多头绦虫抗原特性研究

采用等电聚集电泳（ＩＥＦ）技术,对自然感染绵羊的脑多头蚴的头节可溶性抗原、囊壁可溶性抗原和囊液抗原进行了分析,ＩＥＦ后,考马斯亮蓝Ｒ－２５０染色,扫描,结果表明,头节可溶性抗原共出现了４９个吸收峰,Ｐ＾１范围４．０４－９．９１,主吸收峰９个,其Ｐ＾Ｉ值分别为８．２３、８．０２、７．７６、７．５２、６．８５、６．５４、５．６８、５．０８和４．２３,所含蛋白总量占上样蛋白总量的９９．５％。囊壁可溶性可     

多头绦虫抗原特性的研究--脑多头蚴纯化抗原反应原性评价

脑多头蚴病是由多头绦虫的幼虫－脑多头蚴引起的危害绵羊和犊牛的一种严重的人兽共患寄生虫病。多年来,国内外兽医工作者很重视对该病的研究,在其病原、生活史、流行因素、诊断、防治等方面取得了很大进展。我们在明确了多头蚴抗原的免疫原性后［１,２］,又对抗原的纯...     

多头绦虫抗原特性的研究：原头节及其排泄分泌抗原的免疫原性

应用多头蚴原头可溶性抗原和将原头节进行体外短期短培养后获得的排泄分泌抗原，以４ｇ／Ｌ抗原量与等体积的白油－司班佐剂乳化后，按每次２ｍＬ剂量对试验羔羊进行３次免疫。于最后一次免疫后２周，攻击感染２５００个多头绦虫虫卵，攻击后２２５ｄ剖杀各组羔羊。     

多头绦虫抗原特性的研究：应用IHA观察绵羊免疫及感染后的抗体？…

为了观察绵羊用多头蚴抗原免疫及感染后的抗体消长规律,为羊脑多头蚴病的免疫预防和免疫诊断提供依据,本试验应用多头蚴原头节可溶性抗原,囊壁可溶性抗原,囊液粗抗原致敏绵羊红细胞对绵羊免疫３次及虫卵攻击感染后的血清抗体进行间接血凝试验检测。结果表明,原头节抗原免疫组,囊壁抗原免疫组,囊液抗原免疫组及原头节ＥＳ抗原免疫组在首次免疫后１周,抗体滴度迅速升高,第３次免疫后１周达到峰值,虫卵感染后开始下降,到感染     

多头绦虫抗原特性研究——多头蚴抗原等电聚焦电泳后考马斯亮蓝染色扫描分析

采用等电聚焦电泳（ＩＥＦ）技术,对自然感染绵羊的脑多头蚴的头节可溶性抗原、囊壁可溶性抗原和囊液抗原进行了分析,ＩＥＦ后,考马斯亮蓝Ｒ－２５０染色,扫描。结果表明,头节可溶性抗原共出现了４９个吸收峰,ＰＩ范围４０４～９９１,主吸收峰９个,其ＰＩ值分别为８２３、８０２、７７６、７５２、６８５、６５４、５６８、５０８和４２３,所含蛋白总量占上样蛋白总量的９９５％。囊壁可溶性抗原共出现了６１个吸收峰,其ＰＩ范围为４００～９６６,主吸收峰１０个,其ＰＩ值分别为９５９、８９９、８７９、８５１、８３７、８２３、８０２、７８３、７５２和７２９,所含蛋白总量占上样蛋白总量的９９５％。囊液抗原共出现了５２个吸收峰,其ＰＩ范围为４０１～９８０,主吸收峰３个,其ＰＩ值分别为８２３、５９４和５６８,所含蛋白总量占上样蛋白总量的９９９％。     

多头绦虫抗原特性的研究──多头绦虫节片抗原及原头节ES抗原的SDS-PAGE分析

为了探明多头绦虫成虫节片抗原及多头蚴原头节排泄分泌（ES）抗原的多肽组分，以供今后在免疫诊断与预防脑多头蚴病的应用，本试验应用SDS-PAGE首次分析了多头绦虫成虫节片抗原及多头蚴原头节ES抗原的多肽组分。应用12．5％凝胶的连续系统，垂直板型电泳，考马斯亮兰R－250染色的结果表明，成虫节片抗原共有16条多肽带，其分子量范围29～154kD，其中主带4条，分别为73、88、128、134kD，原头节ES抗原共6条多肽带，分子量范围33～132kD，其中主带2条，分别为33和108kD。本试验初步阐明多头绦虫成虫节片抗原和原头节ES抗原的多肽组分，为进一步研究多头绦虫抗原的特性奠定了基础。     

多头绦虫抗原特性的研究──应用IHA观察绵羊免疫及感染后的抗体消长规律

为了观察绵羊用多头蚴抗原免疫及感染后的抗体消长规律,为羊脑多头蚴病的免疫预防和免疫诊断提供依据,本试验应用多头蚴原头节可溶性抗原、囊壁可溶性抗原、囊液粗抗原致敏绵羊红细胞对绵羊免疫3次及虫卵攻击感染后的血清抗体进行间接血凝试验（IHA）检测。结果表明,原头节抗原免疫组、囊壁抗原免疫组、囊液抗原免疫组及原头节ES抗原免疫组在首次免疫后1周,抗体滴度迅速升高,第3次免疫后1周达到峰值,虫卵感染后开始下降,到感染后30周接近正常水平。多头蚴3种抗原对同种抗原免疫组血清检测敏感性、特异性优于其它抗原,原头节免疫组、囊壁免疫组、囊液免疫组抗体水平明显高于原头节ES抗原免疫组。     

多头纤虫抗原特性的研究——多头绦虫节片抗原及原头节ES抗原的S…

为了探明多头绦虫成虫节片抗原及多头蚴原头节排泄分泌抗原的多肽组分，以供今后在免疫诊断与预防脑多头蚴病的应用，本试验应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ首次分析了多头绦虫成虫节片抗主多头蚴原头节ＥＳ抗原的多肽组分。应用１２．５％凝胶的连续系统，垂直板型电泳，考马斯亮头Ｒ－２５０染色的结果表明，成虫节片抗原共有１６条多肽带，其分子量范围２９￣１５４ＫＤ，其中主带４条，分别为７３，８８，１２８，１３４ＫＤ，原头节ＥＳ抗     

羊脑多头蚴抗原的二维电泳分析

对自然感染绵羊的脑多头蚴原头节可溶性抗原、囊壁可溶性抗原和囊液抗原经二维电泳分析，电头节可溶性抗原共显示７９个多肽斑点，其中酸性多肽斑点２６个，中性多肽斑点５个，碱性多肽斑点４８个，囊壁可溶性抗原共显示５９个多肽斑点，其中酸性多斑点２０个，中性多肽斑点４个，碱性多肽斑３５上。     

羊脑多头蚴抗原的SDS—PAGE分析

采用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对采自自然感染绵羊脑多头蚴的头节、囊壁可溶性抗原及囊液抗原用垂直平板电泳、连续凝胶系统进行了分析。电泳后以考马斯亮蓝Ｒ－２５０染色。结果：头节抗原共２６条多肽带，其分子量范围１７．５￣１４８ＫＤ，其中主带５条，分别为７２、６９、４６、３７和３３ＫＤ；囊壁抗原共２０条多肽带，分子量范围１８￣１２６ＫＤ，其中主带４条，分别为６９、４６、２９和１     

多头绦虫抗原特性的研究：———绵羊免疫及感染后的细胞应答反应研究

分别用多头蚴原头节抗原、原头节排泄分泌抗原、囊壁抗原、囊液抗原对绵羊免疫注射３次,以及攻击感染多头绦虫虫卵后,运用酸性α－醋酸萘酯酶染色法及姬姆萨染色法研究了外周血液Ｔ淋巴细胞、Ｂ淋巴细胞、嗜酸性粒细胞及淋巴细胞的应答反应。结果表明,绵羊感染多头绦虫虫卵后外周血液中Ｔ淋巴细胞数量增加,Ｂ淋巴细胞数量减少,感染后第５周到第６周Ｔ淋巴细胞数量达到峰值,此后开始下降,第３２周时趋于正常,淋巴细胞总数在感     

羊脑多头蚴病ELISA试验用抗原制备的初步研究

用羊脑多头蚴包囊头节、犬多头多头线虫节片经超速离心制备的抗原以及多头蚴包囊液抗原,分别对32头份羊脑多头蚴病阳性血清和63头份阴性血清进行EISA检测。头节抗原、节片抗原和囊液抗原的阳性率分别为81.25％、78.12％和53.12％,前两者阳性率均高于后者;其阴性率分别为82.54％、79.36％和80.95％。进而以头节抗原对32头份羊脑多头蚴病血清、25头份羊细颈囊尾蚴病血清、12头份羊棘球蚴病血清和7头份羊肝片吸虫病血清以及31头份羊肝片吸虫病阴性血清进行ELISA试验。结果,分别有26头份、9头份、4头份、1头份和1头份为阳性反应。经Dancan’s检验,多头蚴病血清S/N平均值明显地高于多头蚴病阴性血清。从而初步证明头节抗原用于诊断羊脑多头蚴病具有较高的敏感性和特异性。     

绵羊多头蚴可溶性蛋白质的SDS—PAGE银染分析

应用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和银染分析法对绵羊多头蚴囊液及原头节的可溶性蛋白质进行分析，结果囊液与原头节分别可见３１和４２条多肽条带，两者均存在与棘球蚴，细颈囊尾蚴相同的２０．３８ＫＤ多肽这两个组成“弧五”抗原的成份。     

多头绦虫抗原特性的研究——绵羊免疫后及感染后的抗体消长规律

用多头绦虫原头节,囊壁,囊液层析纯化抗原及原头节排泄分泌（ＥＳ）抗原对绵羊免疫及攻击感染多头涤虫虫卵后的血清进行ＥＬＩＳＡ检测,观察了血清抗体的消长规律,结果表明,绵羊在感染虫卵后第１周即可检测出血清抗体,感染后３～５周抗体效价达峰值,一直持续到试验结束,免疫组绵羊在免疫３次后,血清抗体效价迅速升高,第３次免疫后１～２周达到峰值,且抗体水平明显高于虫卵感染组,在攻击虫卵后抗体效价开始下降,但直到试     

羊脑多头蚴抗原的等电聚集电泳分析

采用等电聚焦电泳（ＩＥＦ）技术,对自然感染绵羊的脑多头蚴的头节可溶性怕、囊壁可溶抗原和囊液抗原进行了分析。ＩＥＦ电泳后,分别用考马斯蓝Ｒ－２５０法染蛋白质,ＰＡＳ法染多、醛酸α－萘酯－坚固蓝法染酯酶曲同工酶、Ｎｉｌｅ‘ｓ蓝法洒脂。蛋白质染一头节可溶性抗原显带４２条,等电点４．８９－８．７２;囊壁可溶性抗原显带５０条,ｐｌ４．８０－８．６８,囊液抗原显带３９第,ｐＩ４．８０－９．８８。要色后头节可溶     

河北保定地区羊多头蚴和犬多头带绦虫的调查与鉴定

为了解河北省山羊多头蚴和犬多头带绦虫的感染情况,本研究对河北省涞源县、阜平县和易县的山羊和犬进行绦蚴虫感染情况调查,并通过PCR技术对多头蚴与多头带绦虫分离株线粒体pnad1基因部分序列进行扩增与分析,确定多头蚴和多头带绦虫之间的种系发育关系。结果显示,调查区域山羊多头蚴与犬多头带绦虫感染率分别为2.38%和15.33%,通过DNAStar软件分析,所获得多头蚴和多头带绦虫分离株分别与四川多头带绦虫分离株的相似性分别为98.9%~99.5%和99.5%~99.8%,确定羊多头蚴为犬多头带绦虫的幼虫。     

脑多头蚴细胞系生长特性的研究

本课题组对培育的绵羊脑多头蚴细胞系的第22代细胞测定其生长特性和集落形成率。结果：细胞生长曲线峰值期在第6d，集落形成率为3％。