斑点免疫结合试验在霉形体研究中的应用

本文报道了将斑点免疫结合试验(DIBA)用于霉形体种的鉴定,细胞培养中霉形体感染的检测和鸡胚实验感染霉形体的检测,都取得了满意的结果。应用DIBA对11种霉形体培养物和36个自感染细胞和污染疫苗中分离的霉形体的培养物进行了鉴定,结果与直接分离培养物用生长抑制试验,间接免疫荧光检测的结果完全一致。应用口腔霉形体、猪鼻霉形体、精氨酸霉形体和莱氏无胆甾体等4种霉形体的抗血清以DIBA对36株细胞培养物进行检测的结果,证明其中15株感染口腔霉形体,1株感染莱氏无胆甾体,1株为口腔霉形体和莱氏无胆甾体的混合感染,与对照用的分离培养方法结果一致,还有1株用分离培养方法和DNA荧光染色证明有霉形体感染,经鉴定此株霉形体不属于此4种霉形体,故用DIBA未检出。以鸡毒霉形体和滑液霉形体实验感染鸡胚各18枚,以DIBA从这些鸡胚的卵黄液及尿囊液中可检出各自感染的霉形体种。结果说明,在霉形体研究中DIBA为一种快速、简便和特异的血清学方法。     

控制鸡霉形体病的新思路

鸡的霉形体病是由鸡败血霉形体（ＭＧ）和滑膜霉形体（ＭＳ）引起的。鸡败血霉形体主要感染鸡。火鸡,也感染其他禽类,引起呼吸道疾病。在鸡群中长期流行,使母鸡产蛋下降。因此鸡败血霉形体对家禽生产危害最大。 鸡的慢性呼吸道病（ＣＲＤ）是由败血霉形体（ＭＧ）引起的。本病全年都可发生,但以冬天和早春多发,单纯ＭＧ感染,在正常的饲养管理条件下,常不表现症状,呈隐性经过,一般只有轻度呼吸道症状,此时发病率高,死亡率在 １０％－ ３０％。当气候突变、营养不良（如维生素Ａ缺乏）、饲养密度过大、舍内氨气浓度过高、育雏舍温…     

应用聚合酶链反应检测鸡毒霉形体和滑液霉形形体的研究

利用鸡毒霉形体与滑液霉形体基因一定区域互补的序列,合成能分别对ＭＧ和ＭＳ目的基因的２对引物。和这２对引物对１０个国际标准的ＭＧ与ＭＳ菌株ＤＮＡ模板进行ＰＣＲ扩增,结果均得到与预期大小相一 的约７３２ｂｐ（ＭＧ）和２０７ｂｐ（ＭＳ）的ＰＣＲ产物。     

用种特异性DNA探针对鸡败血霉形体病田间样本的检测

用种特异性ＤＮＡ探针对鸡败血霉形体病田间样本的检测Ｍ．Ｉ．ＫｈａｎＳ．Ｈ．Ｋｌｅｖｅｎ王贵平摘译用种特异性鸡败血霉形体（ＭＧ）ＤＮＡ探针对产蛋下降和ＭＧ可疑感染鸡群进行检测，并同常规血清学的病原分离作比较，ＭＧＤＮＡ探针可在２天内清楚地鉴定出直接来自...     

鸡霉形体病的防控

禽霉形体的众多血清型中,最重要的是鸡毒霉形体(MG)、鸡滑液囊霉形体(MS)和火鸡霉形体(MM),尤其是鸡毒霉形体感染很普遍。鸡毒霉形体引发的症状主要在呼吸系统,主要病变在气管和气囊。单纯的鸡毒霉形体感染,在正常的饲养管理条件下,常     

鸡毒霉形体病研究进展

鸡毒霉形体病研究进展李自力毕丁仁（华中农业大学畜牧兽医学院，湖北武汉４３００７０）霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ）是一类缺乏细胞壁的原核生物。现已命名的禽源霉形体共有２１种［１］，最重要的三个成员是：鸡毒霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｇａｌｉｓｅｐｔｉｃ...     

鸡霉形体病与大肠杆菌病合并感染的药物选择

鸡霉形体病与大肠杆菌病合并感染的药物选择陈学周（汝州市成人农民中专河南汝州４６７５００）鸡霉形体病是由鸡败血霉形体（ＭＧ）引起的一种以呼吸罗音、咳嗽、鼻漏及气囊炎为特征的慢性呼吸道病（ＣＲＤ），常与大肠杆菌病合并感染。防治ＣＲＤ的措施包括药物治疗、免...     

应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测鸡毒霉形体和滑液霉形体抗体的研究

用 ELISA 检测鸡毒霉形体和滑液霉形体抗体,试验结果表明:用滑液霉形体抗原对人工感染的31份滑液霉形体阳性血清进行 ELISA 检测,结果全为阳性反应,用鸡毒霉形体抗原对18份鸡毒霉形体阳性血清进行 ELISA 检测也全为阳性反应;滑液霉形体和鸡毒霉形体两种抗原对20份鸡毒霉形体和滑液霉形体阴性血清的 ELISA 检测结果皆为阴性反应。符合率为100%。用鸡毒霉形体抗原对野外收集的60份鸡血清进行了检测,33份呈阳性反应,占55%;27份为阴性反应,占45%,用滑液霉形体抗原对63份鸡血清进行检测,37份呈阳性反应,占59%;26份为阴性反应,占41%。用7份人工感染的滑液霉形体阳性血清进行ELISA 与血凝抑制试验的比较结果表明:ELISA 的灵敏度比血凝抑制试验的高4—16倍。在本试验中,用霉形体的菌体抗原和用 SDS 溶解菌体后提纯的膜抗原均得到了相同的结果,本报告主要是报道菌体抗原的结果。作者同时用此法对鸡毒霉形体和滑液霉形体单克隆抗体进行检测筛选,同样取得了令人满意的结果。不足的是,在进行 ELISA 检测时,鸡毒霉形体和滑液霉形体之间存在有交叉反应。     

精氨酸霉形体和莱氏无（需）胆甾醇霉形体在鸡胚细胞内增殖的比较观察

将精氨酸霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａａｒｇｉｎｉｎｉ，简称ＭＡ）和莱氏无（需）胆甾醇霉形体（Ａｃｈｏｌｅｐｌａｓｍａｌａｉｄｅａｗｉｉ，简称ＡＬ），分别接种于鸡胚细胞，电镜下观察结果如下：（１）此２种霉形体在形态、细胞内分布、增殖形式和吞噬功能以及对培养细胞的选择性等方面是相同的；（２）此２种霉形体引起培养细胞的病理学过程不同。接种ＭＡ的鸡胚细胞，早期即出现髓膜样结构和脂质体等退行性变化，晚期在细胞质内才能见到空泡出现；而接种ＡＬ的鸡胚细胞，早期即可出现细胞质内的空泡化现象，晚期细胞质内才可见到髓膜样结构和脂质体。     

应用多重聚合酶链反应检测鸡毒霉形体和滑液霉形体的研究

根据鸡毒霉形体（ＭＧ）、滑液霉形体（ＭＳ）的基因文库,设计并合成了分别与ＭＧ、ＭＳ某段基因序列互补的两对引物,用这两对引物进行多重聚合酶链反应同时检测ＭＧ与ＭＳ。当样品中同时含有ＭＧ和ＭＳ的目的模板ＤＮＡ时,同时得到２条大小与试验设计相符的７３２ｂｐ（ＭＧ）和２０７ｂｐ（ＭＳ）的ＰＣＲ扩增带;而对其它８种禽病病原的扩增均为阴性,敏感性测定结果表明,多重ＰＣＲ技术最低能同时检出１００ｆｇ的ＭＧ、ＭＳ     

抗菌药物联合应用对霉形体的药效学研究

本研究采用试管肉汤稀释法和棋盘法测定了１７种抗菌药物单独或几种药联合对鸡败血霉形体Ｓ＿６株（ＭＧＳ＿６）的最低抑菌和最低杀菌浓度．结果表明，ＭＧＳ＿６对北里霉素、四环素、红霉素、氟哌酸等高度敏感；四环素类与ＴＭＰ联合呈现协同作用。对实验性感染ＭＧＳ＿６的病鸡进行联合用药治疗试验，初步筛选出几个有良好治疗作用的联合用药配方。本研究是对联合应用抗菌药物治疗实验性鸡败血霉形体病进行的初步探讨，对防治本病具有一定的理论与实践意义。     

用PCR和探针杂交法检测鸡败血霉形体

根据鸡败血霉形体ｆＭＧ－２核酸片断序列,设计合成了１对２５ｂｐ寡核苷酸引物,对鸡败血霉形体基因组ＤＮＡ进行扩增,均获得预期的７３２ｂｐ扩增产物,检测灵敏度为１ｂｐ;参考菌株ＤＮＡ无扩增。回收纯化琼脂糖电泳凝胶中的扩增产物,ＤＩＧ随机引物法合成核酸探讨,Ｄｏｔ－ｂｌｏｔ杂交试验,鸡败血霉形体呈阳性,检测灵敏度为１００ｐｇ;其他为阴性。对自然发病鸡群检测进一步表明,建立的ＰＣＲ和探针杂交法具有高度的灵     

鸡毒霉形体和大肠杆菌混合感染诊治技术

鸡毒霉形体和大肠杆菌混合感染诊治技术刘家彪（兰州华陇康达动物保健公司７３００６０）鸡毒霉形体（ＭＧ）单独感染一般无明显症状，当并发感染时表现呼吸罗音、咳嗽、鼻漏等症状。埃希氏大肠杆菌是早被熟知的病原菌，可引起败血症、脐炎、关节炎、眼球炎、出血性肠炎、...     

鸡源霉形体的分离和鉴定

对乌鲁木齐市2个大型鸡场鸡毒霉形体（Mycoplasma gallisepticum,MG）、滑液囊霉形体（M.synoviae,MS）感染情况用血清平板凝集试验（SPA）进行了血清抽样调查。结果表明，凝集抗体的阳性率分别为66.92%和35.90%，其中商品鸡场MG和MS的阳性率分别为82.50%和52.50%。从凝似MG、MS感染鸡的气管、肺、气囊、鼻裂和跗关节腔分离到19株分离物。经初步鉴定，分离物均为霉形体属成员。用生化和血清学及其他生物学方法，对这些分离物进行了鉴定。结果6株为MG，3株为MS，其余10株也属于霉形体。     

鸡毒霉形体控制的新动向

美国对鸡毒霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｇａｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ，ＭＧ）的控制开始于６０年代，主要是在美国农业部开始对家禽实行屠体检查后，因气囊炎导致胴体废弃率较高后进行的。此后，在火鸡和鸡育种群的ＭＧ控制方面取得了显著的进展。美国的志愿ＭＧ控制计划是...     

PCR检测鸡毒霉形体和鸡滑液囊霉形体的研究

根据禽霉形体16S rRNA的基因序列设计，合成了1对引物，用这对引物对鸡霉素形体（Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊霉形体（Mycoplasma synoviae,MS)菌株DNA进行PCR扩增，得到了与预期大小相一致的580bp的PCR产物，而这对引物对其他畜病病原DNA或RNA模板的扩增结果为阴性，PCR方法对MG和MS的最小检出量分别为2pg和3pg，应用已建立的PCR方法检测MG人工感染样品和临床样品，从人工感染样品中均检测到MG，临床样品的MG阳性检出率为10．25％，高于常规分离培养的阳性检出率。     

肉鸡霉形体与大肠杆菌混合感染及其防治

肉鸡败血霉形体（ＭＧ）与大肠埃希氏菌混合感染是目前商品肉鸡生产中最普遍的疾病之一。据报道，该病占发病肉鸡总数的５０％以上，死淘鸡占总数的４０％以上，用于防治该病的药费占总药费的４０％以上。随着近年来病毒性疾病得到一定程度的控制，此病显得更加突出，阻碍了养鸡业的发展。１　流行特点肉鸡败血霉形体感染通常命名为鸡慢性呼吸道病（ＣＲＤ），当前我国的父母代种鸡场的隐性感染率约占５０％以上，但成年鸡症状不明显，只表现产蛋量和孵化率下降。本病可垂直传播也可水平传播，商品肉鸡多在出壳前就已感染。肉鸡如单纯感染Ｍ…     

精氨酸霉形体和莱氏无（需）胆甾醇霉形体在鸡胚细胞内增殖的比较…

将精氨酸霉形体和莱氏无（需）胆甾醇霉形体，分别接种于鸡胚细胞，电镜下观察结果如下：（１）此２种霉形体在形态、细胞内分布、增殖形式和吞噬功能以及对培养细胞的选择性等方面是相同的；（２）此２种霉形体引起培养细胞的病理学过程不同。接种ＭＡ的鸡胚细胞，早期即出现髓模样结构和脂质体等退行性变化，晚期在细胞质内才能见到空泡出现；而接种ＡＬ的鸡胚细胞，早期即可出现细胞质内的空泡化现象，晚期细菌质内才可见到髓膜样     

藏鸡鸡毒霉形体的血清学调查

霉形体又称支原体 ,是一类缺乏细胞壁的原核微生物 ,分类学上属于软皮纲成员。在兽医学上是一类重要的病原微生物 ,对禽类等动物具有广泛的致病性。 2 0 0 2年 4月 ,西藏某些地区鸡发生一种以咳嗽 ,鼻炎 ,打喷嚏 ,呼吸有锣音等呼吸症状为主要特征的疾病。另外 ,还可见到鼻分泌物较多 ,部分鸡出现结膜炎 ,眼中伴有泡沫分泌物 ,产蛋量下降并有死亡现象。经血清学快速诊断为鸡毒霉形体。为了摸清鸡毒霉形体在藏鸡中的感染情况 ,我们应用血清学方法对西藏各地区的藏鸡进行霉形体检测。结果显示我区藏鸡的鸡毒霉形体感染率较高 ,对藏鸡的年龄、性…     

应用多重聚合酶链反应检测四种霉形体的研究

根据鸡毒霉形体(MG)、滑液囊霉形体(MS)、衣阿华霉形体(MI)和火鸡霉形体(MM)的基因文库，设计了4对分别与MG、MS、MI和MM某段基因序列互补的引物，用这4对引物对同一样品中的MG、MS、MI和MM的DNA模板进行多重PCR扩增。结果，均同时得到了4条特异性的大小与试验设计相符的732bp(MG)、207bp(MS)、299bp(MI)、850bp(MM)多重PCR扩增带，而对其他6种禽病病原体的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明，此多重PCR能同时检出1pg的MG、MS、MI和MM DNA模板。