发酵床垫料中优势细菌的分离鉴定及生物学特性研究

为选育养猪生物发酵床优势菌种,分析了湖南地区正常运行的发酵床中优势细菌种类,并对其生物学特性进行了初步探讨。从生态养猪模式的发酵床中分离纯化优势细菌,通过形态学、16S r DNA序列分析和同源性比较,鉴定出不同种属的10株细菌,其中5株为芽孢杆菌。菌株耐热试验结果表明,5株芽孢杆菌耐热能力强,能安全度过发酵床发酵过程的高温期。5株优势芽孢杆菌能够产生与猪粪降解相关的酶类,有3株菌对某些病原菌具有抑制作用,对猪安全并有促进生长的功能。     

成都市郊区土壤芽孢杆菌的初步研究

利用格网抽样与重点抽样相结合的混合随机抽样技术以及全球卫星定位系统(GPS),在成都市郊区采集耕作层土样20个,采用稀释平板计数法对其芽孢杆菌和总细菌进行了分离.结果表明,芽孢杆菌是成都市郊区土壤细菌中的主要类群,约占细菌总量的25.3%;鉴定出13种芽孢杆菌中,广泛分布的种有巨大芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、球形芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和环状芽孢杆菌.根据物种多样性分析的结果,成都市郊区芽孢杆菌物种较丰富,绝大多数样点能分离到2个种以上,少数采样点可达4个种以上.单个样点均匀度指数较低,生态优势度较高,存在明显的优势种.     

猪粪除臭微生物筛选及其生长曲线测定

为研制猪粪微生物除臭剂,本试验以发酵猪粪为样本筛选除臭微生物并对其生长曲线进行测定,结果从发酵猪粪中分离得到4株具有除臭功能的菌株,经染色镜检和生化反应判定为枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌和班图酒香酵母菌,且这4株菌株的生长曲线各具特点.     

沼液对草莓土传病害的盆栽防效与沼液中拮抗细菌筛选

采用盆栽试验研究了来自2种发酵原料(猪粪水、牛粪水)的沼液及其辐照灭菌产物对草莓枯萎病的防治效果;并采集了江苏省内14个运行稳定的大型沼气工程及户用沼气池的沼液,对其中的芽孢细菌进行分离培养,再采用平板菌丝生长抑制法,分别以草莓枯萎病菌、炭疽病菌、立枯病菌和辣椒疫霉病菌、瓜果腐霉病菌作为指示菌,经过初筛、复筛,获得对5种病原真菌有生长抑制作用的广谱拮抗芽孢细菌,并采用分子生物学方法进行菌种鉴定.研究结果表明:猪粪沼液对草莓枯萎病的防效好于牛粪沼液,未辐照沼液的防效好于辐照灭菌沼液的防效.从14处沼液中共分离获得83株芽孢细菌,其中22株为拮抗细菌,1株芽孢细菌对5种病原真菌都有极强的抗生作用,经16S rDNA鉴定该菌株为多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa).     

成都市郊区土壤芽孢杆菌的初步研究

利用格网抽样与重点抽样相结合的混合随机抽样技术以及全球卫星定位系统(GPS),在成都市郊区采集耕作层土样20个,采用稀释平板计数法对其芽孢杆菌和总细菌进行了分离。结果表明,芽孢杆菌是成都市郊区土壤细菌中的主要类群,约占细菌总量的25、3％;鉴定出13种芽孢杆菌中,广泛分布的种有巨大芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、球形芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和环状芽孢杆菌。根据物种多样性分析的结果,成都市郊区芽孢杆菌物种较丰富,绝大多数样点能分离到2个种以上,少数采样点可达4个种以上。单个样点均匀度指数较低,生态优势度较高,存在明显的优势种。     

辅以多粘类芽孢杆菌堆肥提取液工艺及其对土壤微生物群落结构的影响

以猪粪堆肥为原料,建立多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)与猪粪堆肥提取液的配伍技术工艺,并研究其对烟草黑胫病(Phytophthora parasitica)土壤微生物群落结构的影响。结果表明,最佳技术工艺是多粘类芽孢杆菌添加到猪粪堆肥中发酵72 h,再按照水∶堆肥8∶1(质量比)浸提48 h。不同工艺提取的猪粪堆肥提取液均能有效抑制烟草黑胫病病原菌的生长。与对照相比,施用辅以多粘类芽孢杆菌的堆肥提取液处理土壤疫霉ITS基因拷贝数减少了18.15%~53.33%,土壤中芽孢杆菌数量增加了45.63%~255.00%,同时增加了土壤细菌和放线菌数量,但是减少了真菌数量。辅以多粘类芽孢杆菌的猪粪堆肥提取液处理增加了Bacillus niabensis和B.aryabhttai的丰富度和细菌遗传多样性,但降低了真菌的丰富度和遗传多样性。     

米氏硫胺素芽孢杆菌的分离及鉴定

[目的]分离、纯化土壤中的细菌,通过鉴定得到米氏硫胺素芽孢杆菌.[方法]通过生化鉴定、提取细菌基因组并进行细菌16 s rDNA测序等方法鉴定.[结果]此细菌生化鉴定结果符合《常见细菌鉴定手册》中的关于米氏硫胺素芽孢杆菌的生化鉴定,将细菌的16 s rDNA测序结果在NCBI上进行比对,表明该细菌为米氏硫胺素芽孢杆菌.[结论]分离、纯化得到的细菌经测序对比后确定是米氏硫胺素芽孢杆菌.     

斜带石斑鱼稚鱼和早期幼鱼消化道可培养菌群研究

利用常规微生物分离鉴定方法结合16S rRNA基因序列分析研究斜带石斑鱼Epinephelus coioides 40d稚鱼和70d早期幼鱼消化道可培养菌群.结果表明,副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus、哈维弧菌Vibrio harveyi、短小芽孢杆菌Bacillus pumilus、鲍氏不动杆菌Acinetobacter baumannii、恶臭假单胞菌Pseudomonas putida、嗜冷杆菌Psychrobact-er sp.和洋葱伯克霍尔德菌Burkholderia cepacia均从稚鱼和早期幼鱼消化道分离.系统进化分析结果表明,斜带石斑鱼消化道细菌可归为3类:γ-变形杆菌纲γ-Proteobacteria、β-变形杆菌纲β-Proteobacteria和芽孢杆菌纲Bacil-li.稚鱼和早期幼鱼消化道的优势菌相似,稚鱼消化道的优势菌为芽孢杆菌Bacillus、嗜冷杆菌Psychrobacter、葡萄球菌Staphylococcus和不动杆菌Acinetobacter,而早期幼鱼消化道的优势菌为芽孢杆菌、不动杆菌、嗜冷杆菌和假单胞菌Pseudomonas.芽孢杆菌为稚鱼与早期幼鱼消化道的最优势菌,分别占可培养细菌总数的78.6%和75.6%,而弧菌在稚鱼和早期幼鱼消化道中的数量均较低,分别仅占消化道可培养细菌总数的2.8%和1.1%.乳酸乳球菌Lactococcus lactis、干酪乳杆菌Lactobacillus casei和屎肠球菌Enterococcus faecium等3种乳酸菌仅见于早期幼鱼消化道.     

低温环境下南海深海沉积物中可培养细菌的多样性及其抑菌活性分析

模拟低温(10℃)环境分离纯化培养南海深海沉积物中的细菌,基于16S rRNA基因序列对南海深海沉积物可培养细菌多样性进行分析,并利用滤纸片扩散法测试可培养细菌发酵液的抑菌生物活性。结果表明,从南海深海沉积物中共分离获得相关可培养细菌32株,分属于3个菌门(变形菌门、厚壁菌门和拟杆菌门)的19个种,其中以芽孢杆菌为优势菌群。分离获得的南海深海沉积物可培养菌株中有17株的代谢物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌4种指示菌均表现出抑制作用,占分离菌株种类的89.5%。说明低温环境下对深海沉积物可培养细菌多样性和活性均存在一定影响。     

桉树枝瘿姬小蜂雌成虫体内可培养细菌分离鉴定及多样性分析

[目的]明确桉树枝瘿姬小蜂(Leptocybe invasa Fisher&La Salle)体内可培养细菌多样性,为利用微生物防治该害虫打下基础.[方法]利用传统的细菌分离培养与鉴定方法,结合16S rDNA测序和系统发育分析,对刚羽化的桉树枝瘿姬小蜂雌成虫体内可培养细菌进行多样性分析.[结果]从桉树枝瘿姬小蜂体内分离出11株细菌,经鉴定归类于3个门(厚壁菌门、放线菌门和变形菌门)3个纲(芽孢杆菌纲、放线菌纲和γ-变形菌纲)4个目(芽孢杆菌目、微球菌目、乳酸杆菌目和肠杆菌目)8个科(芽孢杆菌科、微杆菌科、葡萄球菌科、乳酸杆菌科、纤维单胞菌科、微球菌科、肠杆菌科和类芽孢杆菌科)8个属(芽孢杆菌属、微杆菌属、葡萄球菌属、片球菌属、纤维单胞菌属、微球菌属、埃希氏杆菌属和类芽孢杆菌属),其中,厚壁菌门(Firmicutes)6株,为优势类群;芽孢杆菌属(Bacillus)3株,为优势菌属.[结论]桉树枝瘿姬小蜂体内可培养细菌具有丰富的多样性.