防治茄二十八星瓢虫Bt菌株的筛选及杀虫活性分析

以从湖北宜昌、襄阳、荆州、广东东莞、安徽安庆5个地区采集得到的52份土样为试材,分别采用温度筛选法、镜检法、PCR-RFLP法和SDS-PAGE等方法,分离了土壤中的苏云金芽孢杆菌,并鉴定了分离出的Bt菌株的基因型,通过茄二十八星瓢虫二龄幼虫的室内杀虫试验测定分离株的杀虫活性,同时分析了部分Bt菌株的伴孢晶体蛋白,以期挖掘新的Bt菌株资源,筛选出对茄二十八星瓢虫具有高毒力的Bt菌株.结果 表明:分离得到10株含cry3基因的菌株,3株含cry7基因的菌株和2株含cry8基因的菌株,得到1株对茄二十八星瓢虫二龄幼虫有高毒力的Bt菌株,当其伴孢晶体悬浮液的浓度在40 mg·mL-1时,校正死亡率最高可达40.42％;发现YC-2-20、GD-4-1均表达分子量约为67 kDa的晶体蛋白;GD-5-7表达分子量约为130 kDa和80 kDa的晶体蛋白;YC-12-6表达分子量约为130 kDa和70 kDa的晶体蛋白.试验筛选出的Bt菌株为农业生产中茄二十八星瓢虫的绿色防控提供了可应用的菌株及基因资源,同时对延缓害虫抗药性的产生也具有重要意义.     

食用菌迟眼蕈蚊生防菌苏云金芽孢杆菌的筛选及毒力测定

为了筛选对食用菌迟眼蕈蚊有杀虫作用的苏云金芽孢杆菌菌株,采用醋酸钠-抗生素法从33份土样中分离到18株苏云金芽孢杆菌,用药液浸渍饲喂3龄迟眼蕈蚊幼虫,48 h后校正死亡率高于50%的有7株。通过16S r DNA序列同源性比较发现这7株Bt菌与苏云金芽孢杆菌模式菌株ACCT 10792同源性均达到99%,可初步认为在分类学上均属于苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis。PCR扩增鉴定菌株毒蛋白基因型的结果表明,5株分离菌株包含有cry4/10、cry11、cyt1和cyt2等4种基因型,2个菌株未鉴定出基因型,可能含有未知基因,需要进一步鉴定,为研发新型的高效广谱Bt制剂提供优质的菌种资源。     

添加物提高Bt制剂杀灭小菜蛾的速效性

苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)制剂被广泛用来防治蔬菜上的菜青虫、小菜蛾、棉铃虫等鳞翅目害虫。但在实际应用中存在着杀虫速度慢、防治效果不稳定等缺点,使Bt制剂的进一步推广应用受到一定的影响。许多研究者探索着通过对Bt菌种的遗传改良、生产工艺改进、添加其他物质等途径来提高Bt制剂的杀虫效果。 本研究系在初测的基础上,筛选出3组添加物分别混入Bt8010制剂中,用室内毒力测定和田间试验比较其对小菜蛾幼虫的杀灭速度,拟筛选出能明显提高Bt制剂速效性的添加物,以期为研制出防治     

厉眼蕈蚊高活性Bt菌株的筛选

采用浸渍山药饲喂法测定了46株苏云金芽孢杆菌菌株对厉眼蕈蚊的活性。初步筛选结果表明,部分菌株对厉眼蕈蚊7日~8日龄幼虫具有一定的活性,其中BRC-LLP29和IPS82毒力相对较高,处理后48 h幼虫校正死亡率可达87.93%和70.21%。复筛得出二者的LC50（96 h）分别为1.182×108 cfu.mL-1和1.977×108 cfu.mL-1。     

共生菌杀虫毒素对小菜蛾和甜菜夜蛾的杀虫活性

利用从全国采集的土样中收集到28个品系的昆虫病原线虫,分离并筛选出28株共生菌高毒力菌株,对高毒力菌株的杀虫毒素进行初步提取,并以小菜蛾和甜菜夜蛾作为供试昆虫,对其杀虫活性进行测定。结果表明,共生菌的杀虫毒素粗提物对两种害虫的1龄幼虫均有一定的杀虫活性,其中菌株5-5B的杀虫效果最为明显,处理后120h,小菜蛾和甜菜夜蛾的平均校正死亡率分别为100%和68.52%。     

蔬菜根结线虫生防细菌的筛选及菌株HJT2-1种类的初步鉴定

以天津地区7个区县的蔬菜大棚土壤中分离出的306株细菌菌株为试材,采用亚甲基蓝染色法,研究306株细菌菌株发酵液对南方根结线虫2龄幼虫的影响。结果表明:细菌菌株HJT2-1发酵液对南方根结线虫2龄幼虫的校正死亡率较高为81.3%,其温室盆栽防效为55.6%,略低于阿维菌素防效。采用对细菌核糖体DNA的内转录间隔区进行分析的方法将菌株HJT2-1初步鉴定为假单胞菌属细菌。该试验获得了对根结线虫2龄幼虫具有较高致死率的细菌菌株HJT2-1,为开发防治根结线虫的生防制剂奠定了基础。     

不同杀菌剂对莲藕腐败病菌的室内毒力测定及田间防治效果

人工室内接种筛选出F1和F2两个莲藕腐败病菌强致病性菌株。应用菌丝体生长速率法,测定了生产中防治莲藕腐败病常用化学农药对F1和F2的室内毒力。测定结果表明,供试药剂对该病原菌菌丝生长的抑制作用存在较大的差异,其中以硫磺多菌灵的效果最好,对2个供试菌株的EC50分别为11.22μg/mL和12.30μg/mL;其次为甲基硫菌灵,对2个菌株的EC50分别为46.06μg/mL和11.32μg/mL;腐霉利的效果最差,对2个菌株的毒力分别为303.09μg/mL和426.12μg/mL。应用室内抑菌效果较好的硫磺多菌灵和甲基硫菌灵对腐败病严重发生的藕田进行病害防治,结果显示,2种药剂对病情的发展具有一定的控制作用。     

对烟粉虱具有高致病力的虫生真菌筛选

为筛选对烟粉虱具有高致病力的虫生真菌菌株,对7 种白僵菌（Beauveria bassiana）菌株、3 种绿僵菌（Metarhizium
anisopliae）菌株和1 种玫烟色拟青霉（Paecilomyces fumosorseus）菌株进行毒力生物测定。结果表明：白僵菌加拿大1 号菌
株对烟粉虱致病力最高。进而比较其对不同虫态（龄期）烟粉虱的致病力,结果表明加拿大1 号对虫卵无致病力,对2、3、
4 龄若虫均有较高致病力且致病力随龄期的增加而减弱。     

苯甲酰基脲类杀虫剂对异迟眼蕈蚊的生物活性及亚致死效应

以异迟眼蕈蚊为试虫,采用浸渍法和药膜法,研究了4种苯甲酰基脲类杀虫剂对异迟眼蕈蚊的生物活性和亚致死效应,以探讨苯甲酰基脲杀虫剂对异迟眼蕈蚊的致毒效应。结果表明:氟啶脲和氟虫脲对2龄和4龄幼虫的毒力相对较高,其中氟啶脲对2龄和4龄幼虫的LC50分别为5.526mg·L~(-1)和7.521mg·L~(-1)。4种药剂亚致死浓度均导致4龄幼虫发育历期和蛹期的延长,成虫单雌产卵量和卵孵化率的下降,其中氟虫脲和氟啶脲对4龄幼虫发育历期、蛹期、化蛹率和羽化率有显著影响(P0.05),因此氟啶脲和氟虫脲可用于温室和田间防治异迟眼蕈蚊幼虫的理想药剂。     

杀虫剂对哈尔滨地区小菜蛾幼虫的毒力研究

以小菜蛾为研究对象,采用浸叶法研究了6种杀虫剂对哈尔滨地区小菜蛾的室内毒力活性。结果表明:氯虫苯甲酰胺的毒力最高,LC50仅为0.99mg/L,高效氯氰菊酯的毒力最低,LC50达到50.08mg/L,6种药剂对小菜蛾的毒力从大到小依次为氯虫苯甲酰胺多杀菌素苏云金芽孢杆菌(Bt)丁酯脲阿维菌素高效氯氰菊酯,故氯虫苯甲酰胺可作为哈尔滨地区小菜蛾防治的首选药剂。     

农药助剂倍创对辛硫磷防治韭菜韭蛆的增效作用

以龄幼虫为研究对象,采用胃毒触杀联合毒力法,研究2种农药助剂(两份保和减维康)与减量辛硫磷乳油(EC)混用对韭菜韭蛆的防治效果。结果表明:减少30%~40%辛硫磷用量、加入实际用药量14%的两份保、减维康对韭蛆3龄幼虫的LC50值分别为1.74~2.01mg/L、1.96~2.28mg/L,与40%辛硫磷EC的毒力(1.84mg/L)相近。     

Bt-NPV复配剂对蔬菜害虫的田间药效试验

利用甜菜夜蛾NPV(Spodoptera exigua NPV,Se NPV)、棉铃虫NPV(Helicoverpa armigera NPV,Ha NPV)分别与苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)制成复配剂,分别对甜菜夜蛾和棉铃虫2~3龄幼虫进行田间防治药效试验,同时对小菜蛾(Plutella xylostella Linnaeus)、菜粉蝶(Pieris rapae Linne)进行田间兼治。结果表明,复配剂Bt+Se NPV1对甜菜夜蛾幼虫防效,7 d和10 d分别达到78.2%和82.16%,明显高于单剂Bt的防效60.23%和63.79%;Bt+Se NPV1防治白菜田间自然发生的小菜蛾、菜青虫,10 d防效分别达到60.75%、50.58%;复配剂Bt+Ha NPV1防治温室番茄棉铃虫,7 d和10 d防效分别达到63.62%和71.40%,显著高于单剂Bt的防效53.38%和60.78%。由此可见,复配剂Bt+Se NPV1、Bt+Ha NPV1可以有效防治甜菜夜蛾、棉铃虫幼虫,防效在杀虫速度和持续性上明显高于单剂Bt;同时Bt+Se NPV1对菜田的小菜蛾、菜青虫具有一定兼治作用,可扩大复配剂防治蔬菜害虫的作用谱。     

枯草芽孢杆菌Bs-18菌株分离与鉴定及对根结线虫的防治效果

从植物的根际土壤中分离到1株芽孢杆菌菌株Bs-18,通过16SrDNA序列分析鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilus)。在室内,通过浸泡法用Bs-18菌株发酵液处理南方根结线虫(Meloidogyne incognita)的2龄幼虫,发现其对线虫具有显著的致死作用,发酵原液及10倍稀释液在6h时致死率均高于95%。在温室试验中,Bs-18菌株发酵液及10倍稀释液对根结线虫的减退率达到81.8%和76.5%,表现出较高的防治效果,为进一步的田间应用奠定了基础。     

石灰氮对韭菜迟眼蕈蚊的杀虫活性及控制效果

以韭菜迟眼蕈蚊为试虫,采用药液灌根法,研究了石灰氮对韭菜迟眼蕈蚊不同虫态的毒力、田间控制效果及对韭菜的安全性,以期寻找出防治韭蛆的高效安全产品。结果表明:石灰氮对韭蛆幼虫毒杀活性高,尤其是对低龄幼虫最高;对卵和蛹的毒杀效果低于幼虫。室内试验表明石灰氮对成虫产卵有明显的驱避效果;盆栽试验和田间试验表明成虫发生期施用石灰氮对韭蛆控制效果明显,幼虫期施用也有较好的杀虫效果;田间安全性试验结果表明,667m~2石灰氮用量1.5~6.0kg对韭菜安全无害,且能有效提高韭菜产量。     

黄瓜棒孢叶斑病菌的毒力分化及AFLP分析

以6个黄瓜品种(系)为试材,以来自山东、辽宁、黑龙江的200个黄瓜棒孢叶斑病菌为供试菌株,采用苗期接种鉴定及AFLP分子标记技术,研究了黄瓜棒孢叶斑病菌的毒力分化。结果表明:黄瓜棒孢叶斑病菌存在生理小种分化现象,并将200个菌株分为4个生理小种,初步筛选出D0330、D1306、D0649和D2025作为研究黄瓜棒孢叶斑病菌生理小种分化的鉴别寄主备选材料;AFLPs与菌株的地理来源无关,与毒力存在相关性。     

苹果采后青霉病拮抗菌株的分离、鉴定和低能N~+注入诱变

以苹果表面分离到拮抗扩展青霉的菌株BA-16为试材,经形态学、生理生化及16S rRNA序列分析,该菌被鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。为了增强该菌株防治青霉病的能力,通过低能N+注入技术对其进行诱变选育,获得抑菌性能显著提高且遗传性能稳定的突变株BA-16-8。为检测该突变株防治青霉病的增强效果,分别对野生株BA-16和突变株BA-16-8的菌悬液和无细胞发酵液进行果实生防检测。结果表明:突变株的菌体及代谢产物的抗病性能显著高于野生菌株,对于苹果采后青霉病的生物防治具有良好的应用开发前景。     

杜邦安打等几种药剂对斜纹夜蛾的防效比较

斜纹夜蛾是夏秋季蔬菜主要害虫 ,其发生量大 ,食性杂 ,食量大 ,给蔬菜生产造成极大的危害。常用的杀虫剂对斜纹夜蛾低龄幼虫防效较好 ,对高龄幼虫的防效却不理想。本试验比较了杜邦安打、除尽、农地乐、米螨、绿色功夫等药剂对斜纹夜蛾不同虫龄幼虫的室内和田间防效 ,旨在筛选出适用于防治斜纹夜蛾不同虫龄幼虫的低毒安全药剂。1　材料与方法1.1　供试药剂　 15 %杜邦安打 (美国杜邦公司 )、10 %除尽悬浮剂 (美国氰胺国际公司 )、2 0 %米螨悬浮剂 (美国罗门哈斯公司 )、5 2 2 5 %农地乐乳油(美国陶氏益农公司 )、2 5 %绿色功夫乳油 (英国…     

几种杀虫剂对韭菜迟眼蕈蚊的室内毒力测定

以韭菜迟眼蕈蚊成虫和幼虫为试材,采用胃毒触杀联合毒力法和成虫药膜法,测定几种杀虫剂对韭菜迟眼蕈蚊成虫和幼虫的毒力。结果表明:二嗪磷对韭菜迟眼蕈蚊幼虫具有较高的活性,为59.05mg/kg,其次为阿维菌素,为72.89mg/kg;对成虫测定结果表明,联苯菊酯、马拉硫磷对成虫活性高于噻虫嗪、烯啶虫胺,分别为0.30、0.15mg/kg,对成虫表现出良好的活性。二嗪磷、阿维菌素、联苯菊酯、马拉硫磷可以作为韭菜迟眼蕈蚊幼虫、成虫期防治的理想药剂。     

根结线虫拮抗放线菌NZ-5菌株的鉴定及其发酵条件优化

以根结线虫二龄幼虫为试材,研究1株分离自土壤样本的放线菌菌株NZ-5的杀线虫活性,其发酵培养滤液对根结线虫二龄幼虫有较强的毒杀活性,24 h校正死亡率达到84.36%。为了高拮抗菌株进一步应用于田间生产实践,采用形态特征观察、培养特征观察和理化特性检测方法,结合16S rDNA基因序列分析,对其进行鉴定,同时对菌株发酵液对二龄幼虫的致死率来明确该菌株的最优发酵条件。结果表明:菌株的上述特征与链霉菌属Streptomyces中的微白黄链霉菌S.albidoflavus相似性很高,因此菌株NZ-5被鉴定为链霉菌属Streptomyces微白黄链霉菌S.albidoflavus。进一步的发酵条件优化试验发现,该菌株在以燕麦片为碳源、酵母粉为氮源、培养温度为25℃,摇床转速在210 r·min^-1震荡培养4 d,起始pH为7,装液量为75 mL时菌株发酵培养液对根结线虫的毒杀活性为93.29%,相比优化前提高了8.93个百分点,菌株NZ-5能够有效杀死根结线虫二龄幼虫,可作为优良菌株进行杀线虫生物农药的进一步研发。     

中药材丹参根腐病生防菌的分离与鉴定

以聊城市茬平县杜郎口镇中药材种植基地采集的丹参根际土壤为试材,采用梯度稀释法和平板对峙培养法在丹参根际土壤中筛选对丹参根腐病具有较好抑制作用的生防菌。结果表明:初步筛选出10株具有抑菌活性的有益微生物;进一步通过复筛及其抑菌谱的测定分离出2株抑菌效果较好的菌株,分别为2-1和9-2。通过形态学和分子生物学鉴定,2-1和9-2分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),该试验可为今后高效生防菌剂的研发奠定基础。