禽脑脊髓炎的实验室检疫和防治措施

引起禽脑脊髓炎的病原为禽脑脊髓炎病毒。该病毒主要侵害雏鸡,使成年鸡产蛋量下降。患雏的典型病症是共济失调和快速震颤,头颈部震颤尤为明显。本文重点介绍了禽脑脊髓炎的实验室检疫方法(中和实验和荧光免疫实验)及防治措施。     

禽脑脊髓炎的诊断及病原分离

通过流行病学、临床症状、病理剖检、血清学诊断等，初步确定聊城、枣庄发生禽脑脊髓炎。用ＳＰＦ鸡胚快速传代，从自然发病鸡脑中分离出两株病毒，经雏鸡接种、鸡胚接种和琼脂扩散等试验，初步确定两分离株为禽脑脊髓炎病毒     

禽脑脊髓炎病毒的分离与疫苗研制

禽脑脊髓炎病毒的分离与疫苗研制卢中华张红英于晓军杨霞（河南农业大学，郑州４５０００２）王之岑（淮阳师范学校）张保亮（许昌县畜牧兽医技术中心）禽脑脊髓炎（ＡｖｉａｎＥｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓＡＥ）是一种主要侵害雏鸡的病毒性传染病。１９３０年首次...     

某蛋鸡场禽传染性脑脊髓炎发病情况调查

研究主要观察了禽传染性脑脊髓炎在某蛋鸡场产蛋鸡群中的感染情况,针对禽脑脊髓炎对成年鸡的感染特点采取了相应的治疗措施,并对今后的预防工作提出了建议。禽传染性脑脊髓炎对开产蛋鸡的影响主要是表现在产蛋率上,在观察到产蛋率突然下降后,采用琼脂扩散试验(AGP)法对采集到的血样进行检测,证实了鸡群确实感染禽传染性脑脊髓炎。在鸡群患病期间,除了采取积极的治疗措施,同时还对其生产性状及指标进行了追踪调查与分析,结果表明,禽传染性脑脊髓炎对产蛋鸡的生产性能的影响主要是引起产蛋率的下降,而在死淘率及采食量方面均无明显变化。     

从外观有脚弱症的小母鸡中分离出一株新城疫病毒

<正> 在引进牧场22日后的82日龄的鸡群中,发生了脚弱症,使3％的鸡死亡或淘汰。用显微镜观察脑及脊髓,看到病理组织学上的变化极像禽脑脊髓炎(AE),临床症状也类似禽脑脊髓炎。为了分离禽脑脊髓炎病毒,每个脑组织试验材料用0.1ml接种5个6日龄SPF鸡胚的卵黄囊。在接种后第2或第3     

鹌鹑源禽脑脊髓炎病毒的分离鉴定及遗传进化分析

为探究陕西省咸阳市某鹌鹑养殖厂的鹌鹑发病是否为禽脑脊髓炎病毒引起,采集发病鹌鹑的脑、肝脏、肠道等组织,通过鸡胚传代、RT-PCR扩增、免疫组织化学试验及动物回归试验对病原体进行分离鉴定,并对得到的序列进行同源性及遗传性分析。RT-PCR扩增结果显示,用禽脑脊髓炎病毒(AEV)特异性引物成功扩增得到大小为288bp的目的片段,与参考株的核苷酸序列相似性及氨基酸序列相似性分别为84.9%~99.3%和95.8%~98.9%;遗传进化分析结果表明,分离株与SX株位于同一分支;免疫组化试验结果显示,发病鹌鹑的脑、肝脏、肠道组织切片中存在大量的阳性棕黄色着色区域,而阴性对照没有;动物回归试验结果显示,攻毒组鹌鹑出现典型的禽脑脊髓炎(AE)临床症状,发病率55.1%,病死率100%,病理剖检发现患病鹌鹑的脑组织软化,脑半球轮廓模糊,对照组未见异常。成功分离得到1株鹌鹑源禽脑脊髓炎病毒,命名为AEV XY/Q-1410株,为鹌鹑禽脑脊髓炎的诊断及预防提供理论与技术支持。     

禽脑脊髓炎的病理学研究

禽脑脊髓炎（ＡｖｉａｎＥｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ,ＡＥ）是由禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）引起的一种主要侵害雏鸡的传染病,本病已遍及全国各地〔１〕,尤其在山东时有本病发生的报道〔２～５〕,本病已成为危害养鸡业的主要传染病之一。但有关本病发病机理及组...     

禽腺病毒4型的分离与初步鉴定

从疑似心包积液综合征的病死鸡组织中分离获得1株病毒,该病毒无血凝活性,提取其核酸经禽流感病毒、新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、禽脑脊髓炎病毒、禽白血病病毒、传染性法氏囊病毒、禽偏肺病毒和包涵体肝炎病毒特异引物扩增均为阴性,而经禽腺病毒4型特异性引物检测为阳性,则将其暂命名为禽腺病毒4型FJ1674株。将其扩增产物回收后克隆,经序列测定分析表明该株病毒与国内外禽腺病毒4型毒株的同源率为99.4%~100%;经遗传进化分析表明,其与禽腺病毒4型关系密切,共处同一分支。     

禽传染性脑脊髓炎病毒的分离鉴定

通过ＳＰＦ鸡胚连接传代，从自然发病肉鸡脑组织中分离出一株禽脑脊髓炎病毒，命名为ＡＥＶ－Ｌ２Ｚ株。该病毒抗原与标准阳性血清之间出现清晰的沉淀线，在接种的发病鸡胚和病鸡的胰岛细胞和大脑神经细胞的胞浆中可见呈六边形颗业状的病毒粒于聚集或散在，直径２５～３０ｎｍ。该病毒对ｐＨ３，氯仿，乙醚，胰蛋白酶，去氧胆酸钠具有抵抗力，在Ｍｇ＾２＋保护下抵抗热效应（５０℃）对ｐＨ２无抵抗力，２５℃和－８０℃反复冻融３，     

雏鸡脑脊髓炎病理学观察

对19例自然感染禽脑脊髓炎病毒的发病雏鸡大脑、小脑、脊髓、肝脏、脾脏、胰腺、心脏、肺脏、肾脏、腺胃、肌胃、小肠12种器官进行了病理学观察.结果表明,发病鸡的眼观变化主要为脑膜及切面的出血点和腺胃壁灰白色病灶,其它器官均未有可见病变.显微结构则表现为急性非化脓性脑炎和腺胃淋巴细胞增生的变化:脑实质出血,血管周围淋巴细胞浸润形成管套,神经组织细胞变性、坏死并形成小软化灶,小胶质细胞增生集聚于软化灶;脊髓的背侧和腹侧神经元不同程度变性、坏死;腺胃淋巴细胞增生主要见于腺胃固有层深部复管腺间质中;其它器官仅出现轻度的变性变化.     

Dynamic Pathology and Antigen Location Study on Broiler Breeders with Coinfection of Marek's Disease Virus and Reticuloendotheliosis Virus

To further understand the generation and development of coinfection of Marek's disease virus (MDV) and reticuloendotheliosis virus (REV) in broiler breeders, and then find the method and optimal time of differential diagnosis for complex clinic multiple infection, the authors studied the pathohistological changes, apoptosis, immunohistochemistry (immunofluorescence), and ultrastrueture of tumor tissues of broiler breeders inoculated with MDV and REV. The study showed that proliferation of small lymphocytes was seen in the main organs at the age of 1 week, then immature lymphocytes, all kinds of lymphocytes, primitive reticulum cells, and Marek's disease cells (MDCs) were observed at 2-9 weeks. Apoptosis of lymphocytes could not be seen until the age of 10 weeks in the immune system. Immunohistochemistry detection showed that the positive signs of MDV and REV antigen were observed in the main organs at 2 weeks of age. Multi-morphology lymphocytes, MDV, and REV, mitotic figures and apoptosis of lymphocytes were observed with the help of transmission electron microscopy. MDV cooperating with REV promotes the course of disease of coinfection. Differential diagnosis can be done by immunohistochemistry in the early stage (before 2 weeks), and histopathology in the late stage (post 4 weeks). MDCs, primitive reticulum cells, immature lymphocytes, and two kinds of virions can serve as a basis for histopathology differential diagnosis.     

传染性法氏囊病病毒感染对鸡脾脏B淋巴细胞的影响

从口腔和泄殖腔对ＳＰＦ鸡人工感染传染性鸡法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）,于感染后１２、２４、３６、４８小时观察脾脏组织Ｂ淋巴细胞的病理学变化。并通过核酸电泳观察了感染后脾脏组织细胞ＤＮＡ的变化情况。研究结果表明,ＩＢＤＶ感染仔鸡后,可诱导仔鸡脾脏Ｂ淋巴细胞凋亡。     

肉种鸡MDV和REV人工共感染的动态病理学与抗原定位研究

 【目的】深入了解MDV与REV人工共感染肉种鸡后疾病的发生、发展状况,为二者临床复杂的混合感染提供确实的鉴别诊断方法和明确的诊断时间。【方法】MDV和REV强毒株人工共感染1日龄肉种鸡,定期剖检,进行病理组织学、细胞凋亡、免疫组化和肿瘤组织的超微结构观察。【结果】肝、胰腺、腺胃、盲肠扁桃体、心肌在感染后1周出现以小淋巴细胞浸润为主的炎症,2～9周时,大部分实质器官出现以幼稚淋巴细胞、大中小淋巴细胞为主的渐进性增生灶,部分增生灶中可见原始网状细胞和马立克氏病细胞;10周后免疫器官实质细胞出现明显的凋亡;免疫组化显示,肝、脾、法氏囊、胸腺等在2周时呈双抗原阳性;电镜下,肝脏肿瘤组织中可见多形态淋巴细胞,核分裂相和细胞凋亡同时存在,同一细胞中可见MDV和REV两种病毒粒子。【结论】MDV与REV共感染对病程起协同和促进作用,发病早,病变明显;免疫酶及荧光方法可用于共感染的早期诊断（2周以前）;而后期（4周以后）可通过病理组织学进行鉴别诊断,两种病毒粒子、马立克氏病细胞、原始网状细胞、多形态和幼稚淋巴细胞可作为诊断依据。     

绵羊肺腺瘤病毒人工感染羊重要病理生理指标的检测

进一步探讨人工感染绵羊肺腺瘤病毒的羊对淋巴细胞亚群、淋巴细胞凋亡、血气指标、肿瘤标志物的影响.对已人工感染JSRV 300d的病羊,进行临床指标测定,每隔30d用流式细胞仪检测外周血中淋巴细胞及其亚群的动态变化以及淋巴细胞凋亡情况.同时,对血液做血气分析、血清酶和肿瘤标志物的检测.结果:SPA攻毒组感染JS-RV - ...     

不同泌乳阶段和产奶水平对奶牛淋巴细胞凋亡的影响

选择48头奶牛,分为6组,每组8头,分别为泌乳盛期,泌乳中期和泌乳末期,每个泌乳期设高产组和低产组,研究不同泌乳阶段和产奶水平下奶牛外周血淋巴细胞凋亡情况。结果表明:随着泌乳阶段的延长淋巴细胞凋亡率显著升高,其中泌乳末期最高为2.95%,显著高于泌乳盛期(P0.05),泌乳中期淋巴细胞凋亡和各阶段差异不显著;在泌乳盛期和泌乳中期,高产奶牛的外周血淋巴细胞凋亡率极显著地高于低产奶牛(P0.01),泌乳末期低产组淋巴细胞凋亡率升高为3.02%,高产组低产组,但差异不显著(P0.05)。由此可见,随着泌乳时间的延长,奶牛外周血淋巴细胞的凋亡率逐渐上升,并且高产奶牛更易于发生淋巴细胞的凋亡。     

针刺联合亚低温对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织p-Raf1、p-ERK1/2的影响

目的 观察针刺联合亚低温疗法对脑缺血再灌注大鼠神经功能缺损评分、细胞凋亡及p-Raf1、p-ERK1/2的影响。方法 参照ZeaLonga线拴法复制大脑中动脉缺血模型（MCAO）并加以改良,50只SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、针刺组、针刺联合亚低温组,每组10只,针刺及针刺联合亚低温治疗72 h后,观察神经功能缺损评分、TUNEL法检测凋亡细胞,Western Blot法检测大鼠缺血侧脑组织磷酸化Raf-1、ERK1/2蛋白的表达水平。结果 造模后,模型组大鼠神经功能缺损评分升高、凋亡细胞增多,磷酸化Raf1、ERK1/2蛋白的表达水平明显增高,与空白组及假手术组比较差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。经治疗后,各治疗组神经功能缺损评分减少、凋亡细胞及磷酸化Raf1、ERK1/2蛋白的表达水平均明显降低,与模型组比较差异有统计学意义（P<0.01）。与针刺组比较,针刺联合亚低温组神经功能缺损评分,磷酸化Raf-1、ERK1/2蛋白的表达水平下降,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论 针刺及针刺联合亚低温均可改善神经功能缺损,调节p-Raf1、p-ERK1/2,减少细胞凋亡,对脑组织起保护作用,且联合组的脑保护作用更强。     

Dendritic cell apoptosis in the maintenance of immune tolerance

Apoptosis in the immune system is critical for maintaining self-tolerance and preventing autoimmunity. Nevertheless, inhibiting apoptosis in lymphocytes is not alone sufficient to break self-tolerance, suggesting the involvement of other cell types. We investigated whether apoptosis in dendritic cells (DCs) helps regulate self-tolerance by generating transgenic mice expressing the baculoviral caspase inhibitor, p35, in DCs (DC-p35). DC-p35 mice displayed defective DC apoptosis, resulting in their accumulation and, in turn, chronic lymphocyte activation and systemic autoimmune manifestations. The observation that a defect in DC apoptosis can independently lead to autoimmunity is consistent with a central role for these cells in maintaining immune self-tolerance.     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒在自然病例组织中的定位

[目的]为高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HP-PRRS)的预防和治疗提供理论依据。[方法]应用免疫组化与H.E.染色对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)自然感染病例进行抗原定位和病理组织学观察。[结果]病毒抗原主要存在于上皮组织细胞,也存在于巨噬细胞、淋巴细胞和脑神经细胞等组织细胞中。[结论]HP-PRRSV毒株在自然感染病例中的细胞嗜性和组织嗜性有不同于以往毒株的特点。     

甘氨胆酸对小鼠体外脾淋巴细胞凋亡的影响

本研究旨在探索不同浓度的甘氨胆酸(Glycocholic acid,GCA)对小鼠体外脾淋巴细胞凋亡的影响。在0.02μg/ml,0.035μg/ml,0.07μg/ml,0.21μg/ml,1.05μg/mL不同浓度的GCA作用下,应用倒置显微镜观察了体外脾淋巴细胞的核形态,采用琼脂糖凝胶电泳法检测了脾淋巴细胞的DNA片段,采用流式细胞仪测定了脾淋巴细胞凋亡早期磷脂酰丝氨酸外翻百分率;采用分光光度法测定了凋亡细胞氧化还原反应活性——GSH的含量;通过ELISA法检测了Caspase-3和Caspase-9的活性。结果:GCA能够使脾淋巴细胞细胞产生核固缩和凋亡小体;显著引起脾淋巴细胞DNA片段化(P<0.05),极显著的诱导脾淋巴细胞磷脂酰丝氨酸外翻(P<0.01);显著降低GSH的含量(P<0.05);显著提高Caspase-9和Caspase-3的活性(P<0.05)。结论:GCA具有显著的提高小鼠体外脾淋巴细胞凋亡的作用(P<0.05)。     

IBDV超强毒株感染SPF鸡后法氏囊淋巴细胞凋亡及Bax和Bcl-2蛋白动态表达的研究

 为证实传染性法氏囊炎超强毒SNJ93株感染SPF鸡后1～14 d内法氏囊淋巴细胞中Bcl-2、Bax蛋白的动态表达与淋巴细胞凋亡的关系。应用透射电镜观察、TUNEL法标记检测凋亡的淋巴细胞，用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax蛋白。结果表明，感染后1～7 d可见到大量凋亡的淋巴细胞，其中感染后3～5 d最多。感染后1～9 d Bcl-2蛋白显著高于同时点的对照组（P<0.01）；感染后1～5 d Bax蛋白明显高于同时点的对照组，差异极显著（P<0.01）；感染后第7天高于同时点的对照组,差异显著（P<0.05）； Bcl-2/Bax比率在感染后第1天低于同时点的对照组（P<0.05）；3～5 d明显低于同时点的对照组(P<0.01)。SNJ93感染SPF雏鸡后1～7 d内法氏囊淋巴细胞会发生大量凋亡，Bcl-2/Bax能准确反映淋巴细胞的凋亡程度。