魔芋胶酶解工艺条件的优化

[目的]探讨在中试条件下利用中性β-甘露聚糖酶水解魔芋胶制备低聚甘露糖的工艺条件。[方法]在单因素试验条件下,研究了利用枯草芽孢杆菌所产生的中性β-甘露聚糖酶对魔芋胶进行水解来制备低聚甘露糖的工艺条件。[结果]酶法水解魔芋胶生产低聚甘露糖时,优化的酶解条件为：pH6.0,魔芋胶浓度125g/L,酶量200IU/g魔芋胶,酶解温度50℃,酶解时间3h。[结论]该研究可极大地提高魔芋胶的附加值。     

美洲大蠊中小分子肽的Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳分离探索

[目的]探讨适合美洲大蠊中小分子多肽分离、纯化的Tricine-SDS-PAGE方法。[方法]通过比较Tricine-SDS-PAGE中,不同比例3种胶对小分子肽的分离效果,建立更适合小分子肽分离的方法。[结果]聚丙烯酰胺凝胶电泳在一定程度上使标准Marker得到了初步分离,样品混合液均在分离胶、夹层胶和浓缩胶中有着不同程度的聚集,未能起到分离的作用。[结论]对于小分子多肽的混合样品,有待于进一步摸索更合适的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离方法或是其他更好的分离方法。     

二甲胺-丙烯酰胺阳离子聚丙烯酰胺的合成与表征

[目的]分析二甲胺-丙烯酰胺阳离子聚丙烯酰胺的合成与表征。[方法]以丙烯酰胺、二甲胺和甲醛为原料,以亚硫酸氢钠和过硫酸铵作为引发剂合成阳离子聚丙烯酰胺(CPAM),采用正交试验来确定CPAM合成的最优方案,并对CPAM进行阳离子度、分子量的测定及红外光谱表征,分析其对制胶废水处理的效果。[结果]制备CPAM的最佳工艺为m(丙烯酰胺)∶m(甲醛):m(二甲胺)=20∶15∶11、反应温度为35℃、反应时间为6 h、引发剂(亚硫酸氢钠和过硫酸铵)质量分数是0.4%;随高聚物的分子量和阳离子度增大,制胶废水絮凝效也增强;分子量检测并结合红外谱图表明由丙烯酰胺、二甲胺等在试验条件下合成了阳离子聚丙烯酰胺。[结论]CPAM对制胶废水有很好的絮凝效果。     

小麦叶片中1种降解Rubisco大亚基的蛋白酶鉴定

[目的]探明小麦叶片衰老过程中1种降解1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(ribulose 1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase,Rubisco)大亚基蛋白酶的生化特性.[方法]通过天然梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳后切胶回收的方法获得Rubisco全酶,采用离子交换层析、非完全变性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和切胶回收蛋白等方法分离目的蛋白酶,并采用含明胶的聚丙烯酰胺凝胶电泳研究其生化特性(主要是最适pH、最适温度、热稳定性、蛋白酶类型等).[结果]切胶回收的Rubisco全酶样品中存在降解大亚基的蛋白酶.在Mono-Q离子交换层析条件下,该蛋白酶与Rubisco不易分离.利用非完全变性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离出这种降解大亚基的蛋白酶;在聚丙烯酰胺凝胶中,该蛋白酶相对分子质量大于大亚基相对分子质量,位置在大亚基上方,其余部分没有检测到蛋白酶活性.该酶的最适温度为60℃;最适pH值为7.0,在pH 5.0～ 8.0均表现出较高的活性;该酶热稳定性一般,在50℃以上几乎完全丧失其活性;丝氨酸蛋白酶抑制剂AEBSF[4-(2-Aminoethyl) benzenesulfonyl fluoride hydrochloride]可以完全抑制蛋白酶活性,金属蛋白酶抑制剂1,10-phenanthroline可以部分抑制该蛋白酶的活性,酸性蛋白酶抑制剂pepstatin、半胱氨酸蛋白酶抑制剂E-64[transepoxysuccinyl-L-leucylamido(4-guanidino)butane]、金属蛋白酶抑制剂EDTA(ethylene diamine tetraacetic acid)和EGTA[ethylenebis (oxyethylenenitrilo) tetraacetic acid]以及丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF(phenylmethanesulfonyl fluoride)不抑制该蛋白酶的活性.[结论]在切胶回收的Rubisco全酶中发现了1种可以降解Rubisco大亚基的蛋白酶,其可能是1种需要金属离子的丝氨酸型蛋白酶.     

SEC-MALLS-RI体系测定魔芋胶分子结构特性的研究

[目的]用SEC—MAILS—RI系统测定魔芋胶的分子结构。[方法]采用凝胶渗透色谱（SEC）、多角度激光光散射（MALLS）与示差折光检测仪（RI）联用技术系统测定魔芋胶的分子量、分子量分布、分子旋转半径（RMS）及其构象。[结果]魔芋胶的分子结构特性是：重均分子量（Mω）=1．040×10^6g／mol,数均分子量（Mω）=9．395×10^6g／mol,z-均分子量（Mω）=1．329×10^6g／mol;数均旋转半径（Rn）=11O．5nm,重均旋转半径（Rω）=115．9nm,z-均旋转半径（Rz）=129．6nm;分散度分别是Mω／Mn．=1．107和Mz／Mn=1．414。分子旋转半径RMS与分子摩尔数之间的关系曲线斜率为0．40±0．00,表明魔芋胶是一个高度紧密且具有分支结构的聚合物。[结论]建立了测定聚魔芋胶分子量及其分布的激光光散射法,结合凝胶渗透色谱,能在较大范围内准确测量聚合物的绝对分子量,且试验误差较小,重现性好。     

5种魔芋部分生物学特性比较研究

[目的]比较分析不同品种魔芋(Amorphophallus konjac)的部分生物学特性,为魔芋资源的综合利用以及亚热带低海拔地区魔芋大规模种植提供科学依据和理论基础。[方法]通过田间对比试验,对5种魔芋[湘芋一号(湖南)、白魔芋(云南)、花魔芋(湖北)、野生种L-01、野生种M-01]在亚热带低海拔地区的生育期、植株性状、块茎形状、抗性以及产量等进行比较。[结果]这5种魔芋在株高、叶柄、叶片、生育期、产量、生长系数、抗逆性以及块茎品质上均存在较大差异。其中新品种湘芋一号的抗病性、抗逆性最强,产量最高;L-01次之;花魔芋在低海拔地区高温季节患软腐病严重;白魔芋生长缓慢,但其生长系数最大;M-01出芽率低,抗逆性差。[结论]湘芋一号魔芋值得在亚热带低海拔地区进行推广种植。     

仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳体系的优化

[目的]优化仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳体系。[方法]以25份仁用杏和3份食用杏为材料,利用微卫星标记结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术筛选出多态性高、可重复的SSR位点。并比较不同因子对电泳体系的影响,探索仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系。[结果]仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系为：聚丙烯酰胺凝胶的浓度为6%,丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为29∶1,1000V下电泳2～3h,0.1%AgNO3染色15min后显影。[结论]该优化体系为仁用杏资源微卫星标记遗传分析奠定了技术基础。     

仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳体系的优化

[目的]优化仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳体系。[方法]以25份仁用杏和3份食用杏为材料,利用微卫星标记结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术筛选出多态性高、可重复的SSR位点。并比较不同因子对电泳体系的影响,探索仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系。[结果]仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系为：聚丙烯酰胺凝胶的浓度为6%,丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为29∶1,1000V下电泳2～3h,0.1%AgNO3染色15min后显影。[结论]该优化体系为仁用杏资源微卫星标记遗传分析奠定技术基础。     

魟鱼软骨多糖的聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别

[目的]用聚丙烯酰胺凝胶电泳对魟鱼软骨多糖（RCG）进行定性鉴别。[方法]利用纯化RCG,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。[结果]RCG经纯化,基本实现了多糖的分离;根据聚丙烯酰胺凝胶电泳迁移率,可明显鉴别出魟鱼RCG。[结论]该法重现性较好,简单易行,可用于魟鱼RCG的定性鉴别。     

魔芋种植需肥规律研究

[目的]研究魔芋种植需肥规律,为魔芋种植生产提供科学施肥依据。[方法]通过田间试验,研究不同施肥方式及施肥量对魔芋农艺性状及产量性状的影响。[结果]单纯施用有机肥或不含大量元素的无机矿物肥,魔芋球茎膨大倍数和产量增长倍数低;施用速效氮肥可增加魔芋球茎膨大倍数,但同时也增加其发病率,最终产量偏低;合理施用控释肥可降低魔芋发病率并增加其球茎膨大倍数,从而增加产量。[结论]魔芋种植生产中提倡有机肥和无机控释肥(N∶P_2O_5∶K_2O=12%∶10%∶18%)配合施用,依据土壤肥力可一次性作基肥施入有机肥22 488~29 985 kg/hm~2、控释肥600~900 kg/hm~2。     

N,N-二亚乙基双丙烯酰胺与魔芋葡甘聚糖接枝共聚反应的研究

[目的]为了进一步开发利用魔芋资源,改善其黏度及水溶性。[方法]硝酸铈铵引发魔芋葡甘聚糖与N,N-二亚乙基双丙烯酰接枝共聚,并对接枝共聚物的部分性质进行研究。[结果]接枝共聚反应最佳条件为:N,N-二亚乙基双丙烯酸胺浓度1.5 mol/L,硝酸铈铵浓度8.0 mmol/L,反应温度60℃,反应时间2.5 h。[结论]接枝共聚物的水溶性及溶液黏度增强,可用作工业增稠剂和上浆剂。     

基于增粘抗温的魔芋粉-丙烯酰胺接枝共聚改性研究

[目的]合成性能优良的油井压裂胶凝剂。[方法]以高锰酸钾-硫脲为引发剂对魔芋粉与丙烯酰胺进行接枝共聚反应,研究引发剂量、接枝单体浓度、氢离子浓度、反应温度及时间对接枝率的影响,确定魔芋粉接枝丙烯酰胺的最佳反应条件。[结果]改性后产品的粘度增大,交联时间缩短,抗温性增强。以高锰酸钾-硫脲为引发剂引发魔芋粉接枝丙烯酰胺的最佳条件为:10.0 g魔芋粉溶于50 ml60%乙醇水溶液中,40℃溶胀30 min,硫脲、高锰酸钾物质的量比0.5∶1.0,硫脲浓度5 mmol/L,丙烯酰胺浓度1.41 mol/L,H+浓度0.02mol/L,60℃反应3 h,该条件下接枝率达93.68%,最大粘度为351.58 mPa.s。[结论]该研究为石油开采业中胶凝剂的改进提供了依据。     

亲水胶体相互作用的研究

通过研究10种多糖亲水胶体各自特性以及相互之间的作用，发现部分亲水胶体之间具有协同作用，黄原胶与魔芋胶在一定比例范围内复配能协同增稠，胶凝，当ρ（黄原胶）：ρ（魔芋胶）为8：2时，凝胶强度最大，卡拉胶与魔芋胶能协同胶凝形成韧性极强的凝胶，瓜尔豆胶与黄蓍胶能协同增稠，当ρ（瓜尔豆胶）：ρ（黄蓍胶）为7：3时，协同增稠效果最佳。     

40％福美双·萎锈灵种子处理悬浮剂（FS）的研制

[目的]研制40％福美双·萎锈灵种子处理悬浮剂。[方法]按拟定配方制备种子处理悬浮剂,对影响其质量的分散剂、成膜剂、防冻剂、增稠剂、消泡剂和染色剂进行筛选。在该基础上得到了最佳配方,并对按最佳配方制备的样品进行了质量测定。[结果]经初步筛选,分别添加2％MorwetIP与3％Morwet D-425、10％成膜剂B、5％乙二醇、0．2％黄原胶和0．3％硅酸铝镁、0．1％SAG-630、0．4％玫瑰精时,制备的样品效果较好。确定的最佳配方为20％福美双、20％萎锈灵、2％MorwetIP、3％Morwet D-425、0．2％黄原胶和0．3％硅酸铝镁、5％乙二醇、10％成膜B、0．4％玫瑰精、水补足100％,研磨时间为2．5h。该条件下制成的产品各指标均合格。[结论]确定了40％福美双·萎锈灵种子处理悬浮剂的最佳配方。     

保健型魔芋珍珠奶茶的研制

[目的]研究制作魔芋珍珠奶茶的最佳配方。[方法]采用单因素试验和正交试验,考察淀粉用量、魔芋粉用量、海藻酸钠浓度、乳酸钙用量对魔芋珍珠品质的影响;采用正交试验考察奶液、茶汁、魔芋粉和白砂糖添加量对魔芋珍珠奶茶品质的影响。[结果]魔芋珍珠的最佳配方为淀粉用量10 g,魔芋粉用量4%,海藻酸钠浓度0.4%,乳酸钙用量0.10%;魔芋珍珠奶茶的最佳配方为奶液用量50%、茶汁用量20%、白砂糖用量5%、魔芋粉用量为0.20%。[结论]该研究可为魔芋珍珠奶茶的生产和加工提供理论依据。     

20％噻虫嗪油悬剂的研制

[目的]研制20%噻虫嗪油悬剂。[方法]采用湿法研磨工艺配制了20%噻虫嗪油悬浮剂,对其配方中的分散介质、乳化剂、润湿分散剂、增稠剂进行了筛选,并对该制剂进行了理化性能测定。[结果]20%噻虫嗪油悬剂的最佳质量配比为:噻虫嗪原药20.00%,脂肪酸甲酯71.30%,OP-4 0.40%,农乳500#3.00%,EC80 3.00%,黄原胶0.30%,白炭黑2.00%。该制剂外观无明显分层,水中分散性良好,各项指标均符合油悬浮剂的相关标准。[结论]按该配方配制的20%噻虫嗪油悬浮剂工艺简单、对环境污染小,具有较好的市场开发前景。     

KGM/XG复合凝胶的制备及性能研究

[目的]确定KGM／XG复合凝胶的最佳合成条件。[方法]以魔芋葡甘聚糖（KGM）和黄原胶（XG）为主要原料合成了生物可降解复合凝胶KGM／XG,探讨了KGM和XG的共混比例及反应温度对凝胶平衡溶胀比和凝胶强度的影响。[结果]KGM／XG复合凝胶的溶胀比在溶胀初期增加很快,随着溶胀时间的延长,溶胀比增加变慢,最后达到平衡;凝胶的平衡溶胀比随着反应温度的升高逐渐增加,而KGM含量对凝胶平衡溶胀比影响不大;凝胶强度随XG含量的增加和反应温度的升高逐渐增加,当XG含量为70％、反应温度为75℃时,凝胶强度最大。[结论]KGM／XG复合凝胶的最佳合成温度为75℃,XG的适宜含量为70％。     

不同产地魔芋中Cr(Ⅵ)含量的测定

[目的]测定不同产地魔芋中Cr（Ⅵ）含量。[方法]在阳离子表面活性剂溴化十六烷基三甲铵（CTMAB）存在下,利用邻羟基苯基荧光酮（o-HPF）与Cr（Ⅵ）的显色反应对Cr（Ⅵ）进行测定。[结果]在pH值5.4的六次甲基四胺-HCl缓冲溶液条件下,o-HPF与Cr（Ⅵ）、CTMAB形成三元络合物,其最大吸收峰位于555 nm波长处,表观摩尔吸光系数ε=9.672×10^4L/（mol·cm）。络合物中Cr（Ⅵ）∶o-HPF=1∶2。Cr（Ⅵ）的含量在0-5μg/10 ml范围内符合比尔定律。分析得长阳青岗坪村、秭归赵家山村、秭归白鹤洞村中Cr（Ⅵ）含量分别为0.609、1.839、0.800μg/g。[结论]拟定方法可用于不同产地魔芋中Cr（Ⅵ）含量的测定。     

魔芋DNA快速提取新方法及ISSR-PCR扩增（摘要）

[目的]研究魔芋DNA的提取方法。[方法]采用CTAB、SDS及新改良的方法提取魔芋总DNA,通过分光光度计检测、电泳检测及ISSR-PCR检测方法进行比较分析。[结果]采用新改良的方法得到的DNA纯度及产量均较高,适于魔芋DNA的快速提取;以其为模板进行ISSR-PCR扩增,条带清晰,可获得较好的结果。新改良的方法与常规的SDS及CTAB方法相比,有以下优点：①效率高。运用冷冻研磨仪进行研磨,克服了研磨困难问题,节约液氮,且研磨效率大大提高,研磨时间短,褐变较少,1个人即可同时大批量进行提取;②提取质量高。在提取液中加入高浓度的PVP、β-巯基乙醇及KAc,有效去除了多酚和多糖等次生物质,检测结果DNA条带清晰,且无拖尾,更有利于大规模样本DNA提取;③用材少。需要的魔芋组织量少,适宜对较为珍贵的材料进行DNA提取,从而进行分子标记辅助育种、群体遗传多样性分析和种芋纯度鉴定的研究。[结论]为大规模提取高质量的魔芋DNA奠定基础,也为进一步研究魔芋的遗传多样性提供了分子依据。     

魔芋胶对猪肉肌原纤维蛋白凝胶特性和保水特性的调控机制:基于相分离行为和水相稳定

【目的】研究魔芋胶对猪肉肌原纤维蛋白微观结构和相分离结构的影响,进而阐释魔芋胶对肌原纤维蛋白凝胶特性和保水特性的调控机制,为魔芋胶在低脂香肠中的应用提供理论支撑。【方法】试验以添加不同比例魔芋胶-肌原纤维蛋白为模拟体系,测定模拟体系的质构和发生断裂形变时的应力应变、复合凝胶的水分分布和持水力,观察魔芋胶和肌原纤维蛋白的相分离行为以及肌原纤维蛋白凝胶网络的微观结构。【结果】当魔芋胶的添加比例<0.8%时,随着添加比例的提高,复合蛋白凝胶的凝胶强度、储能模量终值和发生断裂形变时的应力分别显著提高到179.21 g、1 192 Pa和9 139.37 Pa(P<0.05)。当魔芋胶添加比例≥0.8%时,随着添加比例的提高,复合蛋白凝胶的凝胶强度、储能模量、断裂形变时的应力和应变分别显著降至83.03 g、566 Pa、4 964.07 Pa和0.64(P<0.05)。低场核磁结果显示在魔芋胶添加比例<0.8%时,复合凝胶体系不易流动水的弛豫时间和自由水所占百分比随添加比例的提高显著降低（P<0.05）,而不易流动水所占百分比显著提高（P<0.05）,同时复...