聚合酶链反应技术及其应用

本文叙述了ＰＣＲ技术发明，基本原理，进展和应用，简要地介绍了锚式、巢式、反向、不对称、逆转录、半定量、竞争性、散布重复序列、高变性引物、等位特异性、竞争引物、多重、着色互补、以及免疫ＰＣＲ技术种等。     

苗木培育靠接技术得到创新

1.小麦品种试验审定 小麦是我市开展品种试验最早的作物,从北京市种子管理站成立起,即开始进行小麦品种试验工作.多年来,小麦品种试验条件不断完善,试验技术不断改进,从不设置重复的简单对比试验,到多年、多点、多重复试验;从单一的产量鉴定,到产量、品质、抗病性、抗寒性等多项性状同步鉴定;数据汇总从简单的平均数统计法,到采用科学的生物统计方法;试验组别从最初的一个组,增加到丰产、优质、节水和特用组,参试品种类型更加丰富,试验更具有前瞻性,筛选的品种更符合生产和市场的需求.     

微卫星标记在家畜遗传育种上的应用

<正> 微卫星(microsatellite)标记是20世纪80年代末期发展起来的一种新型的分子遗传标记。近年来,随着国内外学者对其结构、遗传特性等研究的不断深入,人们发现它具有数量多、分布广、多态性丰富、呈孟德尔共显性遗传、检测快速方便等许多优点,越来越多被应用于动植物的遗传育种研究中,加速了动植物的遗传育种进程。1 微卫星标记的特性 微卫星又称简单序列重复(SSR),或称短串联重复(STK)。这是一类由几个核苷酸(一般2～4个)为重复单位,重复10～20次的串联重复序列。这些串联重复序列由于重复次数的不同而造成序列长度的多态性,因此称之为简单序列长     

山东省小麦产业技术体系现状及发展建议

山东省是小麦生产和消费大省,然而由于小麦产业涉及多个部门、领域,目前存在条块分割、资源分散、低水平重复、分工不明、协作不力等问题,严重阻碍了山东省小麦产业的发展。本文分析了山东省小麦产业在育种、种植、加工等环节的现状及存在的问题,并提出了构建山东省小麦产业技术体系的建议。     

“多规分立”走向“多规融合”的要点与目标模式

规划的分立有其历史必然性和阶段合理性,但面对现存规划,尤其是空间规划之间存在的内容重复、管控交叉、实施困难等问题,规划无论从技术层面还是效用发挥方面,都对融合具有迫切性。总结了上海、广州、重庆等地“多规融合”的实践经验,深入解析了“多规融合”的相关要点,提出了“一本规划、一张蓝图、一套体系、一个平台”的“多规合一”目标模式以及相关建议。     

北京市小麦品种现状及发展方向

<正>1.小麦品种试验审定小麦是我市开展品种试验最早的作物,从北京市种子管理站成立起,即开始进行小麦品种试验工作。多年来,小麦品种试验条件不断完善,试验技术不断改进,从不设置重复的简单对比试验,到多年、多点、多重复试验;从单一的产量鉴定,到产量、品质、抗病性、抗寒性等多项性状同步鉴定;数据汇总从简单的平均数统计法,到采用科学的生物统计方法;试验组别从最初的一个组,增加到丰产、优质、节水和特用组,参试品种类型更加丰富,试验更具有前瞻性,筛选的品种更符合生产和市场的需求。     

ISSR标记技术及其在果树遗传育种中的应用

简单重复序列间扩增(ISSR)是在简单重复序列(SSR)基础上发展起来的一种新技术.该技术以锚定的微卫星DNA为引物,对与锚定引物互补的间隔不太大的重复序列间DNA片断进行PCR扩增.ISSR标记具有较长的引物序列,退火温度高.表现出较好的稳定性,且结合位点丰富,可以检测到基因组中多个位点的差异,能够揭示出比限制性片段长度多态性(RFLP)、随机引物扩增多态DNA(RAPD)、SSR更多的多态性信息.对ISSR标记技术的原理、特点及其在果树种质鉴定、遗传多样性、居群遗传结构、进化与亲缘关系分析以及分子辅助育种等研究方面的应用进行了综述.     

马铃薯原原种椰糠基质繁育技术规程

从范围、规范性引用文件、术语和定义、栽培设施、繁育技术、基质重复利用等方面规范了马铃薯原原种椰糠基质繁育技术.     

可调百叶窗式风机工况调节装置的研究设计

在风机性能测试中，风机工况调节一直是制约着风机性能参数自动和重复获取的主要原因之一。应用可调百叶窗网栅开度来代替原有形式的工况调节装置，克服了筛网叠加和贴纸条法的难以重复及锥形节流器的气流不均匀等问题，同时结合先进的测控技术、传感器等技术，从而便于实现风机工况调节的自动控制。     

宝山区水稻测土配方施肥效果评价初探

采用多点、无重复设计试验实施方案,探索了测土配方施肥对水稻穗粒结构、肥料利用率、产量等方面的影响,旨在为推广水稻测土配方施肥技术提供可靠依据。试验结果表明,采用测土配方施肥技术可增加水稻有效分蘖和每穗实粒数,优化穗粒结构、提高水稻产量,增加经济效益,且具有更强的丰产性;水稻的施肥农学效率、肥料偏生产力分别比常规施肥方法提高2.52、3.03,有效提高了肥料使用效率。     

半潜式平台压裂测试技术创新与实践

由于海上平台作业空间和承重受限,高压及设备多、大、重所带来的安全性和可操作性低以及潮差对半潜式平台升沉等因素影响,在海上平台对低孔低渗油气藏进行储层压裂改造面临很大困难和挑战。惠州XX-2井是中海油的第一口压裂测试油井,通过该井压裂测试的成功实施,形成了压裂管柱补偿技术、压裂管柱重复试压技术、压裂测试施工配套技术和地面出砂处理技术等一系列技术创新与应用,为海上半潜式平台进行储层压裂改造测试作业提供了实践经验,对突破海上低孔低渗油气藏的勘探开发具有重要意义。     

藏红花的表面增强拉曼光谱分析

用光谱分析仪分析藏红花是利用拉曼散射效应,具有检测速度快、简单、可重复、样品无损伤等优点,作为一种在线检测分析技术在农产品检测、食品安全等领域受到了普遍关注和应用。     

靶向切割猪Y染色体的CRISPR/Cas9载体构建及功能验证

【目的】通过CRISPR/Cas9系统对Y染色体多位点切割,实现目标染色体的敲除,为畜禽性别控制提供新的手段。【方法】以CRISPR/Cas9技术为基础,寻找Y染色体上能被sgRNA特异性识别的多拷贝重复序列,并通过体外切割、定量分析、核型鉴定验证其对靶点的有效性。【结果】所设计的sgRNA能够在体外实现对靶片段的明显切割,且切割效率均达到了50%以上。基因的定量分析结果证明了其在细胞水平切割的有效性,且簇状重复序列切割效果明显优于散在重复序列;核型鉴定结果证实了细胞水平猪Y染色体的丢失。【结论】研究结果为后续构建染色体敲除猪,实现猪的性别控制奠定了基础。     

水稻基因组中的微卫星标记及其应用

微卫星又叫简单重复序列,是指以少数几个核苷酸(多数为2～4个)为重复单位组成的串联重复序列,微卫星的两侧为保守的单拷贝序列．不同品种间微卫星基序重复次数的不同而形成了多态性,这种多态性可以通过设计PCR引物扩增检测出来,此即为简单序列长度多态性．微卫星标记具有共显性、高多态性、实验操作简单、快捷和检测结果稳定可靠等优点,是一种理想的分子标记．微卫星标记在水稻基因组中非常丰富,且分布均匀,水稻微卫星标记已发展了2740多个．微卫星标记在水稻分子标记连锁图的构建、基因(QTL)定位、系谱分析和分子标记辅助选择、遗传多样性研究和种质鉴定等许多方面得到了广泛应用．     

重复压裂裂缝转向技术在头台油田的应用

头台油田属于特低渗透油田,大部分井都要压裂投产,随着开发的进行,老井产量递减很快,往往需要重复压裂,但重复压裂只是延伸原有老裂缝,增油效果差。利用重复压裂裂缝转向技术对老井进行改造可以取得很好效果。阐述重复压裂裂缝转向的技术原理,并进行了现场压裂试验。现场压裂试验表明,该技术可以取得良好的增产效果。     

环介导等温扩增技术的研究进展

环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是利用2对特殊设计的引物和一种具有链置换活性的DNA聚合酶,在恒温条件下特异、高效地扩增DNA的新技术,扩增产物为一系列反向重复的靶序列构成的茎环结构和多环花椰菜样结构的DNA片段混合物,电泳图谱呈阶梯式带状分布,反应伴有白色的副产物焦磷酸镁沉淀产生,可通过肉眼定性判断反应结果.LAMP技术已在核酸的科学研究、疾病诊断和动物胚胎性别的鉴定等领域得到了广泛的应用.从LAMP技术的原理、引物组成及反应过程、技术特点、方法延伸和应用等方面对其进行了概述,以期为同类研究提供参考.     

固定化酶在食品工业中的应用研究

固定化酶技术是酶工程的核心,该技术使酶反应的连续生产成为现实,简化了下游分离纯化步骤,利于实现酶的重复利用及产物与酶的分离。目前已经广泛应用于食品、发酵、制药等行业,经济效益显著。     

农药田间试验中虚拟小区技术的探讨

虚拟小区技术是把田间零散分布的病株信息进行逐一统计记录,然后通过统计排序等资料整理手段形成按病级的严重程度分重复,重复内各小区达到病情指数尽可能一致的田间实用技术,具有最大限度平衡供试材料原有误差、随时随地进行、方便实用的优点,但计产计值过于复杂也是其显而易见的缺点。     

云南松基因组微卫星序列特征分析

为了更好地了解云南松基因组特征,分析了云南松基因组中微卫星序列的分布特征,采用FLAF-seq测序技术,共获得1 970条微卫星重复序列,利用MISA通过对Unigene序列的分析,鉴定出7种类型的SSR。7种微卫星序列中主要以单碱基重复类型为主,共1 104个,约占重复序列总数的56.04%,其次是双碱基和三碱基重复类型,分别占总数的27.66%和11.68%,四碱基重复类型数量30个,占重复序列总数的1.52%,五碱基、六碱基重复类型在总重复序列中占比最少,均为0.2%,混合微卫星占2.7%。在单碱基重复类型中占优势的重复单元是A/T碱基,双碱基重复类型中占优势的重复单元是(AT)_n/(TA)_n碱基,三、四、五碱基重复类型中,占优势的重复单元不明显,但几种碱基重复类型中,都包含着丰富的A和T。所得到的微卫星重复序列中以长度20bp序列的微卫星数量最多,微卫星长度≥20bp的只占总数的10.81%。可为后续云南松遗传多样性的研究及SSR引物筛选等提供一定的理论依据。     

基于SSR扩增与测序分析的主栽烤烟品种遗传多样性研究

利用SSR荧光标记和毛细管电泳检测技术分析了SSR标记在8个烤烟品种烤后烟叶中的多态性和稳定性.结果表明:PCR产物浓度50～100 ng/μL为毛细管电泳检测较合适的上样浓度;利用83对SSR引物对8个烤烟品种进行PCR扩增,最终确定5对(NTGS66288、PT30250、PT30213、PT52573、PT30170)SSR引物为本研究的核心引物,且多态性分析表明这5对引物能够有效地将8个烤烟品种区分开;8个烤烟品种间的遗传相似性系数为0.30～0.86,当此系数为0.76时,云烟87、NC297、云烟97和中烟100聚为一类,K326和KRK26聚为一类,红花大金元、翠碧1号各自为一类;高通量测序结果显示NTGS66288、PT30250、PT30213、PT52573、PT30170等5个SSR位点基因座的核心重复单元多为简单二碱基重复和三碱基重复,且8个品种之间的差异仅为核心重复单元数量不同.