明:75%乙醇灭菌30s后在2%(体积分数v/v)NaClO溶液灭菌20min是木榄幼叶表面消毒适宜条件;氨基酸培养基是基础培养基;45℃热激与添加1.0mmol·L~(-1)抗坏血酸均可降低褐化率;AA培养基+0.50mg·L~(-1) 2,4-D+0.50mg·L~(-1) TDZ+1.00mmol·L~(~(-1))维生素C或AA培养基+0.50mg·L~(-1) 2,4-D+0.50mg·L~(-1) CPPU+1.00mmol·L~(-1)维生素C均可得大于50%的愈伤诱导率。因此,克服外植体褐化与应用CPPU或TDZ作为细胞分裂素是木榄愈伤组织诱导成功的关键。     

不同处理对刺梨花药愈伤组织诱导及褐变的影响

以刺梨花药为试材,研究了不同预处理、附加物对刺梨花药愈伤组织形成及褐变的影响.结果表明:低温处理3 d,刺梨花药愈伤组织诱导率最高,褐化率最低;以100 mg/L维生素C浸泡处理2 h后,花药愈伤组织诱导率最高,为50.63%,而褐化率最低,为10.63%;在培养基中加入不同浓度的维生素C或硝酸银可以促进刺梨花药愈伤组织的形成,降低花药的褐化,其中在添加有100 mg/L的维生素C或50 mg/L的硝酸银的培养基中,花药褐化程度最低.     

香水白掌离体培养褐化反应的初步研究

采用L9(34)正交设计,研究不同因素对降低白掌叶片愈伤组织褐化的作用,三因素为大量元素、PVP和继代次数;另外还比较了不同继代周期、抗褐化剂、琼脂浓度对叶柄褐化的影响。结果表明:叶片在1/2MS培养基中,添加PVP 1 000 mg/L,5 d继代1次,抗褐化效果较好;叶柄在PVP为1 000 mg/L、琼脂浓度为7 g/L的培养基中,5 d继代1次的条件下,抗褐化效果明显。     

红掌组织培养过程中外植体褐变的研究

在红掌组织培养过程中,外植体易发生褐变,严重阻碍了红掌组织培养的正常进行。现以红掌‘红粉佳人’(Anthuriumandraeanum cv.Sonate)品种为试材,取健康植株幼嫩叶片为外植体,对其愈伤组织培养过程中褐变现象进行研究。研究不同抗氧化剂、吸附剂(柠檬酸、抗坏血酸VC、叶酸、聚乙烯吡咯烷酮PVP、活性碳AC)以及不同培养基硬度的防褐化效果。结果表明:使用硬度为5 g/L琼脂的MS培养基,并添加6-BA1.0 mg/L+2,4-D0.2 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.2%可有效控制褐变并获得较高的愈伤诱导率。     

仙客来愈伤诱导抗褐化研究

以仙客来（Cyclamen persicum Mill）法国莫莱尓F2代植株为材料,选取同一植株的叶片,叶柄和块茎做为外植体进行愈伤诱导,选取最佳愈伤诱导培养基,针对愈伤诱导过程中出现的褐化问题,从不同方面入手,寻求最佳的褐化控制培养基和培养条件,解决组织培养中褐化问题。结果表明：最佳愈伤诱导培养基是MS＋6-BA（0.5 mg/L）＋2,4-D（2 mg/L）＋KT（0.2mg/L）＋琼脂（9 g/L）＋蔗糖（30 g/L）;最佳褐化控制培养基是在愈伤诱导培养基中添加Vc（2mg/L）或PVP（0.5 mg/L）;暗培养能一定程度上抑制褐化的发生;活性炭虽能抑制褐化但同时也抑制仙客来愈伤组织的生长。     

抗褐变剂对阿月浑子外植体褐变以及几种酶活性的影响

为了探明阿月浑子组织培养过程中的褐变机制,以阿月浑子组培丛生芽为外植体,在其继代培养基(1/2DKW)中分别添加抗褐变剂PVP和Cys,分析组培苗叶片、茎段和愈伤组织的总酚含量以及PPO、POD、PAL、C4H酶活性的变化,研究其与褐变的关系。结果表明,在一个继代培养周期内,愈伤组织中PPO活性呈增加趋势,而叶片和茎中PPO活性呈"V"字形变化。POD活性随继代时间增长而逐渐升高,继代28 d后开始下降,愈伤组织中POD活性变化范围较叶片和茎段中要高一个数量级。PAL活性总体呈下降趋势,而C4H酶活性在继代前期上升,继代14 d或21 d后下降。结合相关性分析可知,阿月浑子各组织的总酚含量与褐变率呈显著正相关,并且POD酶在促褐变反应中发挥主要作用。在实验中发现,PVP与Cys虽然对POD、PPO、CH4酶活性也有一定影响,但其主要是通过抑制PAL的酶活性,显著减少了组培苗和愈伤组织的酚类物质含量,从而降低褐变率。     

椒样薄荷叶片愈伤组织诱导与抗褐变

以椒样薄荷为试材,采用单因素试验法开展了基本培养基的筛选试验,并在基本培养基B5中添加不同植物生长调节剂组合和抗褐变剂,分析其对椒样薄荷愈伤组织形成的影响。结果表明:叶片愈伤组织诱导的基本培养基以B5为宜;植物生长调节剂以KT1.0mg·L~(-1)+2,4-D 0.5mg·L~(-1)为宜;以B5+KT 1.0mg·L~(-1)+2,4-D 0.5mg·L~(-1)为培养基时抗褐变剂以活性炭0.2g·L~(-1)为宜,椒样薄荷愈伤组织诱导率达到100%,褐变率为0.0%,愈伤组织生物量达到42.1g·L~(-1),建立了较理想的愈伤组织体系。     

杜仲叶片愈伤组织诱导研究

以杜仲幼嫩叶片为试材,在MS为基本培养基上添加不同浓度的生长素和细胞分裂素,对愈伤组织诱导的优化条件进行了研究。结果表明:2,4-D和6-BA对诱导杜仲叶片愈伤组织诱导均有影响,最优培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.3 mg/L,诱导率达87.5%,且愈伤组织生长较好。培养基中添加5 g/L活性炭能有效地抑制外植体褐化。     

不同激素配比对牡丹愈伤组织诱导及生化指标的影响

以牡丹组培苗叶片、叶柄为外植体,设计5个不同激素水平的诱导培养基,在愈伤组织形成过程中对所需激素水平、生化指标变化规律进行研究。结果表明:叶片、叶柄愈伤组织诱导的最适培养基均为MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L。在6-BA浓度一定下,叶柄愈伤组织诱导率随NAA浓度的升高而增高,褐化率随NAA浓度升高而下降;叶片愈伤组织诱导率及褐化率与NAA浓度无明显关联。外植体在不同培养基上愈伤组织诱导过程中可溶性糖、可溶性蛋白、SODP、OD 4个生化指标随时间变化规律各不相同。     

苦豆子愈伤组织的诱导及去褐化处理

以苦豆子为试材,采用组织培养的方法,研究了外植体种类、激素水平、水解酪蛋白浓度等不同因子对愈伤组织生长状态的影响,同时对愈伤组织进行了去褐化处理。结果表明:苦豆子子叶为诱导愈伤组织的最佳外植体;最佳诱导培养基为MS+2,4-D 0.5mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L;最佳继代培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 4.0mg/L+NAA1.0mg/L+CH 1 000mg/L;添加3%蔗糖的条件下快速继代是较好的去褐化措施。     

八棱海棠高效再生体系的建立及潮霉素的抗性试验

以八棱海棠子叶为外植体,比较了不同浓度植物激素、不同激素组合、不同暗培养时间及不同浓度潮霉素对八棱海棠再生体系的影响,建立了八棱海棠高效再生体系,筛选并分析了潮霉素在八棱海棠遗传转化中的适宜浓度。结果表明:诱导子叶愈伤的最佳培养基为Sc+2.0 mg·L~(-1) TDZ+0.2 mg·L~(-1) NAA+0.5 mg·L~(-1) GA_3,芽再生的最佳培养基为Sc+2.0 mg·L~(-1) TDZ+0.2 mg·L~(-1) NAA,暗培养最佳时间为10 d,生根最佳培养基为1/2MS+0.25 mg·L~(-1) IBA。八棱海棠在整个再生过程中均对潮霉素敏感,在潮霉素浓度为2.0 mg·L~(-1)的愈伤诱导培养基上,外植体的愈伤诱导率仅为23.33%,分化率仅为9.88%;当潮霉素浓度为4.0 mg·L~(-1)时,愈伤诱导率下降为13.00%,而且愈伤不分化,随着培养时间延长,愈伤组织变得更加致密,之后变褐死亡。在诱导生根培养基上添加3.0 mg·L~(-1)潮霉素,生根率仅为3.52%,大部分外植体再生芽底部只会诱导出愈伤组织,没有根原基形成。八棱海棠子叶愈伤诱导及分化的潮霉素筛选临界浓度为2.0～4.0 mg·L~(-1),生根时潮霉素筛选浓度为2.0～3.0 mg·L~(-1)。     

绿凤藤茶愈伤组织诱导的初步研究

以藤茶初春萌发的幼嫩枝条为外植体,以MS培养基为基本培养基,研究不同植物生长调节物质、不同碳源和不同碳源浓度对藤茶愈伤组织的诱导效应.结果表明:茎和藤须为外植体,其愈伤组织诱导率较高,且诱导愈伤组织的最适培养基为:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+PVP 2 g/L.     

影响辣椒愈伤组织诱导的关键因素分析

以24个辣(甜)椒品种为试材,研究了基因型、外植体、激素配比对愈伤组织诱导率的影响。结果表明:不同基因型愈伤组织诱导率差异显著,最高可达100%,最低为24%;真叶和茎段均可诱导出愈伤组织,茎段诱导效果好于真叶;以添加1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA的MS培养基为愈伤组织诱导的最佳培养基。     

小型西瓜花药愈伤组织诱导及防褐化研究

以8份不同基因型的小型西瓜为试材,研究了基因型、植物生长调节剂对花药愈伤组织诱导的影响及暗培养和抗坏血酸对花药褐化的影响,以期为西瓜单倍体育种提供参考依据。结果表明:8份西瓜材料中7个能够形成愈伤组织,愈伤组织诱导率为3.9%~35.6%;不同基因型对激素的响应不同,‘P15’在D5号培养基中(MS+KT 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1))愈伤组织诱导率最高,‘M30’和‘M34’在D6号培养基中(MS+KT1.0mg·L~(-1)+NAA 1.0mg·L~(-1))出愈率最高;黑暗培养48h对降低西瓜花药褐化作用最好;在诱导培养基中添加1.0g·L~(-1)抗坏血酸可降低花药褐化率。     

红豆杉组织培养的防褐变措施研究

以红豆杉腋芽为外植体,B5为基本培养基,研究了不同激素、添加剂组合对红豆杉组织培养中褐变的影响。结果表明:添加激素2,4-D 2.0mg·L~(-1)+6-BA 0.5mg·L~(-1),愈伤组织生长情况最好,染菌率为11.11%,愈伤组织出愈率最高达88.89%,褐化程度较低,多酚氧化酶(PPO)活性为8.03U·g~(-1)·min~(-1);加入添加剂组合活性炭和柠檬酸,可以降低红豆杉的褐变程度,PPO活性为1.40U·g~(-1)·min~(-1)。     

活性炭与Vc液对兔眼蓝莓外植体及愈伤组织褐化的影响

分别以兔眼蓝莓茎尖和茎段及已形成的愈伤组织为外植体,接种于改良WPM的培养基,并在此基础上分别设置加入200mg/L浓度的Vc液以及对照试验,两组均按一定含量活性炭梯度配置培养基,对比研究活性炭与Vc液对兔眼蓝莓外植体和愈伤组织形成中褐化的影响。结果表明:当培养基中加入Vc液且活性炭含量为100～200mg/L时,能有效防止外植体褐化发生;当培养基中加入Vc液且活性炭含量为200～500mg/L时,能有效防止愈伤组织褐化发生。研究为克服兔眼蓝莓初代培养时外植体及初代形成的愈伤组织时极易出现的褐化现象提供依据。     

非洲菊再生体系的建立

以非洲菊幼嫩花托为外植体,以MS为基础培养基,研究了添加6-BA和NAA的培养基对愈伤组织诱导、丛生芽发生和丛生芽生根的影响。结果表明:花托的大小影响到愈伤组织的诱导和褐化,0.8cm的花托愈伤组织的诱导率高且褐化率低;愈伤组织诱导和芽分化的适宜培养基为MS+6-BA 10mg/L+NAA 0.2mg/L,丛生芽增值的适宜培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,生根培养基为1/2MS+IAA 0.2mg/L。     

番茄两种外植体对氯化钠胁迫耐性的研究

以番茄下胚轴和子叶为外植体,在培养基中添加不同浓度的NaCl,研究了番茄2个品种、2种外植体在愈伤组织和不定芽诱导过程中对NaCl胁迫的耐性。结果表明:随着NaCl胁迫浓度的增加抑制愈伤组织和不定芽的产生,形成愈伤组织和不定芽所需要的时间延长,番茄2个品种、2种外植体在NaCl浓度为100~125mmol/L时愈伤组织诱导率显著地低于对照,NaCl浓度在50~75mmol/L时不定芽诱导率显著地低于对照,不定芽形成比愈伤组织形成过程对NaCl的耐性差。     

鸳鸯茉莉不同外植体诱导愈伤组织研究初探

以鸳鸯茉莉花瓣、叶片、茎段为外植体,MS为基本培养基,探索外植体取材季节和部位对污染的影响;分析植物生长调节剂的种类、浓度对不同外植体诱导愈伤组织的影响和最适组合。结果表明:在34、月取材比5、6月好,12月取材效果较差;通过花瓣能成功诱导出健康的愈伤组织,但诱导率较低(27.1%),平均出愈时间为23~25 d,3种外植体中以嫩叶诱导愈伤组织的效果最好(87.1%),平均出愈时间最短,为18~20 d;茎段愈伤组织诱导率其次(68.1%),平均出愈时间为21~23 d;2,4-D6、-BA对以花瓣为外植体诱导愈伤组织的影响达显著水平,花瓣诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,2,4-D对叶片诱导愈伤组织的影响达显著水平,叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,2,4-D、6-B对茎段诱导愈伤组织的影响达到极显著水平;MS+6-BA 3.0 mg/L+KT 3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L最适合茎段诱导愈伤组织。