硫辛酸对海马CA1区锥体细胞凋亡的抑制作用

采用股动脉放血并双侧颈总动脉夹闭制作全脑缺血再灌注模型 ,于术后 1 d处死动物 ,取脑 ,制作石蜡切片 ,通过 HE染色、Tunel检测 ,以观察海马 CA1区锥体细胞的损伤形式 ,并探讨α-硫辛酸 (α-lipoic acid,L A)对实验性脑缺血再灌注的神经保护作用。结果表明 :在短暂性全脑缺血中 ,海马锥体细胞存在着凋亡和坏死两种死亡形式 ;与对照组相比 ,缺血再灌注后1 d,海马 CA1区损伤较重 ,出现了较多的凋亡细胞 ,而 L A可明显抑制锥体细胞的凋亡。实验证明 :在脑缺血再灌注损伤中 ,细胞凋亡是神经元死亡的一种重要形式 ;L A对脑缺血再灌注有明显神经保护作用     

金属硫蛋白生物学功能研究进展

本文综合相关文献，对金属硫蛋白的生物学功能研究进展进行了归纳和总结。提出了在研究工作中需要注意的问题。     

金属硫蛋白对热应激奶牛血淋巴细胞凋亡基因和HSP70基因表达的影响

为探讨金属硫蛋白(MT)对热应激奶牛血淋巴细胞凋亡基因和HSP70基因表达的影响及其机理,选取25头中国荷斯坦奶牛经产泌乳母牛,随机均分为A、B、C、D、E 5组,分别按每头0(对照),16.0,24.0,32.0和40.0 mg颈静脉注射Zn-MT,于试验第1(注射Zn-MT之前),7和14天逐头采取血样,测定不同剂量的外源性MT对热应激奶牛血淋巴细胞HSP70、Bcl-2、Bax和p53基因表达水平的影响。结果表明,补给外源性MT后,4个试验组奶牛的产奶性能都有不同程度提高,其中B组奶牛的产奶量比A、C、D和E组分别高出20.94%(P＜0.05),15.83%(P＞0.05),10.94%(P＞0.05)和8.85%(P＞0.05);各试验组HSP70基因的表达水平都有所上升,其中D组比对照组高出130.00%,达到显著(P＜0.05)水平;各试验组Bcl-2基因的表达水平均高于对照组,其中C组达到显著(P＜0.05)水平;B、D组Bax基因的表达水平和C、E组p53基因的表达水平较对照组分别降低了22.00%,13.00%和22.00%,34.00%,但均未达到显著(P＞0.05)水平。说明外源性MT能改善热应激奶牛的产奶性能并有效调控奶牛血淋巴细胞HSP70、Bcl-2、Bax和p53基因的表达水平,且表现出较为明显的剂量效应。     

藏药对脑缺血大鼠海马CA3区锥体细胞超微结构的影响

采用夹闭大鼠双侧颈总脉制作全脑缺血再灌流损伤动物模型，对比观察藏五根散治疗前、后对其海马CA3区锥细胞超微结构改变的影响，。结果未治疗组大鼠海马CA3区锥体细胞出现核膜内陷、核染色质分布不均且集聚成块状向核膜边集、胞质水肿,细胞器减少，粗面内质网扩张，核糖体脱失，线粒体膜轮廊不清，嵴断裂或空泡化，而治疗组大鼠海马CA3区锥体细胞超微结构大致正常，表明脑缺血后血供恢复期海马CA3区锥体细胞发生明显的超微结构改变，藏药五根散治疗可使海马病变向正常逆转，为藏药五根散防治脑血同引起认知功能障碍后遗症提供了形态学依据。．     

金属硫蛋白对机体锌营养状况的反应

本试验以小鼠为动物模型,研究了金属硫蛋白(MT)对机体锌营养状况的反应。其结果显示低锌饲粮使血浆MT总量升高,肝脏、肾脏、小肠MT总量下降;限饲应激使血浆MT总量初期(10d)升高,后期(20d)下降,肝脏、肾脏、小肠MT总量初期(10d)下降,后期(20d)升高。限饲应激、低锌饲粮使MT中ZnMT比例升高。限饲组肝脏MT中Zn与Cu的比例约为6∶1、肾脏的比例接近2∶1、血浆和小肠则全部与Zn结合;低锌饲粮组血浆、肝脏、肾脏、小肠MT都以ZnMT形式存在。     

海马CA1区神经细胞凋亡的调控机制

细胞凋亡是一种由基因控制的细胞自主性死亡,此过程涉及一系列基因调控过程。当代许多的外源性或内源性刺激都有机会造成机体失去稳定性,如引发记忆力下降、脑部疾病、肿瘤等。本文从多方面来介绍海马CA1区细胞凋亡的过程。     

外源性金属硫蛋白对中国荷斯坦奶牛血淋巴细胞凋亡/坏死及线粒体膜电位的影响

选取20头处于热应激环境的泌乳奶牛,随机分成A、B、C和D组4组,分别按剂量0.0(对照),4.0,8.0和16.0 mg/头静脉注射金属硫蛋白(MT),以探讨外源性MT对奶牛淋巴细胞凋亡、坏死和线粒体膜电位(ΔΨm)的影响。结果表明,注射MT后,在51~60 d时,校正标准产奶量B、C和D组均显著性高于A组(P<0.05); 35 d时C组(8 mg/头)的血淋巴细胞凋亡率显著性低于B、D组(P<0.05),但与A组无显著性差异(P>0.05),D组(16 mg/头)35 d时凋亡率达到最大,随后(50~60 d)显著性下降(P<0.05);细胞的坏死率A组50 d时较1 d时显著下降(P<0.05),C组(8 mg/头)35,50 d时显著下降(P<0.05),但60 d时开始呈上升趋势(P>0.05),而D组(16 mg/头)坏死率呈现下降趋势,且在50,60 d时均显著低于注射MT之前的血淋巴细胞坏死率;35 d时,A组的线粒体膜电位值(ΔΨm)最高,但上升速度最快的是B组(4 mg/头),在35 d时显著高于20 d时的ΔΨm (P<0.05);50 d时A组和B组的ΔΨm不但不上升,反而下降,其中A组下降的速度更快,35~50 d C组(8 mg/头)保持基本恒定,60 d略有上升,D组(16 mg/头)1~35 d时逐步上升,50~60 d时保持恒定。在60 d时,ΔΨm与注射MT浓度呈正相关。说明外源性MT不仅能提高热应激状态动物的体质,还可让泌乳母牛从热应激状态平稳的过渡到热应激损伤修复状态,若注射8~16 mg/头,能抑制南方泌乳母牛夏季热应激引起的滞后效应。     

金属硫蛋白与动物应激

金属硫蛋白是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白,它与应激及应激性疾病有关。文章就应激对金属硫蛋白合成的诱导,金属硫蛋白对应激的保护作用及其机制等问题做了简单介绍,说明金属硫蛋白在动物养殖业中具有广阔的应用前景。     

金属离子对细胞内金属硫蛋白基因调控的影响

金属硫蛋白是可以被金属诱导和调节细胞内金属离子平衡的一类细胞内小分子蛋白质。作者主要阐述了金属硫蛋白调节细胞内金属离子平衡的机理和金属诱导硫蛋白合成的基因调控,并简要介绍了其他因素对金属硫蛋白的诱导,从而探讨不同因素对金属硫蛋白生物合成的差异。     

金属硫蛋白与应激反应

金属硫蛋白(MT)是一类低分子量,富含半胱氨酸,可以被金属、氧化剂、细胞因子和糖皮质激素等多种因素诱导的蛋白质。它参与多种应激反应,被誉为一种多功能的应激蛋白。本文就MT在各种应激反应中的产生、调控及发挥的功能进行了重点阐述。     

大鼠短暂性全脑缺血再灌注后海马神经元动态变化

采用股动脉放血并双侧颈总动脉夹闭制作大鼠全脑缺血再灌注模型,分别于术后6h、1d、3d、5d处死动物,取脑,制作石蜡切片和冰冻切片,通过HE染色、TUNEL检测及Caspase-3活性测定,对大鼠海马各区锥体细胞形态进行动态观察。结果表明:在短暂性全脑缺血中,海马锥体细胞存在着凋亡和坏死两种死亡形式,细胞凋亡在海马各区中的分布是一动态过程,各区对缺血易损伤性的顺序是:CA1及门区>CA2>CA3>齿状回;脑缺血再灌注不同时间,海马锥体细胞中DNA断裂及Caspase-3的表达与细胞凋亡呈现相似的变化趋势,且DNA的断裂早于Caspase-3的表达;与青年组相比,老年组海马神经元出现凋亡时间早且损伤严重。试验证明:在脑缺血再灌注损伤中,海马各区存在着缺血耐受性差异;细胞凋亡是神经元死亡的一种重要形式。     

Study on Effect of IGF-1 on Proliferation and Apoptosis of Bovine Mammary Epithelial Cells by Adding Inhibitor

The test was aimed to study the effect of insulin-like growth factor 1(IGF-1) on the proliferation of bovine mammary epithelial cells (BMECs),and provide a theoretical basis for the subsequent regulating mammary gland development using IGF-1. The optimal IGF-1 concentration for inhibiting BMECs apoptosis was obtained by measuring the apoptosis rate at 12, 24, 48 and 72 h after the addition of IGF-1 at four groups (0, 10, 50 and 100 μg/mL). Then divided into six groups:BMECs group, BMECs+IGF-1 group, BMECs+LY294002 group, BMECs+IGF-1+LY294002 group, BMECs+RAPA group and BMECs+IGF-1+RAPA group,and the apoptosis rates were detected by flow cytometry. The results showed that the heterologous IGF-1 had an inhibitory effect on the apoptosis of BMECs with an optimal concentration of 50 μg/mL. The apoptosis rates of BMECs+IGF-1+LY294002 and BMECs+IGF-1+RAPA groups were extremely significantly higher than BMECs+IGF-1 group (P<0.01). This study suggested that IGF-1 could activate the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway and thereby inhibit the apoptosis of BMECs. Moreover, IGF-1 might also promote the "repair" mechanism for the inhibited PI3K/Akt/mTOR signaling pathway, and therefore make it reparticipate in BMECs life process.     

添加通路阻断剂对IGF-1影响奶牛乳腺上皮细胞增殖与凋亡的研究

试验旨在研究胰岛素样生长因子-1（insulin-like growth factor 1,IGF-1）对奶牛乳腺上皮细胞（bovine mammary epithelial cells,BMECs）增殖的影响,为后期利用IGF-1调控乳腺发育奠定理论基础。以奶牛乳腺上皮细胞为材料,首先分4组分别外源添加0（对照组）、10、50、100 μg/mL IGF-1且分别培养12、24、48、72 h,测定抑制BMECs凋亡率的最佳浓度;然后分6组：单纯BMECs组、BMECs+IGF-1组、BMECs+LY294002组、BMECs+IGF-1+LY294002组、BMECs+RAPA组和BMECs+IGF-1+RAPA组,采用流式细胞术测定各组细胞凋亡率。结果表明,外源性添加IGF-1对BMECs凋亡率具有抑制作用,最佳浓度为50 μg/mL;BMECs+IGF-1+LY294002与BMECs+IGF-1+RAPA组细胞凋亡率均极显著高于BMECs+IGF-1组（P<0.01）。推断IGF-1能够活化PI3K/Akt/mTOR信号通路,参与BMECs凋亡的调控作用,进而抑制BMECs细胞凋亡;IGF-1可能会对被抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路产生"修复"机制,使其能够重新参与BMECs的生命进程。     

JA1体外诱导HCC细胞凋亡的实验研究

采用噻唑蓝(MTT)还原法,测定了梯度浓度的某植物种子粗提物JA1对人肝癌细胞株HCC增殖作用的影响;同时采用流式细胞术、DNA凝胶电泳和透射电子显微镜技术,在体外观察了JA1对HCC细胞凋亡的诱导作用。结果显示,JA1可显著抑制肝癌细胞HCC的增殖,而且这种抑制有浓度依赖性和时间依赖性;流式细胞仪分析表明,经JA1作用后的肝癌细胞HCC检测标本中有明显的DNA低含量颗粒(“亚G1期”峰);凝胶电泳呈现出典型的DNA梯形条带;电镜下出现细胞凋亡典型的形态学改变。     

线粒体凋亡途径在玉米赤霉烯酮致大鼠睾丸支持细胞凋亡中的作用

为探讨玉米赤霉烯酮(zearalenon,ZEA)雄性生殖毒性作用机理,研究ZEA诱导大鼠睾丸支持细胞(sertoli cell,SC)的凋亡途径,试验选取大鼠原代SC为研究材料,用不同浓度ZEA(0、5、10、20μmol/L)处理SC 24 h后,采用实时荧光定量PCR法检测Bax和Bcl-2 mRNA表达水平;用Western blotting法检测Bax、Bcl-2等线粒体凋亡途径相关蛋白表达;同时检测了20μmol/L ZEA联合Caspase-8抑制剂(Z-IETD-FMK)处理对SC凋亡率和线粒体凋亡相关蛋白的影响。结果显示,与对照组相比,20μmol/L ZEA组细胞Bcl-2转录水平显著下降(P<0.05),Bax转录水平显著上升(P<0.05);10、20μmol/L ZEA组Bax/Bcl-2比值及Cyto-CytC、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3表达量极显著上升(P<0.01),而Mito-CytC表达量极显著下降(P<0.01);与ZEA组相比,ZEA与Z-IETD-FMK联合处理可使ZEA诱导的SC凋亡率极显著下降(P<0.01),tBid/Bid、Bax/Bcl-2、Cyto-CytC、Cleaved-Caspase3、Cleaved-Caspase9蛋白表达显著或极显著下降(P<0.05;P<0.01),而Mito-CytC表达量极显著上升(P<0.01)。综合试验结果,ZEA能够通过线粒体途径诱导大鼠SC发生凋亡。     

生殖激素对禽类卵泡细胞凋亡的影响

从禽类生殖内分泌角度出发，依据近年来国内外的科学研究资料系统地综述了促性腺激素释放激素（Gonadotropin releasing hormone，GnRH）、促卵泡激素（Folicle-stimulating hormone，FSH）、雌激素（estrogen），孕激素（progestin）、促乳素（（Prolactin，PRL），褪黑素（Mel）、抑制素（Inhibin，IB）对禽类卵泡细胞凋亡的调控，为研究禽类繁殖性能及生殖毒理机制提供科学理论参考。     

全蚕粉中1-脱氧野尻霉素的提取分离及分离物对肿瘤细胞的抑制作用

利用柱前衍生化反相高效液相色谱法检测不同前处理全蚕粉中1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)的提取分离效果,并研究其分离产物对人宫颈癌HeLa细胞的抗肿瘤作用。结果表明,超低温冷冻干燥、热风烘干和真空浓缩煎煮冷冻干燥所得全蚕粉中DNJ的质量分数分别为0.494 9%、0.383 9%和0.607 6%;冷冻干燥全蚕粉粉碎粒度为0.15、0.25和0.425 mm时,DNJ质量分数分别为0.494 9%、0.321 5%和0.089 5%;用稀酸浸渍及阳离子交换树脂提取与分离全蚕粉中的DNJ效果最佳,分离物中DNJ的质量分数达到1.08%。浓度为40 mg/mL的全蚕粉分离物对肿瘤细胞的生长抑制率达92.27%,可使肿瘤细胞增殖能力完全丧失。结果提示:采用真空浓缩煎煮结合超低温冷冻干燥、超细粉碎和稀酸浸渍及阳离子交换树脂分离技术,可有效提高全蚕粉中DNJ的提取、分离效率,含DNJ的全蚕粉分离物对HeLa肿瘤细胞的生长具有显著的抑制作用。     

氯丙嗪对大鼠离体培养卵巢颗粒细胞凋亡的影响

本试验旨在通过氯丙嗪对颗粒细胞凋亡影响的研究,探讨氯丙嗪对雌性大鼠性腺毒性的作用机制。对未成熟的Wistar大鼠卵巢颗粒细胞进行原代培养,用不同浓度的氯丙嗪(0、0.1、1、10 μmol/L)染毒细胞,细胞培养24 h。染毒结束后采用MTT法检测细胞相对活力,荧光染料Hoechest 33258检测颗粒细胞的凋亡变化,RT-PCR检测凋亡调控基因Bax、Bcl-2和P53 mRNA的表达。在本试验所设置的剂量范围内,与对照组比较,氯丙嗪能极显著促进颗粒细胞凋亡(P＜0.01),呈浓度依赖关系;RT-PCR检测则显示氯丙嗪能引起Bcl-2、Bax、P53 mRNA表达水平和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA值升高,除低剂量组的Bax mRNA表达水平和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA值无明显改变外,其余各组与对照组相比均差异极显著(P＜0.01)。氯丙嗪可显著抑制大鼠卵巢颗粒细胞活力,诱导颗粒细胞凋亡。     

饲粮锌对肉鸡生长性能、组织含锌酶活性以及金属硫蛋白含量的影响

选用720只1日龄商品代AA肉公鸡进行试验,研究饲粮中添加不同水平无机锌对肉仔鸡生长性能、肝脏铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)活性和肾脏金属硫蛋白(MT)含量的影响,以考核这些指标对评价肉仔鸡锌营养状况的意义。将肉鸡按平均体重随机分成8个处理组,分别饲喂不添加锌的玉米-豆粕型基础饲粮(对照组,含锌28.37mg/kg)和在对照组基础饲粮中以无机硫酸锌形式分别添加20、40、60、80、100、120mg/kg和140mg/kg锌的试验饲粮21d。结果表明:肉仔鸡的日增重、日采食量和肾脏MT含量均受到添加锌水平的显著影响(P<0.05),其中肾脏MT含量受锌水平影响极显著(P<0.01),而不同锌水平对肝脏CuZnSOD活性无显著影响(P>0.1)。这表明对于肉仔鸡,肾脏MT可能是评价机体锌营养状况的敏感指标。