荔枝果肉过氧化物酶酶学性质研究

本文从荔枝果肉中提取了过氧化物酶(POD),对其酶学性质进行了研究.结果表明,该酶最适反应温度为45℃,对热较敏感,当温度为70℃以上时,短时处理即可使酶活降至50％以下.最适pH 5,但在pH6.0～8.0范围内活力比较稳定.该酶在25℃和0.1 mol/L磷酸缓冲液(pH7.0)条件下对愈创木酚和没食子酸的Km值分别是4.64× 10-3和0.063 mol/L.谷胱甘肽和亚硫酸盐能完全抑制POD活性,但谷胱甘肽抑制浓度远低于亚硫酸盐,抗坏血酸只能在廷迟时间内抑制POD活性,对POD抑制具有暂时性,各抑制机制不同;CuSO4 、ZnSO4 、CaCl2 、MgCl2、EDTA对荔枝果肉POD活性有一定激活作用;FeSO4和MnSO4对POD活性有较强的抑制作用.     

洋葱过氧化物酶活性测定及性质分析

[目的]寻找过氧化物酶含量丰富且活性高而稳定的植物原料。[方法]从洋葱中分离、纯化过氧化物酶并测定其活性,同时对其酶学性质进行鉴定并研究NaHSO3、抗坏血酸和EDTA对酶活性的影响。[结果]洋葱过氧化物酶在20～60 s内反应速度恒定,证明酶有活性;所提过氧化物酶的最适反应pH值为6.5,最适反应温度为60℃,温度高于100℃时,过氧化物酶基本失活;抗坏血酸和NaHSO3对过氧化物酶活性有抑制作用,且随NaHSO3浓度增加,其对酶活性的抑制作用增强;EDTA对酶活性的抑制作用不明显。[结论]该研究为过氧化物酶加工工业的进一步发展提供了借鉴。随着NaHSO3浓度的增加,抑制作用逐渐加强;EDTA的抑制效果最不明显。     

台湾青枣多酚氧化酶特性的研究

采用分光光度法,对台湾青枣多酚氧化酶(PPO)的催化特性、最适波长、最适反应时间、最适温度、最适pH值、热稳定性等性质进行了研究,同时研究了抗坏血酸、柠檬酸、L-半胱氨酸3种添加剂对台湾青枣多酚氧化酶活性的影响,以寻求在果品的保鲜以及果肉初加工过程中抑制PPO活性的各控制手段与果品加工的有机结合方法,为防止褐变提供有效、合理的措施。实验结果表明:以邻苯二酚为反应底物时,台湾青枣多酚氧化酶催化氧化产物的最适波长为420 nm,最佳反应时间为20 min,最适反应温度为30℃,最适pH值为6.8。90℃水浴处理5 min该酶已基本失活。3种抑制剂对该酶均表现出不同的抑制效果。单一抑制剂对台湾青枣多酚氧化酶酶促褐变抑制效果的强弱次序为:L-半胱氨酸>抗坏血酸>柠檬酸。其中L-半胱氨酸的有效抑制浓度为0.100 0%。     

双孢菇多酚氧化酶酶学特性研究

为了抑制双孢菇的褐变,研究温度、p H值、底物浓度和作用时间对双孢菇多酚氧化酶活性的影响。结果表明:该酶的最适温度为35℃、最适p H5.0、最适底物浓度0.07mol/L,90℃加热80 s时,该酶几乎全部失活。     

狗头枣过氧化物酶特性研究

研究狗头枣过氧化物酶(POD)的催化特性及抑制剂和激活剂对其活性的影响。结果表明:以愈创木酚为底物时,狗头枣POD最适pH 6.5~7.5左右,最适温度40℃,最适底物浓度0.1mol·L~(-1);抑制剂浓度0~21mol·L~(-1)时,抑制强弱顺序为抗坏血酸L-半胱氨酸EDTA,当抗坏血酸浓度21 mmol·L~(-1)时,狗头枣POD残存酶活为12.8%,狗头枣POD活性随三氯化铁和硫酸铜浓度的升高而增加,三氯化铁的激活效果明显高于硫酸铜;当温度高于55℃时,热处理对狗头枣POD的钝化效果较显著;55℃处理30 min,POD残存活力68.2%;80℃处理25 min、85℃处理20 min或90℃处理10 min可以完全钝化狗头枣POD。     

女贞果实过氧化物酶的纯化及热稳定性研究

为探讨过氧化物酶在女贞果实发育中的作用,经过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100、DEAE-纤维素离子交换层析分离,从女贞果实中分离提纯过氧化物酶(POD),纯化倍数为48倍,回收率为13.3%。该酶的比活力为1 167.15 U/mg蛋白,最适pH为6.5,对H2O2的Km值为3.85 mmol/L,对愈创木酚的Km值为6.2 mmol/L,最适温度为40℃,热稳定性较好,55℃以下不易失活。其活性受到MnSO4明显抑制。     

甘蔗苗过氧化物酶的分离、纯化及性质测定

从新鲜甘蔗苗分离和纯化了过氧化物酶(POD)，纯化过程包括匀浆、硫酸铵分级沉淀、丙酮分级分离和Sephadex G-100柱层析。过氧化物酶最适pH值是4．4；Km值为0．038mol/L；过氧化物酶在4-55℃下水浴20min，酶的失活率较小，在55℃以上时，酶的失活率越来越大；该酶在4℃下耐藏性较好；受半脱氨酸和抗坏血酸等抗氧化剂的抑制。     

枯草芽孢杆菌凝乳酶的酶学性质

对枯草芽孢杆菌凝乳酶的酶学性质进行了研究,结果表明:枯草芽孢杆菌凝乳酶作用的最适反应温度为55℃、最适pH值为5.0,在pH值为6.0时最稳定,在65℃保温60 min酶活基本丧失,Mn2+、Li+、Fe2+、Na+、K+、Mg2+、Ca2+对该凝乳酶有促进作用,Mg2+、Ca2+促进作用较为明显,而Cu2+对该酶有明显的抑制作用;酶修饰剂中β-巯基乙醇对凝乳酶活力的影响较小,EDTA可抑制该凝乳酶的活力;蛋白酶抑制剂σ-phenantroline可以明显抑制酶活性,证实该酶为金属蛋白酶类。在与商品酶对比中发现枯草芽孢杆菌凝乳酶与商品酶的酶学性质相近。     

芽孢杆菌C 产亚硝酸还原酶的发酵 培养基优化及酶学性质研究

通过单因素试验和响应面分析对亚硝酸还原酶产生菌C的发酵条件进行优化,获得最佳发酵培养基为:葡萄糖2.26%,蛋白胨0.2%,NH4Cl0.12%,K2HPO4·H2O0.2%,Mg SO40.075%,KCl0.1%,Fe SO40.004%,Na NO20.2%,在此条件下,酶活达到317.82U/m L,比优化前的190.26U/m L提高了67.05%。产生的亚硝酸还原酶的酶学性质表明,该酶被Mn2+、Mg2+、Na+激活,受Fe2+、EDTA抑制;最适温度和p H值分别为30℃和7.4;当温度低于50℃、p H值在7.0~8.0时,酶能保持较高的活性。与现有文献报道的筛选细菌相比较,该菌株亚硝酸还原酶产量处于较高水平。     

枯草芽孢杆菌P1果胶酯酶酶学性质研究

对枯草芽孢杆菌(Bacillus sp.)P1所产果胶酯酶的酶学性质进行了研究.结果表明,该酶反应的最适温度为55 ℃,热稳定性较强,55 ℃保温1 h后还有70%左右的相对酶活;适宜pH值范围为8.8～10.5,最适pH值为9.2;金属离子Ca2 ,Mg2 对其有较强的激活作用,Na 也有一定的激活作用.K 对其无明显的作用,Hg2 ,Ba2 ,Zn2 ,Fe3 ,Cu2 ,Al3 ,EDTA等对果胶酯酶有抑制作用.