白芨种子萌发及其原球茎高效增殖体系建立

[目的]筛选白芨原球茎诱导和增殖的最适培养基,建立白芨原球茎高效增殖体系,为白芨种苗工厂化组培生产提供技术支持.[方法]以白芨种子为外植体,筛选适宜其无菌萌发的灭菌方法;以MS或1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的植物生长物质和附加物,通过单因素试验,确定最佳光照和温度条件,筛选最适合其原球茎诱导的培养基;通过正交试验,筛选最适合其增殖的培养基.[结果]采用75%乙醇处理白芨蒴果10 min,无菌萌发率达90.0%,且种子萌发不受影响.在原球茎诱导过程中,30.0 μmol/m2·s光照强度和25 ℃温度环境有利于原球茎诱导;最适合原球茎诱导的培养基为1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA.在原球茎增殖过程中,添加土豆泥、椰子汁、香蕉泥等附加物对原球茎增殖有益,其中添加50.0 g/L土豆泥的增殖效果最佳.正交试验结果表明,原球茎增殖的最佳培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+50.0 g/L土豆泥,增殖倍数达5.270.[结论]建立的白芨原球茎高效增殖体系可在白芨种苗工厂化组培生产中推广应用.     

基于原球茎液体培养的白芨快速繁殖研究

为了建立高效的白芨快繁技术体系,研究了白芨种子萌发和原球茎生长的液体培养条件,比较了全程固体培养基培养(QG)与液体固体培养基分段培养(YG)这2种培养方式的优劣。首先通过L18(37)正交试验,筛选了适宜种子萌发及原球茎生长的液体培养条件。结果表明,添加剂种类、大量元素、6-BA浓度、NAA浓度对白芨种子萌发及原球茎诱导影响最大。统计分析结果表明,最佳培养条件为1/4MS+1 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA+100 g/L马铃薯汁+30 g/L蔗糖,p H值5.8,培养温度为22℃,摇床转数为100 r/min,每天光照时间为8 h。另外,源于YG的白芨苗在移栽成活率、叶片颜色、叶片长度、苗高几个方面均优于源于QG的白芨苗,且差异显著。本研究创建的液体固体培养基分段培养体系将有助于保护与可持续利用白芨野生资源。     

白芨工厂化育苗组培快繁技术体系的构建

白芨的野生资源濒临匮乏,其种子自然萌发比较困难,因此传统的白芨种植方法已不适于市场需求。以白芨种子为材料,探究白芨种子萌发、生根及组培苗移栽驯化的最佳方法。白芨种子萌发最佳培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+马铃薯10 g/L,增殖培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂9 g/L+KT 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,最佳生根培养基为MS+NAA 0.2 mg/L+IAA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂9 g/L+马铃薯25 g/L,马铃薯可促进白芨组培苗根的生长,组培苗驯化的最佳处理为预先将培养瓶开瓶进行适应性锻炼,2～3 d后把组培苗移至炼苗基质中,这样可提高白芨组培苗的成活率。白芨工厂化育苗体系的建立可有效地扩大白芨的种植规模,缩短育苗时间,从而更好地利用和保护白芨野生资源。     

铁皮石斛原球茎增殖培养基配方的优化

[目的]获得铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.）原球茎组织培养的最佳培养基配方。[方法]用正交试验筛选出6-BA、NAA、KT最佳的浓度配比,并考察各因素对铁皮石斛原球茎增殖率的影响。[结果]铁皮石斛原球茎增殖的最佳培养基配方为1/2MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT。[结论]该研究为工业化生产铁皮石斛原球茎及其有效成分,推进铁皮石斛工厂化育苗奠定了基础。     

名贵畲药盘龙参种子快繁技术研究

以盘龙参蒴果为外植体,进行组织培养快繁试验,采用对比试验研究不同基本培养基、激素浓度的配比、天然添加物对盘龙参种子萌发、原球茎增殖、分化的影响,从中筛选出离体条件下适宜种子萌发、种苗快繁的培养基配方。结果表明,外植体最佳消毒方案是采用75%乙醇浸泡30 s结合0.1%Hg Cl2浸泡20 min。最适合的种子萌发诱导培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖3%+马铃薯汁15%;原球茎在1/2MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖3%+马铃薯汁15%的增殖效果最好,增殖率为380%;最适合盘龙参原球茎分化的培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖3%+马铃薯汁20%。     

铁皮石斛类原球茎增殖和分化的研究

通过单因素浓度试验和正交试验研究了5种金属离子、不同激素组合及不同天然附加物对铁皮石斛类原球茎增殖、分化的影响。试验结果表明,5种金属离子对类原球茎增殖影响的主次顺序为Mg2+(Fe2+(Ca2+(Mn2+(Zn2+,类原球茎增殖的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+10%马铃薯汁+3%蔗糖(含Mg2+1.0 mmol/L、Ca2+2.0 mmol/L、Fe2+0.1mmol/L、Mn2+0.1mmol/L和Zn2+0.03 mmol/L)。培养基1/2MS+NAA 0.5mg/L+20%马铃薯汁+蔗糖20g/L+琼脂0.8g/L最适于铁皮石斛类原球茎的分化。     

纹瓣兰无菌播种快繁技术研究

以纹瓣兰[Cymbidium aloifolium (L. ) Sw]的种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株的途径进行繁殖.结果表明:种子在MS+6-BA 0. 2 mg/L+AC 1.0 g/L+蔗糖30 g/L培养基培养30 d左右,可形成原球茎;原球茎在1/2MS+6-BA 4 mg/L+KT 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L的培养基上增殖效果最好;原球茎接种于1/2MS+6-BA 0.1 mg/L +NAA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L培养基上培养4周后,再转入1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AC 2.0 g/L+香蕉泥80 g/L的培养基上培养30 d,可诱导形成完整的植株.     

不同培养条件对铁皮石斛原球茎增殖的影响

[目的]为了找到适合原球茎增殖的培养条件,为工厂化育苗提供技术支撑。[方法]以铁皮石斛茎段诱导出的原球茎为实验材料,研究了不同基本培养基、不同碳源、不同浓度的脱落酸(ABA)和培养方式对其增殖的影响。[结果]在5种培养基中,原球茎增殖倍数均呈上升的趋势,其中改良MS的增殖倍数明显高于其他培养基;在低浓度的条件下,随ABA浓度的增加,原球茎的增殖速度加快,当浓度为0.5 mg/L时,增殖最大;蔗糖为碳源时原球茎增殖的效果比葡萄糖、果糖好;固体培养和液体振荡培养时原球茎增殖倍数最高。[结论]在改良MS中加入30 mg/L蔗糖和0.5 mg/L ABA,进行固体培养或液体振荡培养,铁皮石斛原球茎增殖的效果好。     

野生贵州地宝兰无菌播种及根状茎繁育技术研究

[目的]研究以贵州地宝兰种子为外植体进行无菌播种快繁技术体系,筛选出各个阶段较优的培养基,以提高繁育系数。[方法]以贵州地宝兰种子为外植体,通过无菌播种获得大量根状茎,经过根状茎增殖培养、诱导芽分化、生根壮苗培养等不同培养基试验,分别筛选出贵州地宝兰最适合各阶段成长的培养基。[结果]适宜贵州地宝兰种子萌发的培养基为:1.0 g/L Hyponex1+1.0 g/L Hyponex2+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L ZT+100.0 mg/L CM+20.0 g/L蔗糖+1.0 g/L AC。适宜原球茎的增殖培养基为:B5+0.5 mg/L NAA+100.0 g/L马铃薯+30.0 g/L蔗糖。适宜诱导根状茎分化培养基为:B5+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+100.0 g/L香蕉汁+25.0 g/L蔗糖+1.0 g/L AC。适宜生根壮苗培养基为:B5+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA+100.0 g/L香蕉汁+25.0 g/L蔗糖+1.5 g/L AC,pH 5.4~5.8。[结论]该研究为珍稀濒危贵州地宝兰野生种群恢复种植试验提供了重要的种苗资源,也为今后该快速繁育技术提供了参考数据。     

大花蕙兰原球茎诱导培养影响因素及褐化防治的研究

[目的]研究大花蕙兰茎尖外植体原球茎诱导及增殖培养、褐化污染的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖作为外植体,研究无菌系建立、诱导培养的灭菌方法与褐化防治、原球茎诱导培养初始培养基的筛选、原球茎增殖培养的影响因素。[结果]结果表明:解决茎尖内生菌污染及褐化严重的问题,两段式灭菌(75%酒精30 s+0.1%升汞10 min+剥去幼叶+0.05%升汞5 min)优于单一式的灭菌;原球茎诱导培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;原球茎增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭+10%马铃薯。[结论]该研究可为大花蕙兰的茎尖快速繁殖及工厂化生产提供技术依据。     

紫花三叉小白芨组培快繁技术研究

[目的]确定白芨种子萌发的最适培养基,以及种子萌发后在自然光培养下丛生芽诱导分化及生根的最佳条件。[方法]选择成熟白芨果荚为外植体,采用组织培养技术对白芨种子诱导、增殖、生根等问题进行试验研究。[结果]白芨种子诱导最适宜培养基为1/2MB+马铃薯泥20 g/L+蔗糖20 g/L,诱导率为95%;增殖分化培养基为1/2MB+马铃薯泥50 g/L+香蕉泥20 g/L+6-BA0.4 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖25 g/L+艾蒿叶干粉2 g/L,增殖系数为14.2倍;生根培养基为1/2MB+香蕉泥80 g/L+NAA0.5 mg/L+蔗糖20 g/L+艾蒿叶干粉4 g/L,生根率达100%。[结论]白芨组培快繁能培养出带根茎叶的小植株,移栽成活率可达95%,为白芨产业化发展提供技术支持。     

金钗石斛的离体快繁体系研究

[目的]研究金钗石斛的离体快繁体系。[方法]以金钗石斛的种子为材料,采用组培法进行离体培养。[结果]适宜于金钗石斛圆球茎诱导增殖及芽分化的培养基为:MS+1 mg/L BA+0.02 mg/L NAA+浓度2%马铃薯+浓度3%白糖,增殖系数为7～10。生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L BA+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L GA+浓度2%香蕉+浓度2%马铃薯+浓度2%白糖;生根率达98%以上,移栽成活率在90%左右。[结论]该方法对金钗石斛的离体快繁体系进行了研究,为组培繁殖金钗石斛种苗提供了参考。     

白芨瓶内假鳞茎诱导研究

[目的]研究白芨组培苗瓶内假鳞茎形成的影响因素,提高白芨组培苗炼苗成活率,为白芨组培苗在生产上的应用提供技术支持.[方法]以优质白芨组培苗为材料,探讨基本培养基、蔗糖用量、激素和添加物对白芨瓶内假鳞茎诱导的影响.[结果]在MS培养基中,假鳞茎诱导率和平均粒径达到最大值,最适宜白芨假鳞茎诱导.30.0g/L蔗糖较适宜诱导白芨假鳞茎,其诱导率较高,且有利于假鳞茎生长膨大.在6-BA、KT、NAA、IBA 4种激素不同组合中,以6-BA＋KT＋NAA组合的假鳞茎诱导率和平均粒径均显著高于其他组合,其最佳激素配比是6-BA 1.0 mg/L＋KT 0.5mg/L＋NAA 0.2 mg/L.在最佳激素配比培养基中添加40.0 g/L香蕉泥、40.0 g/L上豆泥和1.0 g/L花宝四号,其假鳞茎诱导率和平均粒径均最高,且植株长势较好.[结论]白芨组培苗瓶内假鳞茎诱导的最佳培养基配方是MS＋6-BA 1.0mg/L＋KT 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L＋香蕉40.0 g/L＋土豆40.0 g/L＋花宝四号1.0 g/L＋活性炭1.0 g/L＋蔗糖30.0 g/L.     

白及种子液体悬浮培养原球茎的研究

[目的]研究白及种子在液体悬浮培养条件下萌发的最佳条件,为快速繁殖白及幼苗提供技术支撑。[方法]研究不同光照条件、不同培养基和不同激素及浓度对白及种子萌发的影响。[结果]黑暗有利于白及种子萌发,1/2 MS适宜作为白及种子萌发基本培养基。植物激素对白及种子无菌萌发有一定的促进作用,其中,添加1.0 mg/L NAA对白及萌发促进效果最明显。[结论]在黑暗条件下,以1/2 MS+1.0 mg/L NAA为萌发培养基,白及种子萌发率高,萌发整齐一致,且原球茎生长速度一致。     

铁皮石斛种子液体悬浮培养的研究

[目的]研究铁皮石斛种子的液体悬浮培养方法。[方法]以MS为基础培养基,设计了不同浓度的基础培养基、激素、天然附加物、pH、蔗糖等5个影响因子的15种培养液配方,筛选出铁皮石斛最适的液体培养条件。[结果]适中的无机盐浓度,NAA、较低的pH值、较高的蔗糖浓度以及适量的土豆汁都有利于铁皮石斛种子的萌发;试验优选出的相对适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/LNAA+80 g/L土豆汁+45 g/L蔗糖。[结论]筛选出了相对较合适的培养基配方,为铁皮石斛栽培种植提供了理论依据。     

铁皮石斛组织培养研究

为了解决铁皮石斛种苗稀缺的现状,提高种苗繁殖率,以铁皮石斛种子(成熟率80％～90％)、带芽茎段、叶片3种材料作为外植体,进行组织培养研究.结果表明:铁皮石斛最适宜外植体材料是种子,最适宜的类原球茎诱导培养基为1/2MS,最适宜的类原球茎增殖培养基为MS+KT1.5 mg/L+NAA0.5 mg/L+CM100 mL/L+活性炭0.3 g/L,最适宜类原球茎分化培养基为MS+KT1.5 mg/L+NAA0.5 mg/L+100 mL/L苹果汁,最适宜生根培养基为MS+IBA1.5 mg/L.     

添加剂对白芨组培的影响

 用植物组织培养方法研究了添加剂对白芨组培的影响。结果表明：最适合白芨种子萌发的配方是：MS+1.0-3.0mg/L BA+1.0mg/L NAA+3g/L碳粉,最高萌发率可达99.7%;最适合白芨继代增殖的配方为：MS+1.0-2.0mg/L BA+2.0mg/L KT+0.5mg/L NAA+40g/L琼脂+15g/L魔芋粉,添加魔芋粉利于提高增殖率;而配方1/2MS+0.5mg/L BA+1.5mg/L NAA+1.5mg/L IBA+70g/L香蕉泥,最利于生根,且根系较健壮,利于提高炼苗成活率。     

石橄榄种子无菌播种和快速繁殖研究

[目的]建立石橄榄种子无菌播种和快速繁殖技术体系。[方法]以MS为基础培养基,添加不同浓度6-BA、NAA、有机添加物,筛选适宜的诱导、增殖及壮苗生根培养基组合。[结果]以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+椰子汁50 mL/L为石橄榄种子最佳诱导培养基,14 d可见种子萌动,45 d可分化形成丛生幼苗;以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+椰子汁50 mL/L为最佳增殖培养基,其增殖倍数可达2.750倍,假鳞茎形成率达24.5%;以1/2MS+NAA 0.1 mg/L+AC 1 g/L为最佳壮苗生根培养基,苗高可达3.82 cm,根数1.9条。[结论]该研究为石橄榄野生种质资源保护、快速繁育优质种苗奠定了基础。