猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗的研究

将广西本地分离并筛选的猪繁殖与呼吸综合征病毒株通过细胞增殖，收获感染细胞培养物，经甲醛灭活疫苗，以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗。疫苗物理性状稳定良好，接种猪无不良反应，疫苗免疫原性良好。     

猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫效果观察

猪繁殖与呼吸综合征（ＰＲＲＳ）是９０年代中期在我国流行的一种新的传染病,可引起母猪流产、死胎、弱仔及木乃伊等繁殖障碍和仔猪呼吸道症状,已造成严重经济损失。目前,在美洲国家主要应用活疫苗预防本病,欧洲国家则以灭活疫苗预防本病,并取得一定防制效果［１,２］。本研究则对南京农业大学研制的ＰＲＲＳ灭活疫苗进行了免疫效果观察,现报道如下。１　材料与方法１－１　ＰＲＲＳ灭活疫苗南京农业大学动物医学院研制提供,批号９８１２、９９０１、９９０２。１－２　ＥＬＩＳＡ抗体检测用美国ＩＤＥＸＸ公司生产的ＰＲＲＳＥＬ…     

猪繁殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗的免疫效果研究

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍,仔猪呼吸系统症状和高死亡率为特征的传染病.本研究用PRRSV SY株和美洲型代表株VR2332制备成油乳剂灭活疫苗,同时选用2种商品化PRRS油乳剂灭活疫苗(CH-1a株和SD1株),在曾发生过PRRS流行的某猪场进行4种疫苗的免疫试验.使用美国IDEXX公司的试剂盒检测血清中的PRRSV抗体效价,并用XCHeK软件系统处理数据.免疫试验结果显示,一免后第6组(CH1-a株)产生的抗体效价较其它组高;第3组和第4组(VR2332株)在二免后抗体效价较一免有小幅升高.对免疫试验的结果分析显示,接种灭活疫苗后抗体效价未达到预期的水平,其中具体的影响因素或工艺问题尚需要进一步探讨.此外,IDEXX公司的PRRSV试剂盒不能区分野毒抗体和疫苗毒抗体,这也可能是影响测定实际抗体效价的凶素之一.     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒YA株的分离鉴定及动物回归试验

广东省某猪场暴发以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染病.采集该猪场濒死猪的肺脏,接种Marc-145细胞,产生典型的细胞病变,收集病毒液并命名该病毒为PRRSV YA株.实时荧光RT-PCR试验显示YA株是基因缺失型变异株.扩增YA株的Nsp2基因的部分序列并进行核苷酸克隆、测序,结果显示Nsp2基因缺失第481位和第532～560位氨基酸.扩增Gp5基因序列并测序,绘制遗传进化树,结果显示YA株属于美洲型毒株,与其他7株已发表的高致病性PRRSV同源性达98.8%以上.用YA株病毒接种4头仔猪,其发病率和死亡率分别为100%(4/4)和75%(3/4).     

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒Nsp2基因缺失株Jiangxi-3灭活疫苗免疫效果评价

将猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)Nsp2基因缺失株Jiangxi-3的第9代病毒(Jiangxi-3F9)按常规方法制成油佐剂灭活疫苗,经肌肉注射免疫PRRSV和猪圆环病毒(PCV2)抗原与抗体均为阴性的60日龄健康猪,免疫组分别于初次免疫第21和28天、二次免疫第28天(即初次免疫第28天加强免疫1次)用200LD50的Jiangxi-3 F9进行攻毒,同时各组均设立对照组。通过试验动物体温变化、临床症状、血清PRRS抗体和抗原定期检测结果评价灭活疫苗的免疫效果。结果表明,初次免疫第21和28天免疫组攻毒后体温仍然明显升高,而二次免疫第28天免疫组攻毒后体温升高不明显,最高体温约40℃。初次免疫21-28 d免疫组特异性抗体水平持续升高,初次免疫第21天与第28天抗体水平差异显著(0.01P0.05);二次免疫后免疫组抗体水平仍持续升高,第28天可达3.105±0.125,二次免疫第28天与初次免疫28天抗体水平差异显著(0.01P0.05)。初次免疫第21天和第28天免疫组攻毒后仍能在血清中检出PRRSV抗原,仍表现不同程度的临床症状,而二免第28天的免疫组攻毒后其PRRSV抗原检出率、发病率、死亡率均为0。表明初次免疫第28天加强免疫一次比免疫一次效果好。     

猪繁殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗的免疫效力与攻毒保护试验

本研究选用PRRS灭活疫苗进行了猪免疫效力与攻毒保护试验,证明本疫苗对免疫的猪可产生良好的保护效果.     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗佐剂研究进展

疫苗免疫是预防和控制传染病的主要措施,但对于猪繁殖与呼吸综合征,疫苗免疫存在免疫效率低与安全性差的问题,效果并不理想。因此,如何在安全剂量下提高动物机体的免疫力,成为疫苗研究的热点之一。试验证明细胞因子、化学试剂和微生物产物等几种免疫佐剂可以增强猪繁殖与呼吸综合征疫苗的免疫效果。在研究的9个疫苗佐剂中,IL-2、IL-12、IFN-α、poly IC和poly ICLC、CpG ODN等能增强猪繁殖与呼吸综合征疫苗的细胞免疫效应;CpG ODN和霍乱毒素能显著提高猪繁殖与呼吸综合征疫苗的抗体产生水平;IL-2和CpG ODN在临床实验中能增强疫苗对实验动物的保护,是最具潜力的免疫佐剂。     

猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗(NVDC-JXA1株)对仔猪免疫效果评价

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）,又称猪蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种传染性疾病。母猪表现为流产、早产、死产、木乃伊胎及弱仔等,仔猪和育肥猪则表现为呼吸困难。仔猪发病率和死亡率极高,对养猪业构成了重大危害。特别是近一年来高致病性蓝耳病的暴发,给我国养猪业带来了前所未有的惨重损失。然而药物治疗该病几乎无效,疫苗免疫接种是目前防治该病的主要手段,     

猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗抗原病毒含量测定对比试验

在猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗抗原病毒含量测定对比试验中发现:用方瓶传代与用转瓶传代的Marc-145细胞所测的病毒含量差别很小,用营养液加8%蓝耳病专用血清所测的病毒含量比加8%普通血清的高,用营养液加8%普通血清所测的病毒含量比不加血清的高,分别用冻融2～5次的猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗抗原在同样条件下测定其病毒含量,结果差别很小。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒NADC30-like毒株的分离鉴定

对河南漯河地区某养殖场检出的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性病料进行处理,接种到原代猪肺泡巨噬细胞中,经细胞盲传成功分离出1株PRRSV毒株,命名为HeNLH2017株,并测定了该分离株在原代猪肺泡巨噬细胞上的生长曲线。为进一步分析该分离株的遗传进化特点,扩增测定了ORF5基因和部分Nsp2基因的核酸序列。核酸同源性分析显示,该分离毒株ORF5基因和Nsp2序列与NADC30毒株同源性最高,分别为93.4%和93.8%。遗传进化树分析显示,该分离株与我国2013年以来流行的NADC30-like(Lineage1)毒株处于同一进化分支。氨基酸序列比对分析显示,ORF5基因和Nsp2序列与NADC30-like毒株具有相似的遗传变异特点,且Nsp2序列存在特征性的131个不连续的氨基酸缺失。成功分离到1株NADC30-like毒株,有助于进一步认识NADC30-like毒株在河南地区的流行情况和临床致病特点。     

两株类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)又称为"猪蓝耳病",是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的猪传染性疾病。本研究将采集到的2份疑似患有PRRS的流产胎儿的肺组织研磨后离心,取上清液接种猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)盲传3代。通过RT-PCR方法和间接免疫荧光方法,对组织样品及细胞培养物进行了鉴定和分型。结果显示本研究成功从2份样品中分离到了类NADC30,且该毒株可以在PAM细胞上增殖。该研究结果为研究类NADC30毒株的重组机制、致病情况及研制预防疫苗提供参考。     

猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗的应用

<正>1猪繁殖与呼吸综合征的发生历史1987年初首次在美国记录到,同年秋天,加拿大的安大略州和魁北克州也发生该病。1990/1991年的冬季,德国共有3098个猪场暴发该病。     

猪繁殖与呼吸综合征类NADC30株的诊断与防控

山西地区某规模化猪场发生疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),采样送至华中某检测机构化验,对该毒株Nsp2区418 bp和508 bp的片段进行扩增分析,遗传分析ORF5基因序列、与其他参考毒株的同源性并构建进化树,同时,猪场采取了积极的综合防控、加强饲养管理、改善猪舍环境控制系统、药物保健等措施。检测结果显示,该山西猪场的分离株为NADC30-like PRRSV毒株,现场所采取的防控手段对阻断该毒株的流行起到一定的作用。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒(平谷株)的分离和鉴定

2010年10月,北京某猪场发生以流产、呼吸困难、全身发紫、死亡为特征的流行性传染疾病,采集发病猪的肺脏、脾脏、淋巴结等研磨成组织混悬液,接种Marcl45细胞,该分离物能在Marc-145细胞上增殖并产生特征性的细胞病变(CPE)。收取细胞病毒液并提取总RNA,采用RT-PCR方法,利用PRRSV引物扩增出了目的基因片段,经过测序分析证实具有PRRSV特征。根据流行病学、临床特征、病毒分离、RT-PCR等,最终确定该分离株为猪繁殖与呼吸综合征病毒。     

1株NADC30-like重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及遗传变异分析

为研究山东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行病毒株的遗传变异情况,本研究从山东省威海市某疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病猪场采集的猪肺脏组织中分离到1株PRRSV,命名为SDwh,并对其进行了全基因组序列测定、遗传演化分析和重组分析.结果显示:该病毒株在Marc-145细胞上生长良好,可见明显细胞病变;全基因组演化分析和同源性比对分析结果显示,SDwh株与美国病毒株NADC30和中国的NADC30-like位于同一分支;与北美病毒株NADC30的同源性最高,为93.1%;与我国分离的NADC30-like病毒株CHsx1401、JL580的同源性分别为91.1%和88.4%;与北美经典病毒株VR2332、中国HP-PRRSV JXA1和HuN4的同源性均为85.3%;与欧洲型病毒株Lelystad-virus(LV)同源性最低,为60.6%.与VR2332相比,Nsp2氨基酸序列比对结果显示,SDwh株存在NADC30-like病毒株典型的131个不连续氨基酸的缺失,同时在584~585位缺失2个氨基酸;GP5氨基酸序列比对结果显示,SDwh在GP5抗原表位上有氨基酸的突变.全基因组重组分析结果显示,SDwh株是一株重组病毒株,为NADC30与JXA1-P80的重组病毒,潜在的重组位点位于Nsp2中(2066 nt).本研究结果为PRRSV流行株的重组、演化分析和防控提供借鉴意义.     

一株类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒的全基因组序列分析

为监测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的基因变异情况,采用RT-PCR方法对某猪场疑似患有猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的猪组织样品进行鉴定,测序获得全基因,并对该毒株的NSP2基因缺失特征同源性和遗传进化及重组情况进行分析。结果显示:该猪场感染猪体的病原体为PRRSV,该毒株被命名为180404-2fei;180404-2fei毒株的NSP2区存在131(111+1+19)个氨基酸的不连续缺失,与报道的类NADC30毒株缺失特征一致;180404-2fei的NSP2基因与NADC30毒株核苷酸和氨基酸同源性分别为92.2%和90.1%,180404-2fei毒株的ORF5基因与NADC30的核苷酸及氨基酸序列同源性分别为93.5%和92.0%;遗传进化和重组分析结果表明,180404-2fei毒株属于NADC30-Like亚群,可能是由NADC30与HP-PRRSV重组而来。本研究通过对一株类NADC30 PRRSV的全基因组序列进行分析,为研究PRRSV的遗传变异和PRRS的防控提供了参考依据。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(HuN4-F112株)对类NADC30 PRRSV免疫保护效果的评价

类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)已成为我国PRRSV的主要流行株,为了评价当前商品化疫苗对类NADC30 PRRSV的免疫保护效果,本研究将12头6周龄仔猪随机分为3组,免疫组和攻毒对照组各5头、空白对照组2头,免疫组肌注高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(HuN4-F112株)105.0 TCID50...     

猪繁殖与呼吸综合征 病毒类NADC30毒株的新近流行

猪繁殖与呼吸综合征是严重危害养猪生产的病毒性传染病.自20世纪90年代中期在我国发生和流行以来,已经20余载.据田间流行优势毒株的不同,可大致分为三个阶段:经典毒株流行阶段(1995—2006年)、 高致病性变异株流行阶段(2006—2013年)和新近的类NADC30毒株流行阶段(2013年至今).2013—2014年间与美国分离株NADC30亲缘性较高的一类PRRSV毒株开始在我国暴发流行,其具有与NADC30和MN184等谱系1(lineage 1)毒株相同的nsp2编码区缺失模式.致病性分析及疫苗保护试验结果表明,其致病性介于高致病性毒株与经典株之间,目前商用疫苗对其保护效果不佳.且类NADC30毒株易与其他PRRSV毒株发生重组,产生新的变异株.类NADC30毒株的广泛流行,以及相关重组毒株的叠现,进一步增加了PRRS疫病防控的难度.     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究现状

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种对养猪业危害严重的传染病,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)为有囊膜的单股正链RNA病毒,且具有高度的变异性,有美洲型和欧洲型两个血清型。猪肺泡巨噬细胞(PAM)、恒河猴胎肾细胞系MA-104及源于MA-104的传代细胞系(如Marc-145、CL-2621、HS.2H和CRL-1171)对PRRSV敏感。预防该病的常规疫苗有灭活疫苗和弱毒疫苗两种。通常以特定种毒在适当细胞系中培养增殖,经灭活或致弱,加入佐剂制得相应疫苗。灭活疫苗交叉保护性差,但使用安全;弱毒疫苗抗体产生快、持续时间长、保护力强,但源毒能在猪群中持续存在而有安全隐患。