茶树毛状根的诱导

利用几种不同发根农杆菌株系感染茶树外植体，得到茶树毛状根。通过筛选，找出对其诱导效率最高的一个株系是15834，并证实了乙酰丁香酮对诱导具有促进作用。     

药用植物毛状根次生代谢物积累的影响因素

归纳了药用植物毛状根次生代谢物积累的影响因素，可以为今后研究提供参考。     

党参毛状根诱导条件研究

[目的]研究党参毛状根的诱导条件。[方法]利用发根农杆菌A4、C58C1和A1476进行毛状根诱导,探讨发根农杆菌种类、外植体类型、菌液浓度、侵染时间和共培养天数等因素对党参毛状根诱导的影响。[结果]3种发根农杆菌中A4诱导率最高;茎段的诱导率最高;发根农杆菌浓度在OD_(600)为0.4时诱导效果较好;较佳侵染时间为5 min;共培养时间为2 d时诱导率较高;头孢噻肟钠浓度为300 mg/L时除菌效果较好。[结论]该试验为大量生产毛状根以及毛状根的后续研究提供试验基础。     

发根农杆菌菌株和烟草品种对毛状根诱导率的影响

采用3×3双因子设计,研究发根农杆菌菌株和烟草品种对烟草毛状根诱导率的影响。结果表明:各菌株在不同烟草品种上均诱导出毛状根,经PCR技术检测,确定了发根农杆菌Ri质粒的rolB基因已整合到烟草基因组中。不同烟草品种和发根农杆菌菌株均显著影响毛状根的诱导率;Sumxun毛状根平均诱导率最高,达到了53.4%,其适宜菌株为A4和ATCC15834;K326为34.2%,其适宜菌株为R1000;云烟85为25.6%,其适宜菌株为ATCC15834。     

南药巴戟天毛状根诱导条件优化研究

为探索巴戟天毛状根的诱导条件,该研究选择不同发根农杆菌ATCC15834、AR10、Msu440菌株诱导巴戟天无菌苗的幼芽、叶片、叶柄、茎段等外植体形成毛状根,并研究了共培养时间和乙酰丁香酮(AS)浓度等因素对巴戟天毛状根转化率的影响。结果表明:巴戟天毛状根的最佳诱导条件为:以幼芽为外植体,ATCC15834为转化菌,侵染时间20 min,并在培养基中添加300μmol/L乙酰丁香酮条件下,巴戟天毛状根的诱导转化率最高,可达36.7%。     

龙葵毛状根诱导及其抑菌活性的研究

[目的]探讨龙葵毛状根作为新的抑菌剂的可能性,为其开发利用提供理论依据。[方法]以龙葵叶片为试验材料,利用发根农杆菌的遗传转化技术,对龙葵叶片进行毛状根的诱导。并采用纸片法用龙葵毛状根水提物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和芽孢杆菌进行抑菌活性试验。[结果]龙葵叶片经农杆菌A4侵染后7 d产生毛状根,毛状根具有多分枝、生长迅速且无向地性等特点,PCR及高压纸电泳检测结果表明Ri质粒的t DNA已整合进毛状根中。相同质量浓度下的龙葵毛状根水提物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用较强,龙葵毛状根水提物的抑菌效果优于龙葵实生根并具有显著性差异。[结论]龙葵毛状根对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和芽孢杆菌均有一定程度的抑制作用,其药用价值有待进一步研究。     

地黄毛状根的诱导及条件优化

以发根农杆菌Accc10060菌株侵染地黄外植体,研究不同菌液浓度、不同侵染时间和不同共培养时间对地黄毛状根诱导率的影响。结果表明,发根农杆菌Accc10060菌株可成功诱导出地黄毛状根,PCR检测发现发根农杆菌Ri质粒rol C基因已整合到地黄基因组中并得到表达;单因素试验结果显示,在地黄毛状根的诱导过程中,诱导的最佳菌液浓度为OD600=0.6,最佳侵染时间为10 min,最佳共培养时间为4 d。     

发根农杆菌诱导黄芩毛状根的研究

利用发根农杆菌A4,A4 9615,1.2556诱导中药黄芩外植体,得到黄芩不定根,根据形态和在MS培养基中进行培养证实得到黄芩毛状根,经抗菌素氨苄西林钠500 mg/L除菌后,毛状根表现出分枝多,生长快,且能在MS中生长繁殖的特性,为采用生物技术生产黄芩活性成分奠定基础。     

乌克兰龙葵毛状根诱导条件优化

[目的]利用3种发根农杆菌A4、C58C1、A1476诱导乌克兰龙葵产生毛状根,探究乌克兰龙葵毛状根诱导的最佳条件。[方法]利用植物组织培养技术,研究不同外植体、菌株、侵染时间、预培养天数、菌液浓度和共培养天数等对乌克兰龙葵毛状根诱导率的影响。[结果]叶片为最佳外植体材料;3种菌株均能诱导出毛状根,但A4诱导率最高;最佳菌液浓度为OD600=0.6;最佳侵染时间为5 min;预培养和共培养均为2 d时诱导率最高。[结论]乌克兰龙葵毛状根诱导条件的优化,为其他植物毛状根诱导提供参考,同时为进一步利用植物毛状根生产药用成分提供试验基础。     

银杏叶总黄酮水浸提法的研究

[目的]探索提取银杏叶中总黄酮的最佳条件。[方法]采用水浸提的方法,结合单因素试验和正交试验探讨影响黄酮提取的主要因素。[结果]结果表明,温度对黄酮提取影响最大,固液比1∶60,在90℃下,每次1 h,重复提取3次,黄酮提取率最高。[结论]该研究确立了采用水作为浸提剂从银杏叶中提取总黄酮的最佳方法。     

微波-碱水浸提银杏叶黄酮的研究

[目的]为银杏叶黄酮的提取提供科学依据。[方法]利用微波效应,用氢氧化钙溶液提取银杏叶黄酮,并确定其最佳工艺条件。[结果]在0.5~2.0 min内,黄酮提取率随微波时间的增加而增加。银杏叶含水量在10~20 ml内,黄酮提取率随含水量的增加而增加。黄酮提取率随液料比的增加而增加,液料比在16∶1~25∶1时,提取率基本恒定。在90~95℃内,黄酮提取率随温度的升高而显著增加。在30~50 min内,黄酮提取率随浸提时间的延长而增加。各因素对黄酮提取率的影响依次为：提取温度〉微波时间〉含水量〉pH值〉提取时间〉液料比。[结论]微波-碱水浸提银杏叶黄酮的最佳工艺条件为：银杏叶5 g、微波功率100%、微波时间2.5 min、含水量25ml、液料比12∶1、浸提温度95℃、浸提2次、每次60 min、pH值为9,黄酮的提取率达93.6%。     

银杏叶黄酮含量变化及分布规律的研究Ⅱ.不同栽培方式对叶黄酮含量的影响及盆栽银杏根内黄酮含量变化

以银杏叶用栽培园、丰产园 (果叶兼用 )和盆栽园叶片以及盆栽银杏根部为试材 ,对比分析了黄酮含量的变化。结果表明 :叶用园叶黄酮含量最高 ,丰产园次之 ,盆栽园最低 ;达到含量高峰的时间 ,前期是叶用园最早 ,盆栽园次之 ,丰产园最慢 ,后期是盆栽园和叶用园同步 ,比丰产园早半月 ;含量高峰次数叶用园、丰产园均 3次 ,盆栽园 2次 ;变化幅度盆栽园最大 ,丰产园变化相对稳定。根系中有叶黄酮存在 ,早期含量甚微 ,后期逐渐稳步增加 ,与叶片相比 ,峰值低 ,10月份后二者变化趋势相反     

叶用银杏不同施肥处理效应

对叶用银杏进行不同施肥方式和不同肥料种类、用量和比例的研究。结果表明： 用３０ ｇ· Ｌ－ １ 绿丰威２ 号或尿素＋ 磷酸二氢钾进行根外施肥， 单株叶质量增加２２２８ ％ ～３７７８ ％ 和２０３３ ％ ～２４４４ ％ 。播种苗基肥用量７５０ ｔ·ｈ ｍ － ２ 的单株叶质量比基肥用量为３７５ ｔ·ｈ ｍ － ２ 的增加９２０７ ％ 。采用施尿素２７７ ｇ·ｍ － ２ 、过磷酸钙３８４ｇ·ｍ － ２ 和氯化钾１１１ ｇ·ｍ － ２ 的配方施肥， 单株叶质量增加１２０２ ％ 。为叶用银杏栽培提供了适宜的施肥技术。表３ 参３     

银杏的景观作用分析

银杏是我国特有的植物物种,其寿命长、经济价值较高,景观效果好,在我国城市绿化和景观建设中应用广泛,但也存在一些不恰当的景观应用方式。从银杏的特性入手,对银杏的景观作用进行分析,以明确其景观应用的形式和方法。     

银杏雄株叶片和花粉主要类黄酮成分含量分析

【目的】研究江苏省46个银杏实生雄株(系)叶片和花粉类黄酮化合物主要成分及其含量,为合理开发利用银杏雄株种质资源提供理论依据。【方法】运用HPLC技术分析不同株系叶片和花粉甲醇(乙醇)-盐酸水解溶液中主要黄酮苷元的含量,并采用三因子法计算总黄酮苷含量。【结果】不同银杏雄株叶片和花粉的黄酮含量存在较大差异,通过设定黄酮苷元和总黄酮含量的选择域值,发现扬州有4个品系(扬州03、04、10、20)、泰州有2个品系(泰州08、13)、徐州有2个品系(徐州04、09)符合叶用标准,扬州有10个品系(扬州02、03、04、08、09、10、12、15、18、20)符合花粉用标准。银杏雄株叶片和花粉均含有槲皮素、山奈酚和异鼠李素3种黄酮苷元,但含量不同,叶片中三者差别不大,而花粉中以山萘酚为主,花粉总黄酮平均含量约为叶片的1.42倍。【结论】通过黄酮苷元和总黄酮含量的分析,根据设定的选择指标,可以得到优良的叶用或花粉用单株供生产利用,为银杏雄株资源的综合利用提供了参考。     

银杏种核采后处理对氰化物含量的影响

以银杏核用主栽品种佛指和洞庭皇为试材,对采收的种核进行CaCl_2溶液浸泡、~(60)Co辐照处理后,贮藏于室内,期间每隔20 d测定种核氰化物的含量和种胚的长度变化.结果表明:银杏种核内氰化物含量随着贮藏时间的延长而上升,在148 d左右后逐渐下降,其最低值比贮藏前高出35%~55%;CaCl_2溶液浸泡和~(60)Co辐照均能明显降低种核氰化物的含量,且品种间存在一定差异;银杏种核氰化物含量与种胚的长度呈极显著相关.     

银杏嫁接技术研究

6a试验和生产实践证明，长块削芽接和贴枝接是银杏最好的2种嫁接方法，操作方便，接穗利用率高，嫁接时间长，接苗生长好，嫁接成活率达90％以上。普通枝接1年生砧木基径要0.50cm以上，而削芽接和贴枝接只需0.35cm以上。接穗位置效应明显，以结实树树冠外周1年生延长枝为宜，内膛枝，徒长枝和纤细枝不宜作接穗。翌年4－6月科学施肥，延迟接苗顶芽形成，是培养壮苗的关键。1年生砧木当年嫁接，以8月下旬至10月中旬为好，8月中旬前嫁接，接芽发育不良，抽梢差。接后不能立即断砧，否则接苗因饥饿死亡。用大树根蘖枝，幼树和幼苗枝嫁接的假苗，可从苗木长势，抽梢整齐度，削度，有无雌蕊和结实识别。表4参3。     

银杏细胞对抗生素的耐受性研究

用MS培养基诱导银杏胚产生愈伤组织．分别在MS培养基中加入不同浓度的卡那霉素、潮霉素和杀稻瘟菌素，将银杏愈伤组织转接到含抗菌素的培养基上继续培养11d之后得到以下结果：MS培养基中含潮霉素25mg／L时，银杏愈伤组织变成褐色，停止生长；MS培养基中含同样浓度的杀稻瘟菌素时，银杏愈伤组织变成浅褐色生长变慢；MS培养基中合同样浓度的卡那霉素时，银杏愈伤组织生长良好．银杏细胞对潮霉素的耐受性很弱，可以作为筛选转基因银杏树种的抗生素使用。