改造溶菌酶抑菌活性研究进展

溶菌酶是一种天然抗菌剂,能直接水解细菌细胞壁发挥抑菌作用,但溶菌酶仅对革兰氏阳性菌有抑菌活性的特性限制了其在食品和养殖业中的应用。溶菌酶是一种小分子蛋白质,越来越多的研究通过对溶菌酶进行改造和修饰提高了其抑菌活性并扩大了抑菌谱。笔者主要综述了溶菌酶在使用温度、pH、金属离子、化学修饰、与纳米材料结合、与其他溶液复配和利用基因工程技术等条件改造后,抑菌活性均有不同程度的提高,特别是提高了对革兰氏阴性菌的抑制活性。可通过以下几种改造方式提高溶菌酶的抑菌活性：(1)通过升高温度破坏酶分子内的非共价结合;(2)通过降低pH影响酶的分子空间结构;(3)加入金属离子;(4)对酶分子侧链基团或化学基团进行化学修饰;(5)使用纳米材料负载溶菌酶并固定制成纳米复合材料以破坏细胞壁;(6)利用溶菌酶和其他抑制细菌生长的溶液进行混合制得复合液;(7)使用基因重组技术构建新的溶菌酶表达载体。研究改造溶菌酶对于基础科学的发展及溶菌酶替代抗生素应用于水产和畜禽养殖、开发绿色天然食品防腐剂具有重要指导意义。     

蛋清溶菌酶改性研究进展

溶菌酶是天然抗菌剂,在蛋清中含量最为丰富,主要作用于革兰氏阳性菌,对革兰氏阴性菌几乎不产生作用。为了扩大其抗菌谱,学者进行了溶菌酶改性研究。文章概述了蛋清溶菌酶的结构特点和抗菌机理,并综述了国内外对溶菌酶进行改性的方式及其可能抗菌机理,展望了溶菌酶改性的良好发展前景。     

禽蛋溶菌酶的制备及改性研究进展

溶菌酶是一种专门作用于微生物细胞壁的糖苷水解酶,是天然防腐剂,广泛存在于自然界中,特别是禽蛋中。但是天然溶菌酶是一种非广谱抗菌剂,主要作用于革兰氏阳性菌,而对革兰氏阴性菌几乎没有作用,近年来,很多学者研究了对溶菌酶的改性方法,使其达到对革兰氏阴性菌的抑制作用。本文综述了禽蛋溶菌酶的结构特点、抗菌机理,重点介绍了禽蛋溶菌酶的分离纯化方法以及国内外对溶菌酶进行物理、化学、生物改性的研究进展,并展望了禽蛋溶菌酶改性的发展前景。     

东亚飞蝗抗菌活性物质的萃取及抗菌效应研究

试验研究东亚飞蝗成虫抗菌活性物质的萃取参数与抑菌效应。采用针刺蘸大肠杆菌菌悬液方法,以抗菌活性为指标,用杯碟法测定临床多重耐药菌的抑菌活性,确定最佳诱导时间,初步研究抗菌谱。结果表明,东亚飞蝗抗菌活性物质粗提液对革兰氏阳性菌(如金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)或革兰氏阴性菌(如大肠杆菌、水稻白叶枯病原菌)均有一定的抑制作用。其抗菌谱为:金黄色葡萄球>水稻白叶枯病原菌>枯草芽孢杆菌>大肠杆菌,其中以对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最明显。抗菌活性物质浓度为11.782mg/mL,蝗虫抗菌活性物质收率为8.623%。经纯化后的抗菌活性物质增强对革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌的抑制作用。采用针刺蘸大肠杆菌方式可成功诱导东亚飞蝗抗菌物质的表达,尤其以针刺蘸大肠杆菌诱导后饲养24h得到的抗菌活性物质抑菌活性最强。结果表明东亚飞蝗虫体内含有抗菌活性物质可被诱导表达,其抗菌作用机理有进一步研究。     

沙门菌噬菌体溶菌酶LysSHWT1的制备及抑菌活性分析

近年来抗生素的不合理使用导致细菌耐药性问题逐渐加剧,开发新型有效的抗菌制剂迫在眉睫.噬菌体及其溶菌酶具有特异性强、抗菌效力强、安全性高、筛选周期短、绿色安全及不易产生耐药等优势,可作为一种天然抗菌剂防控细菌病.为了分析广宿主谱沙门菌噬菌体SHWT1的溶菌酶抑菌活性,本文将沙门菌裂解性噬菌体SHWT1的溶菌酶lys基因克...     

茶树油制剂对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的体外抑菌试验

确定茶树油制剂的最低抑菌浓度(MIC),为茶树油制剂作为饲料添加剂提供重要的参考依据,使茶树油有望被开发成为一种可缓解全球"抗菌药物危机"的天然抗菌剂。本试验以茶树油作为抑菌剂,以金黄色葡萄球菌和沙门氏菌分别作为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的代表,进行体外抑菌试验,测定混合抑制培养后的光密度值(OD600nm)并对其进行分析。研究发现茶树油制剂对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌均具有显著的抑菌效果(P0.05),且对二者的抑菌效果一致,在二者浓度为106cfu/ml时的最低抑菌浓度(MIC)相同,均是0.1×2-1×2%,茶树油制剂对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有显著的抑菌效果(P0.05)。     

盐酸沙拉沙星对禽猪致病菌的体外抗菌作用

本试验选用15株禽常见致病菌，用两倍试管稀释法对盐酸沙拉沙星进行最小抑菌浓度（MIC）测定，以给临床用药提供依据。结果表明沙拉沙星的抗菌谱广、抗菌活性强，对革兰氏阳性菌、阴性菌均有抑制作用，其中对革兰氏阴性菌尤其是对鸡大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌的作用较强。     

磺胺类药物的使用方法及注意事项

磺胺类药物是合成的抑菌药，抗菌谱广，对大多数革兰氏阳性和许多革兰氏阴性细菌有效。但个别菌种的菌株可能对其耐药。磺胺类药物通过竞争性抑制叶酸代谢循环中的对氨基苯甲酸而抑制细菌性增殖。细菌对各种磺胺类药物的敏感性都相同，对1种磺胺类耐药意味着对所有的磺胺类药物耐药。     

溶菌酶及其在畜牧业中的应用

溶菌酶是一种广泛存在于生物体内,专一性地作用于微生物细胞壁的盐基水解蛋白酶,其具有无毒、无害、安全性高等特点。本文主要介绍了溶菌酶的基本特性、抑菌机理以及在畜牧业中的应用。     

溶菌酶在养殖中的应用

正溶菌酶(Lysozyme,EC3.2.1.17)存在于哺乳动物的泪液、唾液、血浆、乳汁、胎盘、体液及组织细胞内,其中以蛋清中含量最丰富。溶菌酶对革兰氏阳性菌有抑制作用,而对没有细胞壁的动物体细胞不会产生影响,因此安全性很高。溶菌酶作为抗生素的替代品,被WHO和许多国家认定为无毒、无害、无残留及安全性很高的天然蛋白质,目前已经被广泛应用于医药、食品和畜牧业等领域,2010年溶菌酶被我国卫生部批准为食品添加剂。     

牛类芽孢杆菌BD3526发酵液中抗菌物质的特性及初步分离

牛类芽孢杆菌BD3526在组合培养基中培养发酵48 h,对发酵液中的抗菌物质进行特性研究及初步分离。蛋白酶处理结果表明,牛类芽孢杆菌BD3526发酵上清液含有肽类抗菌活性物质,且具有良好的热稳定性、耐酸碱性。通过对抗菌物质特性的研究发现,其对选取的革兰氏阳性菌具有较强的抑菌活性,而对选取的革兰氏阴性菌没有抑菌活性。通过Sephadex LH-20凝胶柱层析初步分离纯化发现,牛类芽孢杆菌BD3526产生的抗菌物质与麸皮发酵液中产生的抗菌物质有所不同,表明可能有新的抗菌物质产生。     

土霉素预混剂的体外抑菌及临床疗效试验

土霉素是四环素类广谱抗生素,对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、支原体、衣原体、立克次氏体等引起的感染有疗效,也可用于治疗梨形虫病、附红细胞体病等。由于其抗菌谱广,在畜牧业上得到广泛应用[1]。大量流行病学调查资料显示,由于抗菌药     

乳酸菌培养液提高微生物溶菌酶抗菌活性的研究

为了提高微生物溶菌酶对大肠杆菌的抗菌作用,试验采用试管法和肉汤稀释棋盘法测定了微生物溶菌酶、乳酸菌培养液、乳酸菌培养液和微生物溶菌酶联合应用对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果。结果表明:乳酸菌培养液和微生物溶菌酶联合应用,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的平均抑菌浓度指数(FIC指数)分别为0.50,0.25;乳酸菌培养液和微生物溶菌酶联合应用对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌活性均为协同作用。说明乳酸菌培养液与微生物溶菌酶的联合应用提高了微生物溶菌酶的抗菌活性。     

生物防腐剂在食品工业中的应用

笔者介绍了目前应用较多的微生物防腐剂乳链球菌素、溶菌酶及那他霉素的抗菌机理、抗菌谱及其在食品工业中的应用情况,讨论了微生物防腐和保鲜剂的研究进展,并对其发展趋势进行了展望。     

不同动物源性链球菌的耐药性分析

通过形态观察、革兰氏染色及生化试验分离鉴定共获得28株猪源及牛源链球菌。采用琼脂二倍稀释法测定7种抗菌药物对28株链球菌的最小抑菌浓度（MIC）,其中绝大多数受试菌株呈多重耐药性。研究结果表明,不同动物源性链球菌对抗菌药物的抗菌谱不同,揭示的耐药规律对指导临床用药具有重要意义。     

溶菌酶在畜牧业中的应用

溶菌酶是一种无毒、无害、安全性很高的天然蛋白质,具有抗菌消炎、抗病毒、增强免疫力、防腐保鲜等多种作用。本文综述了溶菌酶的来源、种类、抑菌机理及其在畜牧生产中的应用和发展前景。     

传统乳制品中-产细菌素乳酸乳球菌的筛选

采用平板挖井扩散法对从内蒙古传统乳制品中分离鉴定的34株乳酸菌的细菌素产生特性进行研究。在排除有机酸和过氧化氢的干扰后发现，一株乳酸乳球菌CB20—2的发酵上清液对革兰氏阳性60乳酸菌和非乳酸菌显示出抑菌活性，但对革兰氏阴性菌无抑菌作用。其蛋白特性及广谱抑菌性表明乳酸乳球菌CB20—2产生的抗菌物质是一种细菌素。     

溶菌酶及其在畜牧业中的应用

溶菌酶是一种无毒、无害、安全性很高的天然蛋白质,具有抗菌消炎、抗病毒、增强免疫力、防腐保鲜等多种作用。综述了溶菌酶的来源、种类、抑菌机理及其在畜牧生产中的应用和发展前景。     

鸡输卵管表达的重组人溶菌酶的鉴定

为了对鸡输卵管特异表达载体表达的重组人溶菌酶(rhLYZ)的理化及生物学特性进行鉴定,用直接结晶法从重组载体注射鸡蛋清中提取溶菌酶,以兔抗hLYZ血清为一抗,HRP-标记的羊抗免IgG为二抗,进行Western blotting检测,结果表明表达在鸡蛋清中的rhLYZ能被hLYZ特异抗体识别;将纯化的rhLYZ和天然hLYZ在不同温度的水浴中孵育30min,用RBB-R染料标记比色法检测溶菌酶活性的变化,结果显示二者的热稳定性无显著差异;将纯化的rhLYZ和天然hLYZ用不同PH的溶液稀释,40C孵育30min后进行酶的活性测定,结果显示两者在pH3.0～11.0范围内具有活性,最强活性pH为7.0;以12种常见细菌为试验对象,用最小抑菌浓度法测定含rhLYZ蛋清和纯化rhLYZ的溶菌活性,结果显示两者对鲫鱼嗜水气单胞菌、变形杆菌、枯草杆菌、无鞭毛伤寒杆菌、白色念珠菌和柠檬色葡萄球菌具有很强的抑制作用,对痢疾杆菌、白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有较强的抑制作用,对有鞭毛伤寒杆菌和鳖嗜水气单胞菌无明显的抑制作用.这些试验结果显示,表达在重组载体注射鸡蛋清中的rhLYZ具有与天然hLYZ十分相似的相对分子质量、热稳定性、pH活性范围和溶菌谱.     

氟苯尼考对猪链球菌病的疗效试验

氟甲砜霉素（氟苯尼考，Fiorfenicol）系氯霉素族药物中的一种动物专用广谱抗生素，其结构与甲砜霉素相似，但抗菌活性、抗菌谱及不良反应方面明显优于甲矾霉素，其抗菌能力可达甲砜霉素的10倍之多。对95％的常见病原菌高度敏感，对革兰氏阳性和革兰氏阴性菌均有强大的抑制作用；速效、长效、安全可靠、残留低、无交叉耐药性、安全范围大。