糙皮侧耳凝集素基因Plectin的克隆和表达分析

基于cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了两个糙皮侧耳凝集素基因Plectin1和Plectin2。结构分析显示Plectin1和Plectin2基因全长分别为1 371和1 359 bp,二者均含有5个外显子和4个内含子;Plectin1开放阅读框长1 134 bp,编码377个氨基酸,Plectin2开放阅读框长1 122 bp,编码373个氨基酸。Southern杂交试验证实Plectin1和Plectin2在糙皮侧耳基因组中均只有1个拷贝。利用qRT-PCR分析了Plectin1和Plectin2在糙皮侧耳不同生长阶段的表达量,结果显示Plectin1和Plectin2分别在成熟子实体阶段和幼嫩子实体阶段表达量最高,这表明Plectin1和Plectin2基因可能在糙皮侧耳子实体生长发育中起到一定的调控作用。     

糙皮侧耳对玉米秸的降解作用

本文研究了糙皮侧耳在玉米秸-麦麸基质上生长期间，菌体对基质的转化率和基质中主要分的降解规律。实验结果表明：1.头潮菇子实体绝对生物学效率为9.15%,二潮菇子实体绝对生物学效率为4.10%，2.头潮菇子实体阶段所消耗的营养特质有57.61%是来自于水质纤维素的降解，另42.39%是来自于基质有86.82%是来自于木质纤维素的降解，另13.18%是来自于基质非木质纤维素的解，3.在菌丝体生长阶段和头潮菇的原基期，培养物中CMC酶，FP酶和半纤维素酶活性甚低，在实体迅速生长阶段，该三种酶的活性迅速增加，在子实体成熟期左右培养物中出现酶活性高峰，在头潮菇子实体采收后酶活性再次增加，在子实体成熟期基物中再次出现酶活性高峰，由此可见，酶活性增加与子实体生长发育有十分密切的关系。     

利用马铃薯渣栽培糙皮侧耳

以马铃薯渣和农作物秸秆为原料进行糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)栽培试验。结果表明:当马铃薯渣(折合干重)和秸秆(玉米芯)质量比为1∶2时,出菇潮次多、产量高、生物转化率高且商品品质好。     

糙皮侧耳HMG-box转录因子分析与候选基因克隆表达

在糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)的全基因组中鉴定出14个高速泳动蛋白(high-mobility group box,HMG-box)的编码基因(PoHMG1～PoHMG14),对其进行特征、结构与系统进化分析,发现所有的HMGbox转录因子蛋白的三级结构高度相似,相对分子质量为6893.79～60397.29,蛋白PoHMG6、PoHMG11、PoHMG12与PoHMG13之间的亲缘关系较近。基于糙皮侧耳在菌丝、原基、幼嫩子实体和成熟子实体时期的转录组数据,对筛选到的转录因子基因PoHMG11进行克隆分析并探究其功能及表达特性,发现该基因全长序列1 517 bp,编码489个氨基酸,含有一个HMG-box结构域。通过大肠杆菌原核表达载体体外诱导表达出相对分子质量为5.5×104的蛋白,该重组蛋白在1 mol·L^-1 IPTG、25℃诱导表达6 h时表达量最高。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析糙皮侧耳在菌丝、原基、幼嫩子实体和成熟子实体阶段PoHMG11基因的相对表达量,发现该基因在成熟糙皮侧耳子实体中的表达量比其他生长发育时期显著...     

麦秸生料栽培糙皮侧耳试验

通过二年糙皮侧耳菌株比较试验,玉米粉添加量试验、培养料含水量试验及菌种试验,得出如下结论:麦草生料栽培糙皮侧耳的适宜菌株是SN1和CCEF89;培养料中玉米粉的最佳添加量是15％;培养料的适宜含水量是70％;宜采用麦粒菌种,菌龄以发菌到瓶底后再培养3d为宜,播种量是培养料干重的10％。     

糙皮侧耳杂交后代遗传多样性分析

以糙皮侧耳Pleurotus ostreatus白色菌株P1和深灰色菌株P2为亲本,通过单孢菌株配对杂交获得40个杂交组合。出菇记录杂交后代子实体颜色,提取42个样本的全基因组DNA,用ISSR进行遗传多样性分析。结果表明:6条ISSR引物共扩增出45条带,其中多态性条带34条,多态性比率为75.56%,有效等位基因数为Ne=1.4858,遗传多样性指数H=0.2725,香农信息指数I=0.4021。聚类分析后发现,在0.6889水平上聚为4类,聚类结果与子实体颜色关系不大,表明糙皮侧耳杂交后代存在丰富的遗传变异。分类结果将有利于更好的利用这些丰富的育种资源。     

解磷细菌在糙皮侧耳栽培上的应用试验

生物磷细菌菌剂是一种巨大芽孢杆菌的活菌菌剂,在其自身代谢过程中能产生有机酸和酶类物质,从而酵解土壤和其他物料中的无效磷使之成为速效磷,从而起到促进侧耳菌丝生长、提高产量、提早出菇的作用;而且解磷细菌在其代谢过程中还能释放大量的赤霉素、吲哚乙酸、细胞分裂素等促生长因子,进一步起到促产促长作用。同时由于解磷细菌的大量增殖可产生相当量的菌类拮抗物质,可有效的抑制病原细菌和有害真菌的滋长起到防止污染的作用,提高了栽培者的制袋成功率。     

外源性cAMP对糙皮侧耳原基形成的影响

以糙皮侧耳新831为材料,分别在含有不同浓度cAMP的SA培养基上培养菌丝,观察菌丝的生长发育情况。结果:与对照组相比,低浓度cAMP(0.5~3mmol/L)对平菇菌丝生长有促进作用,随着添加浓度的升高,菌丝生长受到抑制;当添加浓度为cAMP 1mmol/L时,菌丝蛋白含量最低且糙皮侧耳原基形成所需时间明显少于对照组;试验表明外源性cAMP对糙皮侧耳原基形成存在一定的影响。研究结果为进一步解析原基形成过程中cAMP的作用机制奠定了一定的基础。     

糙皮侧耳PoLIM基因家族鉴定与表达分析

在NCBI、JGI数据库中检索糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）PoLIMs,进行生物信息学分析;测定PoLIM 1～PoLIM 6在25℃培养7 d(菌丝期),16℃培养5 d（扭结前期）、10 d（扭结后期）、15 d（原基期）、22 d（子实体期）的相对表达量以及菌丝在4℃冷胁迫12、24、48 h的相对表达量。结果表明：PoLIM1～PoLIM6的氨基酸数量为353～1 673;等电点为7.26～9.98;亚细胞定位预测均在细胞核中;有10个保守基序;启动子序列中包含光、生长素、MYB转录因子以及低温胁迫等响应元件。就相对表达量而言,PoLIM1在子实体期较高;Po LIM2在扭结后期和子实体期较高;Po LIM3、Po LIM4、Po LIM6在菌丝期较高;Po LIM5在扭结后期较高,在原基期及子实体期降低。与对照（25℃）相比,4℃冷胁迫时Po LIM1、Po LIM3、Po LIM5、Po LIM6的相对表达量升高。     

辣木枝屑栽培糙皮侧耳初探

目的:利用辣木枝屑为主料栽培糙皮侧耳。方法:通过辣木与常规配方对比试验,研究辣木对糙皮侧耳菌丝生长速度、菌丝长势及生物转化率的影响,以此评价辣木枝屑为主料栽培糙皮侧耳的可行性。结果:糙皮侧耳在辣木枝屑为主料的各配方中均能正常生长和出菇,以配方④(辣木枝屑60%,棉子壳38%,石灰1%,石膏1%)和配方⑤(辣木枝屑50%,杂木屑23%,棉子壳25%,石灰1%,石膏1%)表现最佳,菌丝长势强,生长速度分别为8.0 mm/d和7.3 mm/d,生物转化率分别为96.03%和93.51%,且均优于对照组。结论:辣木枝屑可用于栽培糙皮侧耳。     

葛根渣栽培糙皮侧耳配方筛选试验

试验以葛根渣为主料,设计不同的培养基配方进行糙皮侧耳栽培试验研究。结果表明,以65%葛根渣和17%杂木糠组成的培养基配方D,栽培的糙皮侧耳子实体产量和生物转化率高,且菌丝体洁白、粗壮,出菇周期短。     

糙皮侧耳品种的主成分及聚类分析

为选育高产优良的糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)菌株,分别选取16个菌株的10个数量性状进行主成分和聚类分析.结果表明,前4个主成分的累积贡献率达87.448％;利用SPSS13.0软件中未旋转因子得分值计算出主成分得分,以特征值的贡献率大小为分配系数,计算出不同品种糙皮侧耳菌株的综合得分和排名,并聚类为3个组群,第1组的主要特点为产量高、菌丝生长速度快、单个子实体形态好;第Ⅱ组产量较高、菌丝生长速度较快、单个子实体形态较好;第Ⅲ组产量低、菌丝生长速度较慢.因此第1组和第Ⅱ组综合表现较好,可作为品种选育的优良材料.     

钾肥对糙皮侧耳产量和品质的影响

以糙皮侧耳为试验材料,研究了常用钾肥KCl、KNO_3、K_2SO_4、KH_2PO_4对糙皮侧耳产量和品质的影响。结果表明,补充KCl、KNO_3、K_2SO_4、KH_2PO_4均可有效地提高糙皮侧耳的产量和品质;提高其蛋白质、碳水化合物、灰分和钾的含量。     

糙皮侧耳在玉米秸秆中的生长发育规律

利用玉米秸秆生产糙皮侧耳,菌丝生长规律符合逻辑斯第曲线,子实体生长规律符合指数增长曲线,菌丝生长速度优于棉籽壳培养料,子实体生长的高峰期比棉籽壳培养料滞后,出菇期比棉籽壳培养料长。将玉米秸秆和棉籽壳按1:1混合袋栽糙皮侧耳,生物学效率达145％。     

糙皮侧耳液体菌种培养条件的初步研究

研究了糙皮侧耳液体菌种适宜的培养条件、培养周期与贮存期。结果表明,糙皮侧耳液体菌种适宜的培养基配方为蔗糖2％,玉米粉4％,麦麸3％,酵母粉0．3％,KH2PO4 0．25％,MgSO4 7H2O 0．1％,ZnSO4 0．05％,pH6．17。摇瓶培养装液量80mL／250mL,摇床转速150r/min,接种量10％,培养周期6d,菌种于3d内用完为宜。     

原生质体诱变技术选育糙皮侧耳秸秆分解菌株

通过原生质体的制备,再生及紫外诱变技术对1株具有较强的秸秆降解能力的糙皮侧耳菌株金凤9301进行菌种选育工作。得到1株木质素酶、纤维素酶、半纤维素酶均高产的菌株08P217。其木质索降解率,纤维素降解率,半纤维素降解率分别为出发菌株的1．75,1．71,3．22倍。经酯酶同工酶分析表明,试验所筛选的菌株已不同程度的发生遗传物质的改变,不同于原来的出发菌株。说明采用原生质体诱变育种是获得高效秸秆分解菌株的有效方法。